嗜血杆菌ppt课件.pptx

流感嗜血杆菌引起前列腺流感嗜血杆菌引起前列腺炎炎病例分析病例分析病例介绍病例介绍男性 52岁临床症状：尿频、尿急、排尿困难并有灼烫感。排尿时伴耻骨上疼病程20年，下腹反复疼痛临床诊断：良性前列腺增生症和慢性前列腺炎慢性前列腺炎慢性前列腺增生慢性前列腺炎的定义：有泌尿生殖系统疼痛而微生物学方法未能检验出的尿路细菌性病原体。前列腺增生是一种退行性疾病，是老化的表现，（50岁-55岁开始）男子体内雄激素水平下降，前列腺细胞退行，出现肥大。神经性膀胱尿道功能障碍神经性膀胱尿道功能障碍膀胱颈部功能紊乱、盆底肌肉痉挛、前列腺部尿道高压，容易产生尿液逆流。精神心理因素，如：焦虑、抑郁、恐惧、紧张等。通过精神神经递质神经环路，影响尿道和膀胱神经肌肉功能障碍，导致植物神经功能失调。前列腺按摩后尿标本送检、培养镜下WBC:10/HP24小时培养阴性，孵育时间的延长（72 h）巧克力琼脂在10%CO2显示 105 5 cfu/ml灰色水样菌落增长。革兰染色阴性，氧化酶阳性鉴定鉴定VITEK 2（梅里埃，法国）自动鉴定及药敏试验表明具有良好的识别概率97%流感嗜血杆菌。-内酰胺酶试验阴性药敏结果：氨苄青霉素、异烟肼、头孢呋辛钠、复方新诺明、环丙沙星敏感大肠杆菌、肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌是慢性细菌性前列腺炎的常见致病菌。在276例慢性前列腺炎病原学检测中，9.42%的患者中检测到大肠杆菌，肠球菌9.05%、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌 7.25%、无乳链球菌2.90%，混合感染4.35%自1898年Kretz从尿液样本中首次分离流感嗜血杆菌至今。发现泌尿系统中分离嗜血杆菌以副流感为主流感嗜血杆菌（流感嗜血杆菌（H.influenzae1.1.初分离初分离GG短小杆菌；短小杆菌；2.2.陈旧培养基或恢复其病灶中，具有多形性陈旧培养基或恢复其病灶中，具有多形性（球杆、长杆或丝状）（球杆、长杆或丝状）;3.3.多有菌毛，无芽胞，无鞭毛，不能运动多有菌毛，无芽胞，无鞭毛，不能运动;4.4.正常菌群无荚膜，毒株培养后有荚膜。正常菌群无荚膜，毒株培养后有荚膜。培养特性培养特性培养较难，必须借助于血液中的培养较难，必须借助于血液中的X X、V V两种两种辅助因子才能合成完整的酶，参与细菌的辅助因子才能合成完整的酶，参与细菌的代谢过程。代谢过程。X因子、V因子是什么？巧克力培养基与血平板的区别？X X、V V两种辅助因子两种辅助因子X因子是一种对热稳定的血红素及其衍生物，是一种含铁的卟啉，为细菌合成过氧化酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶的辅基；V因子是一种对热不稳定的维生素B类物质，是脱氢酶的辅酶，在细胞的呼吸中起递氢的作用。红细胞中富含两种因子，但羊血红细胞中含有水解V因子的酶类，V因子依赖性的嗜血杆菌通常不能在完整红细胞的羊血琼脂生长，因而实验室常用巧克力琼脂培养基上分离培养嗜血杆菌血平板与巧克力平板血平板与巧克力平板血平板（1）成分：普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），脱纤维羊血（2）制法：取所需要量的普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），加蒸馏水溶解后，高压灭菌。冷却至50，加入一定量（5%）的羊血，倾注平板。（3）用途：适于各类细菌的生长。巧克力平板巧克力平板（1 1）成份：普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），氯化）成份：普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），氯化血红素，万古霉素，辅酶血红素，万古霉素，辅酶A A（2 2）制法：取所需要量的普通营养琼脂（或哥伦比亚）制法：取所需要量的普通营养琼脂（或哥伦比亚琼脂），加蒸馏水溶解后，高压灭菌。冷却至琼脂），加蒸馏水溶解后，高压灭菌。冷却至6060左右左右加入一定量的羊血，置加入一定量的羊血，置8585水浴中摇动水浴中摇动10-1510-15分钟，冷分钟，冷却到却到5050左右后加入相应量的万古霉素和辅酶左右后加入相应量的万古霉素和辅酶A A，摇匀，摇匀后倾注平板。后倾注平板。（3 3）用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加）用途：除可以分离奈瑟菌，嗜血杆菌外，由于加入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，入了万古霉素，可抑制绝大多数的革兰阳性菌的生长，血液中有血液中有V V，X X因子是位于红细胞中的，一般细菌不能因子是位于红细胞中的，一般细菌不能利用，轻微的加热使红细胞破坏释放到细胞外方可利用。利用，轻微的加热使红细胞破坏释放到细胞外方可利用。培养特性培养特性巧克力色平板上培养：经巧克力色平板上培养：经3535，181824h24h培养形成微小培养形成微小（0.50.50.8mm0.8mm）无色透明，不溶血，呈露滴样小菌落。）无色透明，不溶血，呈露滴样小菌落。48h48h后形成灰白色较大的菌落后形成灰白色较大的菌落嗜血杆菌的鉴定嗜血杆菌的鉴定初级鉴定卫星试验卫星现象（卫星现象（satellite phenomenon）当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多板上培养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多的的V V因子，并弥散到培养基里，可促进流感嗜因子，并弥散到培养基里，可促进流感嗜血杆菌生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌血杆菌生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌落较大，而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血落较大，而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血杆菌的菌落越小。杆菌的菌落越小。原理：有溶血性的细菌在羊血琼脂培养基上生长可破坏红细胞释放X和V因子，从而促进流感嗜血杆菌的生长二级鉴定X因子因子V因子因子溶血溶血流感嗜血杆菌+-溶血嗜血杆菌+杜克嗜血杆菌+-副流感嗜血杆菌-+-副溶血嗜血杆菌-+三级鉴定生化反应V、X因子纸片不足时有无替代试验？金黄色葡萄球菌是唯一能做卫星试验的菌吗？卫星现象（卫星现象（satellite phenomenon）当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在同一血平板上培养时，板上培养时，由于金黄色葡萄球菌能合成较多由于金黄色葡萄球菌能合成较多的的V V因子因子，并弥散到培养基里，可促进流感嗜，并弥散到培养基里，可促进流感嗜血杆菌生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌血杆菌生长，故在金黄色葡萄球菌菌落周围菌落较大，而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血落较大，而离金黄葡萄球菌越远者则流感嗜血杆菌的菌落越小。杆菌的菌落越小。原理：有溶血性的细菌在羊血琼脂培养基上生长可破坏红细胞释放X和V因子，从而促进流感嗜血杆菌的生长陈东科,张秀珍;用于嗜血杆菌鉴定的卫星试验影响因素研究J;检验医学;2004年03期