HPLC 性能确认.doc

Performance Qualification
Protocol #:
Version #: 00
Date: 12/28/24
Equipment #:
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Title:

美国FDA认证与申办高级培训系列

验证方案样本：
高效液相色谱仪性能确认(PQ)

中国 . 北京

验证方案批准

方案起草
签名
日期
QC部门工程师吴XX)

QC部门工程师(刘XX)

方案审核
签名
日期
工程部经理(XX)

QC主管(XX)

质量部门经理(XX)

方案批准
签名
日期
质量总监：(X)

目 录

序号 题目 页数
1.0目的
2.0系统及仪器描述

3.0责任
4.0文件控制
5.0性能确认
6.0最终确认
7.0验证结论及评价
8.0附件

1.0 目的

通过对样品的测试，确认在仪器运行的可靠性、主要参数的稳定性和结果的重现性。

2.0 系统及仪器描述
本仪器为HP1100型高效液相色谱仪，配有四元梯度泵、自动进样器、柱温箱及紫外检测器，数据处理采用XX型工作站。
仪器室有独立的空调系统，电器线路……………
3.0责任
3.1质控部门Mr. XX- -- QC 主管
Ø 为QC部门工程师书写方案提供指导、管理安排执行方案的时间表。包括：验证测试设备、所需人员数，所需时长，采样类型。
Ø 书写指定SOPs。
Ø 指派相关人员为完成验证工作而采用的验证步骤提供审阅、取样和操作。
Ø 审批验证方案，并证实所需的SOPs和SOPs可用以及所需培训圆满完成。
Ø .对审阅验证文件的生产制造部门进行监督。
Ø 审批最终验证报告确保全部验收标准均得到满足。
Ø 维护全部受控的法规符合文件，包括验证方案。
3.2质控部门Mr. XX- -- 仪器操作员
Ø 实施具体确认工作。
Ø 参与书写指定SOPs。
3. 3工程部门 XXXX 设备工程师
Ø 书写或修改指定的SOPs。保证对与验证方案相关的运行部门人员进行适当培训，并维护培训记录。
Ø 方案中包括工程部门的职责例如，对设备或者系统进行适当的校准和维护，备件可用等等。
Ø 指派相关人员为完成验证工作而采用的验证步骤提供审阅、帮助和支持，必要时在实行鉴定研究过程中对仪器和设备系统的取样和操作提供帮助，以确保安装确认、运行及性能特性满足规范的要求。
3.4 QA部门Mr. XXX – 验证&培训组织者
Ø 支持验证方案
Ø 写指定的SOPs。
Ø 建立和通过验证方案的书写格式。
Ø 为QC书写方案的人员提供指南，提供为执行方案提供时间表。包括：必须人员的大概数量，所要求的时间长度，采样的类型，所需设备。
Ø 对相关人员提供的完成验证工作的步骤提供审阅、帮助和支持，以在实行验证过程中对取样和操作设备和设备体系提供帮助
Ø 审阅和批准验证方案和检验必要的SOPs和SOPS。完成必需的和可提供的培训。
Ø 对审阅验证文件的工程和质量部门进行监督。
Ø 审批最终验证报告确保全部验收标准均得到满足。
4.0文件控制
Ø 所有的确认工作均按照经批准后方案的规定进行，所有的记录均应在现场工作的同时完成 ，表格中没有用到的空格均画上单道线 并表明姓名日期，在与本仪器/系统不适用的空白表格处填上 “N/A” 。.
Ø 与测试方法或接受标准不符之处，或在实施方案的过程中观察到的异常之处都应记录在《偏差报告》内。最后所有的文件（批准后的方案、填写完的表格，采购单的复印件）均应装订在确认文件夹内。
Ø 在完成确认工作后，应出具一份实施该方案的验证报告 ，验证报告应经过起初审阅和批准本方案的人员审阅和批准。在确认工作完成后所有文件均应存放在公司内的一个专门的地方。
5.0性能确认：
5.1系统适应性试验

仪器名称
HP1100型高效液相色谱仪
ID

编号

测试题目:
系统适应性试验
目的:
系统适应性符合要求
方法:
流动相制备
取水630mL、乙腈370ml置于1000ml容器内，混匀，经过0.45um
的滤膜过滤，使用前脱气，得流动相：水：乙腈（63：37）。
内标溶液制备：
精密称取对羟基苯甲酸25mg，置100ml容量瓶中用适量乙醇溶解，并稀释至刻度，得每错误！链接无效。含0.25mg对羟基苯甲酸的溶液。
标准溶液制备：
精密称取倍他米松标准品20mg，置100ml容量瓶中,用适量乙醇溶解，并稀释至刻度。移取该溶液和内标溶液各10，置20 ml容量瓶中，摇匀，得每ml分别含倍他米松标准品0.1mg和对羟基苯甲酸0.125mg的标准溶液，备用。
HPLC检测条件：
色谱柱：ODSL1 250mm×4.6mm×5um
检测波长：240nm
流速：约1.0ml/min
进样量：20ul
检测：
用流动相平衡色谱柱，至少30分钟后，开始检测。
将流动相或溶解溶剂进样一次（20ul），主要观察色谱柱及溶剂的出峰检测情况。
将倍他米松标准溶液连续进样5次，按平均峰面积计算相对标准偏差。
接受标准:
（RSD）≤2.0%。
倍他米松主峰和内标物主峰的分离度≥3.0。
按倍他米松主峰计算理论塔板数应>2500。
拖尾因子应在0.95～1.05之间。
倍他米松主峰的保留时间与内标物主峰保留时间之比为1：1.4
确认参数:
次第
项目
1
2
3
4
5
RSD%
倍他米松主峰
峰面积

保留时间

理论塔板数

拖尾因子

内标物
主峰
峰面积

保留时间

拖尾因子

倍他米松主峰与内标物主峰分离度

保留时间比

结论：
评价： 日期： 1

5.2系统稳定性

仪器名称
HP1100型高效液相色谱仪
ID

编号

测试题目:
系统稳定性试验
目的:
系统稳定性符合要求
方法:
按系统适应性项下，每隔1小时重复一次实验，共进行5次。
接受标准:
（RSD）≤2.0%。
倍他米松主峰和内标物主峰的分离度≥3.0。
按倍他米松主峰计算理论塔板数应>2500。
拖尾因子应在0.95～1.05之间。
倍他米松主峰的保留时间与内标物主峰保留时间之比为1：1.4
确认参数:
次第
项目
0小时
2小时
4小时
6小时
8小时
RSD%
倍他米松主峰
峰面积

保留时间

理论塔板数

拖尾因子

内标物
主峰
峰面积

保留时间

拖尾因子

倍他米松主峰与内标物主峰分离度

保留时间比

注：按实际情况通过与否标注□Yes 、 □No。
结论：
评价： 日期： 1

5.3系统重现性页：7
此重现性非彼重现性, 与分析方法验证中的”重现性”不是一个概念.

仪器名称
HP1100型高效液相色谱仪
ID

编号

测试题目:
系统重现性
目的:
系统重现性符合要求
方法:
流动相制备
取水630mL、乙腈370ml置于1000ml容器内，混匀，经过0.45um
的滤膜过滤，使用前脱气，得流动相：水：乙腈（63：37）。
内标溶液制备：
精密称取对羟基苯甲酸25mg，置100ml容量瓶中，用适量乙醇溶解，并稀释至刻度，得每ml含0.25mg对羟基苯甲酸的溶液。
标准溶液制备：
精密称取倍他米松标准品20mg，置100ml容量瓶中,用适量乙醇溶解，并稀释至刻度。移取该溶液和内标溶液各10ml，置20 ml容量瓶中，摇匀，得每ml分别含倍他米松标准品0.1mg和对羟基苯甲酸0.125mg的标准溶液，备用。
供试品溶液制备：
精密倍他米松供试品约80mg，置100ml量瓶中，用乙醇溶解，并稀释至刻度,再精密移取25ml该溶液置100ml量瓶中，用乙醇溶解，并稀释至刻度。移取该溶液和内标溶液各10ml，置20 ml容量瓶中，摇匀，得每ml分别含倍他米松约0.1mg和对羟基苯甲酸0.125mg的标准溶液，备用。
HPLC检测条件：
色谱柱：ODSL1 250mm×4.6mm×5μm
检测波长：240nm
流速：约10ml/min
进样量：20μl
供试品溶液检测：
待上述系统适应性试验完成后，将供试品和标准液分别各进样二次，记录色谱图，按内标法以峰面积计算含量。
计算：
式中：
C— 标准溶液中倍他米松的浓度，以mg/ml计算
Ru— 供试品溶液中倍他米松与内标物的峰面积之比
Rs— 标准溶液中倍他米松与内标物的峰面积之比
在一周内不同的日期由不同的人重复一次该批供试品检测，共进行5次。
接受标准:
（RSD）≤2.0%。
确认参数:
次第
项目
1日
2日
3日
4日
5日
RSD%
倍他米松平均

结论：
评价： 日期： 1

5.4数据安全性

部件名称
软件系统
测试目的:
确认软件系统中测试数据的安全性符合要求
版本:

制造商:

序列号:

方法:
在完成上述“系统重现性” 实验后，由操作人员打开离线数据处理系统，对样品批号，检验日期等进行修改。
接受标准:
原始数据无法更改。
确认结果:

结论：

评价： 日期： 1

6.运行确认结束确认
为保证验证方案中所有的项目均已完成，相关记录已及时填写，必须逐项进行核对。
运行确认检查表
序号
项目
结果
1
系统适应性试验
□Yes □No □N/A
2
系统稳定性
□Yes □No □N/A
3
系统重现性
□Yes □No □N/A
4
数据安全性
□Yes □No □N/A
结论:
检查: 日期
复核: 日期

7.验证结论及评价

评价人：

日期：

验证报告批准书

报告审核人
签名
日期

批准人
签名
日期

15971d8834a555caf858fcbd84132dfd.doc CONFIDENTIAL DOCUMENT