《1.3-测定微生物的数量-每课一练》同步练习.doc

《1.3 测定微生物的数量 每课一练》同步练习
(时间：30分钟　满分：50分)
考查知识点及角度
难度及题号
基础
中档
稍难
测定微生物数量的方法
1、2、4
3

测定微生物数量的过程
5、6
7
8
一、选择题(共6小题，每小题4分，共24分)
1．下列说法不正确的是级 (　　)。
A．科学家从70～80 ℃热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶
B．统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，则以M3作为该样品菌落数的估计值
C．设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度
D．同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多
答案　B
2．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是(　　)。
A．菌落数最多的平板
B．菌落数量最少的平板
C．菌落数量适中的平板
D．取若干个平板菌落数量的平均值
解析　用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计，只是一种估测，根据
此方法的实验过程可知，在某一稀释度下涂布的平板菌体数具有一定的偶然
性，并不是绝对均匀的，所以取若干个平板菌落数量的平均值比较接近样品
中菌体数的真实值。
答案　D
3．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是 (　　)。
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数分别是251和260，取平均值256
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212、256，取平均值163
D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233
解析　在设计实验时，一定要涂布至少3个平板，作为重复组，才能增强实
验的说服力与准确性，所以A、B项不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，
其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了
错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。
答案　D
4．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 (　　)。
A．一个细菌，液体培养基
B．许多细菌，液体培养基
C．一个细菌，固体培养基
D．许多细菌，固体培养基
解析　菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上肉眼可见，是
作为菌种鉴定的重要依据，若是多种细菌形成的菌落则不是标准菌落。
答案　C
5．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是 　　)。
A．筛选出能分解尿素的细菌
B．对分离的菌种作进一步鉴定
C．培养基中还缺乏酚红指示剂作细菌的营养
D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素
答案　B
6．下列关于测定土壤中微生物数量的叙述，正确的是 (　　)。
A．一般选用103～107倍的稀释液分别涂布
B．测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释
C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释
D．若第一次测定某种细菌的数量，可以将101～107倍的稀释液分别涂布到平板上培养
解析　由于土壤中各类微生物的数量不同，在进行分离与计数时，就需要按

照不同的稀释度分别进行涂布；测定细菌一般选择104、105、106倍稀释；测
定放线菌一般选择103、104、105倍稀释；测定真菌一般选择102、103、104
倍稀释。而首次做实验时，可将范围放宽点，将103～107倍的稀释液分别涂
布到平板上培养。
答案　B
二、非选择题(共2小题，共26分)
7．(11分)土壤有“微生物的天然培养基”之称，下图表示对土壤中某种微生物进行分离和计数而进行的对样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图。请据图回答有关问题。

(1)图示统计样品活菌数目的方法叫做________法，主要包括________操作和________操作。
(2)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的________，一般选择菌落数在________的平板进行计数。
(3)图中各试管间的“箭头”表示的操作过程是________________________。
这一操作过程中每一步都要在火焰旁边进行。
(4)图中选择了104、105、106倍的稀释液进行平板培养，最可能是测定土壤中________的数量，这个平板需要在________温度下培养________d。
(5)如果要想分离分解尿素的细菌，平板中培养基成分的特点应该是____________________________________________
如果怀疑培养基被污染导致统计结果有误，则需要做对照实验，方法是__________________________________________________________________
解析　活菌计数最常用的是稀释涂布平板计数法，最关键的步骤是梯度稀释
和涂布平板，本题考查的内容涉及梯度稀释的方法、要点以及涂布平板培养
基的配制、选择稀释度的范围、鉴定培养基是否被污染的方法等都是围绕这
两个方面进行的。
答案　(1)稀释涂布平板计数　梯度稀释　涂布平板
(2)一个活菌　30～300
(3)用移液管吸取1 mL上一试管的菌液注入下一试管中，并用手指轻压移液管橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混合
(4)细菌　30～37 ℃　1～2
(5)尿素作为唯一氮源　将一个培养基在不加土壤液的情况下与加入土壤溶液的培养基同时培养
8．(15分)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。请回答下列问题。

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用________法。
(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于________；使用________法可以在⑥上获得单菌落。
采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养？ ______________________。
(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小？__________________________。
(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染？__________________________。
解析　考查微生物的分离、培养、数量测定、无菌操作等基本技术。(1)依题
意可知，研究人员要从土壤中筛选获得只能利用苯酚的细菌菌株，苯酚应是
这些细菌的碳源，所以培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源；
苯酚作为唯一碳源，它的浓度将影响培养基中细菌的数量；稀释平板计数(活
菌计数或菌落计数)法是常用来统计样品中活菌数目的方法。(2)从题图中可以
看出，微生物在④中不生长，而在⑤中能够生长，说明④中缺乏微生物生长
的必要条件，因为本实验是为了筛选能降解苯酚的细菌菌株，因此可推断④
含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源；若在⑥上获得单菌落，最常
用的方法是平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离)；采用固体平板培养细
菌时要倒置培养，以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上影响微生物的生
长3)苯酚显酸性，不同菌株降解苯酚的能力不同，故用同样苯酚浓度的培
养液培养不同菌株，一定时间后，测定接种了不同菌株的培养液中的pH，则
能比较不同菌株降解苯酚能力的大小。(4)实验过程中，从制备培养基到接种
与培养等全部实验过程都要无菌操作，如培养器皿及培养基的灭菌，接种环
境灭菌，接种过程要注意无菌操作等。
答案　(1)苯酚　A　稀释平板计数(或活菌计数或菌落计数)
(2)④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源　平板分离(或稀释涂布平板或平板划线分离)　避免培养过程产生的水分影响微生物的生长
(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，通过测定接种了不同菌株的培养液中的pH来测定培养液中苯酚含量
(4)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作