1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,白细胞计数,-Neubauer(牛鲍)板计数法,长治市第二人民医院,检验科：薛彬彬,1,2,1、目的：掌握显微镜法白细胞计数的原理,及方法。,2、原理：用白细胞稀释液将血液稀释一定 倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血 液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。,3,3、器材：显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。,4、试剂：白细胞稀释液：2%冰乙酸2ml,10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴，加蒸馏水到100ml。,5、标本：新鲜,全血或末梢血
2、4,改良的牛鲍,计数板。,5,6,操作步骤,1、加稀释液：用吸管吸取白细胞稀释液,0.38ml于小试管中。,2、吸取血液：用微量吸管吸取新鲜全血或,末梢血20ul，擦去管尖外部,余血。将吸管插入试管中白,细胞稀释液的底部，轻轻放,出血液，并吸取上层白细胞,稀释液清洗吸管2-3次。,7,3、混匀：将试管中血液与稀释液混匀，待,细胞悬液完全变为棕褐色。,4、充池：再次将小试管中的细胞悬液混,匀，用微量吸管吸取7ul左右充,入改良牛鲍计数板的计数池中，,室温静置2-3分钟，待白细胞完,全下沉。,8,5、计数：在低倍镜下计数四角4,个大方格的白细胞总数。,6、计算:,WBC=N/4102010,6
3、N/2010,9,其中N为4个大方格的白细胞总数。,9,7、细胞计数原则,大方格四边压线细胞数左不数右，数上不数下，,弓形移动,10,8、考核评价,a.常规考核标准 （RCS）,RCS=100%,评价：白细胞 4.0,10,9,/L者，RCS30%,白细胞在（4.1-14.9）10,9,/L者 RCS20%,白细胞15.0 10,9,/L者 RCS15%,超过上述标准者为不合格,b.其他方法,四大格所见白细胞最大值最小值,四大格所见白细胞数平均值,11,注意事项,(1).稀释液密封保存，防止污染，小试管、计数板、盖片均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。,(2).采血时针刺深度必须适当，
4、不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。,(3).稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液适量，无不足、外溢和气泡，细胞分布均匀。,12,(4).白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差10个以上，两次重复计数误差不得超过10。,(5).白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。,13,(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞总数内，应校正。,校正公式：白细胞校正数/L=M（100/100+N）,M为未校正前白细胞数，N为在白细胞分类时，计数100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。,14,谢谢大家！,15,
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