直接Coombs试验专题知识专家讲座.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,Coombs试验概述,直接Coombs试验原理及方法,直接Coombs试验临床意义,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第1页,一.Coombs试验概述,1945年，英国免疫学家Coombs等人创造,一个能检测红细胞表面抗体新试验，故称,之,Coombs,试验,，亦,称,抗人球蛋白试验。,抗,人,球蛋白试验是抗,人,球蛋白参加一个间接血凝试验,，利用抗人球蛋白抗体作为第二抗体起到桥梁作用，连接与红细胞表面抗原结合,不完全抗体,，使红细胞凝集。,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第2页,不完全抗体,能够与对应抗原牢靠结合,但因其分子量较小,体积小,不能起到桥联作用,在普通条件下不出现可见反应。,Coombs试验用于检测不完全抗体,直接Coombs试验：,检验红细胞上有没有不完全抗体。,间接Coombs试验：,检验血清中有没有游离不完全抗体,。,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第3页,二.直接Coombs试验,（一）直接Coombs试验基本原理,若红细胞在体内被不完全抗体吸附,，,因为,不完全抗体分子量小，,体积小，,不能,起到桥联作用,，仅使红细胞处于致敏状态,，在普通条件下不出现可见反应。,加入抗球蛋白,试剂,，与红细胞上吸咐不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥，出现肉眼可见凝集。,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第4页,待检红细胞,不完全抗体,抗人球蛋白,直接coombs试验原理示意图,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第5页,（二）直接Coombs试验方法,1.洗涤红细胞：取50L受检者全血，以0.9%生理盐水洗涤3次,（1500r/min离心1min）；,2.配制3%-5%红细胞盐水悬液；,3.编号：分别取三个试管，标识为IgG、C3d、IgG/C3d；,4.三管中分别加入50L3%-5%红细胞盐水悬液，加入两滴对应抗人球蛋白试剂（抗IgG、C3d、IgG/C3d）；,5.轻轻混匀后3000r/min离心15s，轻轻摇动试管，观察结果。,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第6页,（三）直接Coombs试验结果判读,阳性结果-出现红细胞凝集，表示红细胞上有 对应抗体存在；,阴性反应-红细胞不凝集，表示红细胞上没有对应抗体存在。,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第7页,（四）注意事项,1.标本采集后应马上进行试验，延迟试验可使抗体从细胞上丢失；,2.受检红细胞一定要洗涤充分，不然红细胞悬液中混杂血清蛋白会中和抗人球蛋白；,3.直接抗人球蛋白试验在初读结果后，放在室温中5-10分钟，再次离心观察。这么孵育之后，若红细胞被C3d致敏时，重新离心观察结果可使阴性结果转变为阳性结果，而IgG致敏红细胞在孵育后反应更弱。,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第8页,三.,直接Coombs试验临床意义,本身免疫性溶血性贫血,新生儿溶血症,溶血性输血反应,药品诱发免疫性溶血性贫血,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第9页,谢谢,直接Coombs试验专题知识专家讲座,第10页,