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细胞蜡块、肺原发灶和转移灶组织在肺腺癌EGFR_ALK_ROS1基因联合检测中的应用.pdf

1、细胞蜡块、肺原发灶和转移灶组织在肺腺癌/基因联合检测中的应用余清 杨志蓉 王宪伟 徐培 何小艳 【摘要】目的 探讨用 例肺腺癌患者的不同样本进行(/)基因联合检测的意义 方法 纳入 年 月至 年 月经病理确诊为肺腺癌患者 例分别对 例肺组织标本(例活检标本和 例手术切除标本)、例浆膜腔积液细胞蜡块、例转移灶组织进行 基因联合检测比较肺组织标本与细胞蜡块、转移灶组织 基因异常检出情况 结果()例肺腺癌患者 突变总检出率为 (/)/分别为 (/)、(/)、(/)肺组织标本、细胞蜡块、转移灶组织 基因检出率分别为:(/)、(/)、(/)三者数据检出率存在着统计学差异()其中细胞蜡块与肺活检组织检出率

2、相比有统计学差异()()例活检标本与 例手术切除标本 基因检出率分别为 (/)、(/)手术切除标本比活检标本有更高的 基因检出率差异有统计学意义()结论细胞蜡块在 基因检测方面具有最高的突变检出率当肺腺癌患者临床难以获取活检组织时可以替代用于基因检测肺手术切除标本比活检标本有更高的 基因突变检出率【关键词】细胞蜡块肺腺癌(/)基因联合检测转移灶组织活检标本手术切除标本 /【】(/).().(/)/(/)(/)(/).:(/)(/)(/)()().(/)(/).().【】(/):./.作者单位:四川 德阳德阳市人民医院病理科通信作者:杨志蓉:.肺癌作为目前全球发病率第二高的癌症其死亡率仍居所有癌

3、症首位随着对肺癌发病机制及生物学行为的深入研究分子靶向治疗得到快速发临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期展中国抗癌协会病理专业委员会建议对于非小细胞肺癌()进行(/)同时检测有助于筛选合适的靶向药物实现肺癌的精准治疗 目前用于 基因检测的标本有细胞蜡块、活检组织、血液等不同类型标本 基因检出情况存在差异本文利用扩增阻滞突变系统()方法对 例肺腺癌患者的不同标本进行 基因联合检测比较资料与方法一、临床资料收集 年 月 年 月本院病理科经过病理确诊肺腺癌的患者标本 例包括浆膜腔积液细胞蜡块 例(胸水 例心包积液 例)肺部组织学标本 例转移灶组织 例(颈部淋巴结 例、纵隔旁占位 例、腰椎 例、小脑 例

4、、肝 例)例肺部组织学标本中包括肺活检标本 例粘膜活检、肺穿刺、支气管内超声引导针吸活检术()标本和肺手术切除标本 例(楔形肺切除、肺叶切除标本)男 例女 例年龄 岁中位年龄()岁 入选患者均未接受过化疗及放疗临床资料完整所有标本经过中性福尔马林固定且存放时间 且数量 个该研究已经通过伦理审查()二、方法 检测 基因突变 按照 组织/胸水 和 试剂盒(均为厦门艾德生物有限公司)说明书提取活检组织或浆膜腔积液细胞蜡块的 和 采用 核酸检测仪(公司美国)检测提取的 和 样品的浓度和纯度 基因突变采用人类基因突变检测试剂盒(厦门艾德生物有限公司)具体操作按试剂盒说明书进行三、统计学分析采用 版软件进

5、行统计学处理计数资料采用百分率()表示比较采用卡方检验以 (两组或三组率比较时)或 (三组率两两比较时)为差异有统计学意义结 果一、例肺腺癌标本 检出情况包括 例肺组织标本(例肺活检和 例肺手术切除标本)、例浆膜腔积液细胞蜡块、例转移灶组织 三种标本 基因突变总检出率为 (/)其中/检出率分别为 (/)、(/)、(/)肺 组 织 标 本 检 出 率 为 (/)其中/检出率分别为 (/)、(/)、(/)细胞蜡块 检出率为 (/)其中/检出率分别为 (/)、(/)、(/)转移灶组织 检出率为(/)其中/检出率分别为 (/)、(/)、(/)三组标本 总检出率存在着统计学差异()其中细胞蜡块比肺组织标

6、本有更高的 检出率差异有统计学意义()(见表)表 细胞蜡块与转移灶、肺组织标本 总检出情况比较()分组 总检出突变或融合 值细胞蜡块(.)(.)(.)(.)转移灶组织(.)(.)(.)(.).肺组织标本(.)(.)(.)(.)注:与细胞蜡块相比 二、例肺组织标本 检出情况包括 例肺活检标本和 例肺手术切除标本 例肺组织标本 基因突变总检出率为 (/)其中/检出率分别为 (/)、(/)、(/)肺活检标本 基因突变检出率为(/)其中/突变检出率分别为 (/)、(/)、(/)肺手术切除标本 基因突变检出率为 (/)其中/突变检出率分别为 (/)、(/)、(/)肺手术切除标本比肺活检标本有更高的 基因

7、检出率差异有统计学意义()(见表)临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期表 肺活检标本和肺手术切除标本 检出情况比较()分组 总检出突变或融合 值肺活检标本(.)(.)(.)(.)肺手术切除标本(.)(.)(.)(.).讨 论 基因是 发生过程中重要的驱动基因近年来针对 三基因的靶向治疗取得显著进展极大改善了驱动基因阳性患者的生存状况研究报道 在 突变或、基因融合的 患者中分别应用表皮生长因子受体酪氨酸酶抑制剂或克唑替尼进行靶向治疗时可获得较野生型患者更优的疗效因此靶向治疗前对 三基因联合检测对于靶向治疗疗效预测和适宜患者筛选具有重要的意义 肺腺癌是 中 基因突变最多的病理类型与其它类型 比较差异

8、有统计学意义()目前检测 基因的样本来源主要包括肺部原发灶的组织学标本、浆膜腔积液细胞蜡块、新鲜胸水、血液等不同类型样本 基因检出情况存在差异血液标本突变检出率最低另外用肺活检标本与肺手术切除标本进行 基因检测对比以及用转移灶组织进行 基因检测的报道少见本文研究 例肺腺癌 基因检测的样本类型包括肺部组织学标本 例(其中肺活检标本 例和肺手术切除标本 例)细胞蜡块 例转移灶组织 例 突变总检出率为 其中细胞蜡块有最高的 突变检出率为 转移灶组织次之为 肺部组织学标本最低为 细胞蜡块 突变检出率高于肺部组织学标本差异具有统计学意义()例肺腺癌中 突变率为 (/)稍低于 例肺手术切除标本 的文献报道

9、这可能与本研究检测样本来源多样化有关 细胞蜡块、肺部组织学标本、转移灶组织 突变检出率从高到低依次为:(/)、(/)、(/)细胞蜡块有最高的 突变检出率这可能与肿瘤组织存在异质性和肿瘤突变负荷相关活检标本由于局部取样仅取到点突变处的肿瘤组织而细胞蜡块中含有脱落到浆膜腔积液中的多种异质性肿瘤细胞贺荣芝等报道胸水与对应的肿瘤组织检测 突变的一致性较好并且胸水突变率略高于组织突变率提示具有转移性的 患者可能有更高的 突变率或与肿瘤组织存在异质性相关 因此建议在 基因检测中在获取不同部位的肿瘤组织检测的同时应尽量获取浆膜腔积液同时检查以避免因肿瘤异质性造成的漏检 年美国临床肿瘤学协会()指南也认为当无

10、法获取组织学标本的前提下脱落细胞学蜡块可以作为驱动基因的备选组织来源是合适的 例肺腺癌 融合突变率为 与既往研究的 相一致其中转移灶组织、细胞蜡块、肺部组织学标本 融合突变检出率从高到低依次为 (/)、(/)、(/)本研究中 例转移灶组织包括颈部淋巴结 例、纵隔旁肿块 例、腰椎、小脑、肝各 例检出融合突变的 例病例均为颈部淋巴结组织 文献报道 突变易出现淋巴结转移及胸膜侵犯是预后不良的一个预测因素本研究中转移灶组织中 融合突变检出率高达 可能与研究报道显示 融合突变主要发生于有淋巴结转移及晚期患者中有关本研究中收集了近三年的数据但转移灶组织仅 例考虑到用转移灶进行 检测较为罕见但结果具有一定可

11、解释性仍对其进行展示该结果的可靠性尚需进一步研究的确证 例肺腺癌 融合突变率为 (/)文献报道 融合基因在 中的阳性率为 且临床特征为年轻、女性、不吸烟的晚期肺癌患者另外一项回顾性分析表明重排的患者中位生存期(个月)高于其他基因重排的肿瘤如 突变和 重排的(分别为 个月和 个月)因此选择正确的样本来进行 检测十分重要 本研究中细胞蜡块、肺部组织学标本、转移灶组织 融合突变检出率从高到低依次为 (/)、(/)、(/)细胞蜡块有最高的 融合突变检出率 是基因及细胞异质性最强的肿瘤之一细胞蜡块中含有脱落到浆膜腔积液中的多种异质性肿瘤细胞可能是导致细胞蜡块有最高 融合突变检出率的原因另外转移灶组织中未

12、检出 突变情况可能与本次研究转移灶组织样本量较少有关后续我们将继续收集病例总结 例肺部组织学标本中活检标本 例和手术切除标本 例 突变总检出率为 临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期(/)活检标本与手术切除标本 基因检出率分别为 (/)、(/)手术切除标本比活检标本有更高的 基因检出率差异有统计学意义()这可能与活检标本其病理组织标本相对较少但手术切除标本的组织取量较大含有更多异质性肿瘤细胞相关因此对于首次用肺活检标本进行 基因检测无突变同时常规治疗效果不佳的患者建议用肺手术切除标本或浆膜腔积液细胞蜡块再次进行 基因检测以避免因检测样本的差异而导致患者失去靶向治疗的机会综上所述本研究显示不同类型

13、样本 突变总检出率存在差异细胞蜡块有最高的 突变检出率为 是很好的基因检测样本来源肺部组织学标本最低为 与肺活检标本比较肺手术切除标本更适合进行 基因检测 三基因中 突变和 融合突变检出最高的标本为细胞蜡块 融合突变检出最高的标本为转移灶组织参考文献 .:.():.中国抗癌协会病理专业委员会肺癌学组.阳性非小细胞肺癌诊断病理专家共识.中华病理学杂志 ():.():.:.():.冯征 文苗苗 王雪娇 等.中国西北地区非小细胞肺癌、基因突变和临床病理特征分析.临床肿瘤学杂志 ():.张新晨 吴齐兵 沈兵 等.安徽地区非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变分析.中国临床药理学杂志():.杨赫 刘子成 王鸿亚 等.浸润性肺腺癌、基因突变状态与影像学、病理学特征的相关性.中国肺癌杂志():.贺荣芝 刘川 蔡婧 等.非小细胞肺癌组织、血液及胸水 基因突变分析.临床与实验病理学杂志 ():.():.:/.():.:.():.():.:.():.():.江薇.融合基因突变在非小细胞肺癌诊断与治疗中的研究进展.中国肿瘤临床 ():.:.():.收稿日期:临床肺科杂志 年 月 第 卷第 期

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