HV人乳头瘤病毒ppt课件.pptx

HPV人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒客服中心陈杰目录A宫颈癌筛查CHPV的感染方式BHPV的分型DHPV的检测方法宫颈癌筛查宫颈癌筛查宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，也是严重影响妇女身心健康，威胁妇女生命的重要原因之一。但它也是唯一病因明确，唯一可以早发现早治疗，唯一可望消灭的疾病。所以我们只要提前筛查和预防，大可不必过多担心。而TCT和HPV联合检测能百分之百防止漏诊HPV病毒学基本知识病毒学基本知识1小环状双链DNA病毒2直径5055nm3无脂蛋白膜4由核酸和蛋白衣壳组成5癌基因E6E7HPV分型Lorem ipsum dolor sit amet,consectetur adipisicing elit.HPV分型分型6、11型与尖锐湿疣关系最密切HPV2、27、57可引起手足部寻常疣HPV56、59-64、67、71均在外阴上皮内增生的病损中测到HPV16、18、31、33、35、型与外阴部原位鳞癌、鲍温样丘疹病及Queyrat增生性红斑有关。HPV感染方式感染方式一种是HPV藏在人的基底细胞内，这种情况可能持续数十年，而不被临床所用的方法检测到，不管高危型HPV或是低危型HPV都有这种形式，可以复制但不引起病变。HPV游离在它感染的上皮细胞里，跟人的DNA没有整合，同样高危型HPV和低危型HPV都有这种状态。整合型，HPV DNA环在E2、E1基因处断开，并与人DNA整合，一般是高危型HPV 感染。生殖道生殖道HPV感染感染高危型HPV通常没有症状，为一过性并可自愈。90%以上的病人两年内可痊愈常见其他亚型继发或者合并感染多重HPV亚型合并感染极为常见自然免疫力差感染后只有50%-60%的女性产生HPV抗体，因此对同种基因型的HPV可再度感染！A细胞学检查B感染组织中HPV蛋白的检测CHPV感染的血清学检查DHPV基因组检测HPV的检测方法A、细胞学检查细胞学检查传统巴氏涂片(CVC)液基薄层细胞学技术(TCT)自动细胞学检测系统test(LCT)计算机辅助细胞检测系统(CCT)优点：操作简单，价格低廉，适宜做初步筛查缺点：凹空细胞是HPV感染的主要形态学改变，但由于其他病毒感染及人为因素都有可能造成细胞内出现空泡或凹空样病变，而且细胞检查易受取材、染色及细胞病理医生的主观判断等因素影响。因此存在灵敏度低、特异性差、假阳性和假阴性率高、不能对HPV进行分型等问题A、细胞学检查细胞学检查TCT检查是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断，它是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，与传统的宫颈刮片巴氏涂片检查相比明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率。TCT宫颈防癌细胞学检查对宫颈癌细胞的检出率为100%，同时还能发现部分癌前病变，微生物感染如霉菌、滴虫、病毒、衣原体等。所以TCT技术是应用于妇女宫颈癌筛查的一项先进的技术。B、感染组织中感染组织中HPV蛋白的检测蛋白的检测针对HPV抗原，主要是衣壳蛋白制备抗体，通过免疫学方法进行检测，ELISA,免疫沉淀法等。优点：原理明确，操作简单缺点：由于HPV不能体外培养，且其免疫原性较弱，故免疫学检测灵敏度较低C、HPV感染的血清学检查感染的血清学检查通过免疫学方法检测血清中是否存在针对HPV产生的抗体优点：原理明确，操作简单缺点：由于人体对HPV产生免疫应答有一定的迟滞性，所以血清学检测对无免疫应答或者HPV潜伏期患者会产生漏检。D、HPV的的DNA检测技术检测技术 聚合酶链反应(PCR,Polymerase Chain Reaction):扩增位于两段已知序列之间的DNA片断的方法。该法有较高的敏感度,可进行HPV分型,缺点是对实验室环境要求较高,容易发生样本间的交叉污染,从而导致假阳性率高。核酸杂交检测有较好的特异性和敏感度,还可以进行HPV DNA的分型,各种核酸杂交检测方法有一定的优缺点。D、HPV的的DNA检测技术检测技术核酸印迹原位杂交适用于HPV分型和HPV DNA分子量鉴定,虽然灵敏度高,但因操作复杂,需要新鲜组织标本,不便在临床上大规模使用。斑点印迹其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法,虽然经济实用,但实验过程存在有放射性污染,是环保所不能轻视的问题。原位杂交（in situ hybridization）一种核酸杂交技术，可用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体DNA）通过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。D、HPV的的DNA检测技术检测技术D杂交捕获法(Hybrid Capture)杂交捕获试验是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大。首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链,DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体,特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕获,偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体结合,碱性磷酸酶使酶底物发光,根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA杂合体的含量。能检测13种高危型HPV包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68。HPV的的DNA检测技术检测技术高方法学方法学灵敏灵敏度度特异性特异性技术特点技术特点斑点印迹（斑点印迹（Dot Dot blotblot）中中中中有一定放射性有一定放射性核酸印迹原位杂核酸印迹原位杂交（交（southern southern blot blot hybridizationhybridization）高高高高标准、麻烦，不宜大规模使用标准、麻烦，不宜大规模使用原位杂交（原位杂交（In In Situ Situ hybridizationhybridization）高高中中蜡块组织包埋内检测蜡块组织包埋内检测HPVHPV杂交捕获（杂交捕获（HCHC、HC2HC2）高高中中无放射性，易使用，高、低危型间有交叉反应，无放射性，易使用，高、低危型间有交叉反应，且不能分型且不能分型普通多聚酶链反普通多聚酶链反应（应（PCRPCR）很高很高中中取材容易，但目前已应用试剂的只能检测少数取材容易，但目前已应用试剂的只能检测少数单一型别，如单一型别，如6 6、1111、1818等，且由于技术上的问等，且由于技术上的问题存在假阳性题存在假阳性HPV基因分型检测人乳头瘤病毒基因分型检测采用PCR-反向点杂交法，使用自行设计的HPV基因组中的特异性引物，对待测样本中可能存在的HPV基因型进行PCR扩增并进行生物素标记，再将PCR扩增产物与固定在芯片上的23个特异性探针进行特异性的分子杂交，并通过化学显色方式判读THANKS谢谢大家!客服中心陈杰