微生物简答.doc

简答题
1. 分析细胞壁的成分和结构，说明G+为何染成紫色，G-为何染成红色。
答：G+：（1) G+菌细胞壁肽聚糖层厚,交联度为75%,又有磷壁酸填充在网眼中,使网眼进一步缩小。(2) G+菌细胞壁含类脂少,乙醇脱色时, 由于乙醇的脱水作用使网眼进一步缩小或关闭。因此脱色不会使结晶紫-碘复合物被抽提出来, 菌体呈紫色。当蕃红复染时,由于网眼的关闭或缩小,不会进入太多的蕃红,既是进入部分蕃红,也掩盖不了紫色,因此菌体仍呈紫色.
G-菌染色机理: (1) G-菌细胞壁肽聚糖层薄,交联程度低(25%),因此网眼大。(2) G-菌细胞壁类脂含量高, 当乙醇脱色时,溶解了部分类脂,使外壁层也出现较大的缝隙。所以，使菌体内的结晶紫-碘复合物被抽提出来, 菌体近无色。再进行蕃红复染时,蕃红大量进入细胞质,菌体呈蕃红的红色.
2.说明芽孢的生物学意义及实践意义。
答：生物学意义：使细菌很好地渡过不良环境，也是生物适者生存的一种表现.
实践意义：（1）从混杂的微生物中分离芽孢杆菌.方法：用80℃处理，杀死营养cell，而保留下芽孢，培养后得到芽孢杆菌.芽孢的形状,大小及在菌体中的位置因种而异,因此,芽孢是鉴定细菌的依据之一.（2）用于菌种保藏.芽孢具抗热性，所以在培养基，发酵工业，食品(罐头)灭菌时，都是以杀死芽孢做为指标.
注：由于芽孢的存在，在食品生产、传染病防治和发酵生产的灭菌工作带来了种种困难。
4. 细菌的繁殖方式分别有哪几种？
答：裂殖:大多数细菌以此方式繁殖 二分裂：等二分裂；不等二分裂。三分裂：绿色硫细菌，一分为三，呈Y形。复分裂：寄生在E.coli 中的食菌蛭弧菌。芽殖:少数细菌以芽殖方式繁殖。凡以芽殖方式繁殖的细菌统称为芽生细菌。
5. 简述溶菌酶、青霉素的杀菌或抑菌机制。
答：溶菌酶：使β- 1,4-糖苷键被破坏——破坏肽聚糖结构——细胞壁被破坏——菌体裂解，起到杀菌作用。
青霉素破坏细胞壁作用机制：
青霉素和D-丙氨酰-D-丙氨酸是结构类似物，在细胞壁合成时，和其竞争性和甘氨酸转肽酶结合，造成肽桥的形成错误，从而导致细菌不能合成完整的细胞壁，起到抑菌作用。
6. 呈“油煎蛋”型菌落的微生物细胞有哪些？
答：L型-细菌，支原体
7. 绘图说明芽孢的结构，并说明芽孢的抗热机理。
答：皮层中含有大量芽孢肽聚糖及吡啶2,6-二磷酸钙，与低价阳离子一起使得皮层具有高渗透压特性,使皮层产生很高的渗透压，吸取芽孢核心的水分，造成皮层充分膨胀，使得核心部分的细胞质变得高度失水，具有极强的耐热性。
8. 为什么说酒精脱色是革兰氏染色成败的关键。
答：G-菌染色时，乙醇脱色不足时误染为阳性.G+菌染色，乙醇脱色过度会误染为阴性.老龄G+菌种或死菌种(由于CW老化或损伤)也会误染为阴性.乙醇脱色一步非常关键，脱色过度或不足都会引起误染.
9. 鞭毛、菌毛的功能各是什么？
答：鞭毛：作用：运动。实际应用:鞭毛的有无，着生方式及数目可做为菌种分类与鉴定指标.菌毛：功能：不是运动。使许多细菌结合在一起形成菌膜.便于对其它生物的吸附. 在细菌接合时,做为遗传物质的通道（性菌毛）。
10. 说明鞭毛的结构。
答：组成：鞭毛蛋白。结构：由三股鞭毛蛋白链紧密铰成绳状，中空。无（9+2结构）原核生物的鞭毛都有共同结构，由基体、钩形鞘和鞭毛丝组成。
11. 特征以链霉菌属为例，简述放线菌的形态及生活史。
答：形态和结构：1 个体形态：即菌丝，体孢子萌发—丝状分枝的，多核单细胞菌体—菌丝体。繁殖：菌丝断裂：液体培养。孢子固体培养。孢囊孢子：在菌丝顶端形成孢子囊，在其中形成孢子，孢囊成熟后破裂，释放出大量孢子。分生孢子：由孢子丝成熟分化而成。放线菌孢子特点：抗干燥强，抗热不强。多为65℃，10-15min失活（嗜热放线菌例外）。
12. 支原体、立克次氏体和衣原体的主要特点分别是什么？
答：支原体：菌体小，能通过细菌过滤器。菌落呈典型的“油煎蛋”形状。是能介于独立生活和细胞内寄生的最小原核微生物。寄生或腐生。
衣原体：能通过细菌过滤器。具有完整的细胞结构，G-菌。专性活细胞内寄生。不经媒介，直接传播.
立克次氏体：壕热立克次体外，均不能通过细菌过滤器除战。专性寄生真核细胞内的G-菌原核生物。与支原体的区别在于有细胞壁和不能独立生活
1. 说明三种酵母生活史的过程和特点
答：各种酵母的生活史可分为三种类型：（1）单倍体型：营养细胞是单倍体；无性繁殖以裂殖方式进行；双倍体细胞不能独立生活，因为双倍体阶段短，一经生成立即减数分裂。（2）双倍体型：特点：营养体为双倍体，不断进行芽殖，双倍体营养阶段长，单倍体的子囊孢子在子囊内发生接合。单倍体阶段仅以子囊孢子形式存在，故不能独立生活。（3）单双倍体型：单倍体营养细胞和双倍体营养细胞均可进行芽殖。营养体既可以单倍体形式也可以双倍体形式存在；在特定条件下进行有性生殖。单倍体和双倍体两个阶段同等重要,形成世代交替
2.霉菌的无性孢子和有性孢子的种类及其所对应的菌的种类。
答：无性孢子包括：孢囊孢子（游动孢子（绵霉属）和静孢子）、分生孢子（曲霉，青霉，镰刀霉）、节孢子（白地霉）、厚垣孢子（总状毛霉）
有性孢子包括：卵孢子、接合孢子、子囊孢子
3. 酵母菌和霉菌在固体培养基上菌落的形态特征。
答：酵母菌：菌落形态特征：大而厚，圆形，光滑湿润，粘稠，颜色单调。常见白色、土黄色、红色，易挑取，正反面颜色、边缘和中央颜色较一致等。霉菌：菌落特征：菌落大、疏松、干燥、不透明；多呈绒毛状、絮状或网状等；与培养基连接紧密，不易挑取，菌体可沿培养基表面蔓延生长；由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈红、黄、绿、青绿、青灰、黑、白、灰等多种颜色，且中央和边缘、正反面常不一致。
1. 病毒壳体结构有哪几种对称形式？毒粒的主要结构类型有那些?
答: 对称形式：螺旋状对称型，二十面体对称型，复合对称型；毒粒的形状大致可分球形颗粒(或拟球形颗粒)杆状颗粒和复杂形状颗粒（如蝌蚪状，卵形）等.
2. 病毒的成分是什么？
基本成分：核酸、蛋白质。有些复杂的病毒在衣壳的外面包裹着一层由脂类和多糖组成的包膜。有的包膜上还长有刺突。
3. 病毒的核酸有那些类型？
答：单链DNA；（ss）双链DNA（ds ）；单链RNA（ss)；双链RNA（ds)；

4. 以T4噬菌体为例，简述病毒繁殖的基本过程。
答：病毒粒子并无个体的生长过程，而只有其两种基本成分的合成和装配，即：核酸复制+蛋白质合成 核蛋白（病毒粒子）噬菌体的繁殖一般可分五个阶段，即
1吸附2侵入3增殖4成熟（装配）5裂解（释放）
5. 什么是一步生长曲线？它可分几个时期，各有什么特点？
答: 定量描述烈性噬菌体增殖规律的的实验曲线。潜伏期:噬菌体核酸侵入宿主cell后，到第一个成熟phage粒子装配前的一段时间。裂解期:潜伏期后，宿主cell迅速裂解，使得溶液中phage粒子数目急剧增多的一段时间。平稳期:宿主cell全部裂解，溶液中phage数目达到最高值的时期。
1. 培养基的配制原则。
答：1、四个原则，目的明确，营养协调，理化适宜经济节约。
2. 配制培养基时为何调节PH？怎样调节？
答：各大类微生物都有它们合适的生长pH范围；采用磷酸缓冲液的方式：调节KH2PO4和K2HPO4浓度可获得pH6.0~7.6间的一系列稳定的pH；采用加入CaCO3做“备用碱”的方式；也可用NaHCO3从而避免CaCO3在培养基中分配不均。
1. 比较发酵、有氧呼吸、无氧呼吸。
答：方式 发酵 有氧呼吸 无氧呼吸
最终电子受体 有机物 分子氧 无机氧化物
电子传递链 无 有 有
产能量 少 多 较多
氧化磷酸化 底物水平 底物水平、电子传递水平 底物水平、电子传递水平2.生物固氮的条件是什么？
答：1.能量ATP的提供2.还原力[H]及其传递体：铁氧还蛋白或黄素氧还蛋白3.固氮酶：固二氮酶（组分Ⅰ，含铁和钼，络合、活化和还原N2）和固二氮酶还原酶（组分Ⅱ，含铁，传递电子给组分Ⅰ ）组成，两者在一起时才具有固氮作用。4 还原底物：N2 5 镁离子6 严格的厌氧环境
3. 固氮酶的组成及各组分的功能。
答：固二氮酶（组分Ⅰ，含铁和钼，络合、活化和还原N2）和固二氮酶还原酶（组分Ⅱ，含铁，传递电子给组分Ⅰ ）组成，两者在一起时才具有固氮作用。
4. 肽聚糖合成中，哪几步被抗生素抑制，都有哪些抗生素？
答：青霉素是肽聚糖单体五胎尾末端D_丙氨酰-D-丙氨酸结构类似物，两者相互竞争转肽酶的活性中心。当青霉素与转肽酶结合后，双糖肽的肽桥无法交联，这样的肽聚糖就缺乏应有的强度，结果形成细胞壁缺损的细胞，在不利的渗透压环境中极易破裂而死亡。
5. 嗜盐菌细胞膜组成及各成分功能。
答：分为红膜与紫膜两部分。红膜：主要成分为细胞色素、黄素蛋白和类胡萝卜素，进行经典的电子传递磷酸化；紫膜：进行光合磷酸化。含有细菌视紫红质，与人眼视网膜上柱状cell中所含的视紫红质蛋白相似，都含有紫色物质视黄醛。
6. 比较光能自养微生物的光合作用的类型。（3种）
答：1 环式光合磷酸化(光合细菌，厌氧)
2 非环式光合磷酸化（蓝细菌，有氧）
3 紫膜光合磷酸化（最简单、最原始的）

7. 酵母菌和细菌的乙醇发酵有何不同？
答：同型乙醇发酵：酿酒酵母能够通过EMP途径进行同型酒精发酵，即由EMP途径代谢产生的丙酮酸经过脱羧放出CO2，同时生成乙醛，乙醛接受糖酵解过程中释放的NADH+H+被还原成乙醇。这是一个低效的产能过程，大量能量仍然贮存于乙醇中，其总反应为：
葡萄糖 ＋ 2ADP + 2Pi ----- 2乙醇 + 2 CO2 + 2ATP
运动发酵单胞菌能通过ED途径进行同型乙醇发酵，但只产生1个ATP。
葡萄糖 ＋ ADP + Pi 2乙醇 + 2 CO2 +ATP
缺乏完整EMP途径的少数细菌（假单胞菌，根瘤菌，农杆菌，粪肠球菌）利用ED途径替代EMP途径产能。
异型乙醇发酵：一些细菌能够通过HMP途径进行异型乳酸发酵产生乳酸、乙醇和CO2等，我们也可以称其为异型乙醇发酵，例如肠膜明串珠菌进行的异型乙醇发酵总反应式为：葡萄糖 ＋ ADP + Pi ----- 乳酸 + 乙醇 + CO2 + ATP
8. 蓝细菌是一类产氧性光合生物，又是一类固氮菌，固氮酶的抗氧保护机制。
答：产生异形胞：缺乏产氧光合系统Ⅱ，含有SOD，能解除氧毒害。非异形胞蓝细菌：固氮作用和光合作用在时间上分隔，群体中央处于厌氧环境下的细胞失去产氧光合系统Ⅱ，有利于固氮提高SOD和过氧化物酶的活性去除过氧化物毒性
9. 次生代谢？特点是？如何利用碳、氮、磷调节机制来提高抗生素的产量？
答：次生代谢：菌体生长到一定时期以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质的过程，大多是分子结构比较复杂的化合物，包括抗生素、激素、生物碱、毒素和信息素、动植物生长促进剂以及生物药物素。通常都是发生在特定的微生物中，与发酵工业有关。如果不能合成，也不会影响细胞的生长繁殖，无明确的生理功能。和初级代谢关系密切，初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢产物的前体在对数期后期或稳定期进行，易受环境影响
受质粒和核DNA严密控制菌株不同，代谢产物种类不同，但和分类无关。
1. 典型生长曲线？分为几个期？典型生长曲线对发酵生产有何指导意义？
答：分批培养细菌时，以时间为横坐标，以菌数对数为纵坐标的相关曲线。能反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。包括延滞期、对数期、稳定期和衰亡期等四个生长时期。延迟期对实践的指导意义：在发酵工业上需设法尽量缩短延迟期。缩短延滞期的措施有：选用繁殖快的菌种；采用对数生长期的健壮菌种；
增加接种量； 调整培养基的成分，在种子培养基中加入发酵培养基的某些成分。
2. 比较灭菌、消毒、防腐和化疗。
答：1.灭菌：采用强烈的理化因素可以使一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施，如各种高温灭菌等，可分杀菌和溶菌两种。2.消毒：采用较温和的理化因素，只是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施，如巴氏消毒法。3.防腐：利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，达到防止物品发生霉腐的措施。4.即化学治疗，是利用对病原菌具有高度毒力而对宿主无显著毒性的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该传染病的一种措施。
3. 烘箱内热空气灭菌和常规加压蒸汽灭菌法中应注意哪些事项？
答：注意事项
1）只适用于玻璃、瓷器、金属等耐热物品的灭菌；2）灭菌物品不要放得太挤；
3）温度不得超过180℃；4）灭菌完毕后，温度需降到80℃以下，方可开箱取物。

4. 常用的灭菌及消毒方法有哪些？条件是什么？适用范围是什么？
答：1.烘箱内热空气灭菌法：条件：电热烘箱中150～170℃下维持1～2小时，只适用于玻璃、瓷器、金属等耐热物品的灭菌；2.灼烧：只能用于接种环、接种针等少数对象灭菌。3.巴氏消毒法：杀死物品中无芽孢的病原菌(如牛奶中的结核杆菌)适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂中对培养基及多种器材、物料的灭菌4.连续加压灭菌法121℃维持15～20min，或115℃下维持35分钟。 5.煮沸消毒法：一般用于饮用水的消毒(100℃下数分钟).6.间歇灭菌法 适用于不耐热培养基的灭菌。常规加压灭菌法 (应用最为广泛)
5. 磺胺类药物及增效剂的作用机制是什么？
答：磺胺类药物结构与细菌的生长因子——对氨基苯甲酸(PABA)高度相似，因而两者在细菌代谢过程中发生了竞争性拮抗作用。磺胺会被错当作底物，合成假二氢叶酸使得细菌无法合成以叶酸为前体的代谢产物。
6. 平板菌落计数法的原理和操作步骤。
答：用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行连续划线、扇形划线、方格划线或其他形式的连续划线 ，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
1. 基因突变的一般规律。
答：1.自发性，在自然条件下随机产生。2.稀有性，突变的随机性由突变率来决定。自发突变的突变率极低，所以称之为稀有性.独立性。每个gene突变的发生是独立的，互不干扰的。诱变性.gene突变具有诱变性，在理化因素的诱导下，其突变率会大提高，可提高10～105倍。回复突变:是指突变型又转变为野生型的突变.不对应性是指突变的发生与环境因素不是一一对应的关系.就是说,突变体的产生与环境因素的存在无关.
2. 简述检出营养缺陷型的四种方法。
答：逐个检出法，夹层培养法，影印接种法，限量补充法
3. 比较普遍性转导和局限性转导。
答：完全普遍转导:通过完全缺陷噬菌体可以转移供体菌CS上的任何gene，并传给受体菌，使受体菌获得供体菌各种遗传性状的现象。供体菌的少数特定gene，通过部分缺陷温和噬菌体转移给受体菌，使受体菌获得供体菌部分遗传性状的过程。
1.土壤资源？
（1）土壤的矿物质成分，提供微生物需要的矿质养料。（2）土壤中的动植物残体，以及耕作土壤中有机肥料，源源不断地供给微生物碳素养料和氮素养料。（3）土壤的持水性为微生物提供水分条件。(4)土壤的孔隙性和土壤水分多少，直接影响土壤的通风条件。（5）土壤的PH范围在3.5-10.5之间，这是大多数微生物活动最适的PH。（6）土壤的保湿性，比地面空气温度变化小，也为微生物的生长提供了良好的条件。

2.Amses实验？具体操作:将待测液加入鼠肝匀浆液，保温一段时间后，吸入滤纸片中，然后将滤纸片放置于事先涂布菌的MM平板中央。经培养后，三种现象：（1）在平板上没有大量菌落产生，说明样品中没有诱变剂存在。（2）在纸片周围有一抑制圈，外周出现大量菌落，说明样品中有某种高浓度的诱变剂存在。（3）在纸片周围长有大量菌落，说明样品中有适当浓度的诱变剂存在。原理：通过检测鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型菌株的回复突变率来确定。His-不能在MM上生长，若产生回复突变成原养型，则可以在MM上生长。
1.抗原进入人体产生抗原规律？
抗原：一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞发生特异性免疫的大分子物质。抗体：机体在抗原刺激下所形成的，由浆细胞产生的一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。规律：（1）初次应答：.0TD抗原初次进入机体，需经一段潜伏期，才能产生抗体，这种初次接触抗原引起抗体产生的过程，成初次反应。本反应产生的抗体主要是lgM，量一般不多，在体内维持时间短。（2）二次应答：初次反应一段时间，在接触同种抗原的刺激，机体内抗体的量会迅速增高。称为再次反应。再次反应产生的抗体，潜伏期短，主要是lgG，量比初次反应的要多几倍-几十倍，在体内维持的时间长。再次反应的出现，是由于记忆B细胞的缘故。（3）回忆应答：初次注射抗原所产生的抗体在体内完全消失时，如果再接触抗原，产生抗体A，量少，但维持时间较长。
是非题
1．一个病毒的毒粒内既含有DNA又含有RNA。( 错)
2．一个病毒的毒粒内既含有双链DNA又含有双链RNA。( 错 )
3．一个病毒的毒粒内只含有一种核酸DNA或RNA。( 对 )
4．植物病毒侵入依靠细胞受体吸附。( 错 )
5．溶源性细菌在一定条件诱发下,可变为烈性噬菌体裂解寄主细胞。( 对)
6．(+)DNA即是与mRNA序列互补的DNA。(错 )
7．朊病毒是只含有侵染性蛋白质的病毒。(  错  )
8．原噬菌体是整合在宿主DNA上的DNA片段,它不能独立进行繁殖。( 对   )
9．病毒具有宿主特异性,即某一种病毒仅能感染一定种类的微生物、植物或动物。( 对 )