1、微循环学杂 志():./.微循环学杂 志 年第 卷第 期基础与实验 瑞马唑仑调节/信号通路对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 严智文 张 亮 王春雨 陈怀龙 中图分类号.文献标识码 文章编号 ()【摘要】目的:探讨瑞马唑仑()对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制 方法:体外培养人胃癌细胞系 分为对照组、低()、中()、高()浓度组(、组)和()/信号通路激活剂氯化锂()组(组)采用 法、克隆形成实验分别检测各组 细胞增殖活力和克隆形成能力 实验检测各组 细胞迁移、侵袭能力 检测各组 细胞中、蛋白表达 结果:与对照组比较、组 细胞增殖活力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力及细胞中、蛋白表达水平显
2、著降低(.)而与 组比较 组 细胞上述指标显著升高(.)结论:可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭其作用机制可能与其抑制/信号通路激活有关【关键词】瑞马唑仑胃癌增殖迁移侵袭/信号通路 /【】:().:()()()()()/()().:(.)(的单克隆集落(即克隆形成数)严智文张 亮王春雨等.实验检测细胞迁移、侵袭能力:使用无血清培养液重悬各组 细胞(.个/)取 加入 小室上室(细胞侵袭检测时 上室碳酸脂膜上预涂/胶/)再取 含 胎牛血清的培养液加入下室常规培养 后取出小室多聚甲醛固定穿过膜的细胞.结晶紫染色 显微镜()观察并拍照 软件计数下室 个视野中迁移、侵袭细胞数取均值进行统计分析.检测细胞、蛋
3、白表达:使用含蛋白酶抑制剂的 裂解液充分裂解后分离细胞中总蛋白 蛋白定量试剂盒检测蛋白浓度后使蛋白煮沸变性 电泳分离等量蛋白()并将分离的蛋白转移至 膜 脱脂奶粉室温封闭 后将膜与一抗(兔抗、分别 、稀释)孵育过夜次日充分洗涤后将膜与二抗(标记山羊抗兔 稀释)室温孵育 显色 凝胶成像分析系统扫描图像 软件定量分析各条带灰度以目标蛋白电泳条带灰度/内参 电泳条带灰度比值表示目标蛋白相对表达量比值越大目标蛋白的表达量越高.统计学处理实验数据采用 .软件进行统计分析 数据分布的正态性和方差齐性分别通过 检验和 检验进行分析计量数据以均值 标准差()表示多组间比较采用单因素方差分析两两比较采用 检验.
4、为差异有统计学意义 结 果.各组细胞增殖活力和克隆形成能力比较如图、表 所示各组 细胞增殖率和克隆形成数差异均有统计学意义(.)两两比较、组和 组 细胞增殖率和克隆形成数显著低于对照组(细胞增殖率.、.、.、.克隆形成数.、.、.、.均 .)而 组 细胞增殖率和克隆形成数均较 组显著增多(.、.均 .)图 各组 细胞克隆形成数量(克隆形成实验)微循环学杂 志 年第 卷第 期基础与实验 表 各组 细胞增殖率和克隆形成数比较(均)组 别细胞增殖率()克隆形成数(个)对照组.组.).)组.).)组.).)组.).)值.注:与对照组比较).与 组比较).与 组比较).与 组比较).各组细胞迁移、侵袭能
5、力比较如图、表 所示各组迁移细胞数和侵袭细胞数差异有统计学意义(.)两两比较、组和 组 细胞迁移、侵袭细胞数显著低于对照组(迁移细胞数.、.、.、.侵袭细胞数.、.、.、.)而 组 细胞迁移、侵袭细胞数较 组显著增多(.、.)瑞马唑仑调节/信号通路对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响图 各组 细胞迁移、侵袭能力(实验)表 各组 细胞迁移、侵袭细胞数比较(均)组 别迁移细胞数(个)侵袭细胞数(个)对照组.组.).)组.).)组.).)组.).)值.注:与对照组比较).与 组比较).与 组比较).与 组比较).各组细胞增殖、迁移、侵袭和/相关蛋白表达比较如图、表 所示各组细胞、蛋白表达差异有统计学意义
6、(.)两两比较、组和 组 细胞中(.、.、.、.)、(.、.、.、.)、(.、.、.、.)、(.、.、.、.)、(.、.、.、.)、(.、.、.、.)蛋白表达水平显著低于对照组(均 .)而 组 细胞中、蛋白表达水平较 组显著升高(.、.、.、.、.、.均 .)图 各组 细胞中、蛋白电泳图()表 各组 细胞中、蛋白表达水平比较(灰度比值 均)组 别 对照组.组.).).).).).)组.).).).).).)组.).).).).).)组.).).).).).)值.注:与对照组比较).与 组比较).与 组比较).与 组比较).微循环学杂 志 年第 卷第 期基础与实验 严智文张 亮王春雨等 讨 论胃
7、癌发病率居消化道恶性肿瘤首位临床治疗以手术为主但进展期患者多数于术后 年内发生复发或转移 一些麻醉药物能够降低术后肿瘤复发率提高癌症患者术后生存率 已有研究显示丙泊酚、利多卡因、布比卡因、罗哌卡因等能够有效抑制胃癌细胞恶性表型发挥抗肿瘤作用 作为一种超短效镇静、麻醉药物用于麻醉维持时对乳腺癌根治术患者围术期细胞免疫的抑制作用小于丙泊酚对腹部肿瘤手术患者超声引导下神经阻滞给药期间的镇静效果优于咪达唑仑或右美托咪定 但 在胃癌中的抗肿瘤活性尚未见报道本研究观察不同浓度 对人胃癌细胞系 表型的作用及其可能机制结果显示在一定浓度范围内 能够显著降低 细胞增殖率、细胞克隆形成数和迁移/侵袭细胞数同时 还
8、显著下调 细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白、和 表达水平 提示 可能通过下调相关蛋白表达抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭等恶性表型/信号通路与人类多种癌症发生发展密切相关也是药物治疗的靶点 转录因子激活时与跨膜受体蛋白结合形成复合物诱导 过度活化并调节下游基因的表达 研究表明靶向 使/信号转导途径失活能够抑制胃癌细胞迁移和侵袭 本研究结果显示给予不同浓度 干预 细胞可使其、蛋白表达水平显著降低其下游蛋白、和、表达也显著下调从而阻断胃癌细胞增殖、迁移和侵袭当给予/信号通路激活剂 后上述蛋白水平均升高提示/信号通路可能是 抑制人胃癌 细胞增殖、迁移和侵袭的作用途径 这与丙泊酚通过抑制/信号通路激活参与调
9、控胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用相同综上本研究表明 可抑制人胃癌 细胞增殖、迁移和侵袭其作用机制可能与其抑制/信号通路激活有关 后续我们将通过多个胃癌细胞系以及动物实验等进行更充分、更全面的验证本文第一作者简介:严智文()男汉族主治医师主要从事临床麻醉研究微循环学杂 志 年第 卷第 期基础与实验 参考文献 .:.()():.刘 畅 郭向阳.局部麻醉药物在肿瘤转移和复发中作用的研究进展.基础医学与临床 ():./.():./.():.李会新 邢 飞 张 卫 等.瑞马唑仑复合瑞芬太尼麻醉用于衰弱老年患者胃癌根治术的效果.中华麻醉学杂志():.:.():.():./.():./.():.李加鹏 付倩
10、琼 黄宏伟.丙泊酚对胃癌 细胞增殖凋亡的影响及其机制研究.中国药师 ():.():.:.():.(下转第 页)瑞马唑仑调节/信号通路对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 .():.赵 倩 曹 静 李明霞.热休克蛋白 调控/对缺氧性肺高压新生大鼠肺血管内皮细胞凋亡及肺动脉压力的作用.新疆医科大学学报 ():.姜 朕 钮明杨 汪浩森 等.血清内皮细胞特异性分子表面活性蛋白 及转化生长因子 对脓毒症患儿继发急性肺损伤的预测价值.中国临床医生杂志 ():.王旭东 赵玉良 史为涛 等.黄芪多糖对脓毒症急性肾损伤大鼠/信号通路介导的肾上皮细胞能量代谢的影响.中国医院药学杂志 ():.闫伟华 常静侠.黄芪多糖对哮喘大鼠气道炎症及肺组织血管内皮生长因子表达的影响.中国临床药理学杂志 ():./.():./.():.():.():.微循环学杂 志 年第 卷第 期基础与实验(上接第 页)./.():./.():./.():./.():.李亚琦 李晓曦 缪长虹 等.瑞马唑仑与丙泊酚对乳腺癌根治术患者围术期细胞免疫功能的影响比较.中国药房():.:.():./.():./.():.黄芪多糖通过/通路保护脓毒症大鼠肺血管内皮细胞
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