1、A 1 和A 2 亚型鉴定标准操作规程(SOP)
核心提示:A抗原主要有两种亚血型,称为A 1和A 2(构成全部A型血的99.99%)。在直接凝集反应中,两种红细胞与抗A试剂均发生强的凝集反应。A 1和A 2 间的血清学区别
A抗原主要有两种亚血型,称为A 1和A 2(构成全部A型血的99.99%)。在直接凝集反应中,两种红细胞与抗A试剂均发生强的凝集反应。A 1和A 2 间的血清学区别,是依于抗A 1试剂做试验获得的结果为基础。这种抗A 1试剂可为B型人的血清制成或为双花扁豆提取并稀释的植物凝集素(lectin)在标准试验情况下,抗A 1试剂凝集A 1红
2、细胞,但不凝集A2红细胞。大约80%欧洲人A型或AB型红细胞可被抗A 1所凝集,因此分类为A 1或A 1B;其余20%红细胞为抗A凝集,但不为抗A 1所凝集,故称为A 2或A 2B型。
在常规输血试验中,除非A2或A 2B型人的血清含有抗A 1抗体,患者与供血者间的A 1或A 2不需要加以区别。据估计在血清内发现有抗A 1抗体的频率,A2型人为1%-8%及A 2B型的人为22%-35%。只有在370C有反应的抗A 1,才考虑其具有临床意义,因其能造成红细胞与血清试验间的ABO正反定型不符,且亦可引起交叉配合试验之不相合。
【原理】
根据A B O 血型的血清学特点,A 型和A B 型可分
3、为A 1 、A 2 、A 1B 和A 2B4 种亚型。抗-A (B型人)血清中含有抗B 和抗A 1 两种抗体,抗-A 可以凝集所有A 型和A B 型红细胞,而抗A 1 只能与一部分A 型和A B 型红细胞反应。据此凡与抗A 1 反应者被指定为A 1 或A 1B 型;不与抗A 1 反应,而与抗A 反应者被指定为A 2 或A 2B 型。
【器材】
试管、吸管、载玻片、离心机、记号笔、蜡笔、显微镜
【标本】
外周血或静脉血
【试剂】
1.抗A 1 分型血清
2.受检者5 %红细胞盐水悬液
3.已知A 1 和A 2 型5 %红细胞盐水悬液
【操作步骤】
1.取清洁玻片两张,一张测定
4、受检者红细胞用,另一张供对照用,并标明A 1 和A 2 。
2.将抗A 1 分型血清各1 滴分别滴在受检者玻片上和对照的A 1 和A2 部分各1 滴。
3.分别将受检者红细胞悬液及对照用A 1 和A 2 红细胞悬液各1 滴分别滴在上述抗A 1 血清上,用玻棒将血清和红细胞悬液混匀。
4.轻轻转动玻片,在室温下反应10 min 后观察结果。
【 结果判断】
A 1 对照红细胞凝集,而A2 对照红细胞不凝集,即受检者红细胞凝集者为A 1 型,不凝集者为A 2 型。
※各亚型的抗原抗体及其与抗血清的反应※
血 型
红细胞上的A、B抗原
血清中的抗体
与血清的反应
与抗A
与抗
5、B
与抗A1
A1
A1和A
抗B 抗H(偶见)
+
-
+
A2
A
抗B,抗A(1-2%)
+
-
-
A1B
A1 A和B
抗H(偶见)
+
+
+
A2B
A和B
抗A1(25%)*
+
+
-
B
B
抗A,抗 A1
-
+
-
O
无
抗A,抗A1,抗B
-
-
-
*指25%的A2B型血清中含抗A1, + 凝集,- 不凝集
【质量控制】
1.A 1 与A 2 红细胞究竟为质的不同还是量的不同,各有依据。因此,检查时必须掌握反应时间。
2.如A 1 和A 2 对照红细胞都凝集,表示抗A 1 血清有问题:如A 1 和A 2 对照红细胞都不凝集则再观察一些时间,如始终不显凝集,也说明抗A 1 血清有问题。
3.新生儿红细胞A B O 血型抗原较弱、不宜作亚型鉴定。