不同颜色染发剂对蚕豆根尖细胞微核的影响.doc

不同染发剂对蚕豆根尖细胞微核的影响
(10生本 10112314153 郑苏瑾)
前言：随着人们生活水平和美容要求的不断提,高, 染发剂的使用越来越普遍。随着人们生活水平和美容要求的不断提高, 染发剂的使用越来越普遍。这些染色剂是否具有致突、致畸、致癌作用, 已成为人们日益关注的问题。蚕豆根尖细胞微核技术是一种以染色体损伤及纺锤丝毒性等为测试终点的植物体细胞检测方法,因具有材料方便,培养简单、技术容易掌握、准确、快速、有明显剂量-效应等优点而成为目前研究和应用较多的检测环境污染物质的检测系统[13]。为了给染发剂的研究制造和管理使用提供科学依据, 我们选用目前畅销的一些染发剂, 用蚕豆根尖细胞微核试验。测定蚕豆根尖细胞中出现的微核率,以此分析染发剂的诱变性,从而判断其对遗传物质是否有毒性效应。我们用不同的染发剂处理蚕豆根尖细胞，统计微核千分率（微核细胞率）。
关键词：染发剂;蚕豆根尖;微核;致突变性
Different hair coloring agent on Vicia faba root tip cell micronucleus effects
Abstract: Along with the people living standard and beauty requirements continue to carry, high, the increasingly common use of hair coloring agent. As people's living standards and aesthetic requirements continue to increase, the increasingly common use of hair coloring agent. These dyes have mutagenic, teratogenic, carcinogenic effects, has become a growing concern. Vicia faba root tip cell micronucleus technology is a kind of chromosomal damage and spindle toxicity as endpoints plant body cell detection method, because of its material culture, convenient, simple, rapid, accurate technology easy to master, has obvious dose - effect has become the current research and application of more detection environmental pollutant detection system [13]. In order to give hair coloring agent on the manufacture and management to provide a scientific basis, we choose the selling some hair coloring agent, using Vicia faba root tip cell micronucleus test. Determination of Vicia faba root tip cell micronucleus rate in this analysis, hair coloring agent mutagenicity, in order to determine the genetic material is toxic effect. We use a different hair coloring agent treatment of root tip cells of Vicia faba micronucleus rate per thousand, statistics ( micronucleus cell rate )
key words: Hair dye; Broad bean root point; Micronucleus; Mutagenicity

细胞的染色体发生断裂后,细胞进入下一次分裂时,染色体片段不能随有丝分裂进入子细胞,而在细胞质中形成直径小于主核的,嗜色与主核一致,完全与主核分开的圆形或椭圆形核集微核，游离于主核外，大小是主核的1/3以下。它的折光率及细胞化学反应性质与主核一样，也具有合成DNA的能力[2]，已经证实，微核率的大小是和用药剂量或辐射累积效应呈正相关，所以微核测可用于化学物质的遗传毒性研究[3]。南阳师范学院生命科学与技术学院的庞振凌和张征田已经做过类似的实验。他们得出的结论是：染发剂对植物染色体是有显著影响的。微核率的多少不仅与染发剂种类和浓度有关，而且于两者之间的交互关系有关[5]。
1.材料与方法
1.1材料
1.1.1 仪器：培养箱，显微镜。
1.1.2 材料：蚕豆
1.1.3 试剂：。A、B、C、D、E五种不同品牌的染发剂，各种染发剂均用自来水稀释配成6.25mg/ml。自来水
1.2.1取材：选取优良的蚕豆种子置于26℃的恒温培养箱浸种催芽，选取出的蚕豆幼苗根尖置于盛有各种剂量组的染发剂中处理10-24h，以自来水做对照。经处理后的根尖，用蒸馏水冲洗后，置于蒸馏水中修复培养22～24 h。
1.2预处理：经处理后的根尖置于0.02%秋水仙素溶液中，浸泡处理4小时。。1.3:固定：用水洗净处理过的根尖，经甲醇/冰乙酸（3/1）中固定6~24 h，再经95%，85%酒精各半小时，最后转入70%酒精中，4℃保存备用。
1.2.2解离：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入6mol/L HCl中60℃解离14-15min，再用蒸馏水洗净。
1.2.3 染色：用蒸馏水清冲洗用改良苯酚品红溶液染色5~10分钟。
1.2.4压片、镜检:选择根尖分生组织均匀、染色良好的区域，观察、计数细胞微核数。
微核的判断标准[6]：主核大小的1/3以下，并与主核分离的小核；小核着色程度与主核相当或稍浅；微核形态为圆形、椭圆形、不规则形状。在所观察的微核细胞中，既有单微核，也有双微核。在各剂量组中，以单微核为多，一般为圆形、椭圆形边缘光滑的小核，多位于胞浆内细胞核附近，与核染色相同。每种染发剂检3个根尖，每个根尖随机镜检约500个细胞，计算微核率MCN(微核率=微核数/观察细胞数×1 000‰)。
2.结果与讨论
不同染发剂对细胞微核的诱导作用（实验结果见表1）
表1 不同染发剂处理的蚕豆根尖细胞的微核率
分组
微核数
根尖1 根尖2 根尖3
微核率X ‰
根尖1 根尖2 根尖3
平均微核率X ‰

A组
B组
C组
D组
E组
对照组

参 考 文 献
[1] 周宏治.农药甲基对硫磷污染环境的微核研究[J].四川大学学报(自然版),2000,37(增):62-66.
[2] 王爽,诸葛坚,余应年.微核与微核试验在遗传毒理学种的应用[J]. 癌变,畸变,突变,2000,12(4):253-256.
[3] 曹佳.微核实验在中国的应用、发展与展望[J].遗传,2003,25(1):73-76
[4] 祝庆蕃,常福聚,赵庆夏.蚕豆根尖细胞微核试验[J]. 癌变,畸变,突变.遗传,1989,11(2):7-8.
[5]
[6] 胡怡秀,臧雪冰,等. 五种国产染发剂及其主要组分对苯二胺的遗传毒性研究[M].癌变,畸变,突变,1996,8(6):358-363.

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