1、
食品论文保健食品 论文
保健食品中功效成分检测方法研究
[摘要]为保证保健食品中的功效、质量，本文通过建立保健食品中大豆异黄酮、染料木素的高效液相色谱法检测对保健食品中功效成分进行检测，此方法具有快速、灵敏、易操作、专禹性强及重复性好等优点。
[关键词]高效液相色谱法；保健食品；检测方法
大豆异黄酮(IsO)是从大豆中分离提取的一种植物雌性激素，是一种具有改善心血管、抗氧化等保健功能的活性成分。笔者通过建立保健食品中大豆异黄酮的高效液相色谱法检测，其操作方便、灵敏度高以及回收率高，具有较好的临床应用。现总结分析如下。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
2、
(1)材料：甲醇含量99.8％(色谱纯)；无水乙醚(分析纯)；染料木素和大豆苷元(美观Sigma公司)；Milli-Q超纯水。
(2)仪器：LC-6A高效液相色谱仪，AS3120型超声波清洗器，SPD-10Avp紫外可见检测器，LC-10Atvp输液泵，shimadzu class-vp5.03工作站。
1.2 标准溶液的配制
(1)大豆异黄酮标准溶液：取大豆苷元加少量的甲醇进行溶解后再用40％的甲醇定容并制成1.0mg／mL的标准准备液，在放入4℃冰箱进行保存，最后给予40％的甲醇稀释为25.0ug／mL的标准使用液。
(2)染料木素标准溶液：取染料木
3、素加少量甲醇进行溶解后再用40％的甲醇定容并制成1.0mg／mL的标准准备液，在放A4℃冰箱进行保存，最后给予40％的甲醇稀释为25.0ug／mL的标准使用液。
(3)大豆异黄酮、染料木素混合标准溶液：取大豆异黄酮、染料木素给予40％的甲醇稀释为25.0ug／mL的标准使用液。
1.3 方法
(1)样品制备。取含有大豆异黄酮的保健食品1g放于25mL的容量瓶中，加入80％的乙醇溶液溶解至20 mL，超声提取30min，再加80％的乙醇溶液定容至刻度，离心5min，3000dmin，摇匀静置，在加入80％的乙醇溶液20倍稀释上述溶液，过0.45μm滤膜，待备用。
4、2)色谱条件。色谱柱：ODS—C18；检测器：紫外可见检测器；流动相：甲醇+水+冰醋酸(45，55，1)；流速：1.0mL／min；柱温：40℃；波长260rim；进样量：10uL。
2 结果
2.1 标准曲线制作
分别取不同程度的大豆异黄酮、染料木素混合标准溶液10ul给予色谱分析，纵坐标以色谱峰面积绘制，横坐标用浓度以绘制。大豆苷元于1-80ug／mL的范围内呈线性，线性相关系数r=0.9994，回归方程y=132083x+151976。染料木素在8-100ug／mL范围内呈线性，线性相关系数r=0.9992，回归方程y=10858x+132794。
2.
5、2 方法的准确度与精密度
取10、25、50ug／mL三种浓度水平的大豆异黄酮、染料木素混合标准溶液，按色谱条件给予色谱测定。结果中染料木索回收范围为93.5％-103.1％，平均回收率为99.5％；大豆苷元的回收范围为95.4％-106.3％，平均回收率为97.8％。染料木素的相对标准偏差为2.09％-2.83％、大豆苷元的相对标准偏差为1.53％-2.69％。染料木素的RSD为2.10％-2.86％，大豆苷元的RSD为1.53％～2.67％。
3 讨论
大豆异黄酮已广泛应用到保健食品的生产中，目前有很多保健食品以大豆异黄酮为主要成分。但由于目前我国的保健食品缺乏严格
6、的质量控制，使得对其大豆异黄酮的检测还无相应的国家标准检验方法。大豆异黄酮与染料木素是大豆制品类保健食品的主要成分功效，而大豆异黄酮则占30％左右，染料木素则占50％左右，而其他的含量则较低，故一般对大豆制品类的保健食品给予检测时只需检测大豆异黄酮与染料木素。大豆异黄酮需通过酶解或酸水解，而因游离的苷元才有活性故需以游离式的形式存在，才能让体内易吸收。在对大豆异黄酮给予检测时，一般给予气相色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法及紫外分光光度法。本文主要对大豆异黄酮与染料木素给予高效液相色谱法检测。
高效液相色谱法即HPLC，是20世纪60-70年代发展的新型分析分离技术。它是一种传统的液相
7、色谱方法、现代高压技术、高灵敏检测器及高效柱填充物的新型分析分离技术。因高效液相色谱法需样品制成溶液，无须气化，故无须受到样品的挥发性约束，尤其是对热稳定性差，挥发性低，分子量大的离子型化合物及高分子化合物尤为有利，而高效液相色谱法具有速度快、范围广、安全性高、分离效率高、灵敏度高及色谱柱可反复使用等优点，故常用于对大豆制品类保健食品的检测。
综上所述，本文通过对大豆制品类保健食品给予高效液相色谱法检测，其结果表明染料木素的平均回收率为99.5％；大豆苷元的平均回收率为97.8％。染料木素的相对标准偏差为2.09％-2.83％、大豆苷元的相对标准偏差为1.53％-2.69％。染料木素的RSD～2.10％～2.86％，大豆苷元的RSD为1.53％-2.67％。故对大豆制品类保健食品给予高效液相色谱法检测能更清楚地了解保健食品的质量，从而保证其质量。
·
浙ICP备2021020529号-1 | 浙B2-20240490 
