医院感染病原学.ppt

医院感染病原学医院感染病原学岳阳市二人民医院院感科岳阳市二人民医院院感科李李义红2人体正常微生物群人体正常微生物群正常人体表和与外界相通的开放性部位存在的正常人体表和与外界相通的开放性部位存在的微生物群。一般不致病，有益无害微生物群。一般不致病，有益无害包括包括细菌、病毒、真菌、衣原体、支原体等菌、病毒、真菌、衣原体、支原体等 以以细菌的数量最多，因此通称菌的数量最多，因此通称为正常菌群正常菌群 原籍菌原籍菌:固有菌群固有菌群(常居菌常居菌),长期寄住于皮肤粘膜期寄住于皮肤粘膜,在一定年在一定年龄和一定部位相和一定部位相对固定。固定。外籍菌外籍菌:暂居菌居菌,暂时寄生在皮肤粘膜上的来源寄生在皮肤粘膜上的来源 于外于外环境的非致病菌和潜在致病菌。境的非致病菌和潜在致病菌。3部位部位主要微生物种主要微生物种类皮肤皮肤表葡、表葡、类白喉杆菌、白喉杆菌、铜绿、丙酸杆菌非致病性奈瑟菌等、丙酸杆菌非致病性奈瑟菌等口腔口腔甲型和乙型甲型和乙型链球菌、乳酸杆菌、梭形杆菌、表葡、肺炎球菌、乳酸杆菌、梭形杆菌、表葡、肺炎球菌、奈瑟球菌、球菌、奈瑟球菌、类白喉杆菌、螺旋体、放白喉杆菌、螺旋体、放线菌、白假菌、白假丝酵母等酵母等鼻咽腔鼻咽腔甲型甲型链球菌、奈瑟球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型球菌、奈瑟球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、球菌、葡萄球菌、铜绿、大、大肠埃希菌、埃希菌、变形杆菌等形杆菌等外耳道外耳道葡萄球菌、葡萄球菌、类白喉棒状杆菌、白喉棒状杆菌、铜绿、非致病分枝杆菌等、非致病分枝杆菌等眼眼结膜膜表葡、表葡、结膜干燥杆菌、膜干燥杆菌、类白喉杆菌等白喉杆菌等肠道道类杆菌、双歧杆菌、大杆菌、双歧杆菌、大肠埃希、埃希、厌氧性氧性链球菌、球菌、粪链球球菌、葡萄球菌、白假菌、葡萄球菌、白假丝酵母、乳酸杆菌、酵母、乳酸杆菌、变形杆菌、破形杆菌、破伤风杆菌、杆菌、产气气荚膜杆菌等膜杆菌等阴道阴道乳酸杆菌、白假乳酸杆菌、白假丝酵母、酵母、类白喉杆菌、大白喉杆菌、大肠埃希菌等埃希菌等尿道尿道表葡、表葡、类白喉杆菌、耻垢杆菌等白喉杆菌、耻垢杆菌等4正常菌群正常菌群对人体的作用人体的作用正常正常情况下情况下正常正常菌群菌群对宿主有利。宿主有利。1、菌群之、菌群之间能相互制能相互制约而而维持其微生持其微生态平衡，平衡，通通过争争夺营养物养物质和空和空间位置，位置，产生代生代谢物物 等来等来杀伤侵入的有害侵入的有害细菌。菌。2、细胞成分或代胞成分或代谢产物能激物能激发宿主防御机制的宿主防御机制的 发育。育。3、有些微生物能在、有些微生物能在肠道内合成一些道内合成一些维生素。生素。4、生物屏障作用。、生物屏障作用。5细菌的定植和抗定植菌的定植和抗定植细菌定植条件：黏附能力菌定植条件：黏附能力满足生活必需的条件足生活必需的条件逃避或逃避或对抗人体的防御抗人体的防御一定数量一定数量正常菌群的抗定植：正常菌群能相正常菌群的抗定植：正常菌群能相对的保持的保持稳定，新来的微生物不易定植定，新来的微生物不易定植6细菌的定植和抗定植菌的定植和抗定植l定植抵抗力：一种已定植的定植抵抗力：一种已定植的细菌具有抑制其他菌具有抑制其他 细菌定植的能力菌定植的能力l去去污染：减少或消染：减少或消灭患者的一部分正常菌群或患者的一部分正常菌群或 定植定植细菌菌 保保护性隔离性隔离防止外源性感染防止外源性感染 控制定植菌控制定植菌防止内源性感染防止内源性感染 如复方新如复方新诺明抑制明抑制肠道需氧菌，可扶道需氧菌，可扶 植植厌氧菌的定植抵抗力水平。氧菌的定植抵抗力水平。7常常见医院感染病原体医院感染病原体l按来源分：内源性、外源性按来源分：内源性、外源性l大部分大部分为人体正常菌群的人体正常菌群的转移菌或条件致病菌，移菌或条件致病菌，对某些某些环境有特殊适境有特殊适应性（如表葡和不性（如表葡和不动杆菌，杆菌，可粘附于塑料表面）可粘附于塑料表面）l常常为多重耐多重耐药菌株菌株:对抗生素有抗生素有较强较广耐广耐药l常侵犯免疫功能低下的宿主：如老年人；血液常侵犯免疫功能低下的宿主：如老年人；血液病、肝硬化、糖尿病、病、肝硬化、糖尿病、恶性性肿瘤等基瘤等基础疾病的疾病的患者；接受各种侵入性操作、器官移植等；患者；接受各种侵入性操作、器官移植等；长期期应用广用广谱抗菌抗菌药物、免疫抑制物、免疫抑制剂、激素等。、激素等。8常常见医院感染病原体医院感染病原体l葡萄球菌属葡萄球菌属凝固酶阴性：表葡、腐生葡凝固酶阳性：金葡金葡是医院感染的重要病原菌，常见感染部位有下呼吸道、外科伤口、导管相关感染、烧伤部位、泌尿道等。途径：污染的手。从有损伤的皮肤和黏膜进入人体，也可因食入含金葡菌肠毒素或吸入染菌尘埃而致病。可以通过患者之间直接或间接接触引起医院感染暴发。9常常见医院感染病原体医院感染病原体l肺炎肺炎链球菌球菌 自然界广泛分布，鼻腔中，多数不致病自然界广泛分布，鼻腔中，多数不致病 能否致病与能否致病与荚膜关系密切膜关系密切 主要引起大叶性肺炎及气管炎、中耳炎、主要引起大叶性肺炎及气管炎、中耳炎、脑 膜炎、胸膜炎、心内膜炎、膜炎、胸膜炎、心内膜炎、败血症等血症等 耐青霉素肺炎耐青霉素肺炎链球菌（球菌（PRSP）10常常见医院感染病原体医院感染病原体l肠球菌球菌 肠道正常菌群的一部分，道正常菌群的一部分，G+医院感染最常医院感染最常见的的为粪肠球菌，占球菌，占80-90%，其次是屎其次是屎肠球菌、球菌、鸟肠球菌。球菌。可造成泌尿道、血液、心内膜、可造成泌尿道、血液、心内膜、伤口及下呼吸口及下呼吸道等部位感染。最常道等部位感染。最常见是是尿路感染尿路感染。条件致病菌。部分肺部感染条件致病菌。部分肺部感染为混合感染。混合感染。11常常见医院感染病原体医院感染病原体l埃希菌属埃希菌属 大大肠埃希菌是最常埃希菌是最常见的的临床分离床分离菌，也是菌，也是肠道道G-杆菌群的主要成杆菌群的主要成员。大大肠埃希菌居医院感染泌尿道感染病原菌首位，埃希菌居医院感染泌尿道感染病原菌首位，也是也是G-菌菌败血症最常血症最常见的病原菌。的病原菌。在在肠道内一般不致病，在免疫力低下的患者可道内一般不致病，在免疫力低下的患者可发生易位引起内源性感染；可通生易位引起内源性感染；可通过患者之患者之间及及工作人工作人员与患者之与患者之间的接触、呼吸道气溶胶的的接触、呼吸道气溶胶的吸入或各种侵入性操作引起外源性感染。吸入或各种侵入性操作引起外源性感染。可引起泌尿道、腹腔、胆道、血液、可引起泌尿道、腹腔、胆道、血液、下呼吸道等部位的感染。下呼吸道等部位的感染。考点12常常见医院感染病原体医院感染病原体l克雷伯菌属克雷伯菌属 G-杆菌，内毒素是主要致病物杆菌，内毒素是主要致病物质。是。是肠道及上呼吸正常菌群的道及上呼吸正常菌群的组成部分。成部分。在住院患者中易在住院患者中易发生定植，尤上呼吸道极常生定植，尤上呼吸道极常见 可通可通过接触患者或呼吸机等医接触患者或呼吸机等医疗器械器械传播。播。不注意洗手，手可成不注意洗手，手可成传播感染的重要方式播感染的重要方式 可引起呼吸道、泌尿道、可引起呼吸道、泌尿道、伤口及血液等部位感口及血液等部位感染，克雷伯菌肺炎易形成染，克雷伯菌肺炎易形成脓肿和和 坏死。肺克坏死。肺克还可引起可引起肠炎和炎和婴儿儿 脑膜炎及膜炎及败血症。血症。13常常见医院感染病原体医院感染病原体l肠杆菌属杆菌属 阴沟阴沟肠杆菌、杆菌、产气气肠杆菌、聚杆菌、聚团肠杆菌等，是杆菌等，是肠杆菌科中最常杆菌科中最常见的的环境菌群，境菌群，但不是但不是肠道的常居菌群。道的常居菌群。阴沟是呼吸道及消化道正常菌群的阴沟是呼吸道及消化道正常菌群的组成部分成部分 产气气肠杆菌是杆菌是产生生AmpC型型酶的重要菌之一的重要菌之一2009天津天津蓟县妇幼保健院新生儿感染幼保健院新生儿感染14常常见医院感染病原体医院感染病原体l假假单胞菌属胞菌属 非非发酵、酵、G-需氧杆菌需氧杆菌铜绿假假单胞菌：俗称胞菌：俗称绿脓，产多种水溶性色素，多种水溶性色素，易造成机会性感染，可易造成机会性感染，可单一一/混合感染，可混合感染，可发生在人体任何部位和生在人体任何部位和组织，常，常见于于烧伤或或创伤部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道嗜麦芽窄食嗜麦芽窄食单胞菌：常呈多重耐胞菌：常呈多重耐药，对包括碳青包括碳青霉霉烯类在内的在内的-内内酰胺胺类、氟、氟喹诺酮类、氨基、氨基糖苷糖苷类等都可表等都可表现为耐耐药，对泰能天然耐泰能天然耐药15常常见医院感染病原体医院感染病原体l不不动杆菌属杆菌属 需氧需氧G-菌，基本菌，基本为腐生菌，广腐生菌，广泛存在于自然界，新泛存在于自然界，新鲜水水标本中本中100%有不有不动杆菌生杆菌生长。常常见鲍曼不曼不动杆菌，易在潮湿杆菌，易在潮湿环境中生存，可境中生存，可引起泌尿道、呼吸道、引起泌尿道、呼吸道、伤口及血液等感染，主口及血液等感染，主要通要通过各种各种污染器械及手染器械及手传播。播。ICU是不是不动杆杆菌引起感染的多菌引起感染的多发区，病死率区，病死率较高，与高，与ICU患患者年者年龄大、病情重、机体免疫力大、病情重、机体免疫力较低、住院低、住院时间长、多有侵、多有侵袭性操作以及广泛使用皮性操作以及广泛使用皮质激素激素和抗生素有关。和抗生素有关。16常常见医院感染病原体医院感染病原体l变形杆菌属形杆菌属 自然界分布广泛自然界分布广泛(土壤、土壤、污水、水、垃圾垃圾)，普通、奇异，普通、奇异变形杆菌引起人的原形杆菌引起人的原发性性和和继发性感染，是泌尿道感染主要病原菌之一，性感染，是泌尿道感染主要病原菌之一，仅次于大次于大肠埃希菌，可由此埃希菌，可由此产生菌血症，生菌血症，还常常引起引起伤口、呼吸道等多种感染。口、呼吸道等多种感染。17常常见医院感染病原体医院感染病原体l嗜肺嗜肺军团菌菌 广泛存在于自然水体与自来水等广泛存在于自然水体与自来水等环境中境中 常常见医院感染医院感染类型：肺炎型：肺炎 感染途径：吸入感染途径：吸入带菌气溶胶菌气溶胶 易感因素：吸烟、慢阻肺、易感因素：吸烟、慢阻肺、饮酒酒过度、使用空度、使用空调设施、使用施、使用肾上腺皮上腺皮质激素或其他免疫抑制激素或其他免疫抑制剂、年老等。、年老等。18常常见医院感染病原体医院感染病原体l分枝杆菌分枝杆菌 人型和牛型人型和牛型结核分枝杆菌是熟知的致病菌核分枝杆菌是熟知的致病菌 非非结核分枝杆菌核分枝杆菌(NTM)广泛分布于自然界，医广泛分布于自然界，医院院环境表面、医境表面、医疗器械及其清洗用水中存在多器械及其清洗用水中存在多种非种非结核分枝杆菌核分枝杆菌l真菌真菌 白假白假丝酵母菌、新型酵母菌、新型隐球菌、曲霉菌球菌、曲霉菌 免疫力低下或免疫力低下或长期使用广期使用广谱抗菌抗菌药物物时易易发生生感染感染19常常见医院感染病原体医院感染病原体l病毒病毒 常常见：HBV、HCV、HIV、CMV SARS相关病毒相关病毒 其他：流感病毒、麻疹病毒、柯其他：流感病毒、麻疹病毒、柯萨奇病毒、水奇病毒、水痘痘-带状疱疹病毒等状疱疹病毒等 可可经血液血液-体液体液传播，也可播，也可经飞沫沫传播，播，还可可经器官移植器官移植传播。播。20医院感染病原体医院感染病原体变迁迁l20世世纪40年代前年代前G+球菌球菌l20世世纪60年代年代G-杆菌取代杆菌取代G+球菌球菌l近年来近年来头孢菌素大量菌素大量应用以及侵入性操作用以及侵入性操作增多，在增多，在G-杆菌得到有效控制的同杆菌得到有效控制的同时，G+球球菌呈上升菌呈上升趋势，同，同时真菌比例增加，病毒、衣真菌比例增加，病毒、衣原体也成原体也成为医院感染的重要病原体。医院感染的重要病原体。21病原体的耐病原体的耐药性性l细菌耐菌耐药性：致病微生物性：致病微生物对抗菌抗菌药物作用的耐物作用的耐受性或受性或对抗性，是抗菌抗性，是抗菌药物、物、细菌本身及菌本身及环境境共同作用的共同作用的结果。果。天然耐天然耐药 因染色体因染色体DNA突突变所致所致 获得性耐得性耐药 大多由大多由质粒、噬菌体及其他粒、噬菌体及其他遗传 物物质携携带外来的外来的DNA片段所致片段所致l交叉耐交叉耐药：细菌菌对同一作用机制同一作用机制药物中不同种物中不同种 类的的药物同物同时耐耐药l多重耐多重耐药：细菌菌对不同作用机制不同作用机制药物同物同时耐耐药考点22细菌耐药的机制产生钝化酶，使抗生素灭活或结构改变靶位发生突变，抗生素的亲和力下降细胞膜通透性降低，抗生素进入减少或进入细菌的抗生素被主动排除体外（外排泵）细菌菌膜形成23耐耐药菌菌 MRSAlMRSAl定定义：凡：凡对甲氧西林、苯甲氧西林、苯唑西林、西林、头孢西丁耐西丁耐药，或青霉素，或青霉素结合蛋白合蛋白2a（PBP2a）阳性、）阳性、mecA基因阳性的金黄色葡萄球菌定基因阳性的金黄色葡萄球菌定义为耐甲耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）lMRSA应视为对所有所有内内酰胺胺类抗生素耐抗生素耐药l1961年英国首次年英国首次报道道MRSA考点24耐耐药菌菌 VRElVRE-耐万古霉素耐万古霉素肠球菌球菌l1988年首次分离于英国年首次分离于英国伦敦敦lVRE的出的出现与近年与近年临床大量使用广床大量使用广谱抗生素和抗生素和糖糖肽类抗生素有关抗生素有关l体外体外证明，明，VRE耐耐药基因可基因可轻易整合到金葡菌，易整合到金葡菌，产生一种生一种难治的耐万古霉素金葡菌治的耐万古霉素金葡菌25耐耐药菌菌ESBLslESBLs产超广超广谱-内内酰胺胺酶l是由是由质粒介粒介导的、能水解氧的、能水解氧亚氨基氨基-内内酰胺胺类抗生素的一抗生素的一类-内内酰胺胺酶，对-内内酰胺胺类抗生抗生素具有广泛水解活性，包括青霉素素具有广泛水解活性，包括青霉素类、氧、氧亚氨氨基基头孢菌素和菌素和单酰胺胺类，通常不水解，通常不水解7-甲氧甲氧基基头孢菌素和碳青霉菌素和碳青霉烯类，其活性可被，其活性可被-内内酰胺胺酶抑制抑制剂抑制。抑制。l1983年德国首次年德国首次报道道l肺炎克雷伯、肺炎克雷伯、产酸克雷伯、大酸克雷伯、大肠埃希菌最常埃希菌最常见26耐耐药菌菌产KPC酶细菌菌lKPC碳青霉碳青霉烯酶lKPC可水解包括碳青霉可水解包括碳青霉烯类抗菌抗菌药物在内的所物在内的所有有-内内酰胺胺类抗菌抗菌药物，但物，但对头孢他他啶和和头孢西丁相西丁相对较弱。弱。l2001年美国北卡年美国北卡罗来来纳州首次州首次报道，我国道，我国2007年年报道了首株道了首株产KPC的肺克的肺克l产KPC酶的的细菌包括肺克、其他菌包括肺克、其他肠杆菌杆菌(如大如大肠埃希菌、埃希菌、产酸克雷伯、沙酸克雷伯、沙门菌、菌、肠杆菌属、杆菌属、奇异奇异变形杆菌等形杆菌等)、铜绿等。等。27耐耐药菌菌 MDR-ABl多重耐多重耐药鲍曼不曼不动杆菌杆菌-同同时耐耐3种以上不同种以上不同类型的抗菌型的抗菌药物的物的鲍曼。曼。l1991年美国首次年美国首次报道道对碳青霉碳青霉烯类抗菌抗菌药物耐物耐药的的鲍曼（曼（CRAB）28耐耐药菌菌l多重耐多重耐药铜绿假假单胞菌胞菌 耐耐药机制复机制复杂，主要与以下因素有关：，主要与以下因素有关：细菌菌产生抗菌活性生抗菌活性酶，如如-内内酰胺胺酶、氨基糖苷、氨基糖苷钝化化酶等；等；细菌改菌改变抗菌抗菌药物作用的靶位，如物作用的靶位，如PBPs、DNA旋旋转酶等等结构构发生改生改变；外膜外膜通透性降低；通透性降低；生物膜形成；生物膜形成；主主动泵出系出系统等。等。lMRCNS：耐甲氧西林凝固：耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌阴性葡萄球菌lPRSP：耐青霉素肺炎：耐青霉素肺炎链球菌球菌lMDR-TB：多重耐：多重耐药结核分枝杆菌核分枝杆菌29标本采集有关的生物安全措施本采集有关的生物安全措施l戴手套、穿工作服，必要戴手套、穿工作服，必要时戴面罩或戴面罩或护目目镜l容器必容器必须防漏。防漏。标本运送本运送时应密封、防渗密封、防渗l严禁将出禁将出现渗漏的渗漏的标本送本送检，应尽量重新采集尽量重新采集标本，将渗漏容器按感染性医本，将渗漏容器按感染性医疗废物物处置。置。l严禁将禁将针头暴露的注射器送到暴露的注射器送到实验室，室，应将注将注射器中的射器中的标本注入无菌密封的容器中送本注入无菌密封的容器中送检。30标本采集的基本原本采集的基本原则l应在疾病急性期或早期，如有可能尽量在用抗在疾病急性期或早期，如有可能尽量在用抗菌菌药物前采集物前采集标本本l收集真正病灶收集真正病灶处的的标本，避免本，避免临近正常菌群的近正常菌群的污染。染。l标本采集要足量，以本采集要足量，以满足足检验的要求。的要求。l选择合适的取合适的取样容器。容器。l检验申申请单上上应提供患者的相关提供患者的相关资料，包括病料，包括病人姓名、病房、住院或人姓名、病房、住院或门诊号、号、标本来源、采本来源、采集部位和采集集部位和采集时间等。等。31标本的运送与保存本的运送与保存l所有所有标本采集后立即送本采集后立即送检，最好在，最好在2h内。如不内。如不能及能及时送送检应放在相放在相应条件保存。运送条件保存。运送时间较长者可使用运送培养基。者可使用运送培养基。l保存的方式主要依保存的方式主要依赖于运送培养基的种于运送培养基的种类及要及要检测的病原体。需的病原体。需检测志志贺菌、淋病奈瑟菌、菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌等病原菌的膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌等病原菌的标本，本，如如脑脊液、生殖道、眼部、内耳道的脊液、生殖道、眼部、内耳道的标本，禁本，禁止冷藏。用于止冷藏。用于检测病毒的病毒的标本本应储存于存于4。尿液、痰液、拭子及插管等尿液、痰液、拭子及插管等标本做普通本做普通细菌培菌培养而无法及养而无法及时送送检时，可冷藏保存。，可冷藏保存。32血培养血培养标本的采集本的采集l采血指征采血指征一般患者出一般患者出现可疑菌血症可疑菌血症应采集血液培养：采集血液培养：发热（38）或低温（）或低温（36），寒），寒战，白，白细胞胞增多（增多（计数大于数大于10.0109/L，特，特别有有“核左移核左移”时），皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、），皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血血压降低，降低，C反反应蛋白升高及呼吸加快，粒蛋白升高及呼吸加快，粒细胞减少、血小板减少等。胞减少、血小板减少等。新生儿可疑菌血症，新生儿可疑菌血症，应该同同时做尿液和做尿液和脑脊液脊液培养。培养。考点33血血标本的采集本的采集l采血采血时间尽量在使用抗菌尽量在使用抗菌药物之前物之前进行。行。对间歇性寒歇性寒战或或发热患者患者应在寒在寒战或体温高峰到来之前或体温高峰到来之前0.5-1h采集血液，或于寒采集血液，或于寒战或或发热后后1h进行。行。当当怀疑疑为急性感染性心内膜炎急性感染性心内膜炎时，应立即立即进行行血培养，在血培养，在30min内采集内采集1-2套血套血标本，然后本，然后立即立即进行抗菌行抗菌药物的物的经验治治疗。对于于亚急性感急性感染性心内膜炎，染性心内膜炎，则推荐在推荐在30-60min内采集两内采集两次各次各2套血套血标本，然后才开始抗菌本，然后才开始抗菌药物的物的经验治治疗。考点34血血标本的采集本的采集l采血套数及采血量采血套数及采血量对于成人患者，要求每次采集于成人患者，要求每次采集2-3套套标本，每本，每套套应包括一个需氧培养瓶和包括一个需氧培养瓶和厌氧培养瓶。氧培养瓶。对于目前普遍采用的自于目前普遍采用的自动化血培养系化血培养系统，成人，成人采血采血20ml，分装在两个瓶内，各分配，分装在两个瓶内，各分配10ml。当采血量不足当采血量不足20ml时，应先注入需氧瓶。先注入需氧瓶。对于于婴幼儿患者，采血量不超幼儿患者，采血量不超过患者患者总血量的血量的1%。通常儿童采血。通常儿童采血1-5ml。考点35血血标本的采集本的采集l皮肤消毒程序皮肤消毒程序（1）使用安）使用安尔碘溶液直接消毒皮肤，达到碘溶液直接消毒皮肤，达到该消消毒毒剂规定要求的定要求的时间即可。即可。（2）严格格执行三步法：行三步法：75%酒精擦拭静脉穿刺酒精擦拭静脉穿刺部位待部位待30秒以上。秒以上。1%-2%碘酊作用碘酊作用30s或或10%碘伏碘伏1-2min，从穿刺点向外画圈消毒，至，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达消毒区域直径达3cm以上。以上。75%酒精脱碘：酒精脱碘：对碘碘过敏的患者，用敏的患者，用75%酒精消毒酒精消毒1min，待，待酒精酒精挥发干燥后采血。干燥后采血。36血血标本的采集本的采集l静脉穿刺和培养瓶接种程序静脉穿刺和培养瓶接种程序在穿刺前或穿刺期在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑防止静脉滑动，可，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。用注射器无菌穿刺取血后直接注入血培养瓶，用注射器无菌穿刺取血后直接注入血培养瓶，勿勿换针头，或，或严格按厂商推荐的方法采血。格按厂商推荐的方法采血。血血标本接种到培养瓶后，本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防倒混匀以防血液凝固。血培养使用血液凝固。血培养使用SPS抗凝抗凝剂，不得用肝，不得用肝素、素、EDTA、枸、枸橼酸酸钠抗凝。抗凝。37血血标本的采集本的采集l注意事注意事项1、最好从静脉采血，不建、最好从静脉采血，不建议从从动脉采血。脉采血。2、一个静脉穿刺点只能采集、一个静脉穿刺点只能采集1套血套血标本，采集第本，采集第2套套血血标本本应该选择第第2个静脉穿刺点。一次静脉采血注个静脉穿刺点。一次静脉采血注入多个培养瓶中入多个培养瓶中应视为单份血培养。份血培养。3、常、常规血培养不宜从静脉血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血，管或静脉留置装置取血，除非除非怀疑疑导管相关血流感染管相关血流感染4、送、送检的的标本所本所标注的内容注的内容应包括病人基本信息、包括病人基本信息、采血采血时间和采血位置，不要把和采血位置，不要把标签贴在血培养瓶的条在血培养瓶的条形形码上，否上，否则仪器无法器无法识别。5、采血后、采血后应该立即送立即送检，如不能立即送，如不能立即送检，需室温，需室温保存，切勿冷藏。保存，切勿冷藏。38静脉静脉导管管标本的采集本的采集l采集原采集原则保留保留导管：至少管：至少2套血培养，套血培养，经外周静脉采血外周静脉采血1套，从套，从导管中心或管中心或输液港隔膜无菌采血液港隔膜无菌采血1套套 拔除拔除导管：采管：采2套外周血培养，无菌方法拔出套外周血培养，无菌方法拔出导管取管取导管尖端管尖端进行培养行培养39静脉静脉导管管标本的采集本的采集l采集方法采集方法导管尖端：消毒管尖端：消毒导管周管周围皮肤，拔出皮肤，拔出导管，管，无菌剪刀取无菌剪刀取约5cm长，置无菌容器中送，置无菌容器中送检经留置留置导管采血：消毒，拔去管采血：消毒，拔去导管盖，消毒管盖，消毒针芯。先接无菌注射器抽吸至少芯。先接无菌注射器抽吸至少0.51ml血弃血弃去，另取一直无菌注射器抽血去，另取一直无菌注射器抽血进行血培养，行血培养，然后封管。然后封管。40静脉静脉导管管标本的采集本的采集l注意事注意事项 送送检的的导管管长度保持度保持约5cm，不要差，不要差 距太大距太大 样本要本要标注采集注采集时间和部位，及和部位，及时送送 检，同，同时送送检外周血和外周血和导管血管血时要分要分 别标注，同注，同时送送检41上呼吸道上呼吸道标本的采集本的采集l鼻拭子鼻拭子无菌拭子入鼻腔内至少无菌拭子入鼻腔内至少1cm后后采集采集标本本取取样时用力旋用力旋转拭子并停留拭子并停留10s，退出拭子，放入运送培，退出拭子，放入运送培养基或无菌养基或无菌试管管标记病人信息，病人信息，须注明鼻内注明鼻内有无病灶，及有无病灶，及时送送检42上呼吸道上呼吸道标本的采集本的采集l咽拭子咽拭子在扁桃体部位、咽喉壁及口腔内炎在扁桃体部位、咽喉壁及口腔内炎症、症、溃疡或渗出部位采或渗出部位采样时，应先先清水漱口清水漱口观察病人咽喉壁和扁桃体，定位炎察病人咽喉壁和扁桃体，定位炎症和渗出物区域症和渗出物区域压舌板舌板轻压舌面，无菌拭子在定位舌面，无菌拭子在定位区域反复刷刮，拭子不要触及区域反复刷刮，拭子不要触及颊腔腔侧壁或牙壁或牙齿，置无菌，置无菌试管或运送培管或运送培养基养基43下呼吸道下呼吸道标本的采集本的采集l咳痰咳痰清晨第一口痰清晨第一口痰为宜宜抗菌抗菌药物物应用前，先清水漱口，有假牙用前，先清水漱口，有假牙应取下取下无痰可用无痰可用35NaCl 5ml雾吸吸约5min导痰痰易受口咽部定植菌易受口咽部定植菌污染染44下呼吸道下呼吸道标本的采集本的采集l气管内抽吸物气管内抽吸物l支气管支气管镜采集采集 支气管冲洗液支气管冲洗液 肺泡灌洗液肺泡灌洗液 防防污染毛刷采染毛刷采样l经气管穿刺吸引物气管穿刺吸引物l经胸壁胸壁针刺吸引物刺吸引物l开胸肺活开胸肺活检45下呼吸道下呼吸道标本的采集本的采集l注意事注意事项尽快（尽快（2h）送至）送至实验室。室。如不能及如不能及时送达，送达，应将将标本本暂存于存于4，但放，但放置置时间不可超不可超过24h。由于上呼吸道定植菌的干由于上呼吸道定植菌的干扰，在，在选择痰培养痰培养检查时应该同同时痰涂片痰涂片检查，每低倍，每低倍视野下白野下白细胞胞10个且上皮个且上皮细胞胞25个，个，应重留重留标本。本。对于普通于普通细菌性肺炎，菌性肺炎，痰痰标本送本送检每天每天1次，次，连续23天。天。不建不建议24h内多次采集，除非痰内多次采集，除非痰液外液外观性状出性状出现改改变。46大便大便标本的采集本的采集l自然排便：成型自然排便：成型粪便需要豌豆大小，液体便需要豌豆大小，液体粪便便的量至少的量至少约5ML，取，取粪便中含便中含脓血或粘液的部血或粘液的部分置清分置清洁容器中送容器中送检。容器要。容器要带密封盖。密封盖。l直直肠拭子：无菌拭子插入肛拭子：无菌拭子插入肛门24cm，在肛，在肛门括括约肌肌处柔和柔和转动拭子，可拭子，可见拭子上有明拭子上有明显的的粪便便标本，置运送培养基中送本，置运送培养基中送检。(不太适不太适合成人，不适于合成人，不适于检查寄生虫、毒素和病毒抗原寄生虫、毒素和病毒抗原)47尿液尿液标本的采集本的采集l症状明症状明显的病人（如尿急、尿的病人（如尿急、尿频、尿痛），一、尿痛），一份份标本就已足本就已足够，治，治疗48-72小小时后再采集第二后再采集第二份份标本。本。对于症状不明于症状不明显的病人，需采集的病人，需采集2-3份份标本。本。怀疑疑肾结核核时，应连续3天采集晨尿。天采集晨尿。l普通培养普通培养1020ml，找抗酸杆菌需，找抗酸杆菌需3050ml。l多次收集或多次收集或24小小时尿不能用作培养。尿不能用作培养。l申申请单上必上必须注明病人症状是否明注明病人症状是否明显，这对于于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。本。l室温保存室温保存时间不超不超过2h，4冷藏不得超冷藏不得超过8h。48尿液尿液标本的采集本的采集l清清洁中段尿中段尿尽量取早晨第一次尿液，置无菌容器加盖送尽量取早晨第一次尿液，置无菌容器加盖送检弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿能代表膀胱部位病原菌的中段尿女性病人：收集女性病人：收集标本前用清洗液冲洗干本前用清洗液冲洗干净，从前，从前向后仔向后仔细擦洗擦洗尿道区域尿道区域男性病人：翻开包皮并清洗尿道口男性病人：翻开包皮并清洗尿道口49尿液尿液标本的采集本的采集l耻骨上膀胱穿刺尿耻骨上膀胱穿刺尿l一次性一次性导尿尿液尿尿液l留置留置导尿管尿液尿管尿液用用75%酒精消毒酒精消毒导尿管外部尿管外部，无菌注射器插入无菌注射器插入导尿管吸取尿液送尿管吸取尿液送检。不要从尿袋中采集尿液，也。不要从尿袋中采集尿液，也不要把不要把导尿管与尿袋拔开后收集尿液尿管与尿袋拔开后收集尿液进行培养行培养50伤口分泌物的采集口分泌物的采集l开放性感染和已破开放性感染和已破溃的化的化脓灶灶采集前先用无菌生理采集前先用无菌生理盐水冲洗表面水冲洗表面污染菌，用染菌，用灭菌拭子采菌拭子采脓液及病灶深部分泌物；如液及病灶深部分泌物；如污染染严重，重，可取感染部位下的可取感染部位下的组织送送检切口：取分泌物，有切口：取分泌物，有时可取沾有分泌物的最内可取沾有分泌物的最内层敷料置敷料置灭菌容器内送菌容器内送检。瘘管：瘘管：灭菌棉拭子菌棉拭子挤压瘘管，弃去前端瘘管，弃去前端脓液后用液后用灭菌容器菌容器收集收集脓液。液。烧伤：清：清创，以无菌棉拭子直接采取多部位，以无菌棉拭子直接采取多部位创面面脓性分泌性分泌物置无菌物置无菌试管中送管中送检。51伤口分泌物的采集口分泌物的采集l闭合性合性脓肿皮肤消毒后，用无菌注射穿刺抽取皮肤消毒后，用无菌注射穿刺抽取脓液或分泌物液或分泌物送送检，有，有时也可将沾有也可将沾有脓液的最内液的最内层敷料放入无敷料放入无菌平皿内送菌平皿内送检。疑疑为厌氧菌感染氧菌感染时，取材后立即将注射器内空气，取材后立即将注射器内空气排空，将排空，将针头插入橡皮塞内，及插入橡皮塞内，及时送送检。52伤口分泌物的采集口分泌物的采集l敷用敷用药物物2h内和内和烧伤12h内不内不应采集采集标本本l皮肤消毒皮肤消毒对培养培养结果至关重要，采集果至关重要，采集标本本时应注注意分泌物的性状、色意分泌物的性状、色泽和气味和气味l深部或粘膜附近的感染深部或粘膜附近的感染应同同时做需氧和做需氧和厌氧培养氧培养l采集采集标本后及本后及时送送检，如，如1h内不能送内不能送检应冷藏冷藏l厌氧培养要注意：避免正常菌群氧培养要注意：避免正常菌群污染；由采集至染；由采集至接种尽量避免接触空气，最好以接种尽量避免接触空气，最好以针筒直接由病灶筒直接由病灶处抽取抽取标本，采取完本，采取完毕立即送立即送检53脑脊液的采集脊液的采集l腰椎穿刺后，采集腰椎穿刺后，采集脑脊液脊液35ml于于3个无菌小瓶或个无菌小瓶或试管中，每管管中，每管12ml，分，分别进行微生物学、生化行微生物学、生化及及细胞学胞学检测。l及及时送送检，室温保存，病毒，室温保存，病毒检测标本可冷藏本可冷藏54其他与感染相关的其他与感染相关的检测项目目l常常规检测：血、尿、大便常：血、尿、大便常规lCRPlPCTlESRlX-线检查