1、,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,致病菌基础知识培训,内容索引,金黄色葡萄球菌的生物学特性,金黄色葡萄球菌的培养特性及生长,金黄色葡萄球菌的检测 与鉴定,金黄色葡萄球菌的计数,金黄色葡萄球菌的概述,按葡萄球菌的生理化学组成,将葡萄球菌分为金黄色,(Staphylococcus aureus),、表皮葡萄球菌,(S.epidermidis),和腐,(S.saprophyticus),,其中金葡多为致病性菌,表葡偶尔致病。,金黄色葡萄球菌是人类化脓性感染中最常见的病原菌。可引起局部化脓性感染,外科切口及烧伤创面的感染;也可引起肺炎、伪膜性肠炎
2、、肾盂肾炎、心包炎等多系统的化脓性感染;还可引起败血症、脓毒血症等全身性感染。葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。,金黄色葡萄球菌,生物学特性,金黄色葡萄球菌呈球形,直径,0.8m,左右,排列成葡萄串状,无芽孢,无荚膜。,革兰氏染色阳性,但衰老、死亡或被白细胞吞噬的菌体,常呈革兰氏阴性。,金黄色葡萄球菌,生长特性,金黄色葡萄球菌在肉汤中呈浑浊生长,在胰酪胨大豆肉汤内有时液体澄清,菌量多时呈浑浊生长。,血平板上金黄色葡萄球菌呈金黄色,有时也为白色,大而突起、圆形、不透明、表面光滑湿润,周围有透明溶血圈。,Baird-Parker,平板上金黄色葡萄球菌圆形突起、直径为,2mm-3
3、mm,、光滑、湿润,颜色呈灰色到黑色,边缘淡色,周围为一浑浊带,在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。,金黄色葡萄球菌检验,方法适用性,增菌培养法:适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。,直接平板计数法:适用于金黄色葡萄球菌含量较高(不小于,10/g,(,ml,),的食品。,MPN,法:适用于金黄色葡萄球菌含量较低杂菌含量较高的食品及其原料和,未经处理的含少量金黄色葡萄球菌的食品。,金黄色葡萄球菌,PetrifilmTM,纸片测试法:适用于肉及其制品、奶制品,定量方法,定性,检样(,25g,或,25ml+225mL7.5%,氯化钠肉汤或,10%,氯化钠胰酪胨大豆肉汤
4、,均质,36,1 18h-24h(45h-48h)Baird-Parker,平板 血平板,金黄色葡萄球菌定性检验,涂片染色,36,1 18h-24h(45h-48h),观察溶血,BHI,肉汤和营养琼脂斜面,血浆凝固酶试验,报告,报告,36,1 18h-24h,金黄色葡萄球菌生化试验,1.,革兰氏染色,对所有的可疑培养物都要进行革兰氏染色。,2.,凝固酶试验,方法:从平板上至少挑取,1,个可疑金黄色葡萄球菌菌落,移种到,TSB/BHI,肉汤中,置,35,培养,18-24h,。取肉汤培养物,0.3mL,同,0.5mL,凝固酶试验兔血浆充分混合,置,35,培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察,6h
5、,。,试验中需同时做已知阳性和阴性对照。,结果判定:以内容物完全凝固,使试管倒置或倾斜时不流动为阳性。部分凝固的必须进行生化鉴定加以证实。凝固酶试验,凝固酶试验结果判定,金黄色葡萄球菌生化试验,3.,生化鉴定,过氧化氢酶试验,葡萄糖厌氧利用试验,甘露醇厌氧利用试验,耐热核酸酶试验(辅助,特性,S.aureus,S.epidermidis,Micrococci,过氧化氢酶,+,+,+,凝固酶,+,-,-,耐热核酸酶,+,-,-,厌氧利用,葡萄糖,+,+,-,甘露醇,+,-,-,金黄色葡萄球菌,Baird-Parker,平板法,25g,或,25ml,样品,+225mL,稀释液 均质,十倍系列稀释,
6、选择,3,个适宜的连续稀释度的样品均液,接种,Baird-Parker,平板,36,1 45h-48h,计数及血浆凝固酶试验,42.5 24,2h,报告,25g,或,25ml,样品,+225mL,稀释液 均质,十倍系列稀释,选择,3,个适宜的连续稀释度的样品均液,各吸取,1ml,分别接种于,3,管胰酪胨大豆肉汤,36,1 45h-48h,Baird-Parker,平板,36,1 45h-48h,血浆凝固酶试验,查,MPN,表,报告结果,金黄色葡萄球菌,MPN,法,金黄色葡萄球菌,PetrifilmTM,纸片测试法,25g,或,25ml,样品,+225mL,稀释液 均质,十倍系列稀释,选择,2-
7、3,个连续适宜稀释度的样品均液,各取,1ml,分别加入,PetrifilmTM,纸片,判读,在测试片上置入确认反应片,无菌落生长,仅有典型紫红色菌落,粉红色晕圈菌落计数为金黄色葡萄球菌,报告,除典型紫红色菌落外其他颜色的菌落,紫红色菌落计数为金黄色葡萄球菌,36,1 1h-3h,谢谢大家!,后面内容直接删除就行,资料可以编辑修改使用,资料可以编辑修改使用,主要经营:网络软件设计、图文设计制作、发布广告等,公司秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意!,致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、,PPT,设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,