北虫草的栽培技术.doc

北虫草大棚的栽培技术
[内部资料] --中科院2009科研
北虫草，又称北冬虫夏草。在分类学上属子囊菌亚门、核菌纲、麦角菌目、虫草属。是昆虫的蛹感染虫草菌后形成的虫与菌的复合体。北虫草主要分布在我国东北三省部分地区的沃土中。其营养与天然野生冬虫夏草有相似的医疗和保健功效，是一味名贵的药用真菌。
      研究所科技人员经过多年的艰辛努力，他们根据野生虫草生长基本条件原理，坚持实践，反复试验，引进北虫草菌种进行组织分离，驯化、筛选，复壮，运用高科技液体育种技术，采用蚕蛹粉、马令薯浸出液、葡萄糖、蛋白胨、米饭，小麦，高粱等培养基配方，进行母种培养基；液体原种培养基；栽培种培养基等制作；并进行严格消毒灭菌，冷却，无杂菌接种，一系列精细管理流程技术措施后，一年内基地种植了一百多万瓶北虫草，长势良好，预计产干品可达3000余公斤。产品已送往省医学科学院质量检测，各种药物营养成份含量指数达到野生虫草基本相同。其中虫草多糖、虫草酸、虫草素的含量高于野生虫草50-100%。
      北虫草的生长基本条件主要是营养、空气、温度、水份、湿度、光线、PH值等七大因素。①营养：就选用碳源、氮源材料，还需矿物质元素适量配制。②空气：在营养生长阶段适当控制，但在生殖生长阶段需要通风量必须加大。③温度：属中低温恒温型品种，菌丝生长阶段，15-28℃之间，最适宜栽培温度16-20℃。高于35℃死亡，低于8℃停止生长。子实体生长阶段8-25℃，最适宜18-22℃。④水份：培养基含水量掌握在1：1.7之间，是产量和各种物质含量的最佳比例。⑤湿度：发菌阶段，室内控制在65%左右。子实体阶段，室内控制在85-92%之间。⑥光线：发菌阶段，无光线发菌快，子实体萌发生长阶段，要有散光照射每天补光16h，无光线或太暗光线，是只长气生菌丝、不长子实体，或长出小量子实体无力及畸形。⑦PH值：培养基呈偏酸较适宜，一般的PH值选配为6.5较好。
      北虫草的栽培技术工艺流程操作：
      一、精选原材料
      1、母种培养基选料：琼脂要无杂质，银白色干燥的。马令薯无霉烂变质，去皮和挖去芽眼。葡萄糖是选用普通的；还要少量的蛋白胨；磷酸二氢钾，硫酸镁等。
      2、原种培养基选料：蛋白胨、葡萄糖、磷酸二氢钾，VB，硫酸镁只是普通的，蚕蛹粉不要霉变受潮的，要干燥新鲜的。
      3、栽培原料：小麦，大米、蚕蛹粉要新鲜，干燥，无霉变，葡萄糖是普通的等。
      二、工具器材
种植北虫草需要超净工作台，玻璃试管、棉花、塑料筐、杀菌锅、摄子、天平、菌种瓶、接种室，紫外线灯，接种针、酒精棉花、消毒剂、工作服（帽子口罩套袖鞋套），培养室架、控温设备等。
      三、北虫草母种制法及培养
      （一）一级母种培养基配制方法
洗净玻璃试管，称好各种原材料，先把马令薯洗净削皮去芽眼，然后切片，放在铝锅烧煮。按水的比例加20%切片后的马令薯，煮开后保温20分钟，再用6层纱布过滤，捏紧渣汁，去渣，再补足水份原等量。再把按各2%剪碎的琼脂，葡萄糖，蛋白胨，磷酸二氢钾、硫酸镁等微量元素按比例原料倒入锅内，文火溶解后再过滤。此时就可分装玻璃试管。每支试管装量1/5。擦净管口，塞好棉塞，再放在灭菌锅消毒。
      当消毒锅固紧盖后立即加热升温至0.5公斤/公分2后。即放净冷气降压至0后，重新升温至1.2公斤/公分2，文火保温40分钟，然后开盖冷却至常温，乘热进行三分之二斜面面积。隔2天后，观察玻璃管的冷凝水回落在底面，观察平面仍很平坦和无杂菌丛生就可等待接种。
      （二）一级母种的接种方法
如果确定母种转管后接种的母种。先消毒接种室，再消毒母种试管和其它器具。其方法是将所用的母种试管、接种工具全部放在超净工作台上，关好门窗，再将消毒气化剂点燃汽化，迅速关好门窗，同时把紫外线灯打开，待气化40min就可准备接种。
      接种的方法是先把母种外表、器皿具在点燃的酒精灯上消毒8-10秒钟时间，再把母种试管口对准酒精灯火焰，并把棉塞轻轻拉出。再用接种铲把菌种划成数段，然后用接种刀按数段的接种段片再划成米粒大少的菌种移植在新的试管斜面中间培养基上。最后把原来的棉塞在酒精灯上消毒3秒钟后迅速塞回试管口，这样就完成一支母种试管接种的工作任务，以后就按此方法顺序类推接种。
      （三）北虫草母种发菌管理方法
当北虫草母种移植在PDA培养基上后，立即将接好的菌移送在23℃左右的温室里恒温培养。经过5-7天的适宜温度发菌，所接入的菌种开始萌发菌丝。并向斜面周边延伸生长。此时就检查所接入的菌种周围有否杂菌生长？一旦发现杂菌立即拣出去掉。到了12-15天后，虫草母种的菌丝在适宜的温度已经长到斜面试管2/3面积时，这时候室温降至22℃左右，目的是使菌丝缓慢生长，起到复壮的作用。到了20天以后，整个菌丝布满斜面，等3-5天后就可接北虫草原种了。
      四、北虫草原种培养技术方法
      当北虫草母种培养成功后就可以培养北虫草原种，具体培养方法是：
      （一）培养基配方：
      ①玉米粉1%；②葡萄糖2%；③蛋白胨1%；④酵母粉0.5%；⑤磷酸二氢钾0.1%，水95.35%；⑥硫酸镁0.5%；⑦PH值调至6.5左右。
      （二）培养方法
      ①制作原种培养基：将这些原料溶于水后装在500毫升玻璃瓶中，每个玻璃瓶装量150毫升，然后用8层纱布做成盖盖住瓶口扎紧，立即放在高压灭菌锅内进行消毒，待压力表上升至0.5公斤/公分2压力时，即放净冷气的指针降至0后，再关掉放气阀门，待温度表指针逐渐上升至1.2公斤/公分2后就开始保温45分钟后，慢慢下降指针至0，然后开盖冷却至常温，再移入接种箱等待接种。
      ②原种接种方法：先把已消毒好的北虫草液体原种培养基移放在超净工作台上。并把北虫草母种和接种勾，酒精灯，消毒棉等接种物也放在超净工作台上，工作服一起消毒。此时就开始在接种室开气化消毒剂，立即关闭所有门、窗、密闭消毒同时打开紫外线灯。待40min后，将烟雾放净，关闭紫外线灯，接种人员就可进行接种。接种的方法是，穿好工作服，打开超净工作台风机，点燃酒精灯，左手拿着母种试管对准火焰口，右手拿着铁勾在酒精灯火焰消毒3-5秒种后立即伸进母种试管内把菌种分成5-7段，再用左手迅速将纱布瓶盖打开，右手即把一段菌块勾入瓶内速将瓶盖按原样盖紧。第二瓶接种的方法随第一瓶一样同。
      当北虫草原种接好后，就迅速移入24-26℃恒温培养室里发菌培养。经过适宜的温度5-6天的发菌培养，栽培者要检查北虫草菌液的颜色为深棕色，瓶口闻有很浓的北虫草气味，就能辨别出菌种的优劣质量。如有发菌瓶内浓度低、气味臭，并有五颜六色的菌液，就是有杂菌污染的菌液，坚决不能用。如果用上去，待长出的不是北虫草，而是杂菌。培养可分，震荡培养，通氧培养。
      五、北虫草栽培方法
      （一）北虫草栽培模式
      北虫草的栽培技术关键是控温、控湿调节、消毒杀菌、精细管理等措施。根据北虫草的生物学特性，运用先进的设备，自动调控温、湿、光、气等各种生活条件。使至适应北虫草生长需要，不间断分批投料、发菌、出草、循环往复，一年四季不受气候影响都可栽培，只采头批草，栽培周期短，效率高，产量也很高，是工厂化生产模式，但投资成本大。
      （二）北虫草栽培设施
北虫草栽培室内，大棚都可以栽培，要搭架子，散射光线很需要，床架要牢固，通风条件要好，有水电方便使用喷水加湿，调节光线，操作灵活，水泥地、沙地都可，门窗要大一点，并装有防蝇纱窗等设施。
      （三）北虫草栽培具体技术
      1、北虫草栽培容器是广口罐头瓶或专用器皿，封盖可用封口膜，用皮套套紧。
      2、栽培种植北虫草培养基配方和消毒。①大米或小麦30克，选择无霉变高质量的，水量1:1.7～1.8比量。也可在水中加些营养液。封口膜封平，立即移放在高压杀菌锅内消毒。灭菌也可以用常压灭菌锅。
       3、当消毒培养基移放进高压灭菌锅内消毒时，压力表指针上升到0.5公斤/公分2时，立即打开放气阀，让压力表指针慢慢降至0时，说明放净冷气，然后关闭阀门，待锅内温度升至1.2公斤/公分2后，恒定保温1小时，再慢慢退温至0指针，（节省时间也可慢慢打开放气阀放气降压）并开盖冷却至常温等待接种。
      （四）接种
      待温度降至30℃以下就可接种。其方法是将接种枪等器具，菌种，灭过菌的培养基放入接种室内，用以上的方法进行气化消毒，按无杂菌要求进行接种。稀释后的菌种每瓶500ml可接种200瓶，移入培养室发菌培养。
      （五）培养菌丝
菌瓶未搬进以前，先用杀菌剂将培养室彻底消毒，然后把已接好菌种的北虫草排放在牢固的架子上。在发菌阶段的前4-5天室温度控制在16-20℃之间，以后调整至18-22℃之间，湿度控制在65-70%之间。每天进行对流通气50-80min，可根据培养室内的实际情况调整。经过7-15天的培养，北虫草菌丝长满全瓶。再经过4-5天散射光的培养，使菌丝营养生长成熟，，同时挑净杂菌，继续做好清洁卫生防蝇工作。
      （六）催蕾出子实体管理
      在催蕾出子座过程中主要做好四方面工作。①每天散射光照不少于8小时，晚上还用日光照照射16小时；②室内温度20-22℃，夜里适当降低3-5℃。③室内空气湿度控制在70%左右。④每天通气2-3次，每次通气20-40分钟，待菌丝由白色转为桔黄色后并陆续纽结成园丘状隆起原基，分秘黄色水珠，就进行做好长北虫草子座准备工作。
      ①出子座管理的温度，出子座前6-7天，室温控制在18-20℃，以后室温适当提高2℃，但不能超过25℃。②光线散射光要充足，但不能直射光照。③湿度提到85%。待北虫草平面突起形成小米粒原基时，要适当通气补充新鲜空气，但不揭瓶盖，可在瓶盖上刺孔5-8个（20号的针头），以利瓶内气体交换。待子座长出1公分长后。将室内湿度提高到90%左右。空间墙壁喷水以提高湿度。当北虫草子座长至1-2cm时，可补一次营养液，按照通风换气相结合的办法进行管理15-20天后即可采收。
      六、北虫草采收、加工、储藏
      北虫草子座生长顶端出现圆头，或有许多小刺后，手触不光滑，头部出现龟裂状花纹，表面出现黄色粉末状物就可及时采收（大约长至6-10公分）。采收的方法是用摄子挟住子座根部一起拉出，剪根摘下。然后及时放在45-60℃烘干或摊晒，风干至含水份10%以后。再把北虫草整理平直装入聚乙稀食品袋中密封，置于低温，干燥，通风，暗光处贮藏。
      七、北虫草栽培技术注意几个问题
      （一）选用抗逆性强，适应性广的高质量品种。
      （二）栽培室要远离污染区域或畜禽场所。
      （三）各道工序要彻底消毒，严格无杂菌操作，各种杂菌要去掉。
      （四）发菌阶段要暗光或无光线发菌效果最好。
      （五）栽培北虫草是高科技产品，技术含量高，各种设备要齐全，尤其是控温器材要配备齐全，工艺操作要特别细心，认真。
      （六）搞好环境卫生，保持栽培清洁场所，做好防蝇技术措施，防止病虫害发生。
      八、基本综述
      1、野生冬虫夏草生长简介
      虫草原产于海拔3500米-4200米之间我国西北青海和西藏、新疆之间地带，还有云、贵、甘、川小部分地区20公分深的沃土中。即这种土有一种菌寄生在鳞翅类昆虫的幼虫体内，所以称之虫菌复合体。其实在秋季后，这种菌感染了幼虫后，这种幼虫不食也不死。到了初冬时，这种幼虫全身都得到菌丝体的生长后，虫体虽死但受菌体吸收营养后，菌丝生长特别旺盛，时值冬眠期，大量的菌丝营养聚集在虫咀口上。此时又到了三、四月期间，气温回升到15℃左右时，虫体上的菌丝体开始复苏达到营养生长高峰期，由虫口形成原基。由于气温不断升高，到五、六月期间，高原上的气温普遍达到20℃左右。这时候的虫体虫咀的顶端虫草原基在适宜的温湿度情况下，虫咀上的子座很快长大。到六月中旬后至七、八月间，成群结队的山民都上虫草产地挖掘。致使挖掘了虫草的土地大量的原有菌丝体和幼虫卵都遭受到腐烂或干燥，不再萌发生长繁殖。所以说，挖虫草很多，资源破坏越严重。致于冬虫夏草的虫营养好，还是草营养好。根据冬虫夏草的生长原理结合营养检验出数据结果，虫体营养差，草体营养高于虫体营养3-5倍，因为虫体营养通过大量菌丝吸收转化到虫咀后，长成草体（子座）后，那么虫已经成了躯壳，好象种了蘑菇一样的培养基已成为废料。所以冬虫夏草的虫体营养最少，草体（子座）营养最好。买虫草，没有虫更好，但没有草是不好的。
      2、问题的讨论
      北虫草的栽培技术经过十年来的反复研究实践已取得掌握了它的生长基本规律，多次获得了满意的产量，产品质量经省医科院质检所多次检验，各种药物营养成份接近和高于野生冬虫夏草含量指数。北虫草鲜草风味鲜嫩可口，营养丰富，可烹调成十多种美味佳肴的菜。经临床应用验证和中草药大辞典载述，北虫草可食药保健与冬虫夏草功效相同。我公司已开发成虫草口服液，虫草胶囊、虫草饮料、虫草糖浆等深加工营养保健食品。当今冬虫夏草由于我国大西北地区滥挖造成有限的资源遭到严重破坏，国内外对冬虫夏草食药应用越来越广泛，货源供不应求，价格非常昂贵，现在的冬虫夏草价格比上世纪七十年代高于1200倍以上。将来很有可能还要继续会无止境的涨价，如果再不采取行之有效措施继续滥挖，破坏冬虫夏草生长环境资源可能会遭到绝灭。所以说，研究开发人工栽培北虫草获得成功，并投入大规模工厂化生产栽培，其营养药物成份已达到和超过野生冬虫夏草含量水平，可为广大人民群众代替非常昂贵价格的野生冬虫夏草保健补品，为开辟农村多种大农业新兴产业，为农业增效和农民增收，提高营养健康水平具有重要意义。但问题是北虫草食药用刚刚开始，传统历史都认为什么东西都是野生的好，陈旧的观念尚未打破，尽管北虫草药物和营养价值很高，权威检验测试机构检验出数据高于野生冬虫夏草营养含量的认定，但北虫草的认识还很幼稚，所以北虫草的应用科学知识推广普及有难度，栽培北虫草虽然技术比较稳定成熟，产品已局部上市，可是深加工刚刚开发，所以各界有识人士共同关注研究、推广、深加工、销售北虫草综合配套系列化生产模式必须建立起来。产、学研共同联合起来，无污染高营养的北虫草的特色产业发展前景是非常美好的，巨大的经济效益和社会效益。

虫草子实体胶囊
  上等虫草子实体，富含多肽有机锗，甘露醇、虫草素、虫草酸、粗蛋白、18种氨基酸、虫草多糖等。其主要营养成分有：
[虫草多糖] 为免疾调节剂。
[虫 草 酸] 软化血管，改善微循环，具有降血脂、镇咳、祛痰、平喘的作用。
[虫 草 素] 具有调节内分泌和神经系统的作用，是一种抗癌的活性物质。
[四种有机酸] 软脂酸、硬脂酸、油酸和亚油酸，具有调节血压的功能。
[五种维生素] B1、B2、B12、E和K。
[六个肽类化合物] 其中L-甘-L