低密度脂蛋白相关受体蛋白6基因多态性与非酒精性脂肪性肝病发病关系研究.pdf

2 0 2 3年9月第5 2卷第9期S e p.2 0 2 3V o l.5 2N o.9陕 西 医 学 杂 志S h a a n x iM e d i c a l J o u r n a l基金项目:河北省医学科学研究课题(2 0 2 1 0 3 8 5)通讯作者:李 多,E-m a i l:1 2 8 6 7 4 7 1 7 1q q.c o m低密度脂蛋白相关受体蛋白6基因多态性与非酒精性脂肪性肝病发病关系研究梁 娜,张泽天,孙晓冉,李 多(河北北方学院附属第一医院消化内科,河北 张家口0 7 5 0 0 0)摘 要 目的:探究低密度脂蛋白相关受体蛋白6(L R P 6)基因多态性与非酒精性脂肪性肝病(NA F L D)发病的关系。方法:选取NA F L D患者(NA F L D组)1 4 4例和体检健康者(对照组)1 3 5例为研究对象。检测两组血清丙氨酸转氨酶(A L T)、天冬氨酸转氨酶(A S T)、三酰甘油(T G)、总胆固醇(T C)、低密度脂蛋白胆固醇(L D L-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HD L-C)、载脂蛋白B(A p o B)以及A p o A 1水平;提取两组血清中基因组D NA,采用P C R法扩增L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5片段并测序;比较两组一般资料和生化指标;观察两组L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点基因型分布并进行H a r d y-W e i n b e r g(H-W)遗传平衡检验;比较不同L R P 6基因型NA F L D患者生化指标;采用L o g i s t i c回归分析L R P 6基因型对NA F L D发生的影响。结果:与对照组比较,NA F L D组体重指数(BM I)及A L T、T G、L D L-C、A p o B水平升高(均P0.0 5)。对照组和NA F L D组L R P 6基因在r s 2 3 0 2 6 8 5位点上均检出T T型、T C型、C C型3种基因型,其中对照组T T基因型最多(5 7.7 8%),NA F L D组C C基因型最多(5 6.9 4%),对照组与NA F L D组基因型比较差异有统计学意义(P0.0 5)。T T型、T C型、C C型NA F L D患者BM I、A L T、T G、L D L-C、A p o B水平依次升高(均P0.0 5)。C C基因型是影响NA F L D发生的独立危险因素(P0.0 5)。结论:L R P 6基因多态性与NA F L D有关,其中C C基因型是影响NA F L D发生的独立危险因素。关键词 非酒精性脂肪性肝病;低密度脂蛋白相关受体蛋白6;基因多态性;r s 2 3 0 2 6 8 5位点;基因型分布中图分类号:R5 7 5.5 文献标志码:A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 0-7 3 7 7.2 0 2 3.0 9.0 3 0R e l a t i o n s h i pb e t w e e n l o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i nr e c e p t o r-r e l a t e dp r o t e i n6g e n ep o l y m o r p h i s ma n do c c u r r e n c eo fn o n a l c o h o l i c f a t t y l i v e rd i s e a s eL I ANGN a,Z HANGZ e t i a n,S UNX i a o r a n,L ID u o(D e p a r t m e n to fG a s t r o e n t e r o l o g y,t h eF i r s tA f f i l i a t e dH o s p i t a l o fH e b e iN o r t hU n i v e r s i t y,Z h a n g j i a k o u0 7 5 0 0 0,C h i n a)A B S T R A C T O b j e c t i v e:T oe x p l o r et h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nl o w-d e n s i t yl i p o p r o t e i nr e c e p t o r-r e l a t e dp r o t e i n6(L R P 6)g e n ep o l y m o r p h i s ma n do c c u r r e n c eo fn o n a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s e a s e(N A F L D).M e t h o d s:At o t a lo f1 4 4p a t i e n t sw i t hN A F L D(N A F L Dg r o u p)a n d1 3 5h e a l t h y s u b j e c t s(c o n t r o l g r o u p)w e r e s e l e c t e d.A u t o m a t i cb i o c h e m i c a l a n a l y z e rw a su s e dt od e t e c t t h e l e v e l so fA L T,A S T,T G,T C,L D L-C,H D L-C,a p o l i p o p r o t e i nB(A p o B)a n dA p o A 1.G e n o m i cD N Aw a se x-t r a c t e d f r o ms e r u m,t h e r s 2 3 0 2 6 8 5f r a g m e n t o fL R P 6g e n ew a sa m p l i f i e db yP C Ra n ds e q u e n c e d.G e n e r a l d a t a,b i o c h e m i c a li n d e x e s,g e n o t y p ed i s t r i b u t i o no f r s 2 3 0 2 6 8 5p o l y m o r p h i s mo fL R P 6g e n ea n dH a r d y-W e i n b e r g(H-W)g e n e t i cb a l a n c e t e s tw e r ep e r f o r m e d.B i o c h e m i c a l i n d e x e so fN A F L Dp a t i e n t sw i t hd i f f e r e n tL R P 6g e n o t y p e sw e r e c o m p a r e d.L o g i s t i c r e g r e s s i o nw a su s e dt oa n a l y z e t h e i n f l u e n c eo fL R P 6g e n o t y p eo nt h eo c c u r r e n c eo fN A F L D.R e s u l t s:C o m p a r e dw i t hc o n t r o lg r o u p,B M I,A L T,T G,L D L-Ca n dA p o Bl e v e l sw e r e i n c r e a s e d i nt h eN A F L Dg r o u p(a l lP0.0 5).T h r e eg e n o t y p e so fT Tt y p e,T Ct y p e a n dC Ct y p e o f t h eL R P 6g e n ew e r e d e t e c t e d a t t h e r s 2 3 0 2 6 8 5 l o c u s o f t h e t w og r o u p s,a n d a m o n g t h e m,t h e c o n t r o lg r o u ph a d t h em o s tT Tg e n o t y p e(5 7.7 8%),a n d t h eN A F L Dg r o u ph a d t h em o s tC Cg e n o t y p e(5 6.9 4%),t h e r ew a s s t a-t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e i ng e n o t y p eb e t w e e n t h e c o n t r o l g r o u pa n d t h eN A F L Dg r o u p(P 0.0 5).T h e l e v e l so fB M I,A L T,T G,L D L-Ca n dA p o B i np a t i e n t sw i t hT Tt y p e,T Ct y p e a n dC Ct y p eN A F L Dw e r e i n c r e a s e ds u c c e s s i v e l y(a l lP0.0 5).C Cg e n o t y p ew a s a n i n d e p e n d e n t r i s kf a c t o ra f f e c t i n gt h eo c c u r r e n c eo fN A F L D(P0.0 5).C o n c l u s i o n:L R P 6g e n ep o l y m o r p h i s mi sr e l a t e dt oN A F L D,a n dC Cg e n o t y p e i sa ni n d e p e n d e n tr i s kf a c t o r a f f e c t i n go c c u r r e n c eo fN A F L D.K E Y WO R D S N o n a l c o h o l i c f a t t y l i v e rd i s e a s e;L o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i nr e c e p t o r-r e l a t e dp r o t e i n6;G e n ep o l y m o r-p h i s m;r s 2 3 0 2 6 8 5l o c u s;G e n o t y p ed i s t r i b u t i o n1421陕 西 医 学 杂 志S h a a n x iM e d i c a l J o u r n a l2 0 2 3年9月第5 2卷第9期S e p.2 0 2 3V o l.5 2N o.9 非酒精性脂肪性肝病(N o n a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s e a s e,NA F L D)是与胰岛素抵抗及遗传易感性有密切联系的肝脏代谢综合征。NA F L D也与脂肪代谢密切相关,其临床表现与酒精性肝病相近,但患者通常无过量饮酒史1-2。目前,NA F L D发病率增长迅速,且呈低龄化发展,严重威胁人类生命健康3-4。低密度脂蛋白相关受体蛋白6(L o w-d e n s i t yl i p o p r o t e i nr e c e p-t o r-r e l a t e dp r o t e i n6,L R P 6)是L R P家族成员,在脂质转运方面发挥重要作用5。王秀梅等6研究显示,微小R NA-2 1可通过L R P 6等靶标参与NA F L D及其相关并 发 症 的 发 生 和 发 展。目 前,关 于NA F L D与L R P 6基因相关性的 报道较少。因 此,本 研 究 选 取L R P 6基因作为候选基因,以NA F L D患者为研究对象,探讨L R P 6基 因在r s 2 3 0 2 6 8 5位点的 多 态 性 与NA F L D发病的关系,为进一步阐明NA F L D的发病机制提供参考。1 资料与方法1.1 一般资料 选取2 0 2 1年5月至2 0 2 2年1 2月于河北北方学院附属第一医院就诊的NA F L D患者1 4 4例为NA F L D组,其中男性8 2例,女性6 2例;年龄2 95 7岁,平均(4 3.0 41 0.3 2)岁;体重指数(BM I)2 0.3 52 8.1 3k g/m2,平均(2 4.3 62.2 3)k g/m2。病例纳入标准:符合NA F L D诊断标准7;未伴有药物性脂肪肝、慢性病毒性肝病以及自身免疫性肝病者;临床资料保存完整;汉族人群。排除标准:伴有恶性肿瘤及心、肺、肾等脏器病变者;有酒精滥用史者;伴有内分泌疾病及其他遗传性疾病者。选取同期体检健康者1 3 5例为对照组,其中男性8 0例,女性5 5例;年龄3 05 5岁,平均(4 2.9 69.8 7)岁;B M I1 9.7 02 5.9 1k g/m2,平均(2 2.9 42.3 8)k g/m2。本研究经医院伦理委员会批准,受试者均签署知情同意书。1.2 主要试剂与仪器 基因组D NA提取试剂盒(批号:BM 1 5 8 3 0,厦 门 万 泰 沧 海 生 物 科 技 公 司);T a qD NA聚合酶(批号:R E 0 1 1 0-0.5 k U,北京金克隆生物技 术 有 限 公 司);d NT P溶 液(批 号:B T N 5 1 2 0 8 C-WD L,泉州睿信生物科技有限公司)。紫外分光光度计(型 号:N a n oD r o p O n e,美 国T h e r m oF i s h e r公司);全自动生化分析仪(型号:UR I T-8 0 2 0 A,福州飞净生物科技有限公司);凝胶成像仪(型号:D 5 6-2 6 M,美国B i o-R a d公司)。1.3 研究方法1.3.1 样品采集和保存:抽取受试者清晨空腹静脉血8m l,以7 7 0 0r/m i n离心1 5m i n,收集上层血清,迅速置于-7 0环境中保存。1.3.2 生化指标检测:取部分血清样本,采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(A L T)、天冬氨酸转氨酶(A S T)、三酰甘油(T G)、总胆固醇(T C)、低密度脂 蛋 白 胆 固 醇(L D L-C)、高 密 度 脂 蛋 白 胆 固 醇(HD L-C)、载脂蛋白B(A p o B)以及A p o A 1。1.3.3 L R P 6基因型检测:取血清样本,采用D NA提取试剂盒提取基因组D NA,紫外分光光度计测定纯度及浓度。P C R反应体系:氯化镁(M g C l2)1.5l,P C R缓冲液2.5l,d NT P2.0l,上下游引物各0.5l,D NA模板2.0l,T a qD NA聚合酶0.2l,d d H2O1 5.8l。P C R反应条件:9 6 4 m i n;9 3 1 9s,5 92 1s,共4 3个循环;7 6 6m i n。r s 2 3 0 2 6 8 5正向引物序列为5-AT AAGA C C G T T G C T G C C T GAT-3,反向引物序列为5-T AT G T T AAT AAT C C T T G-G T G C-3。取1 0l产物电泳后,凝胶成像仪观察结果并拍照。任取多个含3种基因型的单一、明亮特异性条带P C R产物,纯化后送至北京华大基因公司测序,采用C h r o m a s软件进行测序结果比对,寻找基因突变位点。1.4 统计学方法 采用S P S S2 5.0统计学软件分析数据。计量资料以(xs)表示,比较采用t检验或方差分 析,两 两 比 较 采 用S NK-q检 验;计 数 资 料 以 例(%)表示,采用卡方检验;采用L o g i s t i c回归分析L R P 6基因型对NA F L D发生的影响;P0.0 5)。NA F L D组BM I、A L T、T G、L D L-C、A p o B水平高于对照组(均P0.0 5)。表表11 两组一般资料和生化指标比较项 目对照组(n=1 3 5)NA F L D组(n=1 4 4)t/2值P值男/女(例)8 0/5 58 2/6 20.1 5 30.6 9 5年龄(岁)4 2.9 69.8 74 3.0 41 0.3 20.0 6 60.9 4 7BM I(k g/m2)2 2.9 42.3 82 4.3 62.2 35.1 4 50.0 0 0A L T(U/L)1 7.4 33.4 53 7.6 56.6 43 1.6 0 50.0 0 0A S T(U/L)2 0.9 14.2 22 1.5 45.1 51.1 1 30.2 6 6T G(mm o l/L)1.0 60.2 62.3 10.4 82 6.7 9 40.0 0 0T C(mm o l/L)4.6 21.1 34.8 41.1 11.6 4 00.1 0 2L D L-C(mm o l/L)3.0 20.4 13.9 50.6 31 4.5 1 00.0 0 0A p o B(g/L)0.9 80.2 21.3 30.3 89.3 3 40.0 0 0HD L-C(mm o l/L)1.3 50.3 11.3 30.3 40.5 1 20.6 0 9A p o A 1(g/L)1.3 40.3 21.3 00.3 31.0 2 70.3 0 52.2 两组L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点基因型分布比较 见 表2。对 照 组 和NA F L D组L R P 6基 因 在r s 2 3 0 2 6 8 5位点上均检出T T型、T C型和C C型3种基因型。对照组T T基因型最多(5 7.7 8%),C C基因型最少(8.8 9%),T等位基因为2 0 1(7 4.4 4%),C等24212 0 2 3年9月第5 2卷第9期S e p.2 0 2 3V o l.5 2N o.9陕 西 医 学 杂 志S h a a n x iM e d i c a l J o u r n a l位基因为6 9(2 5.5 6%);NA F L D组C C基因型最多(5 6.9 4%),T T基因型最少(1 0.4 2%),T等位基因为7 7(2 6.7 4%),C等位基因为2 1 1(7 3.2 6%)。对照组与NA F L D组基因型比较差异有统计学意义(2=9 4.6 5 7,P=0.0 0 0)。经 吻 合 度 检 验,对 照 组 和NA F L D组基因多态性分布符合H a r d y-W e i n b e r g(H-W)平衡法则(2=2.0 7 4、4.0 0 9,P=0.3 5 5、0.1 3 5),表明对所选样本进行群体遗传学研究具有代表性。表表22 两组L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点基因型分布比较 例(%)组 别nT T型T C型C C型对照组1 3 57 8(5 7.7 8)4 5(3 3.3 3)1 2(8.8 9)NA F L D组1 4 41 5(1 0.4 2)4 7(3 2.6 4)8 2(5 6.9 4)2.3 不同L R P 6基因型NA F L D患者生化指标比较 见表3。T T型、T C型、C C型NA F L D患者BM I、A L T、T G、L D L-C以及A p o B水平依次升高(均P0.0 5)。表表33 不同L R P 6基因型NA F L D患者生化指标比较(xs)基因型nBM I(k g/m2)A L T(U/L)T G(mm o l/L)L D L-C(mm o l/L)A p o B(g/L)T T型1 52 1.4 22.0 92 0.3 35.1 41.9 40.4 23.4 40.4 51.0 10.2 4T C型4 72 3.0 72.4 6*3 4.1 36.7 5*2.2 40.4 6*3.8 60.6 7*1.2 70.3 7*C C型8 22 5.6 42.1 3*#4 2.8 47.0 1*#2.4 20.5 1*#4.0 90.6 4*#1.4 20.4 2*#F值3 4.1 2 47 9.7 3 96.9 4 17.3 2 67.8 0 7P值0.0 0 00.0 0 00.0 0 10.0 0 10.0 0 1 注:与T T型比较,*P0.0 5;与T C型比较,#P0.0 52.4 L R P 6基因型对NA F L D发生的影响L o g i s t i c回归分析 见表4。将是否发生N A F L D作为因变量,校正 性 别、年 龄、B M I、A L T、A S T、T G、T C、L D L-C、HD L-C、A p o B和A p o A 1等混杂因素后,以L R P 6基因的三种基因型(T T型、T C型、C C型)为自变量,行L o g i s t i c回 归 分 析,结 果 显 示C C基 因 型 是 影 响NA F L D发生的独立危险因素(P0.0 5)。表表44 L R P 6基因型对NA F L D发生的影响L o g i s t i c回归分析基因型S EW a l d2值P值O R值9 5%C IT T型1.0 0 0T C型0.0 4 40.2 1 30.0 4 30.8 3 61.0 4 50.6 8 81.5 8 6C C型0.9 7 20.3 1 09.8 3 10.0 0 22.6 4 31.4 4 04.8 5 33 讨 论随着人们生活方式的转变以及代谢综合征在全球的流行,NA F L D是愈发受到重视的慢性肝病8-9。其发病率在世界范围内逐年上升,且流行与肥胖有关。NA F L D能够预防,但由于患病基数大,已逐渐对公共卫生构成较大的挑战。在没有酒精摄入下,过量脂质在肝脏中累积会诱发NA F L D。NA F L D能引起肝功能异常,甚至引发肝炎、肝硬化等疾病,其中代谢因素在肝脂肪变性中起到重要作用1 0-1 1。近年来,运动及一些药物的使用可在一定程度上缓解NA F L D,但这些治疗方式仍然具有局限性,同时一些药物也有一定的毒 性1 2-1 3。本 研 究 结 果 显 示,NA F L D组BM I、A L T、T G、L D L-C、A p o B水 平 高 于 对 照 组,提 示NA F L D的发生与代谢组分的升高关系密切。NA F L D的一些致病因素,如基因多态性,已成为深入实验研究的基础,对NA F L D的发病具有调控作用1 4-1 6。D a i等1 7研究发现,p a t a t i n样磷脂酶结构域3基因r s 7 3 8 4 0 9位点多态性不仅是NA F L D易感性的重要因素,而且与疾病严重程度有关。姜华等1 8研究结果显示,肝性脂肪酸结合蛋白是肝脏脂质代谢的重要调节因子,其基因多态性与NA F L D显著相关。L R P分布于哺乳动物的肝脏动脉壁平滑肌细胞、血管内皮细胞等,其中肝细胞含量最多1 9-2 1。研究2 2表明,L R P 6通过Wn t相关信号通路,使得哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路激活,从而影响脂质合成。L R P 6可通过影响脂质转运参与动脉粥样硬化的发生,且L R P 6变异影响家族性高胆固醇血症的发生2 3-2 4。因此,L R P 6与脂质代谢密切相关,但与脂肪性肝病发病机制的关系仍不明 确,相关报道 较 少,且 汉 族 人 群L R P 6多态性与NA F L D的关系需进一步研究。本研究结 果 显 示,纳 入 的 汉 族 人 群 中 存 在L R P 6基 因r s 2 3 0 2 6 8 5位点多态性,主要包括T T型(野生型)、T C型(突变杂合子)以及C C型(突变纯合子)3种基因型,且3种基因型的分布在NA F L D组和对照组中有差异。其中,对照组T T基因型最多(5 7.7 8%),NA F L D组C C基因型最多(5 6.9 4%)。提示NA F L D患者C等位基因比例 较大,r s 2 3 0 2 6 8 5位点等位 基因C与NA F L D的发病关系密切。本研究发现,C C基因型是影响NA F L D发生的独立危险因素,携带L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点C C基因型的个体患NA F L D的风险是携带T T基因型个体的2.6 4 3倍。此外,本研究结果中C C型NA F L D患 者BM I、A L T、T G、L D L-C、3421陕 西 医 学 杂 志S h a a n x iM e d i c a l J o u r n a l2 0 2 3年9月第5 2卷第9期S e p.2 0 2 3V o l.5 2N o.9A p o B水平高于T T型和T C型NA F L D患者,提示L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点C C基因型携带者出现血脂水平异常或肝脏功能异常的风险增加。综上所述,L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点多态性与NA F L D相关,且C C基因型是影响NA F L D发生的独立危险因素。但因本研究所选样本均来自同一家医院,纳入对象比较单一,而不同地区人群间可能有较大差异,故需进一步进行多中心大样本量的研究。此外,本研究中选取的L R P 6基因r s 2 3 0 2 6 8 5位点与脂质代谢相关疾病的研究相对不足,细胞模型、动物模型以及人群研究均相对缺乏,也需要后续更多研究加以完善。参考文献1 林先佳,王小锋,张媛媛,等.基于网络药理学和分子对接探讨肝脂平治疗非酒精性脂肪性肝病作用机制J.陕西中医,2 0 2 3,4 4(4):5 2 4-5 2 9.2 X i eJ,H u a n g H,L i uZ,e ta l.T h ea s s o c i a t i o n sb e t w e e nm o d i f i a b l er i s kf a c t o r sa n dn o n a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s-e a s e:A c o m p r e h e n s i v e m e n d e l i a n r a n d o m i z a t i o n s t u d yJ.H e p a t o l o g y,2 0 2 3,7 7(3):9 4 9-9 6 4.3 安 欣,刘鲁豫,王成凯.2型糖尿病患者尿微量白蛋白肌酐比值与非酒精性脂肪性肝病相关性分析J.陕西医学杂志,2 0 2 1,5 0(1 1):1 4 1 6-1 4 1 9.4 H o uT,T i a nY,C a oZ,e t a l.C y t o p l a s m i cS I R T 6-m e d i a t e dA C S L 5d e a c e t y l a t i o n i m p e d e sn o n a l c o h o l i c f a t t y l i v e rd i s-e a s eb yf a c i l i t a t i n gh e p a t i cf a t t ya c i do x i d a t i o nJ.M o lC e l l,2 0 2 2,8 2(2 1):4 0 9 9-4 1 1 5.5 W uY,Z h o uL,L i uH,e ta l.L R P 6d o w n r e g u l a t i o np r o-m o t e sc a r d i o m y o c y t ep r o l i f e r a t i o na n dh e a r tr e g e n e r a t i o nJ.C e l lR e s,2 0 2 1,3 1(4):4 5 0-4 6 2.6 王秀梅,李昌平.m i c r o R NA-2 1在非酒精性脂肪肝病中的分子机制J.分子影像学杂志,2 0 1 9,4 2(1):8 7-9 0.7 中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组,中国医师协会脂肪性肝病专家委员会.非酒精性脂肪性肝病防治指南(2 0 1 8更新版)J.中华肝脏病杂志,2 0 1 8,2 6(3):1 9 5-2 0 3.8 L e eCH,L u iD T,L a m K S.N o n-a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s-e a s ea n dt y p e2d i a b e t e s:A nu p d a t eJ.JD i a b e t e sI n v e s-t i g,2 0 2 2,1 3(6):9 3 0-9 4 0.9 刘玲娇,余湘尤,虢小丽.西安市职业人群非酒精性脂肪性肝病患病率及其危险因素调查研究J.陕西医学杂志,2 0 2 1,5 0(1):1 0 7-1 1 0.1 0 L a z a r u sJ V,M a r kHE,A n s t e eQM,e t a l.A d v a n c i n gt h eg l o b a lp u b l i ch e a l t ha g e n d af o r NA F L D:A c o n s e n s u ss t a t e m e n tJ.N a tR e vG a s t r o e n t e r o lH e p a t o l,2 0 2 2,1 9(1):6 0-7 8.1 1 唐颖慧,叶苗青,何瑾瑜,等.化脂复肝颗粒通过抑制T L R 4/N F-B/N L R P 3减轻K u p f f e r细胞炎症改善非酒精性脂肪性肝病机制研究J.陕西中医,2 0 2 2,4 3(1 0):1 3 5 9-1 3 6 3,1 3 6 8.1 2 T i l gH,A d o l p hT E,D u d e kM,e t a l.N o n-a l c o h o l i c f a t t y l i v-e rd i s e a s e:T h e i n t e r p l a yb e t w e e nm e t a b o l i s m,m i c r o b e sa n di mm u n i t yJ.N a tM e t a b,2 0 2 1,3(1 2):1 5 9 6-1 6 0 7.1 3 K h n e i z e rG,R i z v iS,G a w r i e hS.N o n-a l c o h o l i c f a t t yl i v e rd i s e a s ea n dd i a b e t e s m e l l i t u sJ.A d vE x p M e dB i o l,2 0 2 1,1 3 0 7(1):4 1 7-4 4 0.1 4 J u a n o l aO,M a r t n e z-L p e zS,F r a n c sR,e t a l.N o n-a l c o-h o l i cf a t t yl i v e rd i s e a s e:M e t a b o l i c,g e n e t i c,e p i g e n e t i ca n de n v i r o n m e n t a lr i s kf a c t o r sJ.I n tJE n v i r o n R e sP u b l i cH e a l t h,2 0 2 1,1 8(1 0):5 2 2 7.1 5 C a t a l d oI,S a r c o g n a t oS,S a c c h iD,e ta l.P a t h o l o g yo fn o n-a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s e a s eJ.P a t h o l o g i c a,2 0 2 1,1 1 3(3):1 9 4-2 0 2.1 6 T a n gS,Z h a n gJ,M e iT T,e t a l.A s s o c i a t i o no fP N P L A 3r s 7 3 8 4 0 9G/Cg e n ep o l y m o r p h i s mw i t hn o n a l c o h o l i c f a t-t yl i v e rd i s e a s ei nc h i l d r e n:A m e t a-a n a l y s i sJ.BMCM e dG e n e t,2 0 2 0,2 1(1):1 6 3.1 7 D a iG,L i uP,L iX,e t a l.A s s o c i a t i o nb e t w e e nP N P L A 3r s 7 3 8 4 0 9p o l y m o r p h i s ma n dn o n a l c o h o l i c f a t t y l i v e rd i s-e a s e(NA F L D)s u s c e p t i b i l i t ya n ds e v e r i t y:A m e t a-a n a l-y s i sJ.M e d i c i n e(B a l t i m o r e),2 0 1 9,9 8(7):e 1 4 3 2 4.1 8 姜 华,高建鹏,胡 阳,等.肝性脂肪酸结合蛋白基因单核苷酸多态性表达与NA F L D的相关性J.实用医学杂志,2 0 2 0,3 6(1):8 4-8 8.1 9 L i uZ,L iC,L i uM,e t a l.T h e l o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i nr e-c e p t o r-r e l a t e dp r o t e i n6p a t h w a yi nt h et r e a t m e n to f i n-t e s t i n a lb a r r i e rd y s f u n c t i o ni n d u c e db yh y p o x i aa n di n-t e s t i n a lm i c r o b i o t at h r o u g ht h e Wn t/-c a t e n i np a t h w a yJ.I n t JB i o lS c i,2 0 2 2,1 8(1 1):4 4 6 9-4 4 8 1.2 0 C h e nL J,L i nX X,G u oJ,e t a l.L r p 6g e n o t y p ea f f e c t s i n d i-v i d u a ls u s c e p t i b i l i t yt on o n a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s e a s ea n ds i l i b i n i n t h e r a p e u t i c r e s p o n s ev i aW n t/-c a t e n i n-C y p 2 e 1s i g-n a l i n gJ.I n t JB i o l S c i,2 0 2 1,1 7(1 4):3 9 3 6-3 9 5 3.2 1 D i a zA,M a r t i n-J i m e n e zC,W o oY,e t