抗核抗体测定.ppt

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,抗核抗体的测定,1,（,antinuclear antibody,，,ANA,）又称抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白（,DNP,）、,DNA,、可提取的核抗原（,ENA,）和,RNA,等作为靶抗原的自身抗体的总称，能与所有动物的细胞核发生反应，主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。,在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质，激发机体产生许多抗不同核成分的抗体,；,2,抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的阳性率,如系统性红斑狼疮（,SLE,，,95%100%,类风湿性关节炎（,RA,，,10%20%,）、,混合性结缔组织病（,MCTD,，,80%100%,）、,干燥综合症（,SS,10%40%,）、,全身性硬皮病（,85%90%,）、,狼疮性肝炎（,95%100%,）、,原发性胆汁性肝硬化（,95%100%,）等，,3,ANA,主要是,IgG,，,也有,IgM,、,IgA,、,IgD,和,IgE,；,ANA,无器官特异性和种属特异性,；,ANA,主要存在于血清中；,将检出,ANA,作为,AID,存在的依据。,4,抗,DNA,抗体：,抗,dsDNA,/,抗,nDNA,、抗,ssDNA,/,抗,dDNA,等,抗组蛋白抗体,(,AHA,),：,抗,H1,、抗,H2A,、抗,H2B,、,抗,H3,、抗,H4,抗体等,抗非组蛋白抗体：,抗,nRNP,/,抗,U1RNP,、抗,Scl-70,、,抗,SSA,、抗,Sm,、抗,SSB,、抗,Jo-1,、抗,Rib,抗体、,AnuA,、抗,DNP,、抗,DE,多肽抗体、抗,DM53,抗体,抗,RANA,抗体、抗着丝点、抗,Ku,抗体等,抗核仁抗体：,抗,PM-Scl,抗体、抗,Th/To,抗体、,抗,U3-RNP,、抗,4-6-S-RNA,抗体等,（一）,ANA,的类型和临床意义,ANA,谱,5,抗天然,DNA,(,native DNA,nDNA,),抗体,，又称抗双链,DNA(double stranded DNA,dsDNA),抗体。,抗变性,DNA,(denatured DNA,dDNA),抗体,，又称抗单链,DNA(single stranded DNA,ssDNA),抗体。,对,SLE,有高特异性,;,SLE,诊断标准之一。,缓解期降低,70%,90%,SLE,活动期增高,药物疗效,抗,dsDNA,抗体,抗,DNA,抗体,6,抗组蛋白抗体,（,anti-histonic antibody,AHA,）,：,由,H1,、,H2A,、,H2B,、,H3,和,H4,五个亚单位，各自都,有特异性抗体；,AHA,检,出,百,分,率,抗,dsDNA,50,70,90,100,药物诱导性狼疮只能检出此,SLE,AHA,AHA,抗,组蛋白,抗体,7,可提取性核抗原,(extractable nuclear antigen,ENA),是盐水或磷酸盐缓冲液可提取性核抗原的总称，是非组蛋白的核蛋白，属酸性核蛋白抗原，由许多小分子量的,RNA,和多肽组成。,抗,ENA,抗体,8,有特异诊断价值的有以下七种：,抗,nRNP(nuclear RNP,nRNP),抗体；,抗,Sm,抗体；,抗,SSA,抗体；,抗,SSB,抗体；,抗,Scl-70,抗体；,抗,Jo-1,抗体；,抗核糖体抗体。,9,抗,Sm,抗体：,SLE,标记性抗体（,20%,40%,）,抗,U1-RNP,抗体,：,MCTD 95100%,（高滴度）,抗,SSA,抗体：,SS 40%,95%,，其它,CTD,抗,SSB,抗体：,SS 40%,90%,，其它,CTD,抗,Scl-70,抗体：,PSS25%,70%,标记性抗体,抗,Jo-1,抗体：,PM/DM 25%,，标记性抗体,抗,rRNP,（,Rib,）抗体：,SLE,特异性抗体,（,10%,20%,）,10,抗,DNP,抗体（抗核蛋白抗体）：,核蛋白,(DNP),抗原由,DNA,和蛋白质组成。,DNP,抗原有不溶性和可溶性两种，可分别产生相应的抗体。,检出,百分,率,抗,DNP,20,40,60,80,SLE,非活动期,SLE,活动期,抗不溶性,DNP,抗体,抗,DNP,抗,DNP,100,RA,滑,膜液中,抗,DNP,抗可溶性,DNP,抗体,抗,DNP,抗体,11,抗核小体抗体,（,anti-nucleosome antibody,，,AnuA),是细胞核染色质的基本单位,;,细胞凋亡而致核小体大量蓄积，,诱导,B,细胞产生的,AnuA,是,SLE,特异性的标志抗体。,抗,dsDNA,抗体,抗核小体抗体,抗,dsDNA,和抗,Sm,阴性的,SLE,阳性,率为,60,%,80%,，特异性,97%,。,抗,核小体,抗体,12,（二）,ANA,的检测方法,将患者血清先进行稀释，可以做定量试验，在,1:80,稀释仍呈阳性时，对,SLE,的诊断有较大的参考价值。,形成胞核基质,ANA,抗人,Ig FITC,1.,荧光免疫法,13,间接法：第一步：荧光素标记抗抗体,第二步：已知,Ag,固定待测,Ab,洗涤,再加入抗,Ab*,洗涤,镜检。,特点：,1.,制备一种荧光抗体，可检测多种,Ag,或,Ab,。,2.,既可检测,Ag,，又可检测,Ab,。,3.,灵敏度高，但易产生非特异性荧光,Ag,Ab,（？）,抗,Ab*,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,抗核抗体核型与相关疾病,核型,荧光图形,抗体,相关疾病,核膜型,核周环状荧光,抗,dsDNA,SLE,、慢活肝炎,均质型,核呈均质荧光,抗,DNA,、,AHA,、,AnuA,SLE,、,RA,、,PSS,、慢性肝病,斑点型,核内颗粒状荧光,抗,ENA,MCTD,、,SLE,、,PSS,、,SS,、,PM,核仁型,核仁有荧光,抗核仁抗体,PSS,、雷诺现象、,SLE,着丝点型,核浆细小相同颗粒荧光,抗着丝点,PSS,、,CREST,综合征,24,周边型,可见于胶原病、,PBC、CAH,等患者,25,用,ELISA,间接法检测抗,dsDNA,抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。,2.ELISA,法,3.,免疫印记法,26,Thank you!,27,