肺腺癌中CALHM2、PD-L1的表达及其预后分析.pdf

网络出版时间：网络出版地址：肺腺癌中 、的表达及其预后分析刘俊英，杨会钗，李诗，刘月平摘要：目的探讨肺腺癌中钙稳态调节剂（，）、的表达及其预后特征。方法利用 数据库分析 的表达及其预后；收集 例肺腺癌临床资料，采用免疫组化检测 、的表达，分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。结果 数据库分析显示，在肺肿瘤组织中明显低表达（）。例肺腺癌中 表达呈三种模式，包括胞质 例（）、胞核 例（）及胞质核共表达 例（）。其中，男性、有吸烟史及中分化腺癌中 胞质表达较多（）。相关性分析显示，的表达模式与 存在一定相关性（）。生存分析：单纯 胞核表达及伴 患者 胞核表达者的预后均明显优于胞质表达者（）。结论肺腺癌中 呈胞核、胞质表达，结合 表达共同分析可初步评估患者的预后。关键词：肺肿瘤；腺癌；预后中图分类号：文献标志码：文章编号：（）：接受日期：作者单位：河北医科大学第四医院 河北省肿瘤医院病理科，石家庄 作者简介：刘俊英，女，硕士，主治医师。：刘月平，女，博士，主任医师，通讯作者。：有研究显示，年全球约有 万癌症新发病例和 万癌症死亡病例，其中，肺癌是最常确诊的癌症，也是癌症死亡的主要原因 。肺腺癌是最常见的非小细胞肺癌组织学类型，过去的几十年里其在大多数国家均呈上升趋势 。目前，肺癌的靶向治疗已在癌症治疗领域中取得显著成效；然而，肿瘤靶向治疗耐药性的产生又成为肺癌治疗过程中不可避免的瓶颈。因此，现阶段对肺癌的靶向及免疫治疗标志物仍需进一步探索。是一种普遍存在的信号分子，可参与控制细胞增殖和凋亡，对维持细胞内外稳态有重要意义。信号传导在癌症进展等方面至关重要，包括肿瘤微环境和对抗癌症治疗耐药性获得的过程 。基因家族曾被称为 基因家族，是一类电压门控、抑制非选择性离子通道，在味觉信号传导和神经元毒性中起重要作用 。该家族由六个成员组成（），其具有 的序列相似性。曾被称为 ，是电压门控离子通道的成孔亚基，可调节神经活动。家族调节蛋白主要通过介导细胞和（或）亚细胞器相关的 或其它离子通道的跨膜运输起作用 ；在肺腺癌中鲜有报道。本文旨在通过检测肺腺癌中 的表达，并结合数据库分析其相关性及预后，以期为肺腺癌的靶向治疗提供数据支持。材料与方法 临床资料收集 年我院手术切除的肺浸润性腺癌 例标本，患者均有完整的临床资料（年龄、性别、分期、组织学、吸烟史），组织学亚型根据 （）肺肿瘤进行分类。部分亚型病例较少，为减少统计学误差，实验将肺腺癌亚型归为 类，即高分化（贴壁为主型）、中分化（腺泡型、乳头型）、低分化（微乳头型、实性型及黏液腺癌）。患者均有完整的随访资料，手术后有 患者（）接受辅助治疗（患者接受化疗，患者接受化疗联合放疗，患者接受 靶向治疗）。例患者均为原发性肺部病变，无远处转移。免疫组化标本均经 中性福尔马林固定，石蜡包埋，常规 厚连续切片，附于载玻片上，烤片 ，免疫组化采用 两步法染色。兔抗人 （克隆号：）一抗购自美国 公司；采用 自动免疫组化染色平台进行检测，具体操作步骤按试剂盒说明书进行。（克隆号：），使用 试剂盒，购自美国 临床与实验病理学杂志 ；（）公司；采用 免疫组化平台进行检测，具体操作步骤按试剂盒说明书进行。应用 代替一抗作为阴性对照。结果判读 表达水平由两位具有 年以上诊断经验的病理医师进行评分。根据阳性细胞着色强度进行计分 ：（）无着色为 分，弱着色为 分，中等强度着色为 分，强着色为 分。（）根据阳性细胞百分比进行计分：为 分，为 分，为 分，为 分。两项得分相乘：分为阴性，分为阳性，其中 分为弱阳性，分为中等阳性，分为强阳性。另外，表达模式如胞质、胞核以及胞质核阳性（质 核）也被单独记入结果中。采用肿瘤占比 评 分（，）进行判读，为至少 个有活力的肿瘤细胞中完全或部分膜染色的百分比。同时由两位具有 年以上诊断经验的病理医师进行判读。数据库分析利用 在线工具（）分析 数据（肿瘤组 例，正常组 例），利用 中的 模块进行表达分析。“”框中输入基因名，“”框选择肺腺癌，其它选择默认选项，点击“”分析数据，下载 箱式图。统计学分析利用 软件进行统计学分析；计数资料采用 检验及单因素方差分析；两组表达采用 相关性分析。应用 进行单因素生存分析并绘制生存曲线，组间比较采用对数秩检验；运用 比例风险回归进行预后分析。以渐近 双侧 为差异有统计学意义。结果 的不同表达模式及临床病理特征通过 在线工具分析 数据库，包含 例肿瘤和 例正常肺组织，结果显示：与正常肺组织相比，在肺肿瘤组织中明显低表达（，图 ）。本组 例肺腺癌中，阳性率为 （）；在肺腺癌中的表达呈三种模式，包括胞质（例，图 ）、胞核（例，图 ）及胞质核共表达（例，图 ）。在正常肺泡上皮呈胞核表达，在正常支气管上皮呈胞核 质表达。在男性、有吸烟史及中等分化的肺腺癌中 胞质表达较多（，表 ）。图 分析 数据库中 的表达图 肺腺癌中 的表达：胞 质 表 达；胞核表达；胞质核共表达，两步法 与 表达的相关性采用 相关性分析发现，表达强度与 表达有相关性（），而 表达模式与患者性别、吸烟史有关（，表 ）。应用 在线工具分析显示，的 表达与 有相关性（，图 ）。上述结果提示，及蛋白水平的表达均与免疫相关标志物 有相关性。临床与实验病理学杂志 ；（）表 肺腺癌中 不同表达模式及强度的临床病理特征 （）临床病理参数 表达强度弱表达中 强表达值值 表达模式胞质表达胞核表达胞质 核表达值值性别男 （）（）（）（）（）女 （）（）（）（）（）年龄（岁）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）吸烟史是 （）（）（）（）（）否 （）（）（）（）（）分期 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）分期 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）胸膜侵犯有 （）（）（）（）（）无 （）（）（）（）（）组织学分化高 （）（）（）（）（）中 （）（）（）（）（）低 （）（）（）（）（）突变阳性 （）（）（）（）（）阴性 （）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）（）由于 强表达过少，为避免较大误差，统计分析中与中等强度表达合并成“中 强表达”进行分析；表达强度：联合表达百分比和表达强度计分，分为阴性（例），分为阳性（例）；表达模式：只考虑细胞质、细胞核及细胞（质 核）表达，不考虑表达强度及表达百分比等因素（例）；图 分析 与 表达的相关性表 肺腺癌中 表达与临床病理特征的相关性临床病理参数 表达模式 值值 表达强度 值值性别 年龄 吸烟史 分期 分期 胸膜侵犯 组织学分化 表达与肺腺癌预后的关系本组经 生存分析显示，表达强度与预后差异无统计学意义（，图 ）。表达模式中，胞核表达患者的预后明显优于胞临床与实验病理学杂志 ；（）质表达者（，图 ）。本组结合 表达分析显示，患者在不同 表达模式中差异无统计学意义（，图 ）；但在 患者组中，胞核表达者的预后明显优于胞质表达者（，图 ）。因此，联合 表达模式评估，有助于肺腺癌患者的分子标志物研发及预测患者预后，尤其对需进行免疫治疗的患者可能更具有临床意义。同样，利用 在线工具分析肺腺癌 表达（肿瘤组 例，正常组 例）患者预后的情况，结果显示差异无统计学意义（，图 ）。多因素生存分析显示，表达模式及表达强度与患者生存的独立预后因素均无关（均 ，表 ）。讨论目前，文献报道 在肺腺癌中的研究较少，多集中于中枢神经系统的研究，但其 通道载体的结构特征也引起部分专家关注。等 和 等 研究显示，属于四次跨膜蛋白，由四个 组成、带有细胞质的 和 端，通过十一个单体形成半通道及间隙连接 。本组显示 在肺腺癌中的表达可见于胞质和表 多因素生存分析肺腺癌临床病理特征与患者预后的关系临床病理参数 （）值性别 （）年龄 （）吸烟史 （）分期 （）分期 （）胸膜侵犯 （）组织学分化 （）突变 （）（）（模式）（）（强度）（）（或）胞核，多位于胞质。胞质表达多出现在男性、有吸烟史及中等分化肺腺癌患者中；弱表达多为高分化腺癌；中 强表达较少（）。刘洁等 根据数据库进行生信分析显示，在肺腺癌中呈低表达，主要分布于胞质和胞核，本组报道与之一致；但在其临床特征分析中，在肺腺癌中的表达与肿瘤分期、淋巴结转移和吸烟史均无关，女性患者中的表达水平显著高于男性患者；本组结果与之存在一定差异，因此有待积累更多临床数据进一步验证。图 肺腺癌中 表达的患者预后分析：表达强度与总生存期的关系；表达模式与总生存期的关系；时，表达模式与总生存期的关系；时，表达模式与总生存期的关系；分析 数据库中 表达与总生存期的关系临床与实验病理学杂志 ；（）通过 在线工具分析 数据，在肺肿瘤组织中明显低表达，本组免疫组化检测未发现 明显强表达，多数呈弱 中等强度表达，并且发现 表达强度可能与临床病理特征关系较小。经过多个队列的生存分析对比，我们发现胞核表达者的预后显著优于胞质表达者。等 在肺小细胞癌和肺腺癌细胞系的研究中显示，与正常支气管上皮相比，肺癌细胞内质网 含量降低，从另一方面反映 可能通过胞质和胞核的信号转移发挥作用。离子通道是影响肿瘤形成和发展的重要因素，恶性转化可引起细胞增殖增强、分化异常、细胞凋亡受损，最终导致不受控制的迁移和侵袭；通常与离子通道表达水平的改变以及它们在突变癌细胞中的活性有关。等 的研究认为，离子通道通过调节 生理过程的流入和下游信号通路来调节细胞兴奋性。与免疫细胞相比，离子通道使肿瘤细胞更加超极化并影响癌细胞的增殖和转移。因此，离子通道是抗癌治疗中的重要治疗靶点。等 筛选实验室克隆的 个新基因，发现 个基因可以显著下调离子通道活性，使用两种荧光染料 和 标记这 个基因对细胞活力的影响，结果显示 与细胞活力相关。本组 胞质与胞核表达的预后不同，提示 表达模式可能是影响肺癌侵袭的重要因素，但其尚未成为影响患者预后的独立危险因素。等 通过多种先进工具对 相关家族 结构和功能表征进行注释，进一步揭示 在免疫调节中的潜在作用。本组 、胞核表达者的预后明显优于胞质表达者，提示在 患者中，胞核至胞质表达的过程可能存在某些免疫相关机制的参与。因此，离子通道相关免疫调剂机制的研究对于肺癌患者仍有重要临床意义。综上所述，在肺腺癌中有不同程度表达，其表达模式与 有相关性，联合 检测可帮助肺腺癌患者预后评估。参考文献：，：，（）：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（），（）：，（）：，（），（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：刘洁，黄伟，王磊利用生物信息学分析 在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 医学临床研究，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：临床与实验病理学杂志 ；（），（，）（），（），（），（）（），（）（），（），：；（上接第 页），（，；，），（），（），：（），（），：；临床与实验病理学杂志 ；（）