辐照灭菌确认方案.docx

#有限企业研发部#辐照灭菌确认方案考证方案审批表一、考证方案拟定表方案草拟人方案草拟日期、考证方案审查审查人（署名）日期-三、考证方案同意同意人（署名）：同意日期：年月曰方案履行日期：年月日四、考证履行小构成员成员署名组长副组长小构成员目录1. 主要内容和合用范围2. 辐照剂量测定2.1原理2.2选择SAL和获取产品样品2.3测定初始污染菌初始污染菌的计算初始污染菌的测定校订系数的测定产品释出物的查验2.4成立考证剂量2.5达成考证剂量实验2.6成立灭菌剂量3. 辐照灭菌加工确认4. 考证总结报告书#辐照灭菌确认方案1. 主要内容和合用范围本文关于#的灭菌确认过程做了详尽描绘，确认的内容包含辐照剂量的设定及辐照加工确认。本方案拟定的目的在于证明产品辐照切合ISO11137-26的要求，灭菌后的产品能达到10-6的无菌保证水平。2. 辐照灭菌剂量设定原理考证的原理是鉴于ISO11137方法，即先对辐照前产品的初始污染菌进行测定，而后选择考证剂量。再用考证剂量对产品进行辐照，并测定存活微生物的样品件数，以此来确立最低灭菌剂量（SAL=10 ）-6选择SAL和获取产品样品该产品的SAL选定为10-6,采集惯例生产的标准包装产品，于灭菌前对三个批号进行随机抽样，每批起码抽取10个样品，此中取样比率（SIP ）为1。测定初始污染菌初始污染菌的计算测定起码30个样品单元的每件样品的初始污染菌并计算，a）三批中的每一批的均匀的单元产品初始污染菌（批均匀），和b）全部的单元产品均匀初始污染菌（总均匀初始污染菌）。ISO11137-26或GB/T18280-27中，测定起码30个样品单元的每件样品的初始微污染菌并计算：批均匀值和总均匀值。当初始污染菌较低（如小于10）;同意集中检测单唯一批中10个单元产品来确立批均匀初始污染菌。将三批产品的每批均匀初始污染菌与总均匀初始污染菌比较，确立能否有一批均匀值是总均匀值的两倍或两倍以上。确立初始污染菌测定中能否供给了校订因子，成立测定校订因子的方法。初始污染菌测定测定依照：ISO11737-1 ： 1995试验方法：（平板计数法）1）洗脱液：无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾，磷酸氢二钠，氯化钠，蛋白胨，加水10ml，微温溶解，分装，过滤，灭菌。2）样品办理：2取样品10cm，剪碎，加无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液10ml，浸泡，振摇，作为1:10的供试液。3）需气菌培育：取供试液1ml,置直径90mm的无菌平皿中，注入1520ml温度不超出45。的熔解的营养琼脂培育基，混匀，凝结，倒置培育。4）霉菌培育：取供试液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入1520ml温度不超出45。的熔解的玫瑰红钠培育基，混匀，凝结，倒置培育。5）计数：除还有规定外，细菌培育48小时，每日点计菌落数，一般以48小时的菌落数报告；霉菌、酵母菌培育72小时，每日点计菌落数，一般以72小时的菌落数报告；必需时，可适合延伸培育时间至57天进行菌落计数并报告。菌落延伸生长成片的平板不宜计数。计算各稀释级供试液的均匀菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落均匀数不小于15,则两个平板的菌落数不可以相差1倍或以上。结果:批号样品气需气菌(cfu件)霉菌(cfu#)需气菌(cfu#)霉菌(cfu#)需气菌(cfu#)霉菌(cfu#)12345678910均匀数批均匀初始污染菌为(cfu件)总均匀初始污染菌为（cfu/牛）校订系数的测定依据ISO11737-1中描绘的初始污染菌确实定方法进行试验，测定校订因子，该因子取自对活菌计数的初始污染菌检测技术的考证。测定依照：ISO11737-1:1995试验方法：1）标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372 ），传代培育，制成1cfu/m l备用。2）洗脱液准备：无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾，磷酸氢二钠，氯化钠，蛋白胨，加水10ml，微温溶解，分装，过滤，灭菌。3）制备悬液稀释液，使中含有1个芽胞。向随机抽取的10个产品上接种该稀释悬液，并在层流下进行干燥。4）用洗脱液对接种的产品进行洗脱，测定洗脱的芽孢数，并计算均匀值。1除以均匀芽胞数即为回收率的校订系数。样品编号12345678910孢数均匀芽胞数:校订系数：产品释出物的查验测定依照：ISO11737-1 : 1995试验方法:1）标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372 ），白色念珠菌（ATCC10231 ），传代培育，制成1cfu/ml备用。2）产品办理：取灭菌产品以无菌操作转移到1mlSCDB 培育基中，3035。培育24h。3）接种：以无菌操作接种标准菌于上述产品SCDB培育基中，2832。培育出现阳性结果或是起码培育7天。用标准平板计数法进行微生物计数（CFU ）。结果:微生物ATCC接种量:(cfu)产品 +SCDB +标准菌比较SCDB+标、隹菌枯草杆菌黑色变种9372白色念珠菌10231结论：。成立考证剂量依据初始污染菌的结果和ISO11137 : 26方法1中的表5,成立适合的考证剂量。详细方法为：a）假如一批或更多批次均匀初始污染菌等于或大于总均匀初始污染菌的两倍，则使用最高批次值；b）假如批次均匀初始污染菌的每一个小于总均匀初始污染菌的两倍，则使用总均匀初始污染菌。依据初始污染菌的测定试验结果，获取该产品三批的批均匀初始污染菌和总均匀初始污染菌分别为（cfu /件）和（cfu /牛），最高批次值为（cfu/件），所以选择（cfu件）作为初始污染菌。依据11737-1附录校订过的初始污染菌可经过初始污染菌乘以校订系数求得，故产品的生物负载预计值为：（cfu/牛）。依照ISO11137方法1中的表5查得该校订过的初始污染菌对应的考证剂量为ESAL=10 -2）,指定这个剂量作为灭菌剂量。假如均匀初始菌在表5中没有给出，则用比实质计算的初始污染菌大些的，最靠近表中数值的均匀初始污染菌。达成考证剂量试验概括从批次产品中选择1件产品进行考证剂量试验，在浙江佳翔辐照技术有限企业进行辐照。采纳确立的灭菌剂量进行辐射办理，所照剂量用该企业搁置的剂量计测定剂量，保证所测剂量落在规定剂量的土 10%以内。最高剂量不可以超出灭菌考证剂量的10%，假如计算的辐仍旧品的均匀剂量少于考证剂量的90%，则考证剂量实验要重做。假如样品汲取剂量比考证剂量的90%少，而且实行无菌实验时，察看到的结果是可接受的（1个无菌试验的阳性个数不超出2个，则考证能够接受），则考证明验不需重做。辐照办理试验剂量计布放应说明剂量计布放表示图，每一剂量计的测定数据，并经过数据判断所测计量能否在规定剂量的范围内。因为本企业辐照灭菌属拜托加工，该部分实验报告可由拜托加工企业出具。无菌查验剂量计测定结果判断合格后，对经辐照办理的样品进行无菌查验。试验依照：ISO11732:1998试验方法：1）样品测试接种均应按无菌操作法（在1级净化工作台内）进行。2）无菌翻开包装，用灭菌剪刀、镊子，将产品转移至SCDB培育基中。3）将样品培育基放28 - 32 C温箱中培育14天。4）察看有无细菌生长。结果：无菌试验查验结果试验样品试Z佥数目培育基彳否度（C）培育天数阳性数150mlSCDB 28-32结论：经测试，试验产品阳性菌数为,经考证剂量辐照后的无菌检查结果为。成立灭菌剂量假如实验使用整个产品，而且考证剂量是能够接受的，从表5中获取最靠近均匀初始污染菌的单元产品的灭菌剂量，该初始污染菌与单元产品的均匀初始污染菌相等或许跟大，读出达到10-6SAL所需的辐照剂量，该剂量定为生物型无菌护创膜产品惯例辐照灭菌的最低剂量，最高剂量往常依照最低剂量的两倍来制定。3辐射灭菌加工确认该部分用于确认在成立的灭菌剂量下，#产品辐照灭菌过程的有效性，确定辐射灭菌过程运转参数在规定的范围内，保证产品的灭菌质量。该部分应由拜托加工企业出具的辐照加工确认报告，应恪守GB11137-26医疗器材保健产品灭菌辐照灭菌的有关规定。4.考证总结报告书考证名称生物型无菌护创膜灭菌确认产品批号规格观察时间点留样日期观察日期报告人考证过程及记录:评论:建议:审查人（署名）：审查日期：同意人（署名）：同意日期：