抗核抗体基本概念和对应临床疾病.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,抗核抗体基本概念及临床检测,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第1页,传统定义,针对细胞核成份本身抗体总称。,广义定义,针对细胞内全部抗原成份本身抗体总称。对,ANA,了解不再局限于核成份，而是指核酸和核蛋白抗体总称,靶抗原存在于包含细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂结构等部位,抗核抗体定义,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第2页,ANA,可见于各种疾病，尤其是结缔组织疾病，常作为结缔组织病诊疗、病情判断和疗效观察指标,在非结缔组织病中也可出现阳性。,正常人中（尤其是老年人）也可出现阳性，但滴度低，而且常表现为,IgM,型,高滴度,ANA,则高度提醒本身免疫性疾病,当前，,ANA,检测已成为临床上一个极主要本身免疫病筛查试验。,ANA,检测临床意义,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第3页,系统性红斑狼疮,活动期,非活动期,药品诱导红斑狼疮,混合性结缔组织病（,MCTD,、,Sharp,综合征）,类风湿性关节炎,进行性系统性硬化症,多发性肌炎及皮肌炎,干燥综合征,慢性活动性肝炎,溃疡性结肠炎,其它风湿病,正常人,95,100,80,100,100,100,20,40,20,50,85,95,30,50,70,8030,40,26,5-10,ANA,检测临床意义,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第4页,ANA,试验室检测策略推荐,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第5页,ANA,间接免疫荧光法筛查试验,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第6页,间接免疫荧光法检测,ANA,基本原理,间接免疫荧光法,包被,HEp-2,细胞基质玻片,样本中,ANA-IgG,FITC,标识抗人,IgG,抗体,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第7页,抗原谱完整(细胞核、细胞浆中近百种本身抗原),人源细胞，无种属非特异荧光干扰,肿瘤细胞，易于培养及商品化生产,核质比大，可观察到各种不一样荧光核型,ANA,筛查经典和标准基质:,HEp2,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第8页,均质型,核点型,着丝点型,核仁型,Scl-70,粗颗粒型,细颗粒型,核膜型,.,核糖体,P,蛋白,线粒体型,高尔基体,溶酶体,肌动蛋白,波形蛋白,基于,Hep-2,细胞为基质,ANA,初筛试验,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第9页,ANA,间接免疫荧光法筛查试验实际价值,初步甄别本身免疫性疾病患者（阴阳性结果）,尽可能判断荧光核型（缩小靶抗原确认试验范围）,获取抗体滴度信息（判断病情进展、预后等）,考虑到荧光法筛查试验存在主观性强特点，所以应以一个客观和现实态度去面对筛查试验结果,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第10页,几个相对常见且主要荧光核型,均质型,核点型,着丝点型,核仁型,粗颗粒型,核膜型,.,核糖体,P,蛋白,线粒体型,肌动蛋白,常见且主要核型标准,核型表现相对经典,阳性率相对较高,靶抗原相对明确,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第11页,应重视,ANA,滴度检测,抗体滴度临床意义,1,、明确界定本身免疫性疾病患者；,2,、作为疾病进程、临床疗效和病情预后及转归等判断指标,当前国际主流,ANA,间接免疫荧光法检测系统广泛采取起始稀释度为,1:40,。即该检测系统正常参考范围为,1:40,。梯度稀释时稀释因子为,1:2,。,HOB,企业产品推荐按照,1:80,开展稀释。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第12页,荧光强弱及血清稀释度,荧光强弱判读,观察标本特异性荧光强度普通用“,+,”号表示。,“,”,为无或仅见极微弱荧光；,“,+,”为荧光较弱但清楚可见；,“,+,”为荧光明亮；,“,+,”为刺眼强荧光。,临床上依据特异性荧光强度达“,+,”以上判定为阳性,抗体梯度稀释,起始稀释：,1:80,梯度稀释（稀释因子,2,）,1:160,1:320,1:640,1:1280,1:2560,直至抗体转阴,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第13页,各稀释度反应性,抗体滴度,临床意义,1:80,1:640,阳性,+,1:80,阳性，需结合临床表现综合判断,阳性,+,1:160,阳性，提醒可能存在相关疾病,阳性,+,弱,+,1:320,明确阳性，提醒可能存在相关疾病,阳性,+,阳性,+,1:640,中等阳性，提醒可能存在相关疾病,阳性,+,阳性,+,1:1280,强阳性，高度提醒存在相关疾病,阳性,+,阳性,+,1:2560,极强阳性，高度提醒存在相关疾病。,ANA,荧光滴度判读举例,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第14页,HOB,企业间接免疫荧光法产品系列,产品系列,基质,检测项目,ANA,筛查,HEp-2,细胞,ANA各种不一样核型,dsDNA,绿蝇短膜虫,抗,dsDNA,抗体,AKA,大鼠食管,抗角蛋白抗体,ANCA,中性粒细胞,乙醇和甲醛固定,抗中性粒细胞胞浆抗体,组织器官,大鼠肝,/,肾,/,胃,ASMAPCAAMALKM-1LC-1,HEp-2,细胞产品系列（举例）,166,孔,1010,孔,812,孔,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第15页,ANA,靶抗原确认试验,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第16页,条带酶免分析法检测,ANA,基本原理,LIA,检测方法原理,底物,颜色反应,硝酸纤维膜,IgG,抗体,碱性磷酸酶标识抗人,IgG,抗体,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第17页,ANA,谱系列,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第18页,U1-nRNP,和,Sm,抗原,SLE:5-30%,SLE:15-40%,MCTD:95-100%,功效:参加,mRNA,前体剪切,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第19页,SS-A(Ro-60),Ro-52,和,SS-B,Anti-SS-A(60 kDa),干燥综合征,.:40-95%,SLE:20-60%,新生儿狼疮,:96%,Anti-SS-B,干燥综合征,.:40-95%,SLE:10-20%,新生儿狼疮,:78%,Anti-Ro-52(52 kDa),非特异,功效:调控,RNA,翻译,功效:,RNA,聚合酶,III,辅助蛋白,X,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第20页,Scl-70(DNA-,拓扑异构酶,I),功效:在,DNA,复制和转录过程中完成双链解螺旋,疾病:,硬化症:50%-75%,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第21页,Anti-Scl-70,特点,局限型和弥散型硬化症病中阳性率分别为,10%,和48%。,抗,Scl-70,抗体阳性患者通常病情发展快、预后差、多器官累及。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第22页,PM-Scl,抗原:几个多肽复合物(分子量间于20-100,kDa)，,主要靶抗原为,100 kDa,相关疾病:,硬化症:2%-5%肌炎:8%重合综合征:24%,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第23页,Jo-1,抗原:组氨酰,tRNA,合成酶(50,kDa),细胞浆中磷蛋白,相关疾病:,多肌炎/皮肌炎血清学标志，阳性率为25-35%，当伴有肺间质纤维化多肌炎,，,阳性率可高达70%。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第24页,着丝点,抗原：动粒中4种蛋白：,A(17 kDa),B(80 kDa),C(140 kDa),D,蛋白(50,kDa)。,着丝点蛋白,B,为主要靶抗原,(,与,IIF：100%),功效:分裂期纺垂体附着点,相关疾病:硬化症:18%局限型:80%-95%(,CREST,综合征),抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第25页,PCNA:,细胞增殖相关核抗原,I,型,抗原:,DNA,聚合酶,辅助蛋白,发挥控制细胞周期作用,相关疾病:,系统性红斑狼疮特异性抗体，但其发生率仅为,3%,。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第26页,染色体结构示意图,DNA,核小体,染色体,染色质,组蛋白,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第27页,dsDNA,抗原：双链,DNA，,天然,DNA(,脱氧核糖核酸骨架,),相关疾病：,dsDNA:,为,SLE,诊疗标准之一，阳性率为60-90%，不一样检测方法诊疗特异性差异较大。抗体滴度与疾病活动性、狼疮肾炎发病风险含有相关性。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第28页,组蛋白,抗原:,H1,H2A,H2B,H3,H4，H2A-H2B，H3-H4(,主要靶抗原为,H1,和,H2B),相关疾病:,药品诱导性,LE:100%(,抗组蛋白抗体是该病唯一标志性抗体,),各种结缔组织病：,SLE:30-80%,SSc:30%SS:10%,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第29页,核小体,抗原:组蛋白和,DNA,形成复合物,相关疾病:,SLE,：高特异性指标，阳性率为50-95%，特异性几乎100%,，,抗核小体抗体可独立,于,抗,dsDNA,抗体单独出现，因而抗核小体抗体与抗,dsDNA,抗体联合检测，可提升,SLE,血清学检出率。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第30页,40 S,亚基,60 S,亚基,P0,P1,P1,P2,P2,抗原:核糖体,60S,亚基中3种蛋白质:,P0,P1,P2.,具备相同碳端抗原位点,核糖体,P,蛋白,相关疾病:,SLE:,为,SLE,高特异性指标，阳性率为5-15%，,常见于神经狼疮。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第31页,AMA,与,AMA-,M2,靶抗原:线粒体亚结构上几个生化性质明确物质，可分为九种类型。其中最常见临床意义比较明确为,AMA M2，,由,AMA,不一样亚型临床相关疾病，因而对,AMA,阳性结果做深入分型试验非常主要。,主要相关疾病:,PBC:（,高滴度,AMA M2）85%-95%。,在其它慢性肝脏疾病（30%）和进行性系统性硬化症（7-25%）中也可检出,AMA M2，,但滴度较低。,抗核抗体基本概念和对应临床疾病,第32页,