欧洲药典重金属检测.doc

欧洲药典 7.0
2.4.8 重金属
下述方法需要使用硫代乙酰胺试剂。作为另一种选择，硫化钠溶液（0.1ml）也常常适用。由于各论中所述测试是使用硫代乙酰胺试剂研发出来的，如需用硫化钠溶液替代，需要包括方法A、方法B和方法H监测溶液，由测试规定的待测物的量进行配制，其已经加入了制备对照溶液规定量的铅标准溶液。监测溶液至少要与对照溶液一样深，否则测试是无效的。
方法A
供试溶液：12ml待测物水溶液。
对照溶液（标准）：10ml规定的标准铅溶液（1ppm or 2ppm Pb）和2ml的待测液混合。
空白溶液：10ml的水和2ml的测试溶液混合。
向每种溶液中，加入2ml pH为3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。2分钟后目测。
系统适用性：相较于空白溶液，对照溶液呈浅棕色
结果：供试溶液的棕色不深于对照溶液。
若结果难以判断，进行膜过滤（孔径0.45μm）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
方法B
供试溶液：用含最少量水的溶剂（例如含15％水的二氧杂环乙烷或含15％水的丙酮）溶解成12ml待测液。
对照溶液（标准）：10ml规定的铅标准溶液（1ppm or 2ppm Pb），加入2ml的待测液。用待测物所用溶剂稀释100ppm Pb的铅标准溶液至1或2ppm Pb。
空白溶液：10ml待测物所用溶剂和2ml的待测溶液混合。
向每种溶液中，加入2ml pH为3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。2分钟后目测。
系统适用性：相较于空白溶液，对照溶液呈浅棕色
结果：供试溶液的棕色不深于对照溶液。
若结果难以判断，进行膜过滤（孔径0.45μm）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
方法C
供试溶液：规定量（不超过2g）的待测物质置于坩埚内，加4ml 250g/l硫酸镁的稀硫酸溶液。玻璃棒搅拌混和，小心加热。若混合物仍为液体，则在水浴中蒸发使其干燥。连续加热灼烧，灼烧温度不超过800℃，直到获得白色或灰白色的残渣。取出，冷却后加数滴稀硫酸润湿残渣。再次蒸发、灼烧并冷却。灼烧的总时间不能超过2小时。制取2份残渣，分别加入5ml稀盐酸，0.1ml的酚酞试液，然后滴加氨水，直到出现粉红色。冷却，滴加冰醋酸至颜色消失，再多加0.5ml冰醋酸。如有需要进行过滤，并冲洗过滤器。加水稀释至20ml。
对照溶液（标准）：按供试溶液的制备方法，用规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）代替待测物质。取10ml的该溶液，加2ml待测液。
监测溶液：按供试溶液的制备方法，向待测物质中加入配制对照溶液规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）。取10ml的该溶液，加2ml待测液。
空白溶液：10ml的水和2ml待测液混合。
向12ml每种溶液中，加入2ml pH为3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。2分钟后目测。
系统适用性：
- 相较于空白溶液，对照溶液呈浅棕色，
- 监测溶液至少要同对照溶液颜色深度相同。
结果：供试溶液的棕色不深于对照溶液。
若结果难以判断，进行膜过滤（孔径0.45μm）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
方法D
供试溶液：在坩埚内，充分的混合规定量的待测物质和0.5克的氧化镁，灼烧退去暗红色，直至出现同质的白色或灰白色物质。如果灼烧30分钟后仍有颜色，取出冷却，用玻璃棒混和，重复进行灼烧。如有必要，重复此项操作。在800℃加热约1小时。分别制备两份残渣，各加5mL等体积的盐酸和水的混和溶液。加0.1ml酚酞试液，然后滴加浓氨水直至出现粉红色。冷却，加冰醋酸直到溶液褪去颜色，再多加0.5ml冰醋酸。如有必要，过滤并冲洗过滤器。加水稀释至20ml。
对照溶液（标准）：按供试溶液的制备方法，用规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）代替待测物质并在100-105℃烘箱中干燥。取10ml的该溶液，加2ml待测液。
监测溶液：按供试溶液的制备方法，向待测物质中加入配制对照溶液规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）并在100-105℃烘箱中干燥。取10ml的该溶液，加2ml待测液。
空白溶液：10ml的水和2ml待测液混合。
向12ml每种溶液中，加入2ml pH为3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。2分钟后目测。
系统适用性：
- 相较于空白溶液，对照溶液呈浅棕色，
- 监测溶液至少要同对照溶液颜色深度相同。
结果：供试溶液的棕色不深于对照溶液。
若结果难以判断，进行膜过滤（孔径0.45μm）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
方法E
供试溶液：溶解规定量的待测物质于30ml或规定量的水中。
对照溶液（标准）：除有另外的规定，稀释规定量的铅标准溶液（1ppm Pb）至与供试溶液相同的体积。
将供试溶液注入注射器，将注射器放置好，然后均匀用力压活塞，使供试溶液全部通过过滤器。在打开载体和移开预滤器时，检查膜过滤器是否被杂质污染。如不是需要替换过滤器的情况，发现杂质，则在相同条件下重复以上操作。
向预过滤或规定量的预过滤溶液中加入2ml pH3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合并静置10分钟。再按上述方法进行过滤，但是要改变过滤顺序，使过滤液先经过滤膜再经过预滤装置（图2.4.8.-1）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。过滤完成后，打开载体，移除过滤器，干燥滤纸。
用同样的方法处理对照溶液。
结果：供试溶液的铅斑颜色不得比标准铅斑深。
方法F
供试溶液：将规定量或体积的待测物放入洁净干燥的100ml长颈烧瓶中（若反应产生过多的泡沫液可选用300ml体积）。45°角夹住烧瓶。如果待测物是固体，加入足量8ml硫酸和10ml硝酸的混合物来彻底湿润待测物，如果待测物是液体，加入少量8ml硫酸和10ml硝酸的混合物。轻微加热直至反应开始，使反应逐渐减弱并加入额外分量的酸混合物，每次加入后进行加热，直到加入了18ml酸混合物。增加热量使其稍微沸腾，直到溶液颜色变深。冷却，加入2ml硝酸，并再次加热直到溶液变深。继续加热，随后加入硝酸直至颜色不能变得更深，然后剧烈加热直到产生密集的白色烟雾。冷却，小心加入5ml水，轻微煮沸直到产生密集的白色烟雾且继续加热使其体积减至2-3ml。冷却，小心加入5ml水，观察溶液的颜色。如果为黄色，小心加入1ml浓过氧化氢溶液并再次蒸发直到产生密集的白色烟雾且体积减至2-3ml。如果溶液仍显黄色，重复加入5ml水和1ml浓过氧化氢溶液直到溶液无色。冷却，小心用水稀释并冲洗至50ml比色管中，保证总体积不超过25ml。使用浓氨水（如有需要，依照要达到的特定范围，可使用稀氨水）调整溶液的pH至3.0~4.0，使用短距pH试纸作为外指示剂。加入2ml pH为3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。用水稀释至50ml。
对照溶液（标准）：使用规定体积的铅标准溶液（10ppm Pb）在同一时间用同一方法进行配制除。
监测溶液：按供试溶液的方法进行配制，加入配制对照溶液所需体积的铅标准溶液（10ppm Pb）。
空白溶液：按供试溶液的方法进行配制，略去待测物。
在白色背景下垂直目测。2分钟后，供试溶液的棕色不得比对照溶液深。
系统适用性：
- 相较于空白溶液，对照溶液呈浅棕色，
- 监测溶液至少要同对照溶液颜色深度相同。
结果：供试溶液的棕色不深于对照溶液。
若结果难以判断，进行膜过滤（孔径0.45μm）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
方法G
注意：使用高压消解器时，必须遵循安全注意事项和厂家提供的操作说明书。消化周期必须详尽取决于微波炉的类型（如能控微波炉、温控微波炉或高压炉）。周期必须遵循厂家的说明书。若得到澄明的液体，说明此消解周期适宜。
供试溶液：规定量的待测物（不超过0.5g）放置于合适洁净的烧杯中。加入过量的2.7ml硫酸，3.3ml硝酸和2.0ml浓过氧化氢，使用磁力搅拌器。在加入下一种试剂前，要使物质与溶剂进行反应。将混合物转移至耐高压消解器（含氟聚合物或石英玻璃）。
对照溶液（标准）：按供试溶液的制备方法，用规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）代替待测物质。
监测溶液：按供试溶液的制备方法，向待测物质中加入配制对照溶液规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）。
空白溶液：按供试溶液的方法进行配制，略去待测物质。
关闭消解器放置在实验室微波炉中。消解使用两种分离的合适程序序列。程序设计成几步来控制反应，根据微波炉的不同类型进行压力、温度或能量的监测。第一程序完成后，等消解器冷却了再打开。每个容器内加入2.0ml浓过氧化氢溶液，然后开始第二程序。第二程序完成后，等消解器冷却了再打开。如有需要，重复添加浓过氧化氢溶液和第二消解程序来得到澄明的溶液。
冷却，小心用水稀释并冲洗至烧瓶中，保证总体积不超过25ml。
使用浓氨水（如有需要，依照要达到的特定范围，可使用稀氨水）调整溶液的pH至3.0~4.0，使用短距pH试纸作为外指示剂。为了避免过热，使用冰浴和磁力搅拌。用水稀释至40ml，混合均匀。加入2ml pH为3.5的缓冲溶液。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。用水稀释至50ml，混合并放置2分钟。
进行膜过滤（孔径3μm；见图2.4.8-1，无预滤器）。使用中等强度且恒定的压力缓慢且均匀地过滤。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
系统适用性：
- 相较于空白溶液，对照溶液产生的斑点呈棕色，
- 监测溶液至少要同对照溶液斑点颜色深度相同。
结果：供试溶液产生的斑点棕色不深于对照溶液。

方法H
供试溶液：将规定量的供试品溶解于20ml溶剂或规定的溶剂混合物中。
对照溶液：稀释规定量的铅标准溶液（10ppm Pb）于20ml溶剂或规定的溶剂混合物中。
空白溶液：20ml溶剂或规定的溶剂混合物。
向每种溶液中加入2ml pH3.5的缓冲溶液（某些情况下会出现沉淀作用，指定的专论会建议以一定量的给定溶剂进行再溶解）。混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合并静置2分钟。进行膜过滤（孔径0.45μm）。比较不同溶液在过滤器上产生的斑点。
系统适用性：相较于空白溶液，对照溶液产生的斑点呈棕黑色。
结果：供试溶液产生的棕黑色斑点不深于对照溶液。

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图8-1重金属检查装置（尺寸的单位为mm）