细菌标本的采集和运送.doc

临床细菌检验标本采集指南

1
．所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作，防止污染原则下认真进行。

2
．已采集原始标本都应置于、密封的容器中运送，含有明显区分各部门文字标
志。

3
．带针头的注射器运送标本到实验室，用无菌试管或防护装置套住注射针，再
置于防漏塑料袋中运送。

4
．避免来自寄生菌的污染，应当保证每份标本代表感染过程。健康宿主在感染
的许多部位也可出现的正常菌丛，主要来自皮肤、黏膜和呼吸道，它若过早、过
度生长，掩蔽了真正的病原菌，干扰培养结果解释。

5
．采集足够量标本，材料不足可能产生假阴性结果。

6

．已采集标本，常规性细菌学检验，不超过
1 h
送交实验室，延迟运送影响病原
菌检出。

血液和骨髓标本的采集

1
．
菌血症患者多数为间歇性，
病原菌是周期性出现在血液中，
随之无细菌时期。
不管临床症状经历的严重程度，
但患者血液中病原菌浓度水平相当低，
据此要求
临床多次采集血液标本进行培养，
但
24 h
内一般不超过
3
次，
成人每次血量
10 -20 
ml
可提高阳性检出率。

2
．血标本接种到培养瓶后，轻轻混匀以防血液凝固。立即送检，如不能立即送
检，需室温保存或置
35
℃～
37
℃孵箱中，切勿冷藏。

3
．
一般患者出现以下一种体症时可作为采血的重要指征：
发热
(
≥
38
℃
)
或低温
(
≤
36
℃
)
，寒战，白细胞增多，皮肤粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血压降低，
CRP
升高及呼吸快，特殊患者
(
如血液病
)
出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具
备上述几种体症的临床可疑菌血症应采集血培养。
新生儿菌血症，
应该增加尿液
和脑脊液培养。
对入院危重感染患者在未进行系统性抗菌药物治疗之前，
应及时
采集血培养。

4
．采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，在
24h
内采集
2
～
3
份血培养
(
一
次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养
)
。对间歇性寒战或发热应在
寒战或体温高峰到来之前
0.5
～
1h
采血液，或于寒战或发烧后
lh
进行。

5
．不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集
2
～
3
份血标本，
24
～
36 h
后估计体温升高之前
(
通常在下午
)
再采集
2
份以上。

6
．急性脑膜炎炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎和肾孟肾炎发热患者，应在抗
生素治疗或更换前，从不同部位采集血液标本，做
2
次血液培养
(
应在抗生素治疗
前完成
) 
。

7
．疑似心内膜炎患者：急性病例，在抗生素治疗或改变前
1 - 2h 
，从各个不同
部位采血
3
次做血液培养。
亚急性病例，
第一天
24 h
内，
相隔
1 h
连续采集
3
次血标
本培养，
若
24 -48 h
全部阴性，
再采集
2 -3
次血标本培养。
若已经抗生素治疗患者，
连续
3
天，每天取
2
次血液标本。

8
．皮肤消毒程序：严格执行以下三步法：

1
）
70
％酒精擦拭静脉穿刺部位待
30s
以上。

2)1
％～
2
％碘酊作用
30s
或
10
％碘伏
60s
，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域
直径达
3cm
以上。

3)70
％酒精脱碘。对碘过敏的患者，用
70
％酒精消毒
60s
，待酒精挥发干燥后采
血。

9
．培养瓶消毒程序

1)70
％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用
60s
。

2)
用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精，然后注入血液。如果是自
配带塞子的三角瓶，此步骤可免去。

10
．静脉穿刺和培养瓶接种程序

1)
在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿
刺点。

2)
用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头
(
如果行第二次穿刺，应换针头
)
直接注入
血培养瓶，
如果是自配带塞子的三角瓶，
严格无菌操作将血液注入三角瓶内，
应
烧瓶口，避免采血针头与三角瓶瓶口和瓶塞接触。

11
．采血量：成人采血量是
5
～
l0ml
，儿童
l
～
5ml,
骨髓
l
～
2ml
。血液和肉汤之比
为
1
：
5
～
l
：
10
为宜。

[
附
]
血管内导管尖端培养

1.
用酒精清洁导管周围皮肤。

2. 
无菌手续移动导管，剪取尖端末段
5 cm 
，直接置入无菌试管中。

3. 
立即运送到细菌实验室，防止干燥，常规培养不超过
15min ,4 
℃保存不越过
2 
h
。

4
．
只有当做血液培养的同时，
做血管内导管尖端培养，
确定患者菌血症的来源。
或是抽取新鲜脓性标本培养，
确定软组织相关感染，
并做在附近有插入导管的尖
端段培养。

脑脊液标本的采集

CSF
采集后，置于无菌带塞试管中，
15min
内运送实验室，绝不可冷藏。一般细
菌培养检验最小量≥
1ml
，真菌≥
2ml
。

尿液标本的采集

1
．有下列情况之一者，应进行尿培养

(1)
有典型的尿路感染症状；

(2)
肉眼脓尿或血尿；

(3)
尿常规：白细胞和／或亚硝酸盐阳性；

(4)
不明原因的发热，无其他局部症状；

(5)
留置导尿管的病人出现发热；

(6)
膀胱排空功能受损；

(7)
泌尿系统疾病手术前。

2
．注意尽量采集晨尿标本，睡前少饮水，以免稀释尿液，应保证尿液在膀胱内
停留
4h
以上。

3
．中段尿采集

清洁外阴反尿道口周围，自然排尿，

让尿流不间停，截留中段
尿，置于无菌容器中，不少于
1 ml
。

4
．直接插导管采集尿标本

一般插入导管后。先让尿流弃
15 ml 
再留取培养标
本。
尽情不采用导管采集标本，
极容易将尿道细菌丛进入膀胱，
增加医源性感染
危险。

5
．滞留导管集尿

用
70% 
酒精消毒导管口，
用针筒抽取
5 - 10 ml
尿，置于无菌
容器中送实验室。
操作时注意防止混入消毒剂。
不能采集收集袋中的尿液。
滞留
导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。

6
．标本采集后，常规≤
2 h 
送交实验室。

下呼吸道标本的采集

有以下任何一种情况时建议采集标本进行培养：
(1)
咳嗽；
(2)
咯血；
(3)
呼吸困难；
(4)
发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或
CRP
明显增高情况者。

1
．自然咳痰法

以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口
腔和牙齿，
有假牙者应取下假牙。
尽可能在用抗菌药物之前采集标本。
用力咳出
呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖
的容器中，
标本量应≥
lml
。
咳痰困难者可用雾化吸入加温至
45
℃的
100g
／
L NaCl
水溶液，使痰液易于排出。标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存≤
2h
。

2
．支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针
穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，
但必须注意
采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。

3
．小儿取痰法

用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽
时，
可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。
幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，
以诱发咳痰。

粪便标本的采集

当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养：
(1)
粪
便涂片镜检白细胞
>5
／
HP
；
2)
重症腹泻；
(3)
体温大于
38.5
℃；
(4)
血便；
(5)
便中
有脓液；
(6)
未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者；
(7)
来自疫区的患者。

1
．
标本采集尽可能在发病早期和使用抗菌药物治疗之前。
在不同的时间采集
2
～
3
个标本可以提高致病菌的分离率。

2
．自然排便采集粪便标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便
1
～
3g
。
液体粪便则取絮状物，一般取
l
～
3ml
，直接装入粪便容器中送检。

3
．直肠拭子采集粪便标本，适于排便困难患者或婴幼儿。可将肛门周围洗净，
用无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门，成人约
4
～
5cm
，儿童约
2
～
3cm
，在肛门括
约肌处柔和地旋转拭子，可在拭子上明显见到粪便。

4
．粪便标本置于
清
洁
、干燥广口容器中
(
不宜使用纸盒
)
尽快送检，室温条件下
不能超过
2h
。

眼、耳、鼻、喉
标
本的
采集

1.
眼结膜标本

预先沾湿拭子，
在结膜上滚动采集标本。
标本在
15 min 
内送达实
验室。

2. 
眼角膜标本采集

在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，在接种在
培养基平饭上培养和涂片。

眼部感染所获取的标本量很少，
建议医师取样后直接种在培养基平板上培养和涂
片。

3.
口腔咽部标本

先用一个试子揩去溃疡或创面浅表分泌物，
第二个试子采集溃
疡边缘或底部，常规培养≤
2 h 
运送实验室。

4. 
患有外耳炎患者，需要深部耳拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂
窝织炎。

5. 
鼻标本留取

用一根无菌棉拭子，伸进一侧鼻孔约
2.5 cm 
，与鼻黏膜接触，
轻轻地旋转拭子蘸取黏膜上分泌物，
缓慢抽出，
置于运送培养基或将拭子直接送
检。

脓液标本的采集
(
病灶分泌物
) 
1
．开放脓肿用无菌生理盐水或
70% 
乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基底
部或边缘部，采集二个拭子。置无菌容器中送检。

2
．闭合性脓肿用注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。

无菌体液标本的采集

1
．无菌体液是指除血液、骨髓和脑脊液外的羊膜液、后穹隆穿刺液、透析液、
心包液、腹膜穿刺液和滑膜液。

2
．当留取标本时，防止无菌体液凝固，在无菌容器内预先加入灭菌肝素
0.5 
mg( 
可抗凝
5 ml 
标本
)
再注入各种穿刺液，轻轻混合。

生殖系统标本的采集

阴
道、子
宫颈
凹陷、子
宫
内膜、生殖道
创伤
、前庭大腺、羊水膜及前列腺等分泌
物
应
由医
师
采集，
收集于无菌
试
管内送
检
。
淋病奈瑟菌
检查时
，
不
论
男女尿道及
子
宫颈
均需用拭子插入尿道及子
宫颈
3 
cm
深取
样
送
检
，
要避免受
阴
道分泌物
污
染
拭子。

眼、耳、鼻、喉

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