网络药理学结合巨噬细胞实验分析薏苡仁抗炎机制_刘杰.pdf

doi:10 3969/j issn 1002 7386 2023 02 004论著网络药理学结合巨噬细胞实验分析薏苡仁抗炎机制刘杰刘振强包蕾项目来源:黑龙江省自然科学基金项目(编号:H2018050);黑龙江中医药大学校基金(编号:201831，2019MS40)作者单位:150040哈尔滨市，黑龙江中医药大学通讯作者:包蕾E-mail:154329396 qq com【摘要】目的运用网络药理学相关方法并结合体外巨噬细胞实验，探讨薏苡仁抗炎的潜在作用机制。方法通过 TCMSP 数据库筛选薏苡仁的有效活性成分，PharmMapper 平台获得对应靶点，Uniprot 数据库获取靶点对应基因。通过 DRUGBANK、TTD、OMIM 数据库获取炎性的相关靶点。Venny 2 1 0 在线分析工具获取潜在作用靶点。采用Cytoscape 3 7 1 软件构建“薏苡仁-活性成分-潜在作用靶点”网络，利用 STRING 数据库获得薏苡仁抗炎 PPI 网络，DAVID 平台进行 GO 分析和 KEGG 信号通路富集分析。最后选择薏苡仁主要活性成分，验证其对脂多糖诱导的小鼠RAW2647 巨噬细胞炎性模型炎性因子 TNF-和 INF-的影响。结果共筛选出了 9 个活性成分，50 个潜在作用靶点，其中主要作用靶点为 SRC、CASP3、MAPK1 等。GO 和 KEGG 分析发现薏苡仁抗炎作用主要是通过 VEGF 信号通路、癌症中心碳代谢、花生四烯酸代谢等多途径发挥协同调节作用。体外巨噬细胞炎性实验表明-谷甾醇可显著降低由脂多糖诱导的巨噬细胞炎症模型炎性因子 TNF-和 INF-的表达，且抑制作用呈剂量依赖性。结论薏苡仁中的多种成分作用于多个靶点，通过多条通路的调节实现其抗炎作用。【关键词】薏苡仁;抗炎;网络药理学;巨噬细胞【中图分类号】R 285【文献标识码】A【文章编号】1002 7386(2023)02 0180 05Study on anti-inflammatory mechanism of Semen Coicis by network pharmacology combined with macrophageexperimentLIU Jie，LIU Zhenqiang，BAO Lei Heilongjiang University of Chinese Medicine，Heilongjiang，Harbin 150040，China【Abstract】ObjectiveTo explore the potential anti-inflammatory action mechanism of Semen Coicis by applying thenetwork pharmacology-related method and macrophage experiments MethodsThe active composition(AC)of Semen Coiciswas screened out from the traditional Chinese medicine(TCM)system pharmacology database and analysis platform(TCMSP);PharmMapper platform and Uniprot database were respectively applied to acquire the corresponding targets andgenes of protein targets DRUGBANK，Therapeutic Target Database(TTD)，Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)database were applied to acquire the targets of inflammation The potential targets were acquired via online tool Venny 2 1 0The network of“Semen Coicis-AC-Potential Targets of Action”was set up by using Cytoscape 3 7 1 software;the protein-protein interaction(PPI)network for Semen Coicis anti inflammation was acquired by STRING database;the gene ontology(GO)and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)signal pathway enrichment analysis were performed by theplatform for Annotation，Visualization，and Integrated Discovery(DAVID)The main AC of Semen Coicis was selected toverify the effects on the tumor necrosis factor-(TNF-)and interferon-(INF-)in the lipopolysaccharide(LPS)-inducedRAW264 7 macrophage inflammation model of mice ResultsA total of 9 AC and 50 potential targets of actions wereacquired，and main targets were steroid receptor coactivator(SRC)，caspase-3(CASP3)，mitogen-activated protein kinase 1(MAPK1)，etc GO and KEGG analysis showed that the anti-inflammatory effect of Semen Coicis mainly played the regulatoryrole through the vascular endothelial growth factor(VEGF)，signaling pathway，central carbon metabolism in cancer，arachidonic acid metabolism and similar signaling pathways，etc In vitro macrophage inflammation experiments showed that-sitosterol could significantly reduce the expression of TNF-and INF-in the LPS-induced 7 macrophage inflammationmodel，and the inhibitory effect was dose dependent ConclusionMultiple targets of Semen Coicis act on multiple targets andachieve its anti-inflammatory effect by regulating multiple pathway【Key words】Semen Coicis;anti-inflammatory;network pharmacology;macrophages炎性反应是机体内一种重要且复杂的生物过程，它可以保护机体免受感染、损伤或损伤造成的潜在伤害。有效的炎性反应依赖于免疫系统、血管系统和组织之间细胞和分子复杂的相互作用1。但是当细胞和分子之间的稳态被打破，会引发过度的炎性反应，最终导致免疫介导的炎症性疾病，包括类风湿性关节炎、炎症性肠病、牙周炎、血管炎等多种疾病2 4。持续的慢性低水平炎性反应还会导致冠心病、代谢综合征、糖尿病肾病5，6，甚至炎症也越来越多地被认为是导致癌症和精神疾病的诱因7。因此，有效的降低过度炎性反应至关重要。薏苡仁为禾本科植物薏苡 Coixlacryma-jobi L var ma-yuen(Roman)Stapf 的干燥成081河北医药 2023 年 1 月 第 45 卷 第 2 期Hebei Medical Journal，2023，Vol 45 Jan No.2熟种仁。性甘、淡、凉，归脾、胃、肺经。化学成分包括脂肪油、薏苡仁酯、薏苡仁内酯、薏苡仁多糖等。主要应用于水肿、脚气浮肿、小便不利、脾虚泄泻、湿痹拘挛、肺痈、肠痈、赘疣等多种疾病8。目前，临床上关于薏苡仁治疗风湿病、皮肤病和肾病等炎症相关的疾病有很多报道，疗效显著9。但是关于薏苡仁抗炎的主要成分、相关靶点及主要作用机制仍不明确。因此本研究利用网络药理学10 探究薏苡仁抗炎的主要活性成分、关键靶点及重要通路，并结合体外脂多糖(LPS)诱导的小鼠 RAW264 7 巨噬细胞炎症模型实验验证其主要活性成分对炎性因子 TNF-和 INF-的影响，为薏苡仁应用于炎症相关疾病的治疗提供参考依据。1材料与方法1 1细胞小鼠 RAW264 7 巨噬细胞购于美国菌种保藏中心。12主要试剂DMEM 培养基、青-链霉素、胰蛋白酶购于 美 国 Gibco 公 司，胎 牛 血 清 购 于 美 国 ClarkBioscience 公司，LPS、-谷甾醇标准品、四甲基偶氮唑蓝 MTT 购于美国 Sigma 公司，二甲基亚砜(DMSO)购于北京索莱宝科技有限公司，TNF-、IFN-酶联免疫检测试剂盒(小鼠)购于南京建成生物工程研究所有限公司。1 3仪器设备酶联免疫检测仪购于瑞士 Tecan 公司，CO2培养箱、台式高速离心机购于赛默飞世尔科技(中国)有限公司，倒置显微镜购于德国徕卡公司，高压蒸汽灭菌锅购于上海申安医疗器械厂。1 4方法1 4 1薏苡仁活性成分筛选及靶点预测:利用TCMSP(http:/tcmspw com/tcmsp php)平台11 获得薏苡仁的化学成分，选择 OB30%且 DL0 18 的成分作为候选活性成分，并获得候选活性成分的 mol2 格式结构图，上传至 PharmMapper(http:/www lilab-ecust cn/pharmmapper/)服务器，获取前 300 个靶点。将靶点蛋白导入 UniProt(https:/www uniprot org/)数据库，获取靶点蛋白对应基因名。1 4 2免疫疾病相关靶点预测:在 OMIM(https:/www omim org/)数 据 库、GeneCards(https:/wwwgenecards org/)数据库、DRUGBANK(https:/wwwdrugbank ca/)数据库中获取抗炎相关靶点。1 4 3获取交集基因:通过 Venny 2 1 0 在线分析工具获取潜在作用靶点。1 4 4薏苡仁-化学成分-潜在作用靶点网络构建:将“143”中获取的潜在作用靶点利用 Cytoscape 3 7 1软件构建“薏苡仁-活性成分-潜在靶点”相互作用网络。1 4 5关键靶点的互作:将“1 4 3”中潜在作用靶点导入 String(https:/string-db org/)数据库，Organism设定为“Homo sapiens”，“highest confidence”0 9，根据 Degree 值排序，获得 Degree 值前十的靶点。1 4 6薏苡仁抗炎功能 GO 分析:通过 DAVID(https/david ncifcrf gov/)数据库对薏苡仁抗炎功能的潜在作用靶点进行 GO 富集分析，限定“OFFICIAL_GENE_SYMBOL”，选取 P 0 05 的条目来评估生物过程(biologicalprocess，BP)，细 胞 组 分(cellularcomponent，CC)和分子功能(molecular function，MF)三个模块，并根据基因数排序，分别选取三个模块的前10 条 富 集 结 果，导 入 微 生 信(http:/wwwbioinformatics com cn/)平台进行可视化分析。14 7薏苡仁增强免疫功能代谢通路富集分析:应用DAVID 平台对潜在作用靶点进行 KEGG 代谢通路富集分析，限定“OFFICIAL_GENE_SYMBOL”，根据富集分析的结果明确潜在作用靶点参与的代谢通路，进而明确该药治疗某种疾病的主要代谢通路，限定 P 0 05，根据通路中所含的基因数进行排序，选取前 15条通路导入微生信平台进行可视化分析。1 5实验验证药物配制:将-谷甾醇溶于 DMSO后，用完全培养基(含 10%胎牛血清的 DMEM 培养液)配制成 200 mol/L 的-谷甾醇母液，0 22 m 滤膜过滤除菌后，用完全培养基稀释成 20、2、0 2、0 02、0 002 mol/L 的溶液。1 5 1细胞炎症模型:采用 LPS(100 ng/ml)诱导RAW264 7 细胞。取适当稀释的对数生长期细胞2 ml，加入 6 孔板，于 5%CO2培养箱培养 24 h。吸出孔内培养液，模型组加入 2 ml 完全培养基配制的100 ng/ml LPS 溶液，LPS 终浓度 100 ng/ml;给药组加入1 mL 不同浓度的-谷甾醇溶液和1 ml 完全培养基配制的200 ng/ml LPS 溶液，-谷甾醇溶液终浓度分别为 10、1、0 1、0 01、0 001 mol/L，LPS 终 浓 度100 ng/ml;空白组为与给药组含相同量 DMSO 的完全培养 基。重 复 3 个 孔，培 养 24 h 后，收 集 上 清，12 000 r/min离心，取上清液用于炎性因子的检测。1 5 2炎性因子检测:采用 ELISA 法检测 RAW264 7细胞 TNF-和 INF-的浓度，具体检测步骤参照说明书。450 nm 下测定 OD 值，分别根据标准品浓度及各孔 OD 值绘制标准曲线回归方程，R20 99 可用于下一步。将样本所测得 OD 值带入方程，计算待测样本中 TNF-和 INF-的浓度。1 6统计学分析应用 SPSS 24 0 统计软件，计量资181河北医药 2023 年 1 月 第 45 卷 第 2 期Hebei Medical Journal，2023，Vol 45 Jan No.2料以 珋x s 表示，采用 t 检验，P 0 05 为差异有统计学意义。2结果2 1活性成分筛选及靶点预测TCMSP 数据库获得薏苡仁化学成分 38 个，其中 OB30%且 DL0 18的 10 个有效活性成分，其中薏苡仁内酯未找到其分子式，因此舍弃。最终获得 9 个有效活性成分，352 个靶点。见表 1。表 1薏苡仁化学成分CAS 号中文名分子名分子式474-40-8柠檬二烯醇Sitosterol alpha1C30H50O544-35-4亚油酸乙酯MandenolC20H36O27683-64-9角鲨烯(6Z，10E，14E，18E)-2，6，10，15，19，23-hexamethyltetracosa-2，6，10，14，18，22-hexaeneC30H50111-03-5甘油单油酸酯(2R)-2，3-dihydroxypropyl(Z)-octadec-9-enoateC21H40O483-46-5-谷甾醇sitosterolC29H50O83-48-7植物甾醇StigmasterolC29H48O3443-84-32-十八烯酸单甘油酯2-MonooleinC21H40O457-88-5胆固醇CLRC27H46O537-40-6甘油三亚油酸酯Glyceryl trilinoleateC57H98O62 2免 疫 疾 病 相 关 靶 点 的 筛 选 和 预 测在DRUGBANK、TTD、OMIM数 据 库 输 入 关 键 词“Inflammation”，分别获得相关靶点290、158、1 083 个，去除重复项后共获得靶点 840 个。2 3获取交集基因通过 Venny 2 1 0 在线分析工具对 352 个活性成分靶点和 840 个疾病靶点进行对比分析，获得 50 个潜在作用靶点。2 4薏苡仁-活性成分-潜在作用靶点网络构建将活性成分及其对应潜在作用靶点信息导入 Cytoscape3 7 1 软件构建“薏苡仁-活性成分-潜在靶点”相互作用网络。共 60 个节点，其中药材节点 1 个，活性成分节点 9 个，潜在靶点节点 50 个，共计 365 条连线。见图 1。2 5薏苡仁抗炎潜在靶点 PPI 网络将 50 个潜在作用靶点输入 String 数据库，构建相互作用网络模型。筛选整理 Degree 值前 10 的靶点包括 SRC、CASP3、MAPK1、PPARG 等，说明这些靶点可能在薏苡仁抗炎中起到了关键作用。见图 2，表 2。2 6GO 富集分析基于 DAVID 数据库对潜在靶点图 1薏苡仁-活性成分-潜在靶点相互作用网络图;薏苡仁;9 个活性成分;50 个潜在靶点进行 GO 分析，设定 P 0 05，得到生物过程(BP，biological process)条目 134 个，细胞组分(CC，cellularcomponent)条 目 18 个，分 子 功 能(MF，molecularfunction)条目 55 个，薏苡仁参与抗炎反应的生物学过程主要包括信号转导(signal transduction)、蛋白水解图 2薏苡仁抗炎 PPI 网络图281河北医药 2023 年 1 月 第 45 卷 第 2 期Hebei Medical Journal，2023，Vol 45 Jan No.2表 2薏苡仁抗炎关键靶点编号基因名蛋白名Degree 值1SRCProto-oncogene tyrosine-protein kinase Src262CASP3Caspase-3173MAPK1Mitogen-activated protein kinase 1164PPARGPeroxisome proliferator-activated receptor gamma125STAT1Signal transducer and activator of transcription 1-alpha/beta126NOS3Nitric oxide synthase，endothelial117LCKTyrosine-protein kinase Lck108PPARAPeroxisome proliferator-activated receptor alpha109NOS2Nitric oxide synthase，inducible910KITMast/stem cell growth factor receptor Kit9(proteolysis)、炎性反应(inflammatory response)、凋亡过程(apoptotic process)等，参与抗炎反应的分子功能主要包括蛋白质结合(protein binding)、ATP 结合(ATP binding)、锌离子结合(zinc ion binding)、激酶活性(kinase activity)等。分别选取 3 个模块的前 10 条富集结果，导入微生信平台进行可视化分析。见图 3。图 3薏苡仁抗炎靶点 GO 分析2 7KEGG 富集分析通过 DAVID 数据库对潜在作用靶点进行 KEGG 分析，限定 P 0 05，根据通路中所包含的基因数进行排序，选取前 15 条通路导入微生信平台进行可视化分析。薏苡仁抗炎的主要通路包括VEGF 信号通路(VEGF signaling pathway)、癌症中心碳代谢(Central carbon metabolism in cancer)、花生四烯酸代谢(Arachidonic acid metabolism)、T 细胞受体信号通路(T cell receptor signaling pathway)等。见图 4。28-谷甾醇抗炎效果验证LPS 处理巨噬细胞组的 INF-和 TNF-的表达量较高，分别为 207 62 和1 672 63 ng/L。与模型组相比，不同浓度-谷甾醇(10、1、0 1、0 01、0 001 mol/L)均有不同程度降低炎性因子的效果，且随着浓度的升高抑制效果增加，在10 mol/L 时抑制作用最明显，TNF-和 INF-的含量分别为 1 022 35 ng/L、151 33 ng/L。见表 3。图 4薏苡仁抗炎靶点 KEGG 富集分析表 3炎性因子 TNF-和 INF-浓度ng/L，珋x s组别TNF-INF-空白组127 41 5 0334 10 3 05模型组1 672 63 16 83207 62 9 7610 mol/L 组1 022 35 37 61*151 33 10 04*1 mol/L 组1 042 46 29 39*155 60 9 60*0 1 mol/L 组1 227 15 30 48*169 28 7 95*0 01 mol/L 组1 477 02 32 33*177 09 7 40*0 001 mol/L 组1 696 73 39 05199 41 9 12注:与模型组比较，*P 0 053讨论炎症是免疫系统对有害刺激产生的一种应答反应，并通过消除有害刺激和启动愈合过程来发挥作用12。适度的炎性反应可以有效地减少即将发生的损伤或感染，有利于恢复组织稳态。然而，不受控制的急性炎性可能会转变成慢性炎性，进而导致多种疾病的发生13。因此，抗炎是多种疾病防治的重要路径。巨噬细胞作为免疫系统的基本组成部分，是大多数组织中最丰富的免疫细胞，具有抗原呈递，免疫监视、调节、防御等多种功能14。此外，巨噬细胞在组织发育、维持组织稳态、组织修复、组织再生和清除凋亡细胞等过程中也发挥着重要的作用15。当病原体入侵时，巨噬细胞被激活并通过释放炎性因子来抵抗病原体，包括肿瘤坏死因子、白介素、干扰素等。然而，当381河北医药 2023 年 1 月 第 45 卷 第 2 期Hebei Medical Journal，2023，Vol 45 Jan No.2这些炎性因子的产生得不到控制时，会对机体造成严重损伤，诱发多种疾病16。Guo 等17 发现在体外实验中薏苡仁可以促进双歧杆菌和乳酸杆菌两种益生菌的生长，在体内实验中薏苡仁可以改善溃疡性结肠炎大鼠的肠道菌群结构，缓解体内溃疡性结肠炎的症状。Zhang 等18 研究表明薏苡仁可以改善类风湿性关节炎大鼠的症状，降低了促炎细胞因子(IL-1、TNF-、IL-6、MCP-1)的表达，并增加了抗氧化酶(GSH-Px、SOD 和 CAT)的活性。-谷甾醇属于植物甾醇类化合物，广泛存在于天然植物中，被誉为“生命之钥”。Liu 等19 研究表明-谷甾醇可以调节巨噬细胞极化并减轻小鼠的类风湿炎性。Yin 等20 研究表明，-谷甾醇及其衍生物通过抑制小鼠的氧化和炎性来抑制脂多糖/d-半乳糖胺诱导的急性肝损伤。张冬阳21 从薏苡仁中提取的-谷甾醇具有抑制有害菌，田丹丹等22 从牛油果中提取植物甾醇，发现其同样具有抑菌效果。本研究查阅文献发现其中-谷甾醇23 具有显著的抗炎作用，-谷甾醇可以显著抑制巨噬细胞的炎性因子 TNF-和 IFN-的表达，且这种抑制作用呈剂量依赖性。薏苡仁抗炎的主要靶点包括 SRC、CASP3、MAPK1、PPARG、STAT1、NOS3、LCK、PPARA、NOS2、KIT 等，这些靶点可能是薏苡仁发挥抗炎作用的重要靶点。SRC 基因编码的蛋白质是酪氨酸蛋白激酶，其可能在胚胎发育和细胞生长的调节中发挥作用，该基因的突变可能与结肠癌的恶性进展有关24。CASP3基因编码的蛋白质是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶，在细胞凋亡的过程中起着核心作用25。MAPK1 基因是编码 MAP 激酶家族的一个成员，MAP 激酶也称为细胞外信号调节激酶(ERK)，作为多种生化信号的整合点，参与多种细胞过程，如增殖、分化、转录调控和发育26。综上所述，薏苡仁的抗炎作用是通过多成分、多靶点、多通路进行的，其活性成分与靶点、靶点与疾病靶点、靶点与信号通路之间均存在复杂的关系，对以上相关通路的预测还需通过实验进一步验证。参考文献1Taams LSInflammationandimmuneresolutionClinicalandExperimental Immunology，2018，193:1-22Lin YJ，Anzaghe M，Schlke St Update on the pathomechanism，diagnosis，and treatment options for rheumatoid arthritis Cells，2020，9:8803Francisco C，Alejandro OF，Raymundo VP，et al Periodontal disease，systemic inflammation and the risk of cardiovascular disease Heart LungCirculation，2018，27:1327-13344Ndrepepa GMyeloperoxidase-Abridgelinkinginflammationandoxidative stress with cardiovascular disease Clinica Chimica Acta，2019，493:36-515Juszczak F，Caron N，Mathew AV，et al Critical Role for AMPK inMetabolic Disease-Induced Chronic Kidney Disease International Journalof Molecular Sciences，2020，21:79946Esmat A，Alireza S，Elaheh A，et al Comparison Between Biomarkers ofKidney Injury，Inflammation，and Oxidative Stress in Patients withDiabetic Nephropathy and Type 2 Diabetes Mellitus Iranian journal ofkidney diseases，2020，14:31-357Parker BJ，Wearsch PA，Veloo ACM，et al The Genus Alistipes:GutBacteria With Emerging Implications to Inflammation，Cancer，and MentalHealth Frontiers in Immunology，2020，11:9068钟赣生主编 中药学 第 9 版 北京:中国中医药出版社，2012193-1949陈仲汉 冯兴华教授临床应用薏苡仁治疗风湿病经验研究 北京中医药大学，201610陈海彬，周红光，李文婷，等 网络药理学-中药复方作用机制研究新视角 中华中医药杂志，2019:34:2873-287611Ru J，Li P，Wang J，et al TCMSP:a database of systems pharmacologyfor drug discovery from herbal medicines J Cheminform，2014，6:1312黎玉翠 广藿香酮及广藿香醇的抗炎，抗真菌活性及药物代谢研究 广州中医药大学，201313Mu X，Li Y，Fan GC Tissue-Resident Macrophages in the Control ofInfection and Resolution of Inflammation Shock，2021，55:14-2314Ivashkiv LB IFN:signalling，epigenetics and roles in immunity，metabolism，diseaseandcancerimmunotherapyNatureReviewsImmunology，2018:18:545-55815Oishi Y，ManabeIMacrophagesininflammation，repairandregeneration International Immunology，2018，30:511-52816Qiu P，Liu Y，Zhang J Review:the Role and Mechanisms of MacrophageAutophagy in Sepsis Inflammation，2019，42:6-1917Guo M，Ding S，Zhao C，et al Red Ginseng and Semen Coicis canimprove the structure of gut microbiota and relieve the symptoms ofulcerative colitis Journal of Ethnopharmacology，2015，162:7-1318Zhang C，Zhang W，Shi R，et al Coix lachryma-jobi extract amelioratesinflammation and oxidative stress in a complete Freund s adjuvant-induced rheumatoid arthritis model Pharmaceutical Biology，2019，57:792-79819Liu R，Hao D，Xu W，et al-Sitosterol modulates macrophagepolarizationandattenuatesrheumatoidinflammationinmicePharmaceutical Biology，2019，57:161-16820Yin，Y，Liu X，Liu J，et al Beta-sitosterol and its derivatives represslipopolysaccharide/D-galactosamine-induced acute hepatic injury byinhibiting the oxidation and inflammation in mice Bioorganic andMedicinal Chemistry Letters，2018，28:1525-153321张冬阳 薏米中-谷甾醇的提取、分离、纯化及其功能性的研究 锦州医科大学22田丹丹，李艳，梅晓宏 牛油果中植物甾醇的鉴定及抗氧化，抑菌活性 食品科学，2019，40:30-3523Jayaraman S，Devarajan N，Rajagopal P，et al-Sitosterol CircumventsObesityInducedInflammationandInsulinResistancebydown-Regulating IKK/NF-B and JNKSignaling Pathway in Adipocytes ofType 2 Diabetic Rats Molecules，2021，26:210124Jos Rivera-Torres，Esther San Jos Src Tyrosine Kinase Inhibitors:NewPerspectives on Their Immune，Antiviral，and Senotherapeutic PotentialFrontiers in Pharmacology，2019，10:101125Kuo WT，ShenL，ZuoL，etal Inflammation-inducedOccludinDownregulation Limits Epithelial Apoptosis by Suppressing Caspase-3Expression Gastroenterology，2019，157:1323-133726Seternes OM，Kidger AM，Keyse SM Dual-specificity MAP kinasephosphatases in health and disease Biochimica et Biophysica Acta(BBA)-Molecular Cell Research，2019，1866:124-143(收稿日期:2022 06 19)481河北医药 2023 年 1 月 第 45 卷 第 2 期Hebei Medical Journal，2023，Vol 45 Jan No.2