1、*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考，不能作为科学依据。本资料仅供参考，不能作为科学依据。谢谢。本资料仅供参考!,生物技术试验凝集反应,免疫学教研室 刘平,1/22,凝集反应,【试验目标】,1了解凝集反应原理、基本类型及其临床意义。,2掌握玻片凝集试验、间接凝集试验试验方法和结果分析。,2/22,【概述】,在一定浓度电解质溶液中，颗粒性抗原与对应抗体结合后，出现肉眼可见凝集块，称为凝集反应。,抗原,特异性,抗体,特异结合,电解质,抗原抗体复合物,3/22,凝集反应是一个定性检测方法
2、，也能够进行半定量检测。因为凝集反应方法简便，当前在临床检验中仍被广泛应用。,凝集反应可分为,直接凝集,反应和,间接凝集,反应。,4/22,一、直接凝集反应,细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参加下可直接与对应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应。,惯用凝集试验有,玻片法,和,试管法,两种。,5/22,玻片凝集试验ABO血型判定,玻片凝集试验为定性试验，普通用已知抗体作为诊疗血清，与受检颗粒抗原，如菌液或红细胞抗原各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼观察凝集结果，出现凝集颗粒为阳性。,此法简便，快速，适合用于从病人标本中分离得到菌种诊疗或分型，也可用于红细胞ABO血型判定。,6/22,【
3、试验原理】,人类ABO血型抗原主要有A和B两种，依据红细胞表面这两种抗原有没有可把血型分为四种。据此，将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞表面上对应抗原结合而引发红细胞凝集，据其凝集情况便可判定出受试者血型。,ABO血型划分,红细胞表面Ag,血清中Ab,A型,A,抗B,B型,B,抗A,AB型,A、B,、,O型,、,抗A、抗B,7/22,【试验材料】,1ABO血型判定试剂盒内含抗A分型试剂和抗B分型试剂各1支。,2一次性采血针1枚、洁净玻片2块、75酒精、灭菌棉签。,8/22,3用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。用另一载玻片一端取
4、适量血液加入抗抗A分型试剂，并混匀；用另一端再取适量血液加入抗抗B分型试剂，并混匀。用干棉签止血。,4观察红细胞有没有凝集发生。如有凝集，可见红细胞凝集成块；无凝集，红细胞呈均匀分散。判定结果后把玻片放入消毒液中。,【试验方法】,1取洁净载玻片1块，并标识（如图）,2将抗A、B分型试剂分别加,1滴于标识有A、B玻片两侧。,A,B,抗,A,抗,B,9/22,【试验结果】,10/22,二、间接凝集反应,将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小颗粒性载体表面（这种载体与免疫无关），然后与对应抗体或抗原结合，在适量电解质存在下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集反应。,依据载体不一样可将间接凝集反应分为：间接
5、血细胞凝集试验、间接乳胶凝集试验（及间接乳胶凝集抑制试验）和金黄色葡萄球菌协同凝集试验等。,11/22,载体,可溶性抗原,致敏,致敏颗粒,NS,凝集颗粒,间接凝集试验示意图,原理,12/22,载体种类及其处理方法,红细胞：,新鲜红细胞吸附蛋白质能力差。普通先醛化后应用。,聚苯乙烯胶乳颗粒：,可物理吸附蛋白质；常制备带有化学活性基团颗粒,13/22,间接凝集抑制试验妊娠试验,【试验原理】,可溶性抗原致敏乳胶颗粒与对应抗体作用可使乳胶颗粒凝集，此为间接乳胶凝集试验。若使抗体先与可溶性抗原作用，再加入该抗原致敏乳胶颗粒，则乳胶凝集被抑制，此为间接乳胶凝集抑制试验。,孕妇尿中绒毛膜促性腺激素（HCG）
6、含量显著增高。HCG与抗HCG抗体先作用后，再加入HCG致敏乳胶颗粒，不出现凝集反应，此为妊娠试验阳性；非孕妇尿中HCG含量不足以消耗掉抗HCG抗体，抗体与后加入HCG致敏乳胶结合展现凝集现象，则妊娠试验阴性。,14/22,15/22,间接凝集抑制试验,待测抗原,已知抗体,特异结合,抗原抗体复合物,NS,致敏颗粒,无凝集颗粒,阳性,16/22,间接凝集抑制试验,待测抗原,已知抗体,无结合,抗原抗体分散,NS,致敏颗粒,有凝集颗粒,阴性,17/22,【试验材料】,1妊娠诊疗试剂盒：内含抗血清（抗HCG）、乳胶抗原（HCG致敏）,各一支,2 1号尿、2号尿。,3有格玻片和毛细吸管等。,18/22,
7、【试验方法】,1在玻片第1、第2内分别加1滴1号尿、2号尿。,2每格内加入妊娠诊疗试剂抗血清1滴。轻轻摇动12 min使其充分混匀。,3每格加入乳胶抗原1滴，轻轻摇动玻片35 min后观察结果，统计各标本有没有凝集现象。,19/22,【试验结果】,孕妇尿格呈均匀浑浊乳状液，无凝集，妊娠试验阳性；正常尿格出现白色细小凝集物，随时间延长凝集物变成小块状，妊娠试验阴性。待检尿若为乳状液，妊娠试验阳性；若出现凝集，则妊娠试验阴性。,1,2,孕妇尿,正常尿,20/22,【注意事项】,1试验所用诊疗试剂用前应充分摇匀，而且应在使用期内使用。,2加样用滴管及混匀用牙签不能共用。,3加样不宜太多，玻片应一直保持水平，以防两格之反应液相混。,21/22,【试验思索】,1统计血型判定试验、乳胶妊娠诊疗试验材料、方法及结果判定（可用图示或表格方式表示）。,2直接凝集试验与间接凝集试验有何不一样？,3在各凝集试验中都设有对应对照，有何意义？若对照出现异常怎样分析及处理？,22/22,
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