萱草花黄酮对阿尔茨海默病大鼠脑、肝组织的影响_李治伟.pdf

文章编号:1673-2995(2023)04-0252-03论著萱草花黄酮对阿尔茨海默病大鼠脑、肝组织的影响李治伟，罗小琴*，徐向，周峰，石佳鹭(长沙卫生职业学院，湖南 长沙410006)摘要:目的评价萱草花黄酮(Hemerocallis flavone，HCF)对阿尔茨海默病(Alzheimers disease，AD)大鼠脑组织和肝组织氧化应激的影响，探讨应用其降低 AD 氧化应激水平的可能性。方法SD 大鼠 24 只，随机分 3 组，即空白对照组、AD 模型对照组、HCF 组。氯化铝灌胃结合 D 半乳糖腹腔注射制备 AD 模型;分别检测各组大鼠脑组织和肝组织匀浆中丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和过氧化氢酶(catalase，CAT)活力;单因素方差分析进行数据分析，组间比较采用 LSD-t 检验。结果与空白对照组比较，AD 模型大鼠脑组织 MDA 含量增加，SOD、CAT 活力降低;与 AD 模型组比较，HCF 组脑组织 MDA 含量降低，肝组织 SOD、CAT 活力升高，肝组织 CAT 活力升高，SOD 活力无明显变化。结论HCF 可通过升高抗氧化酶 SOD 和 CAT 活力增强机体和脑组织的抗氧化能力，降低 AD 脑组织和机体的氧化应激水平。关键词:萱草花;黄酮;阿尔茨海默病;大鼠;氧化应激中图分类号:961文献标志码:AEffects of flavonoids from Hemerocallis fulva on brain and liver tissues of Alzhei-mers disease ratsLI Zhiwei，LUO Xiaoqin*，XU Xiang，ZHOU Feng，SHI Jialu(Changsha Health Vocational College，Changsha，Hunan Prov-ince，410006，China)Abstract:ObjectiveTo evaluate the effect of Hemerocallis flavone(HCF)on oxidative stress in brain and liver tissues of Alzheimersdisease(AD)rats，and to explore the possibility of using it to reduce the level of AD oxidative stress MethodsTwenty-four SD ratswere randomly divided into three groups:blank control group，AD model control group，and HCF group AD model was established by ga-vage of aluminum chloride and intraperitoneal injection of D galactose;Malondialdehyde(MDA)content，superoxide dismutase(SOD)and catalase(CAT)activity in brain and liver homogenates of rats in each group were detected;Single factor analysis of variance was usedfor data analysis，and LSD-t test was used for inter group comparison esultsCompared with the blank control group，the content ofMDA in the brain tissue of AD model rats increased，while the activity of SOD and CAT decreased;Compared with the AD model group，theHCF group showed a decrease in MDA content in brain tissue，an increase in SOD and CAT activity in liver tissue，and an increase in CATactivity in liver tissue，with no significant change in SOD activity ConclusionHCF can enhance the antioxidant capacity of the body andbrain tissue by increasing the activity of antioxidant enzymes SOD and CAT，and reduce the level of oxidative stress in AD brain tissue andthe bodyKey words:hemerocallis flowers;flavone;Alzheimers disease;rats;oxidative stress阿尔茨海默病(Alzheimers disease，AD)是一种渐进性神经退行性疾病，表现为老年人认知、情绪、语言和记忆的进行性损害1。随着疾病进展患者各项生理功能不断恶化，日常生活不能自理，伴随各种神经精神症状和行为障碍，严重影响健康和寿命，已逐渐发展为人群第六大死亡原因，65 岁以上老年人群第五大死亡原因2。AD 发病机制的研究主要集中在淀粉样变、tau 蛋白、神经炎症、金属离子、氧化应激基金项目:湖南省自然科学基金(2021JJ60097)作者简介:李治伟(1989 )，男(汉族)，讲师，硕士。通信作者:罗小琴，讲师(E-mail:443958247 qq com)假说、线粒体功能障碍、代谢异常等方面3。氧化应激是连接 AD 不同假说和机制的桥梁，是导致神经元损伤的过程，并在各种途径中发生，甚至可以被认为是 AD 发病机制中的至关重要因素4。萱草花中提取分离的黄酮类化合物在既往的研究中显示了良好的改善学习记忆和抗抑郁等神经调节作用5-6，并且可通过提升抗氧化酶活力降低机体氧化应激水平实现改善肝损伤、肝纤维化等作用7-8。本研究通过探讨萱草花黄酮(Hemerocallis fla-vone，HCF)对 AD 大鼠脑组织和肝脏氧化应激的影响，从改善脑组织和肝组织氧化应激方面探讨 HCF252第 44 卷第 4 期2023 年 08 月吉林医药学院学报JournalofJilinMedicalUniversityVol 44No 4Aug 2023DOI:10.13845/ki.issn1673-2995.2023.04.020对 AD 的潜在药用价值。1材料与方法1 1实验材料SPF 级 SD 大鼠 湖南斯莱克景达实验动物有限公司，合 格 证 号 SCXK(湘)2009-0004 ，体 重(201 2 11 2)g;HCF 为课题组提取分离;D 半乳糖(Sigma-Aldrich，Fluka);氯化铝、水合氯醛、乌拉坦均为国产分析纯;超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、过氧化氢酶(catalase，CAT)、考马斯亮蓝试剂盒均购自南京建成。电子秤(ALH01，上海英展);研磨仪(JXFSTPP-24;上海净信);离心机(TD5A，湘仪);722 分光光度计(722-100，上海欣茂);酶标仪(model 550，BIO-AD)。1 2动物分组与给药24 只 SD 雄性大鼠随机分为 3 组，即空白对照组、模型对照组、HCF 组，每组 8 只。在保持相同喂养条件的同时，空白对照组灌胃纯净水+腹腔注射生理盐水，模型组灌胃氯化铝 200 mg/kg+腹腔注射 D-半乳糖 60 mg/kg，HCF 组灌胃氯化铝 200 mg/kg+腹腔注射 D-半乳糖 60 mg/kg+灌胃 HCF50 mg/kg，1次/d。根据体重每周调整 2 次给药剂量，10 周后取材。1 3取材10%水合氯醛和 25%乌拉坦 1 1 混合溶液腹腔注射麻醉大鼠，迅速断脑后冰面分离脑组织和肝组织，立即保存于液氮中备用。1 4指标检测取肝和脑组织，10 倍生理盐水匀浆、离心后取上清，严格按照试剂盒操作步骤进行。1 5统计学方法所有数据采用 SPSS 22 0 进行处理，多组数据采用单因素方差分析，两两比较采用 LSD-t 检验，取=0 05。2结果2 1HCF 对 AD 大鼠脑组织 MDA 含量、SOD 和 CAT活力的影响与空白对照组比较，模型组脑组织中 MDA 含量显著升高(P 0 05)，SOD、CAT 活力均显著下降(P 0 05)。与 AD 模型对照组比较，HCF 组 MDA含量显著降低(P 0 05)，SOD、CAT 活力均显著升高(P 0 05)。见表 1。表 1HCF 对 AD 大鼠脑组织 MDA、SOD、CAT 水平的影响(?x s，n=8)组别MDA/(nmol/mg 蛋白)SOD/(U/mg 蛋白质)CAT/(U/mg 蛋白质)空白对照组 2 08 0 293 71 1 722 47 0 15AD 模型组 4 07 1 17a1 83 0 83a1 98 0 29aHCF 组2 19 0 74b3 41 1 58b2 42 0 15b与空白对照组比较:aP 0 05;与模型对照表比较:bP 0 052 2HCF 对 AD 大鼠肝组织 MDA、SOD、CAT 水平的影响与空白对照组比较，模型组肝组织中 MDA 含量显著升高(P 0 05)和 SOD、CAT 活力均显著下降(P 0 05)。与 AD 模型对照组比较，HCF 组 MDA含量显著降低(P 0 05)，CAT 活力显著升高(P 0 05)，SOD 活力无明显变化(P 0 05)。见表 2。表 2HCF 对 AD 大鼠肝组织 MDA、SOD、CAT 水平的影响(?x s，n=8)组别MDA/(nmol/mg 蛋白)SOD/(U/mg 蛋白质)CAT/(U/mg 蛋白质)空白对照组 0 96 0 3510 44 1 619 77 0 98AD 模型组 2 57 0 99a6 90 2 96a6 86 1 47aHCF 组1 28 0 42b7 36 2 949 90 0 83b与空白对照组比较:aP 0 05;与模型对照表比较:bP 0 053讨论3 1HCF 改善 AD 大鼠氧化应激水平MDA 是自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化的重要标志产物，检测 MDA 的量可反映机体内脂质过氧化的程度并间接地反映出细胞损伤的程度9。本研究中 AD 模型大鼠脑组织和肝组织 MDA 含量较空白对照组显著升高，表明氯化铝与 D 半乳糖联合作用诱导的 AD 模型脑组织和肝组织氧化应激水平显著升高。3 2HCF 通过上调抗氧化酶活力改善 AD 大鼠脑组织氧化应激水平活性氧是氧化应激过程中的重要使动因子，SOD和 CAT 能分别清除超氧阴离子自由基和氢氧自由基，对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作352第 4 期李治伟，等 萱草花总黄酮对阿尔茨海默病大鼠脑、肝组织的影响用，保护细胞免受氧化应激损伤10。本研究中 HCF组大鼠与 AD 模型组大鼠比较，MDA 含量显著下降，肝组织 SOD 和 CAT 活力均显著上升，脑组织 SOD 活力显著上升，表明 HCF 可显著提高机体抗氧化酶活力，特别是提高 CAT 活力发挥抗菌素氧化作用。参考文献:1 SE THOE E，FAUZI A，TANG Y Q，et al A review on ad-vances of treatment modalities for Alzheimers disease J Life Sci，2021，276:119129 2 2021 Alzheimers disease facts and figuresJ AlzheimersDement，2021，17(3):327-406 3JOHI A Disentangling mitochondria in Alzheimers dis-ease J Int J Mol Sci，2021，22(21):11520 4BAI ，GUO J N，YE X Y，et al Oxidative stress:thecore pathogenesis and mechanism of Alzheimers disease J Ageing es ev，2022，77:101619 5 MA T C，SUN Y，WANG L N，et al An investigation of theanti-depressive properties of phenylpropanoids and fla-vonoids in Hemerocallis citrina BaroniJ Molecules，2022，27(18):2809 6LIN S H，CHANG H C，CHEN P J，et al The antidepres-sant-like effect of ethanol extract of daylily flowers(JnZhn Hu)in rats J J Tradit Complement Med，2013，3(1):53-61 7 沈楠，黄晓东，李治伟，等 萱草花总黄酮改善 CCl4致大鼠肝纤维化的作用J 药学学报，2015，50(5):547-551 8 徐博，李妍，纪朋艳，等 萱草花黄酮对酒精性肝损伤氧化应激及肝细胞凋亡机制的探讨 J 重庆医学，2017，46(10):1304-1307 9GAWEL S，WADAS M，NIEDWOOK E，et al Malondi-aldehyde(MDA)as a lipid peroxidation marker J WiadLek，2004，57(9/10):453-455 10KWON K，JUNG J，SAHU A，et al Nanoreactor for cas-cade reaction between SOD and CAT and its tissue regen-eration effect J J Control elease，2022，344:160-172(收稿日期:2023-03-22)(上接第 251 页)度揭示对 BH 与 Hb 相互作用的机制提供基础数据，为 BH 在临床治疗新生儿黄疸提供了理论依据，为BH 在医药领域中的研究和应用提供了重要参考。参考文献:1 IU S L，CHAN L W，KWONG A N Clinical and biochemi-cal characteristics of infants with prolonged neonatal jaun-dice J Hong Kong Med J，2018，24(3):270-276 2 MINAI-TEHANI D，TOOFANI S，YAZDI F，et al Inhibi-tion of pseudoperoxiadse activity of human red blood cellhemoglobin by methocarbamolJ Int J Biol Macromol，2017，94(Pt B):788-792 3 张永，黎红平，李慈梅 盐酸小檗碱对血浆游离血红蛋白的影响 J 现代医院，2012，12(8):77-78 4 刘春芳，乔利，王艳伟，等 黄连和小檗碱对大鼠红细胞氧化性溶血及其抗氧化系统的影响 J 中国实验方剂学杂志，2010，16(6):156-159 5 OLIVEIA J B S，AMOS L，SOUZA C O，et al Initial bio-physical characterization of Amynthas gracilis giant extra-cellular hemoglobin(HbAg)J Eur Biophys J，2020，49(6):473-484 6LEE J H，KASOTE D M，JAYAPAKASHA G K，et alEffect of production system and inhibitory potential of aro-ma volatiles on polyphenol oxidase and peroxidase activityin tomatoes J J Sci Food Agric，2021，101(1):307-314 7ABI-MEHABAN F，ZAGA S J，SALAIZADEH NThe effect of glucose on doxorubicin and human hemoglobininteraction:Characterization with spectroscopic techniques J Int J Biol Macromol，2021，181(3):193-201 8HOSSAIN M J，ASHID M A，SULTAN M Z Transitionmetal chelation augments the half life of secnidazole:mo-lecular docking and fluorescence spectroscopic approaches J Drug es(Stuttg)，2020，70(12):583-592 9 胡茜，张颖，李堃，等 黄连主要成分小檗碱的临床药理作用探析J 中国中医药现代远程教育，2021，19(24):203-205(收稿日期:2022-11-06)452吉林医药学院学报2023 年 08 月第 44 卷