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《医学微生物学》实验教学大纲
Medical Microbiology

课程中文名称：医学微生物学实验
课程英文名称：Experiments of Medical microbiology
课程编号：×××（仿宋常规小4号）
实验学时：20学时
学分：××（仿宋常规小4号）
适用专业：临床医学专业七年制、五年制
先修课程：医学微生物学
开课学院：医学院
开课学期：第四三学期、第四学期
教材及实验指导书：
贾文祥主编，《医学微生物学》，人民卫生出版社，2005年8月第1版。
一、 实验课程简介
医学微生物学是一门实践性很强的基础与临床之间的桥梁课程。理论课中的许多基本概念、基本规律、生物学特性都需要通过实践来验证说明。微生物学实验课的宗旨就是通过与理论课相关的实验课的学习，让学生更好的理解、掌握、运用所学的理论知识，培养学生分析问题、解决问题和实验操作的能力。
二、 实验课性质、目的和任务
性质：独立设课
目的：加深理解并巩固理论知识，学习和掌握有关的实验操作技术。培养学生观察、思考和分析问题的能力、动手能力及独立工作能力。
任务：细菌形态学观察技术；细菌培养技术,细菌的生化反应检测；菌分布与外界因素对细菌影响；综合性实验--流感病毒的分离鉴定；病原性球菌的检测；综合性实验—肠道杆菌的检测；其他细菌。
三、 实验课教学基本要求
1、实验课前做好预习，明确本次实验课的内容及其原理、方法和注意事项。
2、实验过程中要仔细认真，注意分工协作。操作内容要按操作步骤进行，学会正确操作手法、准确记录实验结果。示教内容要注意观察，并记录好相关内容。
3、严格遵守实验室规则，在微生物实验课上，要树立“有菌观点”，严格掌握和不断完善无菌操作技术。
4、科学总结，实验完毕应自行分析实验结果，得出可能的结论，并总结实验中的体会和经验。除当堂作好实验记录及绘图外，还应按规定完成系统实验报告。
四、 实验教学的内容与基本要求
第一次试验 细菌形态学观察技术：
实验目的：
1) 掌握无菌操作、油镜使用方法
2) 熟悉细菌的基本形态和特殊结构的镜下特点；
3) 掌握革兰氏染色法并了解其在医学实践中的意义。
教学基本要求：
1) 熟悉细菌形态学检查的基本方法；
2) 熟悉细菌染色标本的基本制作步骤；
3) 掌握革蓝染色法的步骤、医学意义以及主要原理；
4) 熟悉显微镜油镜头的使用及保护；
5) 掌握细菌的基本结构形态特征；
6) 熟悉细菌的特殊结构形态特征。
实验内容提要：
1) 宣读医学微生物学实验室规则
2) 显微镜油镜头的使用及保护
3) 细菌基本形态和特殊结构标本片示教
4) 细菌涂片的制备及革蓝染色法
实验类型： 验证性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1） 光学显微镜、镜油、二甲苯等
2）葡萄球菌、大肠埃希菌培养物、接种环、玻片、酒精灯等
第二次试验 细菌培养技术和生化反应
实验目的：
1) 掌握细菌的分离培养技术及纯种菌接种法;
2) 熟悉细菌各种生长现象及细菌的代谢产物;
3) 了解细菌常用培养基及生物因素对细菌的影响。
教学基本要求：
1) 掌握培养基的制备原则及各种培养基的接种方法
2) 熟悉鉴别细菌常用的几种生化反应原理及方法
3) 熟悉细菌的生长表现
4) 了解常用培养基的制作过程
实验内容提要：
1) 培养基制备原则和程序介绍
2) 细菌的接种技术演示及操作
3) 细菌的生长表现观察
4) 常用的几种生化反应检测方法及意义
5) 观看“病原性细菌的检测与防治”录像
实验类型：验证性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1) 各种培养基、配制基础培养基的各种原料
2) 葡萄球菌、大肠埃希菌培养物、接种环、酒精灯等
3) “病原性细菌的检测与防治”录像带
第三次试验 细菌分布与外界因素对细菌的影响
综合性实验--流感病毒的分离鉴定（1）
实验目的：
1) 熟悉细菌的分布情况及外界因素对细菌生长的影响
2) 熟悉呼吸道病毒的分离培养与鉴定
教学基本要求：
1) 掌握紫外线杀菌原理、应用范围及高压蒸汽灭菌的原理、应用
2) 掌握药敏试验方法（纸片法）并了解其医学意义。
3) 熟悉实验室常用的消毒、灭菌、除菌的仪器、原理及用途。
4) 了解化学消毒剂对细菌的影响原理。
5) 掌握临床呼吸道病毒感染标本的采集、处理及送检原则。
6) 掌握流感病毒的分离培养---鸡胚尿囊腔接种技术。
实验内容提要：
1) 细菌的分布检查—-空气、咽喉、体表、物品。
2) 细菌的药物敏感试验
3) 化学消毒剂的杀菌试验
4) 紫外线的杀菌试验
5) 综合性实验—流感病毒的分离培养（1）——鸡胚尿囊腔接种
实验类型：验证性实验，综合性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1) 紫外线灭菌灯、常用抗生素药敏纸片、固体平板培养基。
2) 培养箱、12-14日龄的鸡胚、检卵箱、石蜡、钢锥、注射器、吸管等。
第四次试验 综合性实验--流感病毒的分离鉴定（2）
实验目的：
熟悉呼吸道病毒的分离培养与鉴定的全过程
教学基本要求：
综合性实验—流感病毒的鉴定血球凝集试验（2）
1) 熟悉鸡胚尿囊液收集方法。
2) 掌握血球凝集试验原理和操作方法、结果观察及效价判定。
3) 了解血球凝集抑制试验操作方法、结果观察及效价判定。
4) 观看PCR检测病毒的录像，了解PCR检测病毒的原理及步骤。
实验内容提要：
1) 流感病毒的鸡胚尿囊液收集
2) 流感病毒滴度测定—-血球凝集试验
3) 流感病毒的鉴定-血球凝集抑制试验
4) 观看PCR检测病毒的录像
实验类型：验证性实验，综合性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1) 尿囊腔接种后经72小时培养的鸡胚、卵垫板、眼科镊子、剪刀等。
2) 0.5%的鸡血球、生理盐水、小试管、吸管、试管架等。
3) PCR检测病毒的录像带。
第五次试验 病原性球菌的检测
综合性实验—肠道杆菌的检测（1）
实验目的：
1) 掌握病原性球菌的形态和染色性与葡萄球菌的鉴别
2) 主要肠道杆菌的形态、染色性
3) 主要肠道杆菌的培养特性
4) 主要肠道杆菌的生化反应
5) 综合性实验—粪便中肠道致病菌的分离培养和鉴定
教学基本要求：
1) 掌握葡萄球菌血浆凝固酶试验原理、方法及意义。
2) 掌握粪便标本中肠道病原菌的分离鉴定程序。
3) 熟悉肠道病原菌和非病原菌在EMB、MCK平板上的菌落特征。
实验内容提要：
1) 葡萄球菌、链球菌血琼脂平板培养物观察。
2) 葡萄球菌血浆凝固酶试验---玻片法。
3) 大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在EMB、MCK平板上的菌落特征观察。
4) 粪便标本中肠道病原菌的分离培养、初步鉴定（分两个阶段进行）。
5) 观看肠道杆菌检测的录像。
实验类型：验证性实验， 综合性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1) 金葡菌和白葡菌培养物、1：2的人血浆、接种环等。
2) 各种球菌的血平板培养物、肠道杆菌在EMB、MCK平板培养物等。
3) EMB、MCK平板培养基
4) 球菌及肠道杆菌革蓝染色标本。
5) 肠道杆菌检测的录像带。
第六次试验 综合性实验—-肠道杆菌的检测（2）
实验目的：
1) 肠道致病菌的分离培养和鉴定（血清学鉴定）
2) 掌握肥达氏反应的原理及结果分析，熟悉肥达氏反应的方法及结果判定
教学基本要求：
综合性实验—粪便中肠道致病菌的分离培养和鉴定（2）

1) 掌握肠道杆菌的血清学鉴定---玻片凝集法。
2) 熟悉并掌握肥达氏反应的原理、操作方法及结果判定。
实验内容提要：
1）肠道致病菌和非致病菌在双糖铁培养基上的生长特征观察并记录结果。
2）肠道杆菌的血清学鉴定---玻片凝集反应。
3）肥达氏反应的原理，掌握操作方法及结果判定。
实验类型：验证性实验，综合性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1） 伤寒沙门菌、痢疾志贺菌诊断血清、生理盐水、载玻片等。
2） 患者血清、伤寒沙门菌O、H菌液、56℃水浴箱、小试管、试管架等。

第七次试验 其他细菌（结核、白喉、炭疽、螺旋体）的检测
实验目的：
1）抗酸染色的原理、方法及结核分支杆菌显微镜下的特征。
2）白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、螺旋体的形态及染色特征。
教学基本要求：
1）掌握抗酸染色的原理、方法及结核分支杆菌在显微镜下的特征。
2）掌握白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、螺旋体的形态及染色特征。
实验内容提要：
1） 用肺结核患者痰液标本做抗酸染色。
2） 观察白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、钩端螺旋体、梅毒螺旋体染色标本片。
实验类型：验证性实验
必修或选修：必修
使用的主要仪器：
1） 抗酸染色液、显微镜、蜡笔、玻片夹、痰液标本等
2）白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、钩端螺旋体、梅毒螺旋体染色标本片
五、 实验成绩的考核与评定办法
1. 课题提问；
2. 实验操作；
3. 实验报告
4. 出勤情况