EDTA―K2抗凝血对生化检验结果的影响及校正方法分析.doc

EDTA―K2抗凝血对生化检验结果的影响及校正方法分析

　　【摘要】 目的：分析EDTA-K2抗凝血对30余项生化项目检验结果的影响，并分析其原因及其校正。方法：对同时抽取的50例EDTA-K2抗凝血标本与血清标本在AU2700生化分析仪进行TBIL、DBIL、SP、A、ALT、AST、TBA、ALP、MAO、ADA、BU、Cr、UA、P、Mg、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、IMA、CK、CK-MB、LDH、α-HBDA、CRP、ASO、RF、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4等项目测定，对大部分生化项目进行直线回归进行相关系数分析。结果：两组标本生化项目中除DBIL、Mg、ASO、RF、ALP、IMA比较差异有统计学意义外，其他项目无统计学意义；相关性良好（r2>0.80）的生化项目有TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。结论：在血清标本不足时或血清标本存在溶血时，可用多余的血常规标本（EDTA-K2抗凝血）经离心后，替代血清标本用于（除TBIL、LDH、α-HBDA、P、Mg、UA、ASO、RF、ALP、IMA外）生化项目的检测，且结果可用于临床分析。
　　【关键词】 EDTAK2； 生化检验； AU2700生化分析仪； 直线回归； 相关系数r
　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2015.07.026
　　临床生化检验中，常常遇到生化标本太少或者存在溶血，影响生化检验结果准确性、及时性；同时部分患者（新生儿、儿科患者、烧伤患者、ICU室患者）重新采血存在困难，而这类患者往住是血常规检测与生化检测基本上是同步进行的，笔者尝试用EDTA-K2抗凝血经离心后取血浆替代血清标本进行常用生化项目检测，旨在分析EDTA-K2抗凝血对生化检验结果的影响，分析原因并提出相关的处理措施，现报道如下。
　　1 材料与方法
　　1.1 实验材料及试剂 无抗凝剂管或促凝管、EDTA-K2抗凝管，由湖南浏阳医用仪具厂提供。检测项目原理及试剂：总胆红素（TBIL，氧化法）、直接胆红素（DBIL，氧化法）、总蛋白（SP）、白蛋白（A）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆汁酸（TBA，循环酶法）、尿素（BU，酶法）、肌酐（Cr，苦味酸法）、尿酸（UA，酶法）、血糖（GLU，己糖己酶法）、血淀粉酶（AMS）、磷（P）、镁（Mg）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B（APOB）等项目由山东3V生物科技有限公司生产，C反应蛋白（CRP）、抗O（ASO）、RF、IgG、IgM、IgA、C3、C4均为永和阳光生物科技有限公司生产。缺血修饰白蛋白（IMA）由长沙熙康生物科技有限公司生产。
　　1.2 仪器 AU2700全自动生化分析仪，长沙湘智TDZ5-WS低速离心机。
　　1.3 标本来源 本院住院部同一患者同时采取血常规及血生化标本，其中血常规足够量及肉眼未见小凝块，所有标本经离心后无明显溶血及乳糜状。
　　1.4 质控物 朗道质控物，批号：ZX21511N。
　　1.5 方法 先用朗道质控物进行测定，所有项目均在控，进行下一步分析。取同一患者的血常规剩余血及血生化标本，经离心后取血浆或血清在AU2700生化析仪上进行相关生化项目分析，所得结果进行统计学分析。
　　1.6 统计学处理 使用SPSS 13.0统计学软件对本组数据进行分析，P0.80）的生化项目有TBIL、BU、Cr、P、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C、APOA1、APOB、CK、CK-MB、α-HBDA、CRP、ASO、AMS、IgG、IgM、IgA、C3、C4。结果见表1。对结果相差太大的生化项目（ALP、IMA）不进行直线回归方程及相关性分析，但分析其原因。
　　3 讨论
　　本实验研究发现，EDTA-K2抗凝血浆组与血清组在肝、肾功能、血糖血脂、心肌酶、免疫球蛋白等多数项目比较差异无统计学意义，与有关文献[1-3]略有差异，笔者认为有两个方面的原因：其一是笔者所采用的标本是住院患者，来源广泛且高、低值相差大，而有关文献标本来源是体检者，结果在一定范围内波动，故统计学处理方面会有差异；其二可能存在不一样厂家试剂或方法学不一致。
　　EDTA-K2抗凝原理是EDTA-K2中的EDTA成分可与Ca2+形成配位化合物，而Ca2+是内、外凝血途经的必需因子，所以血液不能凝固，从而起到抗凝作用，因此EDTA-K2抗凝血浆组中的钙、镁含量下降，与文献[1-4]报道一致。
　　此次实验中发现EDTA-K2抗凝血浆组ALP的检测值明显低于血清值，甚至有个别检测值为负数或零，呈明显的抑制状态，文献[5]认为这主要因为ALP检测中的中间产物对硝基苯酚需要在碱性溶液中转变为醌式结构，呈现较深的黄色而进行比色分析，而EDTA在抗凝过程中产生了氢离子，而使溶液成中性甚至酸性，故检测受到抑制；EDTA-K2抗凝血浆组IMA的检测值明显高于血清值，这是否与EDTA-K2中的某些成分能促进缺血修饰白蛋白检测反应，有待进一步验证。
　　临床护理工作中，多个项目检测抽血时，一般会按照如下顺序进行抽血：凝血功能→血常规→血生化→免疫等[6]，对于某些患者（新生儿、儿科患者、大面积烧伤患者等）会存在抽血困难，抽取一、二管血后，适当挤压抽完后面部分项目（生化、免疫等），往往会造成轻度溶血，而溶血标本对部分生化项目检测有影响[7-10]。 　　EDTA-K2抗凝血对血生化项目的影响，各文献[1-5，11-13]说法不一，有学者虽提出建立抗凝血浆结果参考值或进行校正，但未见相关报道[12]。本文参照文献[14]，进行直线回归及相关性分析，经验证EDTA-K2抗凝血多数生化项目结果在本实验室内可替代血清的结果，可用于临床，这不仅可以减少“医源性贫血”的隐患[15]，而且对于某些溶血、血少患者需重新抽血检测时，缩短样本检测周期有着重要的意义[16-17]。
　　综上所述，EDTA-K2抗凝血与血清在多数生化项目上相关性良好，其检测结果经校正后可以替代血清用于临床。
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　　（收稿日期：2014-11-17） （本文编辑：王宇）