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临床标本中酵母样真菌的分离培养及药敏分析
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 【摘要】 目的：监测分析目前常见酵母样真菌感染现状与耐药情况，为临床二重感染性疾病提供病原学诊断和合理使用抗真菌药物的依据。以加强抗真菌药物的合理使用。方法 各种临床标本经分离培养后，用科玛嘉真菌显色培养进行鉴定，康泰生物制剂的酵母样真菌药敏板条进行药敏试验。结果：送检的2571份临床标本共分离真菌263例，检出率为10.3% 结果 临床念珠菌感染中以白念珠菌为主(53.5%)，热带念珠菌（17.2 %），光滑念珠菌（10.1%），克柔念珠菌8.9%），其他念珠菌（10.3 %）。非白念珠菌感染呈上升趋势。两性霉素、制霉菌素耐药率最低，分别为5.1 %、4.4%，其次为5-氟胞嘧啶(10.9%)，灰黄霉素耐药率最高(87.1 %)，其次为益康唑（55.3%），咪康唑(37.5%),氟康唑（30.3%）。结论 当前临床常见抗真菌药的耐药株明显增高，临床实验室不仅应做好真菌的分离鉴定，而且要认真做好分离株的药敏试验，加强抗真菌药物的合理使用，减少耐药株的产生。
【关键词】真菌，抗真菌药物，真菌药物敏感试验， 耐药分析

  近年来由于广谱抗生素、激素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂的广泛应用以及侵袭性操作的大量使用，导致菌群失调和机体对真菌的抵抗力降低，真菌引起患者医院感染日益增多，由于条件致病性真菌感染病例不断增多，又使得真菌治疗后的耐药问题日渐突出。我们对2008年4月～2012年 12月我院住院感染患者临床送检标本分离的263株念珠菌菌种及药敏结果进行分析，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 试验菌株 收集2008年4月～2012年12月我院住院患者临床标本中分离的263株念珠菌。患者年龄10岁—90岁，其中60岁以上患者占78.9%，包括
血液、痰、浓汁、咽拭子、伤口分泌物、尿液等标本。
1.2 质控菌株 白色念珠菌ATCC64548（S），白色念珠菌ATCC64550（R）。
1.3 检验方法 常规分离临床标本，用科玛嘉显色培养基(郑州博赛科技有限公司)鉴定。康泰生物制剂酵母样真菌药敏板条做药敏试验。
2 结果
2.1 2571份临床标本，其中痰、咽拭子2054份，粪便13份，尿液189份，分泌物201份，血液、脑脊液、胸腹水等43份，浓汁71份，共分离出263份检出率占10.3%，其中痰咽拭子真菌分离出257株，尿液4株，伤口分泌物2株

各种标本真菌检出率
标本类型
例 数
检出例数
检出率%
痰、咽拭子
2054
257
12.5
粪便
13
0
0
尿液
189
4
2.1
伤口分泌物
201
2
0.9
血、脑脊液等
43
0
0
浓汁
71
0
0
合计
2571
263
10.3%
2.2 2571份标本共分离出263株真菌，其中主要是白色念珠菌141株，占53.5%，其次热带念珠菌45株占17.2%，光滑念珠菌26株占10.1%，克柔丝念珠菌23株占8.9%，其他念珠菌28株占10.3%
检出的真菌的种类
标本种类
酵母样真菌类型
白色念珠菌
热带念珠菌
光滑念珠菌
克柔念珠菌
其他念珠菌
尿
3
1

伤口分泌物
2

痰咽拭子
136
44
26
23
28
2.3药敏试验结果，263株真菌对7种抗真菌药物敏感试验显示总体耐药率（包括中介菌株），最高的是灰黄霉素（87.1%）其次为益康唑（55.3%）、咪康唑（37.5%）、氟康唑（30.3%），两性霉素、制霉菌素、5-氟胞嘧啶敏感率较高分别为94.9%、95.6%、89.1%见下表
不同念珠菌药物的敏感株敏感率
药物
白色念珠菌
热带念珠菌
光滑念珠菌
克柔念珠菌
其他念珠菌

141
45
26
23
28

S
I
R
S
I
R
S
I
R
S
I
R
S
I
R
5-氟胞嘧啶
125
3
13
41
1
3
23
0
3
20
0
3
25
0
3
两性霉素
134
4
3
43
0
2
25
0
1
22
1
0
26
0
2
制霉菌素
135
2
4
43
0
2
25
1
0
22
0
1
27
1
0
咪康唑
88
17
36
28
3
14
16
0
10
15
0
8
18
3
7
氟康唑
98

15
28
31
1
13
18
1
7
15
0
8
20
1
7
益康唑
63
19
59
20
2
23
12
1
13
11
1
11
12
3
13
灰黄霉素
18
25
98
6
0
39
3
3
20
3
3
17
4
7
17
3 讨论

各种临床标本中真菌的检出率以痰液最高，而且我们还发现，大多为混合感染或继发于其他细菌感染。 临床标本中分离的念珠菌以白色念珠菌最多,因此一般认为,白色念珠菌是酵母菌中最常见最主要的人体条件致病菌。美国国家医院感染监控系统1980-1990报道[1]，十年医院真菌感染27190例,念珠菌感染占72.2%,其中白色念珠菌一种占全部真菌感染的55%. 7种抗真菌药物敏感试验显示,在7种治疗念珠菌药物的体外试验中,对5-氟胞嘧啶和制霉菌素及两性霉素敏感性较好,对唑类药物敏感性次之,结果与国内外文献报道基本一致[2]。从我院5年临床标本分离到念珠菌263株，占同期所分离病原菌的10.3%，表明念珠菌在所有病原菌的构成比中在逐渐上升。在各念珠菌群中白色念珠菌和热带念珠菌最多，分别占53.5%和17.2%。由于不同菌种对抗真菌药物的敏感性不同,所以对临床分离的念珠菌鉴定到种,对临床合理选择抗真菌药物有重要参考价值，建议有严重免疫功能低下的患者，应避免长期使用唑类药物。
参考文献
[1] 周贵民，谢灵，杨继勇。深部酵母菌感染的病原学变化及其临床意义。中华医学检验杂志，1999，22：27-29。
. [2] 孙海平，郑邵同，付启云，等。105例深部真菌感染及药敏试验结果。临床检验杂志2005，23（1）12。