亿万中元霉菌2012(闫循忠).pdf

霉菌毒素生物降解技术应用报告人报告人：计计 成成单单位位：中国农业大学中国农业大学四川眉山一奶牛公司纯牛奶被检出致癌物四川眉山一奶牛公司纯牛奶被检出致癌物AFM1，国家规定奶中国家规定奶中 AFM1最高值为最高值为0.5g/kg，被检牛奶被检牛奶中中AFM1实测为实测为 1.2g/kg，超标超标1.4倍倍。前言前言研究背景和意义研究背景和意义表表1黄曲霉毒素引发的人类肝癌情况黄曲霉毒素引发的人类肝癌情况肝癌高发区地理分布与该地区食物被黄曲霉毒素污染的程肝癌高发区地理分布与该地区食物被黄曲霉毒素污染的程度呈正相关度呈正相关。1.人黄曲霉毒素中毒人黄曲霉毒素中毒癌症年平均发病率癌症年平均发病率食物食物AFB1阳性率阳性率调查年限调查年限来源来源世世 界界 平平 均均7/10万万Yeh等等，1989江苏启东县江苏启东县63/10万万52.3%1979-1989Yeh等等，1989广西扶绥县广西扶绥县52/10万万48.8%1979-1989Yeh等等，1989癌症年平均发病率癌症年平均发病率膳食中膳食中AFB1摄取量摄取量，ng/d调查年限调查年限来源来源江苏启东县江苏启东县61/10万万22.3-25.91983-1999孙桂菊等孙桂菊等，2002广西扶绥县广西扶绥县131/10万万1211-40971973-1999孙桂菊等孙桂菊等，2002肉鸡肝损伤肉鸡肝损伤，免疫机能下降免疫机能下降豚鼠肝脏颜色变化豚鼠肝脏颜色变化鸭腹腔病变鸭腹腔病变患鸭拱背和尾下垂患鸭拱背和尾下垂2.动物黄曲霉毒素中毒动物黄曲霉毒素中毒 低剂量的呕吐毒素低剂量的呕吐毒素（DON）造成动物生产性能和免疫机能造成动物生产性能和免疫机能下降下降，高剂量的毒素则引起动物急性死亡高剂量的毒素则引起动物急性死亡(Prelusky 等等,1994)。DON引起消化道出血引起消化道出血T-2毒素导致雏鸡口腔损伤毒素导致雏鸡口腔损伤3.动物单端孢霉烯族毒素中毒动物单端孢霉烯族毒素中毒呕吐毒素对猪的危害呕吐毒素对猪的危害全身性出血全身性出血，尿酸盐沉积和上消化道出现炎症尿酸盐沉积和上消化道出现炎症。禽类呕吐毒素中毒禽类呕吐毒素中毒 动物对玉米赤霉烯酮的敏感程度依次是动物对玉米赤霉烯酮的敏感程度依次是:猪猪、大鼠大鼠、牛和禽牛和禽。青年母猪对玉米赤霉烯酮的敏感性最强青年母猪对玉米赤霉烯酮的敏感性最强，饲料中含饲料中含0.10.15 mg/kgmg/kg的玉米赤霉烯酮即可引起阴门红肿的玉米赤霉烯酮即可引起阴门红肿，子宫的体子宫的体积和重量增加积和重量增加。肿大的子宫肿大的子宫正常子宫正常子宫玉米赤霉烯酮对母猪子宫的影响玉米赤霉烯酮对母猪子宫的影响（Cemlyn Martin，2003）4.4.动物玉米赤霉烯酮动物玉米赤霉烯酮中毒毒玉米赤霉烯酮导致阴门红肿玉米赤霉烯酮导致阴门红肿玉米赤霉烯酮导致直肠和阴道脱垂玉米赤霉烯酮导致直肠和阴道脱垂猪玉米赤霉烯酮中毒猪玉米赤霉烯酮中毒（Cemlyn Martin，2003）动物胚胎死亡动物胚胎死亡仔猪八字腿仔猪八字腿猪玉米赤霉烯酮中毒猪玉米赤霉烯酮中毒内内容容一一、霉菌毒素污染概况霉菌毒素污染概况二二、饲料霉菌毒素污染的防治饲料霉菌毒素污染的防治三三、霉立解降解霉毒素的动物试验霉立解降解霉毒素的动物试验四、霉菌毒素生物降解前景展望 霉菌毒素是由真菌霉菌毒素是由真菌(霉菌霉菌)产生的具有毒性的次级代谢产物产生的具有毒性的次级代谢产物。主要的霉菌毒素包括主要的霉菌毒素包括：黄曲霉毒素黄曲霉毒素、单端孢霉烯族毒素单端孢霉烯族毒素（T2毒素毒素、呕吐毒素呕吐毒素）、玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮、赭曲霉素赭曲霉素、烟曲烟曲霉素等霉素等。一一、霉菌毒素污染概况霉菌毒素污染概况.麦角（类）生物碱1.污染饲料的主要霉菌毒素污染饲料的主要霉菌毒素 联合国粮农组织联合国粮农组织（FAO）估计估计,全世界谷物全世界谷物25%受霉菌毒素受霉菌毒素污染污染，平均有平均有2%的粮食由于霉变不能食用的粮食由于霉变不能食用，全世界由于霉全世界由于霉菌毒素污染造成每年数千亿美元的损失菌毒素污染造成每年数千亿美元的损失。据美国农业部统计据美国农业部统计,畜禽食用霉菌毒素污染的饲料畜禽食用霉菌毒素污染的饲料,畜牧业每畜牧业每年遭受年遭受 14.4亿美元的经济损失亿美元的经济损失。北美北美Afla 8%;ZON 52%;DON 87%;FUM 49%OTA 12%南美南美Afla 22%;ZON 57%;DON 27%;FUM 88%;OTA 6%南欧南欧Afla 50%;DON 41%;ZON 19%;FUM 83%.;OTA 29%中东中东Afla 8%;ZON 29%;DON 40%;FUM 65%;OTA 22%东北亚东北亚Afla 13%;DON 71%;ZON 56%;FUM 44%;OTA 22%东南亚东南亚Afla 65%;DON 41%;ZON 49%;FUM 57%;OTA 32%南亚南亚Afla 88%;DON 30%;ZON 30%;FUM 58%;OTA 71%大洋洲大洋洲Afla 11%;ZON 18%;DON 26%;FUM 9%;OTA 15%中欧中欧Afla 14%;DON 60%;ZON 26%;FUM 32%;OTA 28%北欧北欧Afla 0%;DON；62%;ZON 3%;FUM 40%;OTA 25%2.2010年全球霉菌毒素污染概况年全球霉菌毒素污染概况2008中国饲料原料霉菌毒素污染调查5.80%12.60%15.20%17.30%49.10%无毒素1种毒素2种毒素3种毒素4种以上毒素中国玉米霉菌毒素污染抽样检查概况中国玉米霉菌毒素污染抽样检查概况（2007）霉菌毒素霉菌毒素样本数样本数检出率检出率()超标率超标率()含量含量黄曲霉毒素黄曲霉毒素431007.02.154.7 g/kgT T-2 2毒素毒素7210027.812.51129.9 mg/kg玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮4797.946.84.4 3613.6 g/kg 呕吐毒素呕吐毒素409532.50.012.3 mg/kg烟曲霉毒素烟曲霉毒素757642.70.110.0 mg/kg赭曲霉毒素赭曲霉毒素7566.726.70.3 89.2 g/kg霉菌毒素霉菌毒素样品数样品数平均含量平均含量ngng/kg/kg最高值最高值ngng/kg/kg阳性率阳性率()黄曲霉毒素黄曲霉毒素33424.81719.496.1T T-2 2毒素毒素34936.7252.198.3玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮420223.07772.387.9烟曲霉毒素烟曲霉毒素30929.8240.499.7赭曲霉毒素赭曲霉毒素383750.08400.085.4去氧瓜萎莲菌醇去氧瓜萎莲菌醇412970.010900.099.0亚洲地区配合饲料和饲料原料中霉菌毒素的分布亚洲地区配合饲料和饲料原料中霉菌毒素的分布（2007）我国华南我国华南、华东乃至华北地区收获季节雨量较多华东乃至华北地区收获季节雨量较多，农作物农作物在田间就会受到霉菌的污染在田间就会受到霉菌的污染。解决粮食霉菌毒素污染是一个世界性问题解决粮食霉菌毒素污染是一个世界性问题，是解决食品安是解决食品安全和人类健康的大问题全和人类健康的大问题。Aspergillus spp.Fusariumspp.Penicillium spp.黄曲霉寄生曲霉霉变玉米黄曲霉寄生曲霉霉变玉米黄曲霉毒素污染黄曲霉毒素污染4.2010年北京地区霉菌毒素污染的调查年北京地区霉菌毒素污染的调查北京地区主要饲料北京地区主要饲料原料中原料中黄曲霉毒素黄曲霉毒素检测结果检测结果项目项目样品数样品数检出率检出率(%)超标率超标率(%)毒素平均含毒素平均含量量(g/kg)最小值最小值(g/kg)最大值最大值(g/kg)轻度轻度污染污染率率(%)中度中度污染污染率率(%)严重严重污染污染率率(%)玉米玉米1650.06.26.924.810.0072.0043.86.20.0糠麸糠麸1346.20.00.270.110.001.3046.20.00.0豆粕豆粕1233.30.01.110.990.0012.0033.30.00.0DDGS1794.15.912.625.130.0083.688.25.90.0计成等计成等 2011北京地区北京地区猪全价猪全价配合配合饲料饲料黄曲霉毒素含量黄曲霉毒素含量检测结检测结果果项目项目样样品品数数检出率检出率（%）超标率超标率（%）毒素平均含量毒素平均含量(g/kg)最小值最小值(g/kg)最大值最大值(g/kg)轻度污轻度污染率染率（%）中度污中度污染率染率（%）乳猪料乳猪料757.114.36.563.430.0045.1742.814.3仔猪料仔猪料1471.414.35.793.690.0047.2657.114.3中猪料中猪料1457.17.13.701.430.0048.1850.07.1大猪料大猪料1866.711.15.262.460.0046.8055.611.1妊娠母妊娠母猪料猪料1070.00.00.310.170.001.8070.00.0哺乳母哺乳母猪料猪料1369.223.111.655.080.0050.1046.123.1计成等计成等 2011镰刀菌霉变玉米镰刀菌霉变玉米(DON)项目项目样品数样品数检出率检出率（%）超标率超标率（%）毒素平均含毒素平均含量量（mg/kg）含量范围含量范围（mg/kg）轻度污染轻度污染率率（%）中度污中度污染率染率（%）玉米玉米1492.957.11.010.17Ab0-2.1335.857.1糠麸糠麸1392.30.00.440.07Bc0-0.8992.30.0豆粕豆粕1154.50.00.050.02Cd0-0.2154.50.0DDGS17100.088.21.360.06Aa0.85-1.7211.888.2北京地区主要饲料原料中呕吐毒素北京地区主要饲料原料中呕吐毒素检测结果检测结果计成等计成等 2011北京地区北京地区猪全价猪全价配合配合饲料饲料呕吐毒素含量呕吐毒素含量检测结果检测结果项目项目样品数样品数检出率检出率（%）超标率超标率（%）毒素平均含量毒素平均含量（mg/kg）含量范围含量范围（mg/kg）轻度污染轻度污染率率（%）中度污染中度污染率率（%）乳猪料乳猪料785.70.00.280.07b0.00-0.5385.70.0仔猪料仔猪料14100.014.30.850.15a0.16-2.3185.714.3中猪料中猪料14100.014.30.620.09a0.12-1.1485.714.3大猪料大猪料1894.422.20.580.11a0.00-1.4472.222.2妊娠母妊娠母猪料猪料10100.013.60.820.14a0.13-1.4586.4136哺乳母哺乳母猪料猪料1310023.10.620.13a0.07-1.5276.923.1计成等计成等 2011玉米赤霉烯酮霉变玉米玉米赤霉烯酮霉变玉米项目项目样样品品数数检出率检出率（%）超标率超标率（%）含量范围含量范围（g/kg）阳性样品平均值阳性样品平均值（g/kg）轻污染轻污染率率（%）中度污染中度污染率率（%）严重污染率严重污染率（%）玉米玉米1410006.25-321.47109.08161.55B10000豆粕豆粕1154.4500-35.409.19191.14B10000糠麸类糠麸类1310000-44.4014.92182.25B10000DDGS1710041.1848.89-2957.87882.68146.4A58.8223.5317.6527北京地区主要饲料北京地区主要饲料原料中玉米赤霉烯酮检测结果原料中玉米赤霉烯酮检测结果计成等计成等 2011项目项目样品数样品数阳性样品阳性样品数数检出率检出率（%）超标率超标率（%）含量范围含量范围（g/kg）阳性样品平均阳性样品平均值值（g/kg）轻污染率轻污染率（%）乳猪料乳猪料7710004.69-106.8639.1117.04100仔猪料仔猪料141410001-114.5953.60 13.02100中猪料中猪料141410007.59-131.6966.97 13.02100大猪料大猪料181810007.08-149.7659.0112.51100怀孕母猪怀孕母猪料料101010009.23-149.1162.94 13.59100哺乳猪料哺乳猪料131310007.35-231.5975.60 13.02100合计合计767610001-231.5958.885.3610028猪全价猪全价配合配合饲料玉米赤霉烯酮饲料玉米赤霉烯酮含量含量检测结果检测结果计成等计成等 2011 联合国粮农组织联合国粮农组织（FAO）于于1995年建议将危害分析与关键年建议将危害分析与关键控制点控制点（HACCP）系统应用于霉菌毒素管理系统应用于霉菌毒素管理，通过加强通过加强作物生长作物生长、成熟成熟收获和贮存等各个环节的控制来最大限收获和贮存等各个环节的控制来最大限度的减少食品和饲料中的霉菌毒素度的减少食品和饲料中的霉菌毒素。饲料在贮存过程中不可避免霉变饲料在贮存过程中不可避免霉变：1）严格控制原料的含水量严格控制原料的含水量2）使用优质防霉剂使用优质防霉剂（丙酸及其盐类丙酸及其盐类）二二、饲料霉菌毒素污染的防治饲料霉菌毒素污染的防治适用范围适用范围动物动物霉菌毒素霉菌毒素（ppb）AF1ZONT2OTADON玉玉米米2020500 10001005000配合饲料配合饲料家家禽禽2020500 10001005000猪猪2020500 10001001000犊犊牛牛2020500 10001001000泌乳期动物泌乳期动物2020500 10001001000牛牛2020500 10001005000-中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准ZON=玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮；T2=T-2毒素毒素；OTA=赭曲霉毒素赭曲霉毒素；DON=呕吐毒素呕吐毒素中国霉菌毒素的限量标准中国霉菌毒素的限量标准方法分类方法分类具体技术具体技术优缺点优缺点1.1.上世纪上世纪5050年代年代传统物理化学法传统物理化学法碱处理碱处理、氧化处理氧化处理、高温处理高温处理、原料稀原料稀释等释等降低饲料的营养价值降低饲料的营养价值；影响饲料的感官品质影响饲料的感官品质；有些方法去毒不彻底有些方法去毒不彻底。2.2.上世纪上世纪9090年代年代吸附剂吸附法吸附剂吸附法硅铝酸盐类等无机硅铝酸盐类等无机吸附剂吸附剂、酯化甘露酯化甘露聚糖等有机吸附剂聚糖等有机吸附剂影响维生素和微量元素等吸收影响维生素和微量元素等吸收；在消化道内吸附效果不稳定在消化道内吸附效果不稳定；造成环境蓄积性污染造成环境蓄积性污染。3.3.本世纪初本世纪初微生物发酵处理法微生物发酵处理法芽孢杆菌芽孢杆菌、白腐真白腐真菌菌、假密环菌等假密环菌等芽孢杆菌可以直接添加芽孢杆菌可以直接添加；次级代谢产物可能有毒害作用次级代谢产物可能有毒害作用。4.4.本世纪近本世纪近1010年年纯化降解酶降解法纯化降解酶降解法白腐真菌白腐真菌、假密环假密环菌菌、粘细菌粘细菌、芽孢芽孢杆菌等所产解毒酶杆菌等所产解毒酶特异性强特异性强；不影响饲料的营养价值不影响饲料的营养价值；避免毒素的蓄积性污染环境避免毒素的蓄积性污染环境；避免次级代谢产物的毒害作用避免次级代谢产物的毒害作用。1.霉菌毒素解毒方法研究进展霉菌毒素解毒方法研究进展研究表明部分粘土类矿物质能吸附黄曲霉毒素研究表明部分粘土类矿物质能吸附黄曲霉毒素2.吸附剂吸附效果吸附剂吸附效果DON 不易被吸附剂吸附不易被吸附剂吸附样品名称样品名称样品样品称样量称样量g g蒙脱石蒙脱石称样量称样量g gVB6VB6结果结果（g/kgg/kg）平均数平均数吸附率吸附率%九联肉鸡九联肉鸡多维多维0.40990.409913.25 13.25 13.04 13.04 0.42470.424712.83 12.83 九联肉鸡九联肉鸡+蒙脱石蒙脱石0.43480.43480.54440.54447.27 7.27 6.94 6.94 46.78 46.78 0.42120.42120.54090.54096.60 6.60 大龙仔猪大龙仔猪多维多维0.43310.433116.51 16.51 16.60 16.60 0.41170.411716.70 16.70 大龙仔猪大龙仔猪+蒙脱石蒙脱石0.42230.42230.54350.54359.80 9.80 8.91 8.91 46.33 46.33 0.41820.41820.54350.54358.02 8.02 吸附剂对维生素B6的吸附作用瘤胃内容物含水量为瘤胃内容物含水量为84%-94%全消化道中全消化道中67%的内容物在瘤胃中的内容物在瘤胃中。消化道食糜在瘤胃内停留消化道食糜在瘤胃内停留20-48小时小时，相当于整个相当于整个消化过程的一半时间消化过程的一半时间。瘤胃中被吸附的黄曲霉毒素会解吸附瘤胃中被吸附的黄曲霉毒素会解吸附。3.反刍动物吸附剂应用的问题反刍动物吸附剂应用的问题 霉菌毒素传统的物理和化学去毒方法存在效果不稳定霉菌毒素传统的物理和化学去毒方法存在效果不稳定、营营养成分损失大养成分损失大、影响饲料适口性影响饲料适口性，且难以规模化生产等缺且难以规模化生产等缺点而不能被广泛应用到实际生产中点而不能被广泛应用到实际生产中。微生物及生物酶解毒因具有解毒效率高微生物及生物酶解毒因具有解毒效率高、特异性强特异性强、对饲对饲料和环境没有污染等特点和优势料和环境没有污染等特点和优势，备受研究者的关注备受研究者的关注。霉菌毒素生物降解霉菌毒素生物降解指微生物指微生物、植物及其代谢产生的酶与毒植物及其代谢产生的酶与毒素作用素作用，使其分子结构中毒性基团被破坏而生成无毒降解使其分子结构中毒性基团被破坏而生成无毒降解产物的过程产物的过程。4.生物降解法的发展生物降解法的发展 国家自然科学基金项目国家自然科学基金项目（编号编号:30571353,31072063）、）、动动物营养学国家重点实验室项目物营养学国家重点实验室项目（编号编号:2004DA125184（团团）0806），），长江学者和创新团队发展计划研究项目长江学者和创新团队发展计划研究项目（编号编号:IRT0945）及及农业产业科学技术体系农业产业科学技术体系（蛋鸡蛋鸡）（编号编号:nycytx-41-）项目资助下项目资助下。对霉菌毒素对霉菌毒素（特别是特别是黄曲霉毒素黄曲霉毒素、呕吐毒素呕吐毒素、玉米赤霉烯玉米赤霉烯酮酮）生物降解进行了比较系统的研究生物降解进行了比较系统的研究，并取得一些显著成并取得一些显著成果果。5.本研究室研究成果本研究室研究成果菌株编号菌株编号菌株鉴定结果菌株鉴定结果ANSM068Myxococcus fulvus 橙红色粘球菌橙红色粘球菌ANSB060ANSS353Bacillus subtilis 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌Stenotrophomonas maltophilia嗜麦芽窄食单胞菌嗜麦芽窄食单胞菌ANSBS02Brevundimonas sp.短波单胞菌短波单胞菌ANSBC05Bacillus anthracis 炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌ANSKB03Klebsiella sp.克雷伯氏菌克雷伯氏菌ANSCW03Cellulosimicrobium sp 纤维微杆菌纤维微杆菌ANSE471Enterobacter hormaechei 霍氏肠杆菌霍氏肠杆菌ANSB532Brachybacterium sp 短状杆菌短状杆菌课题组筛选到的能降解课题组筛选到的能降解AFBAFB1 1的菌株的菌株（Guan等等，2008）Company L应用应用Bacillus subtilis 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌ANSB060经过经过发酵生产产品发酵生产产品命名霉立解命名霉立解4.成果转化产品成果转化产品霉立解霉立解（一一）霉立解对饲喂黄霉变花生粕肉鸡霉立解对饲喂黄霉变花生粕肉鸡生产性能的影响生产性能的影响2012年4月中国农业大学涿州实验站三三、霉立解降解霉毒素的动物实验霉立解降解霉毒素的动物实验1.实验动物实验动物将将420420只体重接近的只体重接近的7 7日龄罗斯日龄罗斯308308肉公鸡肉公鸡，随机分为随机分为7 7组组，每组每组6 6个重复个重复，每个重复每个重复1010只鸡只鸡，进行饲养试验进行饲养试验。试验设计见表试验设计见表1 1。表表1 试验设计试验设计分组分组日日粮粮1基础日粮基础日粮+21%正常花生粕正常花生粕（正对照正对照）2基础日粮基础日粮+21%霉变花生粕霉变花生粕（负对照负对照）3基础日粮基础日粮+21%正常花生粕正常花生粕+500g/t 霉立解霉立解4基础日粮基础日粮+21%正常花生粕正常花生粕+1000g/t 霉立解霉立解5基础日粮基础日粮+21%霉变花生粕霉变花生粕+500g/t 霉立解霉立解6基础日粮基础日粮+21%霉变花生粕霉变花生粕+1000g/t 霉立解霉立解7基础日粮基础日粮+21%霉变花生粕霉变花生粕+2000g/t 霉立解霉立解注注：霉变花生粕为被黄曲霉毒素污染的花生粕霉变花生粕为被黄曲霉毒素污染的花生粕，经测定其经测定其AFB1含量为含量为330g/kg，AFB2含量为含量为80.1g/kg，AFG1含量为含量为30.2g/kg，AFG2含量为含量为7.1g/kg，其他种类毒素其他种类毒素ZEN为为15.1g/kg，DON和和OTA均未检出均未检出。2.试验设计试验设计表表2 2 基础日粮组成及营养水平基础日粮组成及营养水平（风干基础风干基础）原料名称原料名称组成组成（%）营养素名称营养素名称东北玉米东北玉米58.758.7粗蛋白粗蛋白（%）21.4821.48国产膨化大豆国产膨化大豆6.06.0禽代谢能禽代谢能MC/KgMC/Kg3.013.01涿州豆粕涿州豆粕8.08.0钙钙（%）0.990.99正常花生粕正常花生粕21.021.0总磷总磷（%）0.650.65石粉石粉1.21.2非植酸磷非植酸磷（%）0.430.43磷酸氢钙磷酸氢钙1.81.8蛋氨酸蛋氨酸（%）0.620.62食盐食盐0.30.3蛋胱氨酸蛋胱氨酸（%）0.910.91大豆油大豆油2.02.0赖氨酸赖氨酸（%）1.151.15预混料预混料1.01.0合合计计100.0100.0样品名样品名产地产地AFBAFB1 1含量含量ugug/kg/kg平均值平均值ugug/kg/kg降解率降解率%霉变花生粕霉变花生粕1 1-1 1湖北湖北336.96 336.96 324.17324.17霉变花生粕霉变花生粕1 1-2 2湖北湖北311.38 311.38 霉变花生粕霉变花生粕2 2-1 1湖北湖北348.53 348.53 342.37342.37霉变花生粕霉变花生粕2 2-2 2湖北湖北336.22 336.22 霉变花生粕霉变花生粕1 1-1 1+霉立解霉立解湖北湖北83.33 83.33 58.1958.1982.05 82.05 霉变花生粕霉变花生粕1 1-2 2+霉立解霉立解湖北湖北33.05 33.05 霉变花生粕霉变花生粕2 2-1 1+霉立解霉立解湖北湖北52.06 52.06 42.8342.8387.49 87.49 霉变花生粕霉变花生粕2 2-2 2+霉立解霉立解湖北湖北33.60 33.60 霉立解体外降解霉变花生粕黄曲霉毒素的测定霉立解体外降解霉变花生粕黄曲霉毒素的测定各处理组饲料样各处理组饲料样组别组别2121天体重天体重（g g）4242天体重天体重（g g）日增重日增重（g/g/只只天天）日采食量日采食量（g/g/只只天天）料重比料重比对照组对照组844.198.85ab23910124.03a73.661.68a134.562.11a1.860.02cd霉花生粕霉花生粕834.237.42b2257.0035.65b67.751.49b132.341.47a1.970.02a好花生粕好花生粕霉立解霉立解500500838.334.25b2326.8031.96ab70.881.56ab133.642.03a1.890.02bcd好花生粕好花生粕霉立解霉立解10001000828.817.94b2353.9525.53a72.321.21a137.362.22a1.900.01bc霉花生粕霉花生粕霉立解霉立解500500838.469.22b2339.7829.97ab71.491.20ab137.071.75a1.920.02b霉花生粕霉花生粕霉立解霉立解10001000839.258.52b2353.8217.28a72.720.60a133.471.71a1.840.03d霉花生粕霉花生粕霉立解霉立解20002000863.847.86a2381.0422.24a72.410.86a136.731.41a1.890.01bcd表表3 霉立解对饲喂黄曲霉毒素霉变花生粕肉鸡霉立解对饲喂黄曲霉毒素霉变花生粕肉鸡2222-4242天天生产性能的影响生产性能的影响3.试验结果试验结果左左正常花生粕正常花生粕 1组组中中霉变花生粕霉变花生粕 2组组右右霉花生粕加霉立解霉花生粕加霉立解 5组组4.试验试验6周末体重变化周末体重变化5.试验试验6周各处理组鸡肝脏图片周各处理组鸡肝脏图片负对照组鸡出现肝脏病变死亡情况负对照组鸡出现肝脏病变死亡情况5.肉鸡肝脏变化肉鸡肝脏变化（二二）霉立解对饲喂霉变玉米对产蛋鸡霉立解对饲喂霉变玉米对产蛋鸡生产性能的影响生产性能的影响2010年12月中国农业大学涿州实验站表表1 1 试验设计试验设计分组分组日粮日粮C0基础日粮基础日粮（对照对照）C20基础日粮基础日粮+20%霉变玉米霉变玉米E20基础日粮基础日粮+20%霉变玉米霉变玉米+ANSB060发酵液发酵液C40基础日粮基础日粮+40%霉变玉米霉变玉米E40基础日粮基础日粮+40%霉变玉米霉变玉米+ANSB060发酵液发酵液C60基础日粮基础日粮+60%霉变玉米霉变玉米E60基础日粮基础日粮+60%霉变玉米霉变玉米+ANSB060发酵液发酵液注注：（：（1）霉变玉米为被黄曲霉毒素污染的玉米霉变玉米为被黄曲霉毒素污染的玉米，经测定其经测定其AFB1含量为含量为70 g/kg，其他种类毒素其他种类毒素DON为为0.23g/kg，ZEN和和OTA均未检出均未检出。（2）枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌ANSB060菌液的添加量为菌液的添加量为：1公斤发霉玉米添加公斤发霉玉米添加0.4升发酵液升发酵液。1.试验设计试验设计表表2 2 基础日粮组成及营养水平基础日粮组成及营养水平（风干基础风干基础）原料原料Ingredient比例比例Percentage,%营养成分营养成分Nutrition component含量含量Content玉米玉米 Maize62.34代谢能代谢能 ME,MJ/Kg11.09大豆粕大豆粕 Soybean meal22.00粗蛋白粗蛋白 CP,%16.50棉籽粕棉籽粕 Cottonseed meal3.00赖氨酸赖氨酸 Lysine,%0.87小麦麸小麦麸 Wheat bran2.00蛋氨酸蛋氨酸 Methionine,%0.42磷酸氢钙磷酸氢钙 CaHPO41.60蛋蛋+胱氨酸胱氨酸 Met+Cys,%0.66石粉石粉 Limestone8.23钙钙 Ca,%3.48食盐食盐 Salt0.25磷磷 P,%0.58氯化胆碱氯化胆碱 Choline chloride0.08有效磷有效磷 AP,%0.40小苏打小苏打 Sodium bicarbonate0.20蛋氨酸蛋氨酸Methionine0.09赖氨酸赖氨酸Lysine0.07矿物质预混料矿物质预混料aMineral premixa0.11维生素预混料维生素预混料b Vitamin premixb0.03合合 计计 Total100正常玉米正常玉米（左左）与被黄曲霉毒素污染的玉米与被黄曲霉毒素污染的玉米（右右）表表3 3 枯草芽孢杆菌对饲喂枯草芽孢杆菌对饲喂3 3周周AFB1AFB1霉变玉米蛋鸡生产性能的影响霉变玉米蛋鸡生产性能的影响分组分组产蛋率产蛋率（%）平均蛋重平均蛋重（g）日耗料量日耗料量（g）料蛋比料蛋比C075.00a56.71100.22ab2.48abC2065.00ab56.4893.08bc2.88abE2074.68a56.5881.12cd1.93bC4063.41ab53.95109.63a3.75aE4066.08ab54.3198.27ab2.96abC6049.79b53.3269.44d3.21abE6055.39b53.3970.76d2.56abSEM6.100.461.780.12P0.010.19.00010.022.生产性能试验结果生产性能试验结果组别组别蛋黄重蛋黄重(g)蛋黄色泽蛋黄色泽蛋壳强度蛋壳强度(kg/cm2)蛋壳厚度蛋壳厚度(mm)哈氏单位哈氏单位蛋白高度蛋白高度(mm)蛋形指数蛋形指数蛋壳色泽蛋壳色泽C016.29abc6.96a2.68a0.34a72.625.231.3586.55C2016.35ab5.95bc2.20ab0.32bc73.655.561.3585.37E2017.17a6.27ab2.37a0.32bc77.055.661.3685.37C4014.73d5.742.43a0.31a73.335.151.3785.26E4015.16bcd5.79bc2.40a0.33ab72.215.481.4084.08C6015.50bcd5.88bc1.88b0.31a76.485.861.3983.73E6015.01cd5.94bc1.80b0.32bc76.345.621.3983.16SEM0.120.070.040.0020.590.070.0030.25P.0001.0001.00010.010.050.130.110.18表表4 4 立解立解060060菌对饲喂菌对饲喂3 3周周AFB1AFB1霉变玉米蛋鸡蛋品质的影响霉变玉米蛋鸡蛋品质的影响3.鸡蛋品质试验结果鸡蛋品质试验结果表表5 5 枯草芽孢杆菌对饲喂枯草芽孢杆菌对饲喂3 3周周AFB1AFB1霉变玉米蛋鸡器官指数的影响霉变玉米蛋鸡器官指数的影响处理处理肝脏重肝脏重/活体重活体重（%）脾脏重脾脏重/活体重活体重（%）肾脏重肾脏重/活体重活体重（%）心脏重心脏重/活体重活体重（%）C03.25a0.090.770.40C202.56b0.090.700.33E203.11a0.090.750.34C402.09c0.080.680.32E402.62b0.090.730.35C601.97c0.080.670.35E602.44bc0.100.640.37SEM0.500.000.100.10P.00010.080.160.094.肝肝、脾脾、肾试验结果肾试验结果表表6 6 枯草芽孢杆菌对饲喂枯草芽孢杆菌对饲喂6 6周周AFB1AFB1霉变玉米蛋鸡肝脏代谢酶活和抗氧化指标的影响霉变玉米蛋鸡肝脏代谢酶活和抗氧化指标的影响处理处理SOD活性活性（U/mgprot）GSH-Px活性活性（U/mgprot）MDA含量含量（nmol/mgprot）C0157.26a37.48a0.21cC20142.28ab31.75ab0.39cE20139.87ab32.53ab0.42cC40132.86b22.99b0.85bE40148.84ab31.18ab0.37cC60132.25b24.16b1.29aE60145.75ab29.17ab0.85bSEM9.665.250.20P0.050.040.00015.抗氧化试验结果抗氧化试验结果表表7 7 枯草芽孢杆菌对饲喂枯草芽孢杆菌对饲喂6 6周霉变玉米蛋鸡回肠和结肠食糜周霉变玉米蛋鸡回肠和结肠食糜AFB1AFB1残留量的影响残留量的影响处理处理回肠食糜回肠食糜结肠食糜结肠食糜AFB1残留量残留量（g/kg）降解率降解率（%）AFB1残留量残留量（g/kg）降解率降解率（%）C000.000.70.01C206.590.077.660.09E203.350.34496.800.0511C4015.540.0243.110.20E4011.560.142624.420.0943C6022.050.1238.600.04E6013780.073725.010.16356.肠道黄曲霉毒素降解试验结果肠道黄曲霉毒素降解试验结果烘干物质烘干物质）（三三）霉立解对霉立解对仔猪生长的应用仔猪生长的应用效果研究效果研究2011年4月亿万中元生物技术公司试验猪场1.试验设计试验设计9696头健康的三元杂交仔猪头健康的三元杂交仔猪，平均体重平均体重25250.5kg0.5kg，试试验期为验期为2121天天。处理处理重复重复对照组对照组20%20%霉玉米霉玉米20%20%霉玉米霉玉米+1kg/T+1kg/T霉立解霉立解12348888888888882.试验结果试验结果平均采食量平均采食量（g)平均日增平均日增重重（g)料肉比料肉比腹泻率腹泻率（%）对照组对照组136126643152.120.113.120%霉玉米霉玉米组组134631619202.210.0540.6霉立解霉立解+20%霉玉米组霉玉米组135119636232.090.090仔猪生产性能结果仔猪生产性能结果（四四）呕吐毒素降解菌对呕吐毒素降解菌对生长猪的应用生长猪的应用效果研究效果研究（合作研究合作研究）1999年6月加拿大农业部食品研究所用作益生菌用作益生菌饲料混合发酵去毒饲料混合发酵去毒降解降解饲饲料中料中DON在鱼的肠道筛选在鱼的肠道筛选微生物微生物1.试验设计试验设计猪饲养试验猪饲养试验动物饲养试验验证解毒微生物的效率动物饲养试验验证解毒微生物的效率适应期适应期4天天预饲期预饲期9天天攻毒期攻毒期 9天天恢复期恢复期11天天小猪小猪组成组成A正常玉米正常玉米B玉米玉米+DONC发酵发酵+毒的玉米毒的玉米D发酵的玉米发酵的玉米玉米玉米玉米玉米+DON+DON发酵发酵+毒玉米毒玉米+DON 发酵玉米发酵玉米+DON 呕吐毒素呕吐毒素05 ppm5 ppm0DOM-1去环氧化去环氧化呕吐毒素呕吐毒素0000表表1 1 猪去毒试验设计猪去毒试验设计测定指标生产性能指标生产性能指标个体重个体重耗料量耗料量每个试验阶段测两次每个试验阶段测两次饲料增重比饲料增重比试验期第试验期第1818天取血天取血，测定血清生化指标测定血清生化指标4个处理组的猪有显著差异个处理组的猪有显著差异B组玉米组玉米+DON D组发酵玉米组发酵玉米C组发酵玉米组发酵玉米+DONA组正常玉米组正常玉米2.试验结果试验结果处理组处理组ABCD攻毒期攻毒期日增重日增重(g/d)882b458a835b835b日采食量日采食量(g/d)1,337b943a1,367b1,347b料重比料重比0.66b0.47a0.62b0.61ab恢复期恢复期日增重日增重(g/d)9161,056890899日采食量日采食量(g/d)1,6481,6801,6291,628料重比料重比0.550.630.550.55表表2 2 解毒微生物对断奶仔猪生长性能的影响解毒微生物对断奶仔猪生长性能的影响+DON+DON 表表3.3.猪血清中猪血清中DONDON和和DOMDOM-1 1的含量的含量处处理理n重复数重复数DON平均浓度平均浓度 SD(ngml-1)DOM平均浓度平均浓度 SD(ngml-1)A组正常玉米组正常玉米6n.d.n.d.B组玉米组玉米+DON838.813.7 n.d.C组发酵玉米组发酵玉米+DON8n.d.20.84.4 D组发酵玉米组发酵玉米6n.d.n.d.n.d.:未检测出未检测出;SD:表示表示8个处理的标准误个处理的标准误结论结论 细菌发酵处理的日粮可以消除细菌发酵处理的日粮可以消除DONDON对仔猪生长性能对仔猪生长性能的影响的影响。细菌本身对