1、
实验2水样总氮的测定
—过硫酸钾氧化-紫外分光光度法（HJ 636-2012）
一、实验目的
（1）掌握总氮的测定原理和方法。
（2）了解影响总氮测定的因素。
二、实验原理
K2S2O8+H2O→2KHSO4+1/2O2
KHSO4→H++ HSO4ˉ
HSO4ˉ→H++ SO42-
OH-+H+→H2O
在60 ℃以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，分解出的原子态氧在120～124 ℃条件下，可使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐。在此过程中有机物同时被氧化分解。
A＝A220－2A275
2、 （1-1）
本方法的检出限为0.05mg/L，测定范围为0.20～4.00mg/L。
三、实验试剂 （配制以下试剂均使用无氨水）
（1）氢氧化钠溶液（200 g/L）：称取20 g氢氧化钠，溶于无氨水中，稀释至100 mL。
（2）氢氧化钠溶液（20 g/L）：，将溶液（1）稀释10倍而得。
（3）碱性过硫酸钾溶液：称取40 g过硫酸钾(K2S2O8)溶于600 mL水中，另称取15 g氢氧化钠溶于300 mL 水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至1000 mL，溶液存放在聚乙烯瓶内，最长可贮存一周。
（4）盐酸溶液（1＋9）
3、浓盐酸和无氨水的体积比为1:9。
（5）硝酸钾标准贮备液（氮含量100 mg/L）：硝酸钾(KNO3)在105℃～110℃电热干燥箱中干燥3h，在干燥器中冷却后，称取0.7218 g，溶于无氨水中，移至1000 mL容量瓶中，用无氨水稀释至标线，混匀。加入1～2 mL三氯甲烷作为保护剂，并在0～10 ℃暗处保存，可稳定6个月。
（6）硫酸溶液（1＋35）：浓硫酸和无氨水的体积比为1:35。
3. 实验器材
所用玻璃器皿用盐酸(1＋9)或硫酸(1＋35)浸泡，清洗后再用无氨水冲洗数次。
（1）紫外分光光度计：配备10 mm石英比色皿。
（2）压力蒸汽灭菌器：医用手提式蒸气灭菌器或家
4、用压力锅(压力为1.1～1.4 kg/cm2)，锅内温度相当于120～124 ℃。
（3）比色管：具玻璃磨口塞，25 mL。
四、实验方法和步骤
1. 样品测定
（1）取10.00 mL试样（20～80μgN）置于比色管中＋5 mL碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞用绳扎紧瓶塞，以防弹出→将比色管置于医用手提蒸气灭菌器中，加热至顶压阀吹气，关阀→使压力表指针到1.1～1.3 kg/cm2，此时温度达120～124 ℃后开始计时→保持温度在120～124 ℃之间30 min→自然冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管，冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀2～3次→＋(1＋9)盐酸1.0
5、mL→用无氨水稀释至25 mL标线，盖塞混匀→在紫外分光光度计上，以无氨水作参比，10 mm石英比色皿，分别在波长为220 nm与275 nm处测定吸光度，并用式（1-1）计算出校正吸光度Ar。同时作空白（10 mL无氨水代替试样，Ab≤0.03）
2. 标准曲线的测定
分别吸取(10 mgN/L)硝酸钾标准溶液0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00和7.00 mL于25 mL具塞磨口玻璃比色管中，其对应的总氮（以N计）含量分别为0.00、0.20、0.40、0.80、1.20、2.00和2.80mg/L。加无氨水定容，直接上机测定，用差值△A与浓度c作标准曲线。计算线
6、性回归方程。
五、实验数据记录
按式(1-1)计算样品的校正吸光度Ar，减去Ab后在标准曲线上查出相应的总氮浓度，乘以定容体积，得总氮质量m，按下式计算总氮浓度CN。
式中：CN(mg/L)；m —试样含氮量，mg； V —试样体积， L。
六、思考题
1. 实验的干扰离子有哪些？如何消除？若空白较高，原因？
2.总氮与硝氮+氨氮的和大小比较，若小于硝氮+氨氮的和，原因？
3.查国标CB3838-2002和污水排放标准，判断是否超标？
七、注意事项
1）参考吸光度比值A275/A220×100％＜20％时，大于20%应鉴别。λ220-280nm，每隔2-5nm测吸光度，在220和275nm处不应有折线出现。
2）玻璃具塞比色管的密合性应良好。使用压力蒸汽消毒器时，冷却后放气要缓慢；防开裂；
3）测定悬浮物较多的水样时，在过硫酸钾氧化后可能出现沉淀。遇此情况，可吸取氧化后的上清液进行测定。
4）使用高压蒸汽消毒器时，应定期校核比力表；
5）无氨水；每升水中加入0.1ml浓硫酸，蒸馏。收集馏出液。
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