高糖上调内皮细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的作用机制.pdf

基础研究高糖上调内皮细胞间黏附分子1 和血管细胞黏附分子1 表达的作用机制农善伟柯丽琴张小勇黄秀清满永王抒黎健宁应之2 1 9【摘要】目的探讨高糖上调内皮细胞间黏附分子1(I C A M 1)和血管细胞黏附分子1(V C A M 1)表达的作用机制。方法高浓度葡萄糖(2 0r e t o o l L)处理分离培养的人脐静脉内皮细胞(H U V E C s)，以2-7 二氯荧光索双醋酸盐(D C F H D A)标记流式细胞仪检测细胞内活性氧(a o s)。W e s t e r nb l o t 分析细胞内抑制性蛋白K B(I K B)和核转录因子-K B(N F-K B)蛋白表达和磷酸化水平免疫荧光法检测N F-K B 的活化。结果高糖处理H U V E C s 后，伴随R O S 的显著升高，I K B 蛋白明显下调，磷酸化的I K B 和N F-K B 均增多，使N F K B 移位至细胞核内，导致I C A M 1、V C A M l 的表达明显增强。结论高糖通过刺激R O S 的产生和N F-K B 的活化上调内皮细胞I C A M-I 和V C A M 1 黏附因子的表达。【关键词】葡萄糖；内皮细胞；活性氧；细胞黏附分子M e c h a n i s mu n d e r l y i n gu p-r e g u l a t i o no fI C A M-1a n dV C A M-1 e x p r e s s i o n si n d u c e db yh i g h#u c o s ei ne n d o t h e l i a lc e l l sN O N GS h a n-w e i+，K EL i q i n，Z H A N GX i a o-y o n g，H U A N G 尼“一q i n g，M A NY o n g，W A N GS h u，L IJ i a n，N I N GY i n g-z h i N o r t h w e s tN o r m a lU n i v e r s i t y，L a n z h o u7 3 D D 7 D，C h i n aC o r r e s p o n d i n ga u t h o r s：N I N GY i n g-z h i，E m a i l：n i n g y z n w n u e d gO g；1 2J i a n，E n t a i l：l i j i a n 跏m o h 饥【A b s t r a c t】O b j e c t i v eT oi n v e s t i g a t et h em e c h a n i s mu n d e r l y i n gu p-r e g u l a t i o no fI C A M Ia n dV C A M 1 e x p r e s s i o ni n d u c e db yh i S hS l u c 雠i ne n d o t h e l i a lc e l l s M e t h o d sC u l t u r e dh u m a nu m b i l i c a lv e i ne n d o t h e l i a lc e l l s(H U V E C s)w e mt r e a t e dw i t h2 0m m o l Ls l n c o 鸵，a n dc e l l u l a rr e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s(R O S)l e v e lw a sd e t e c t e db yf l o we y t o m e t r y W e s t e r nb l o tw a sa p p l i e dt oa n a l y s ee x p r e s s i o na n dp h o s p h o r y l a t i o no fI K Ba n dN F-K B T h ea c t i v a t i o no fN F-x BW A gm e a s u r e db yi m m u n o f l u o r e a c e n c e R e s u l t sT r e a t m e n to fH U V E C sw i t h2 0m m o l LS l u 嘲ed e c r e a s e dI K Bl e v e la n ds t i m u l a t e dt h ep h o s p h o r y l a t i o no fI K Ba n dN F K B a n da c c o m p a n i e db yi n c r e a s e dR O Sl e v e LN F K Bw a st r a n s l o c a t e di n t on u c l e u sw h e r eN FK Bu p r e g u h t e dt h ee x p r e s s i o n so fi n f l a m m a t o r yf a c t o r ss u c ha sI C A M-Ia n dV C A M-1 C o n d u s i o n sH i g hg l u c o s eu p r e g u l a t e st h ee x p r e s s i o n so fI C A M 一1a n dV C A M lv i at h es t i m u l a t i o no fR O Sg e n e r a t i o na n dt h ea c t i v a t i o no fN F K Bp a t h w a y【K e yw o r d s】G l u c o s e；E n d o t h e l i a lc e l l s；R e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s；C e l la d h e s i o nm o l e c u l e糖尿病是心血管疾病的重要危险因素，其中血糖异常是糖尿病患者血管并发症的重要原因之一，高糖导致内皮细胞发生特异的功能异常和形态改D O I：1 0 3 9 6 9 j i s s n 1 0 0 7 5 4 l O 2 0 l O 0 3 0 1 6基金项目：国家自然科学基金项目(3 0 4 4 0 0 6 5、3 0 5 7 2 0 8 2、3 0 8 7 0 2 7 3)、北京市自然科学基金资助项目(7 0 5 2 0 5 9)作者单位：7 3 0 0 7 0 兰州，西北师范大学(农善伟、宁应之)；卫生部北京医院老年医学研究所(柯丽琴、张小勇、黄秀清、满永、王抒、黎健)通讯作者：黎健，电子信箱：l i j i a n b j h m o ko n；宁应之，电子信箱：n i n g y z n w n u e d I Lc n注：农善伟、柯丽琴为并列第一作者；黎健、宁应之为并列通讯作者变，是血管并发症的早期标志。研究表明，高糖具有一定的细胞毒性，可延长内皮细胞的增殖，破坏细胞周期，增加D N A 损害，加速细胞凋亡。高糖还可调节黏附分子的表达并增加中性白细胞和单核细胞对内皮细胞的黏附。另据报道，高糖可导致内皮细胞中活性氧(r e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s，R O S)生成增加，并导致细胞凋亡 2 _ 3】。R O S 作为细胞信号传导通路中的重要信号分子，在内皮细胞的生长与损伤中起关键作用。过多的R O S 可刺激内皮细胞产生细胞问黏附分子1(i n t e r c e l l u l a ra d h e s i o nm o l e c u l e1，I C A M-1)和血管细胞黏附分子1(v a s c u l a rc e l la d h e s i o nm o l l i e1，V C A M-1)等黏附因子，造成炎症细胞浸润，加重血管内皮损伤。万方数据本研究以人脐静脉内皮细胞(h u m a nu m b i l i c a lv e i ne n d o t h e l i a lc e l l s，H U V E C s)为细胞模型从R O S生成和核转录因子K B(n u c l e a rf a c t o r K B，N F x B)活化角度探讨高糖上调内皮细胞I C A M 1 和V C A M 一1黏附因子表达的作用机制。1 材料与方法1 1 材料M 1 9 9 培养基、青霉素和链霉素为G i b c o 产品；胰蛋白酶和E D T A 为S i g m a 产品；胎牛血清为H y-c l o n e 产品；逆转录试剂盒、鼠抗人因子相关抗原抗体、F I T C 标记的羊抗鼠I g G、H o e c h s t 3 3 3 4 2、T a g 酶和型胶原酶为P r o m e g a 产品；兔抗N F K B、I K B、P I K B、I C A M 一1 和V C A M l 抗体均为S a n t aC r u z 产品；细胞内R O S 检测试剂盒购自江苏碧云天公司。1 2 原代H U V E C s 的分离培养取长度约2 0c m 的新鲜脐带，用生理盐水冲洗脐静脉后，用2 的型胶原酶灌注脐静脉1 5m i n，收集灌注液，8 0 0r p m 离心6m i n，收集内皮细胞到2 5e m 2 培养瓶中加入M1 9 9 混合培养基(5m 1)在3 7 含5 的C O，培养箱中培养，1 2h 后更换新鲜培养基，以后每隔2d 换液1 次。待第2、3 代细胞长至亚融合状态时用于实验。分离培养的细胞经因子鉴定为内皮细胞。1 3 细胞内R O S 检测用无血清的培养基冲洗细胞2 次，加5m 1 无血清培养基和7 山2-77 一二氯荧光素双醋酸盐(D C F H D A)到2 5c m 2 的培养瓶中，在3 7 含5 C O，的培养箱中孵育4 5r a i n；P B S 洗3 次，用胰酶消化，加血清终止反应，用无血清培养基洗2 次，用3l I l l 无血清培养基重悬细胞；其中阳性对照组加药物R o s u p(试剂盒提供)5 山，常温下孵育lh；P B S 冲洗2 次后用流式细胞仪检测细胞内R O S。1 4W e s t e r nb l o t 检测蛋白水平去除培养液，用冰冷的P B S 洗涤细胞2 次；将2 5c m 2 培养瓶置至碎冰上，加入预冷裂解液2 0 0 山，冰上孵育2 0r a i n，收集细胞裂片及裂解缓冲液4 1 20 0 0g 离心1 0r a i n 收集上清液测定蛋白浓度。取总蛋白与6 倍蛋白上样缓冲液混匀总体积约3 0斗1，1 0 0 加热5m i n，稍离心；配制并灌注1 2 S D SP A G E 胶，恒压8 0V 电泳，待溴酚蓝染料带进入分离胶后将电流调至1 2 0V，当溴酚蓝带到达凝胶底部时，停止电泳。将硝酸纤维素膜浸入转膜缓冲C h i n e s eJ o u r n a lo fC a r d i o v a s c u l a rM e d i c i n e，J u n e2 0 1 0。V o L1 5。N n3液中1 5m i n，3 5 0m A 进行恒流电转移lh。取出硝酸纤维素膜用邢s 洗2 遍，用含5 封闭液封闭膜lh，加入1：3 0 0 稀释的一抗室温孵育2h，T r B S 洗膜5m i n 3，加入l 元s 3 0 0 0 稀释的辣根过氧化物酶标记的相应二抗孵育lh，洗膜5r a i n 4，E C L 化学发光法压片显影。1 5 免疫荧光法检测N F K B 的活化按照实验要求处理好细胞，P B S 洗1 次，用一2 0 预冷的甲醇于一2 0 同定1 0r a i n，P B S 洗3次，每次5m i n，3 牛血清白蛋白(P B S 配置)封闭1 5m i n，加入P B S 稀释适量比例的一抗4 湿盒孵育过夜(阴性对照用P B S 代替一抗)，P B S 洗3 次，每次5m i n，加入I5 0 稀释的F I T C 标记的羊抗兔I g G 在3 7 孵育3 0m i n，P B S 洗3 次，每次5r a i n，D A P I(终浓度1 0 彬“)常温下孵育5r a i n 染核，P B S 洗2 次，每次3m i n，5 0 的甘油封片，荧光显微镜下观察。1 6 统计学处理计量资料用均数标准差(i s)表示。用S P S S1 1 0 统计学软件进行数据分析，但由于样本例数较少，不适用t 检验，因此采用成组设计两样本比较的秩和检验进行统计分析，P 0 0 5 判定差异有统计学意义。2 结果2 1高葡萄糖诱导H U V E C s 内活性氧升高为了检测葡萄糖对H U V E C s 内R O S 生成的影响，我们根据预实验结果选定2 0m m o l L 葡萄糖作用H U V E C s4h，通过D C F H D A 标记结合流式细胞仪分析细胞内R O S 的生成量。结果显示，高浓度葡萄糖能够显著提高胞内R O S 水平(为对照组的1 3 5 倍，P 0 0 5，n=3)，造成细胞内氧化应激状态的产生。2 2 高葡萄糖刺激I K B 磷酸化在各种刺激因素作用下，N F-K B 信号通路中的I x B 首先被激活，导致I K B 磷酸化而降解，同时释放N F K BP 5 0 P 6 5 二聚体进入细胞核，也即N F K B 的活化来启动下游信号分子的转录。与对照组相比，2 0m m o l L 葡萄糖处理4h 组I K B 蛋白明显下调(P 0 0 5，n=3)，其W e s t e r nb l o t检测条带相对灰度值为对照组的0 6 7 倍；而P I K B蛋白水平明显上调(P 0 0 5，r,=3，图1)，其W e s t-e r nb l o t 检测条带相对灰度值为对照组的2 0 0 倍。万方数据虫国!坠鱼壁盘查垫!Q 堡旦筮!鲞筮!翅C 为对照组；G 为处理组，图2、4 同图1 两组I K B 磷酸化水平2 3 高葡萄糖上调N F K B 磷酸化W e s t e r nb l o t 结果表明，与对照组相比，2 0r r n n o L L葡萄糖处理4h 组N F K B 蛋白没有明显变化，而P N F-B 蛋白水平上调(P 0 0 5，n=3，图2)，其W e s t e r nb l o t 检测条带相对灰度值为对照组的1 8 2 倍。图2 两组N F-K B 磷酸化水平2 4 间接免疫荧光法检测N F K B 的活化荧光显微镜检测结果表明，与对照组相比，2 0m m o l L 葡萄糖处理组N F K BP 6 5 转位至细胞核内(图3)，表明葡萄糖处理导致N F K B 的活化。图3 间接免疫荧光法检测N F K B 的活化(2 0 0)-2 2 1 2 5 葡萄糖诱导I C A M 1、V C A M 1 蛋白表达增强我们用W e s t e r nb l o t 检测炎症相关因子I C A M 1、V C A M 1 的表达，结果显示，与对照组相比，葡萄糖处理组I C A M 一1、V C A M l 表达均明显增强(图4)，其W e s t e r nb l o t 检测条带相对灰度值分别为对照组的1 3 0 倍和2 2 5 倍。图4 葡萄糖诱导I C A M 一1、V C A M 一1 蛋白表达增强3 讨论糖尿病引起血管病变的主要因素是高血糖。研究表明，高血糖导致的血管病变分别涉及4 种主要的分子途径。(1)增加多元醇(P o l y 0 1)代谢通路的流量；(2)增加胞内糖基化终末产物A G E s 的形成；(3)激活P K C 激酶；(4)增加氨基乙糖(h e x o s a m i n e)代谢通路的流量HJ。尽管这4 种致病途径各不相同，但它们都有一个共同的后果，即导致氧化应激。显然，研究这种高血糖引起的氧化应激反应机制是研究糖尿病发展过程和血管病变的重要内容。氧化应激(o x i d a t i v eS t r e s s)是指机体在遭受各种有害刺激时体内高活性分子如R O S 和活性氮自由基(R e a c t i v eN i t r o g e nS p e c i e s，R N S)的产生过多，氧化程度超出抗氧化系统对氧化物的清除，氧化系统和抗氧化系统失衡，从而导致组织损伤。在正常生理环境下，内皮细胞可产生少量R O S 并由细胞的抗氧化系统所清除，以维持内皮细胞的自稳态；但是当R O S 蓄积过多时，一方面导致内皮细胞功能失调甚至细胞凋亡，另一方面R O S 可刺激内皮细胞产生I C A M 1 和V C A M 一1 等黏附因子，造成炎症细胞浸润，加重血管内皮的炎症损伤。除此之外，内皮细胞还能释放一系列信号分子，导致平滑肌细胞增殖、单核细胞聚集和血小板黏附，启动炎症反应，最终导致动脉粥样硬化的形成。高糖刺激内皮细胞内R O S 升高与其本身的代谢有关，抑制葡萄糖摄取则可以有效抑制R O S 的产生【5】。糖尿病患者血管内皮细胞处于高度氧化应激状态，因为高水平葡萄糖不仅能够激活N O X 酶复合体，还能够刺激线粒体R O S 的产生、导致e N O S 去万方数据耦联、破坏内皮的抗氧化系统，引起细胞内氧化应激水平增高和细胞功能失调。为了探讨高糖引起血管内皮细胞氧化应激的作用机制，我们用高浓度(2 0r e t o o l L)葡萄糖处理H U V E C s，通过流式细胞术检测R O S 水平的改变。结果显示，与正常培养条件相比，2 0m m o l L 葡萄糖处理的H U V E C s 中R O S 水平显著升高。研究结果显示，R O S 可以激活多种细胞信号传导途径，如N F K B、J u nN 末端激酶(J u nN t e r m i n a lk i n a s e，J N K)和p 3 8 丝裂原活化蛋白激酶(p 3 8m i t o g e n a c t i v a t e dp r o t e i nk i n a s e，p 3 8M A P K)等6 1。N F K B 是许多生理和病理生理进程重要的调节因子，包括适应性和先天性免疫反应、炎症反应、增殖、肿瘤增生和凋亡。因此，细胞内N F K B 活性的精确调控非常重要0 7-9 。I K B 是一类基因家族，其功能主要是抑制N F K B 的活化。I K B 具有特征性的多个锚蛋白重复结构，静息状态下I K B 可通过锚蛋白重复结构与N F K B 的R e l 同源性结构域(R e lH o m o l o g yD o-m a i n，R H D)结合，使N F K B 处于失活状态，N F K B二聚体与抑制蛋白I K B 结合成三聚体而位于细胞质。胞外的刺激可激活I K B 的泛素化降解途径。I K B 上丝氨酸残基的磷酸化诱导I K B 的降解。I K B的磷酸化和降解释放N F K B 并暴露N F K B 的核定位信号，从而允许其转位入核，激活核内相关基因的表达0 I。研究表明，N F K B 在感染性休克(s e p t i cs h o c k)发展进程中处于中心地位J。N F K B 能够调节大量急慢性炎症的促炎症因子的转录，其中包括I C A M-1 和V C A M-1。研究表明，在氧化应激状态下，高水平的R O S 能激活N F K B，N F K B 核转位后能调节众多基因的表达。W a n g 等【1 2 1 在研究抗癌药阿霉素(D O X)的心血管毒性时发现，在内皮细胞中D O X 诱导生成的R O S 介导了N F K B 的激活并引起细胞凋亡发生。用胰岛素处理降低葡萄糖浓度时则N F K B 受到抑制，且I K B 表达上调3。L i 等4 1 报道，高糖刺激状态下的内皮细胞内N F K B 的上调是通过P K C 磷酸化实现的。我们的研究显示，高浓度葡萄糖处理H U V E C s 之后，伴随R O S 的升高，磷酸化的I K B 和N F K B 均增多，I K B 失去对N F K B 的抑制作用，N F-K B 移位至细胞核内。另外，我们还发C h i n e s eJ o u r n a lo fC a r d i o v a s c u l a rM e d i c i n e,J u n e2 0 1 0,V o L1 5,N o 3现，与对照组相比，葡萄糖处理组I C A M l、V C A M 一1的表达均明显增强。这些结果提示，高糖可以诱导R O S 的升高，引起N F K B 的活化，导致I C A M 1、V C A M 一1 的表达增高。在体内这样会造成局部炎症反应不断加强，内皮细胞的正常功能受到损伤而促进动脉粥样硬化的形成。参考文献 1】W uQ D，W a n gJ H，F e n n e s s yF，e ta 1 T a u r i n ep r e v e n t sh i g h-g l u c o s e-i n d u c e dh u m a nv a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l la p o p t o s i s A mJP h y s i 0 1 1 9 9 9。2 7 7：C 1 2 2 9 1 2 3 8。2 T a k a i s h iH，T a n i g u c h iT，T a k a h a s h iA，e t a 1 H i s hs h c o a c c e l e r a t e sM C P 一1p r o d u c t i o nv i ap 3 8M A P Ki nv a s c u l a re n d o t h e l i a lc e l l s B i o c h e mB i o p h y sR e sC o m m u n，2 0 0 3。3 0 5：1 2 2 1 2 8【3 H oF M，“us H，L i a uC S，e ta 1 H i g h 咖c 雠一i n d u c e da p o p t o s i si nh u m a ne n d o t h e l i a lc e l l si Sm e d i a t e db ys e q u e n t i a la c t i v a t i o n so fc-J u nN H(2)-t e r m i n a lk i n a s ea n dc a s p a s e-3 C i r c u l a t i o n。2 0 0 0，1 0 l：2 6 1 8-2 6 2 4 4】T o m o k oK a k e h iC h i h i m，Y a b e N i s h i m u r a N O Xe n z y m e sa n dd i a b e t i cc o m p l i c a t i o n s S e m i nZ m m u n o p a t h o l。2 0 0 8，3 0：3 0 1 3 1 4 5 L e eH B，Y uM R，S o n gj s，e ta 1 R e a c t i v eo x y g e ns p e c i e sa m p l i f yp r o t e i nk i n a s eCe i 酬i n gi nh i g hg l u c o e i n d u c e df i b m n e c t i ne x p r e s s i o nb yh u m a np e r i t o n e a lm e s o t h e l i a lc e l l s K i d n e yI n t 2 0 0 4 6 5：l1 7 0 1 1 7 9 6 Y a d o n gZ h a n g，F e iC h e n R e a c t i v eo x y g e ns p e c i e s(R o s)。T r o u b l e m a k e r sb e t w e e nN u c l e a rF a c t o r K B(N F K B)a n dc-J H ON H 2 一t e n n i n a lk i n a s e(J N K)C A N C E RR E S E A R C H，2 0 0 4。6 4：1 9 0 2 一1 9 0 5 7】N e u m a n nM，N a u m a n nM B e y o n dl g B s：a h e m a t i v er e g u l a t i o no fN F K Ba c t i v i t y F A S E BJ，2 0 0 7，2 1：2 6 4 2-2 6 5 4 8 M o y n a g hP N，7 1 1 I eN F K Bp a t h w a y JC e l ls c i，2 0 0 5，1 1 8：4 5 8 9-4 5 9 2 9 H a y d e nM S，G h o s hS S i g n a l i n gt oN F K B D e v。2 0 0 4。1 8：2 1 9 5-2 2 2 4 1 0】J o b i nC，S a r t o r 舳n eI k a p p aB N F-k a p p aBs y s t e m：ak e yd e t e r m i n a n to fm u c o s a li n f l a m m a t i o na n dp r o t e c t i o n，A mJP h y s i o lC e t IP h y s i 0 1 2 0 0 0 2 7 8：C A 5 1 4 6 2 1 l】“us F，M a l i kA B N F K Ba c t i v a t i o na$ap a t h o l o g i c a lm e c h a n i s mo f p t i cs h o c ka n di n f l a m m a t i o n A mJP h y s i o lL u n 异C e l lM o lP h y s i o l。2 0 0 6，2 9 0：1 6 2 2 缶4 5【1 2 W a n gS，K o t a r m a j uS，K o n o r e vE。e ta 1 A c t i v a t i o no fn u c l e a rf a c t o r-k a p p aBd u r i n gd o x o m b i c i n-i n d u c e da p o p t o s i si ne n d o t h e l i a lc e l l sa n dm y a c y t e si sp r o a p o p t o t i c：t l I er o l eo fh y d r o g e np e r o x i d e B i o c h e mJ，2 0 0 2。3 6 7：7 2 9-7 4 0【1 3 D a n d o n aP，A l j a d aA，M o h a n t yP，e ta 1 I n s u l i ni n h i b i t si n t r a n u c l e a rn u c|e a rf a c t o rk a p p a Ba n ds t i m u l a t e sl k a p p a Bi nm o n o n u c l e a rc e l l si nO b e a S es u b j e c t s：e v i d e n c ef o ra na n t i i n f l a m m a t o r ye f f e c t?JC l i nE n d o e r i n o iM e t a，2 0 0 1 8 6：3 2 5 7-3 2 6 5【1 4 1“L S a w a m u r aT。R e n i e rG G l u c o s ee n h a n c e se n d o t h e l i a lL O X le x p r e s s i o n：r o l ef o rL O X 1i ng l u c o s e i n d u c e dh u m a nm o n a c y l ea d h e s i o nt oe n d o t h e l i u m D i a b e t e s，2 0 0 3。5 2：1 8 4 3 1 8 5 0(收稿1 3 期：2 0 1 0-0 4-0 8)(本文编辑：谭潇)万方数据高糖上调内皮细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的高糖上调内皮细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的作用机制作用机制作者：农善伟，柯丽琴，张小勇，黄秀清，满永，王抒，黎健，宁应之，NONG Shan-wei，KE Li-qin，ZHANG Xiao-yong，HUANG Xiu-qing，MAN Yong，WANG Shu，LI Jian，NING Ying-zhi作者单位：农善伟,宁应之,NONG Shan-wei,NING Ying-zhi(西北师范大学,兰州,730070)，柯丽琴,张小勇,黄秀清,满永,王抒,黎健,KE Li-qin,ZHANG Xiao-yong,HUANG Xiu-qing,MANYong,WANG Shu,LI Jian(卫生部北京医院老年医学研究所)刊名：中国心血管杂志英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR MEDICINE年，卷(期)：2010，15(3)被引用次数：0次 参考文献(14条)参考文献(14条)1.Wu QD.Wang JH.Fennessy F Taurine prevents highglucose-induced human vascular endothelial cellapoptosis 19992.Takaishi H.Taniguchi T.Takahashi A High glucose accelerates MCP-1 production via p38 MAPK invascular endothelial cells 20033.Ho FM.Liu SH.Liau CS High glucose-induced apoptosis in human endothelial cells is mediated bysequential activations of c-Jun NH(2)-terminal kinase and caspase-3 20004.Tomoko Kakehi Chihiro.Yabe-Nishimura NOX enzymes and diabetic complications 20085.Lee HB.Yu MR.Song JS Reactive oxygen species amplify protein kinse C signaling in high giucose-induced fibronectin expression by human peritoneal mesothelial cells 20046.Yadong Zhang.Fei Chen Reactive oxygen species(Ros),Troublemakers between Nuclear Factor-B(NF-B)and c-Jun NH2-terminal kinase(JNK)20047.Neumann M.Naumann M Beyond IBs:alternative regulation of NF-B activity 20078.Moynagh PN The NF-B pathway 20059.Hayden MS.Ghosh S Signaling to NF-B 200410.Jobin C.Sartor RB The Ikappa B/NF-kappa B system:a key determinant of mucosal inflammation andprotection 200011.Liu SF.Malik AB NF-B activation as a pathological mechanism of septic shock and inflammation200612.Wang S.Kotamraju S.Konorev E Activation of nuclear factor-kappa B daring doxorubicin-inducedapoptosis in endothelial cells and myocytes is pro-apoptotic:the role of hydrogen peroxide 200213.Dandona P.Aljada A.Mohanty P Insulin inhibits intranuclear nuclear factor kappaB and stimulatesIkappaB in mononuclear cells in obese subjects:evidence for an antiinflammatory effect 200114.Li L.Sawamura T.Renier G Glucose enhances endothelial LOX-1 expression:role for LOX-1 in glucose-induced human monocyte adhesion to endothelium 2003 相似文献(10条)相似文献(10条)1.学位论文 具英花 氨基单糖-葡萄糖胺在内皮细胞活化调节中的作用 2006 近年来，众多的临床及病理学的研究改变了研究人员对动脉粥样硬化发病过程的认识。尤其是免疫组织化学方法的应用，明确了作为脂肪斑或粥样斑块的主组成分的泡沫细胞主要是巨噬细胞，而不是一直以来认为的平滑肌细胞；而且各时期动脉硬化斑块组织中均观察到活化T细胞，这使研究者们着眼于动脉粥样硬化发生过程中的炎症细胞的作用。虽然动脉粥样硬化斑块组织中可见脂质块，动脉粥样硬化不再是单纯的脂质的异常堆积，而是伴有内皮细胞的损伤及炎症的免疫紊乱状态。内皮细胞的活化可诱导细胞黏附分子(如ICAM-1)和趋化因子(如MCP-1)，内皮细胞表面表达的黏附分子可诱导单核细胞和T淋巴细胞等与内皮细胞的结合，这就是炎症的起始阶段，也是动脉粥样硬化发生的关键性的一步。与内皮细胞结合的炎性细胞在单核细胞趋化因子和氧化低密度脂蛋白(LDL)的趋化因子的作用下浸润至内皮下，进而转化成成熟的巨噬细胞并表达清道夫(scavenger)受体，吞噬修饰脂蛋白，进一步变成泡沫细胞。促炎症细胞因子例如肿瘤坏死因子(TNF-)白介素-1(IL-1)等也常在动脉粥样硬化灶中表达，而且早期动脉粥样硬化病人以血清TNF-浓度增加为特点。研究证明这些细胞因子可改变细胞形状及活力，并影响炎症部位的血管渗透性；还可以诱导内皮细胞表达表面黏附分子，调节血管张力、血栓形成及单核细胞的浸润等。Cationic antibacterial protein of 18 kDa，因为它的序列由两个亮氨酸开始并由37个氨基酸组成，所以也称为LL-37。值得关注的是，最近发现动脉粥样硬化灶的巨噬细胞、内皮细胞表达LL-37，而且可诱导内皮细胞的ICAM-1和MCP-1，还可诱发血管平滑肌细胞的死亡。葡萄糖胺是可在生理条件下自然生