紫外分光光度法测定染料木素胶囊含量及溶出度_王剑波.pdf

药物分析杂志Ci hnJh PA耐2以抖,2 4(5)4 73在反相柱上的保留时间,与血清杂质峰分离。该法样品处理简单,样品用量少,适用于临床药物浓度监测和药动学研究。流动相的pH值、离子对试剂的浓度和乙睛的比例对分离效果影响 明显,本文在反复调整试验中确定了如上色谱条件,通过方法确证和应用,证明该法稳定可靠,重复性较好。参考文献1FANu L一ya n(范鲁艳),QI UYi一甲n(仇益群),A TNGzhen(汤展).h Pi kn ei tc s即d e r侧v eibov a心a bi i ly to fm ef o t即五nhyi dl卜ch l oi d re。a p su le s(盐酸二甲双服胶囊的药动 学与 相对生 物利 用度).Ac a tU九iM eAh n公(安徽医科大学学报),199 9,3 4(4):2 682Ka l】Ha,Yu en,Kokh Kia Jlge Ph.i sm pleh ih g一脚雨巾助cei lq ui deh功mato歹叩hiem eh to df orh tedetem rin ationO fn le山mlininhum a np俪n a I.Jh co r矛n a拟盯B,19 98,7 10:2 433OleVe ste炸V Ils t,F诬a lNa bbie,Bira nswa no sn.Detni a to no fme t-o fn m ninpl朋mabyhig h一碑而助明cei l甲ideh I Dmatoga rphya f terultr浦la t rtio n.Jc ho r确叻呀r,19 98,7 1:62994C ha l re sBu re eG,玩obs enN况IW,Ra 甲ens c动几之erJ.Rap idi l明id一eho rn”to邵娜hiedetem r tn ationO fI n etf onl lininpl a sm aa ndu n n e.l CinC辰m,1 981,2 7(3):434(本文于2X()3年1 1月20日修改回)紫外分光光度法测定染料木素胶囊含量及溶出度王剑波顾宜2郭萍3高容(1.第四军医大学药物研究所西安7 10 03 3;2.第四军医大学西京医院西安7 100 33;3.武警四川消防总队医院药械科成都6 1X()7 2)摘要目的:建立了测定染料木素胶囊含量和溶出度的方法。方 法:利用染料木素与氢氧化钠能产生颜色反应,在27 lu n r波长处有最大吸收的特点,用紫外分光光度法测定染料木素胶囊中染料木素的含量,并用中国药典溶出度测定第一法,以0.0 1molL一氢氧化钠溶液为溶出介质,转速lo or,mi n一,用建立 的紫外分光光度法进行检测。结 果:染料木素浓度在2.以-6.1 2此一范围内,与吸收度呈良好线性关系(;=0.999 9),平均回收率为9 9.7 6%,s RD为0.9 2%(n=6);胶囊在3 0而n时的溶出量均不少于标示量的 9 5%。结论:此法简单、准确,可作为染料木素胶囊质量控制标准之一。关扭词紫外分光光度法染料木素溶出度含量测定Dee tr即nin,i tono fConte nta nd D i8 8olutionofGe城stei nCas Pu le sb yUVSPecto rh Potomety rwAN eJia n一加,GuYiZ,GuoRng3a nd以oo R雌(1.石川自“比o fMde t八汕几阮d众“,o F州hM江如仃山 几d众口之n U匆,iXh a7 10 03 3;2.尤挤咭月。胡云园,F公“材人对以如y r几几di cal 以成洲”勿,i X加7 10 03 3;3J卜产地材万记时o fPh ar刀协叮,S交ha unP哪众比汉月比c o川阳I C,脚扬明园,h c几叩趾jAdo Pl如 凡旧碗曳州6 1阅72)A b蛇a rctob je ci tve:O Tesa b tlishameh to dtodetem rin eh teeo ntei na nd dissO lutio no fg enise tiningenis teinea P-s u ls.Me比侧如:Ba sedo nh teeoloure raetiono fgenisteina ndNa0H,h wiehha sh tema xiuma bs or ptionin27 Inmwv aelenh g t,asPee加photomei t remh e todwa susedf ordetem rinationo fgenisteinin罗i nsteinea Ps u les.h Tediss ol u-tio no f罗nisteine即sule swa smea su e rdin0.01m olL一1Nao Ha sm edium,出eo ra t tio n以s讲edwa slo ormin一l,h tedv eel叩edUVs伴eo t rphoo tme匀meh to dwa sa dope tdf o rh tedetem rini a ton.Re s 川s t:h Tegenisteinhadag以记linei a rl yinh tee one ent rationa r n罗of2.0 4一6.12卜gmL一(r=0.9 99 9).h Tea ve邺ee re o ve叮wa s99.76%wih tS RDo f0.92%(n=6);h tedis s olui to nwa sno tle s sh ta n95%o fla bel leda m ou nta t30min.Concl u动叨:h Tismeh tod15sim Ple,a r nida nda ceu a re t,a ndea nbeu sed f orh te四a liy teont rolO fge nisteine即su les.Keywo rd sUVs拌ct rophotomey t r,ge nistein,dis s olution,detem rinatio n染料木素(g ei nse ti n)为异黄酮类化合物,化学名称为5,7,4一三经基异黄酮(C,HI。05),具有明显防治骨质疏松症、心血管疾病和抗肿瘤等多种药理作用一,因此,近1 0年来染料木素的研究与开发倍受人们的关注。染料木素胶囊为我们从中药槐角中用新工艺提取制成的新制剂,已向国家药监局药物分析杂志CihnJP hamzA n公X2(抖,2 4(5)申报一类新药,为制定染料木素胶囊质量控制标准,我们建立了用紫外分光光度法测定其含量和溶出度的方法,现将结果报道如下:为此选定27 1nm为测定波长。通1AI泥1仪器、试药和样品uv一2 65型紫外可见分光光度计(日本岛津);BP一19 05电子天平(德国Sa o r tiru,公司);Z RS一4型智能溶出仪(天津大学无线电厂)。染料木素对照品(i Sg n raCh e而ca lCO.)纯度大于9 8%。氢氧化钠为分析纯试剂,采用i Mi l l一Q超纯水配制各种浓度的溶液。微晶纤维素、竣甲基淀粉钠,西安惠科医药化工有限公司,均为药用规格。染料木素胶囊(规格:每粒0.1 89,染料木素 5 0m g,微晶纤维 6 5mg,竣甲基淀粉钠 6 5m g)5批,标示量为每粒 5 0mg,由第四军医大学药物研究所制剂室提供。2方法与结果2.1测定溶液的配制2.1.1染料木素对照品溶液精密称取于五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重 的对照品约2 0m g,置10 0mL量瓶中,加0.0 1mo lL一氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,制成浓 度为2以此m L一的对照 品贮备液,用移液管精密量取该溶液2.0mL,置于10 0m L量瓶 中,用0.0 1m olL一氢氧化钠溶液稀释到刻度,摇匀,得到浓度为每1mL中含染料木素4.0 8此的溶液,即得。2.1.2样品溶液取 同一批号的胶囊1 0粒,精密称定。精密称取内容物约7 5m g(约相当于原生药的20mg),置于10 0m L量瓶中,加0.01 mo lL一氢 氧化钠溶 液 2 5m l,充分振荡使染 料木素溶解,用0.0 1mo lL一氢氧化钠溶 液 稀 释至刻度,摇匀,滤过,精 密量取续滤液2mL,置100m L量瓶中,用0.0 1mo lL一氢 氧化 钠溶液稀 释至刻度,摇匀,即得。2.1.3辅料溶液按照制剂处方(不加染料木素)和样品溶液制备方法,制成辅料溶液。2.2测定波长选择取上述染料木素对照品溶液、样品溶液及辅料溶液,在UV一26 5型紫外可见分光光度计上,于20()一4X()n n I波长范围内测定吸收曲线。结果见图1,表明对照品与样品在27 1.Ol u n波长处有最大吸收,辅料几乎无吸收,对测定无干扰,40 020 040 020 040 0入/朋图1空白辅料(A)、对照品(B)、样品(c)吸收光谱图i Fg1UVspe ca t ro fe x cie pns t(A),山e面c a l祀纯e n c r。阳bs.mce(B)a nda m Sp】e(C)2.3线性范围用移液管精密量取对照品贮备液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0mL,置于5个10 0mL量瓶中,用0.0 1mdL一氢氧化钠溶液稀释到刻度,得到2.时,3.0 6,4.0 8,5.1 0,6.1 2卜gm L一的溶液,以相应的溶剂为空白,在27 Il n n处测定吸收度,以吸收度(A)为纵坐标,以浓度(C此mL一)为横坐标,计算其回归方程(n=5)为:A二0.X)54+0.1298Cr=0.999 9结果表明:染料木素在2.0 4一6.1 2此m L一浓度范围内呈现良好的线性关系。2.4加样回收率试验精密称取已测知含量的样品适量(相当于含染料木素约1 0m g)共6份,置5 0m L量瓶中,分别精密加人对照品贮备液5mL,加0.0 1m olL一氢氧化钠溶液巧mL溶解,充分振荡,用0.0 1mdL一氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2.0mL,置10 0mL量瓶中,用0.0 1molL一氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,按分光光度法(2创叉年版中国药典附录WA,以下同)在27 Im n处测定吸收度。计算回收率,结果平均回收率为99.76%,RSD为0.92%(n=6)。2.5稳定性试验回收率试验中样品溶液在室温下放置O,2,4,6,sh后,在27 Il n n处测定吸收度,分别为0.54(),0.54 1,0.542,0.542,0.54 1,结果表明,样品溶 液 在sh内测定结果稳 定(s RD=0.15%)。2.精密度试验取回收率试验中样品溶液,重复进样5次,吸收度值分别为0.5 18,0.5 17,0.5 18,0.518,0.51 7,结果表明,样品溶液具有较好的精密度(S RD=0.11%)。药物分析杂志ihCnJp知址mAnalZ以”,2 4(5)2.7样品测定按照“2.1.2”项下方法,对5批样品进行了样品溶液制备。另取“2.1.1”项下对照品溶液和空白溶剂,按上述方法,在2l 7u r n处分别测定吸收度,计算含量,结果见表1。衰1染料木素胶班含且测定 结果T的IL随e tr ti nu aito nn 活u ls to fgei s ne tina C s pu le批号(玩No.)2印10503取样量甲即听)/哪平均标示量%(1司犯1 1司a庄田u nt%)RSD/%75.77.7 6.42的10 5087 4.876.176.42X()10 51474.876.1764加0.0 1m olL一氢氧化钠溶液稀释至1 0mL;另精密称取对照品2 5.4 mg,加。,0 1mo lL一氢氧化钠溶液溶解并稀释成5.0 8此mL一的溶液。取上述2种溶液,按本文方法,在27 1nm处分别测定吸光度,计算每粒胶囊在不同时间累积溶出百分率。2.8.1同批染料木素胶囊的溶出度测定结果染料木素胶囊(批号20 01 050 3,胶囊平均重0.241 99,胶囊外壳重0.0567 69,)3 6粒,分为6组,每组6粒,按上述溶出度测定方法进行测定,累积溶出百分率结果见表2。衰2同批染料木寮胶班不同时间康积溶出率结果(n二,牙土s)卯.879 7.59Tab 2Ad de d山比du公v e.e to f山e别山.eg roupge刘蜘e ti na C S Pu le sa td i.陇比nt仙me s(n二,又幻)不同时间景积溶出率(司dd eid咖lui tve毗a t山氏e rnt血e s)/%NO.5min15口jn3 D面n4 5n”n印田切呱6 19 8.2 D9 8.肠%.7 92佣1肠177 4.8%.6 90.2 47 6.17642X()1肠237 4.8%.4 80.3 276.12.8溶出度测定方法:溶出度测定第一法(中国药典20(刃年版二部附录XC)。释放液:0.0 1mo lL一氢氧化钠溶液9侧m;L温度:(3 7土0.5);转速:lo ormin一。操作:在5,15,30,45,6 0m in时取溶液o rmL(同时补充空白介质o rmL),经0.8卜m孔径滤膜滤过,取5m in时续滤液4.0m L,15,30,45,6()min时续滤液1.0m L,置于10m L量瓶,21.6678 1.5 29 8.8 49 8.7 1.9 68 991.3293.399 8.肠9 7.9 59 8.10卯.6 9卯.汉8 9.9 1521.2 29 3.1491.2 998.3 49 8.579 7.7 6%.1762 7.的9 7.4 5%.0 5x土32 4.2 4士4.4 988.55士4.4 19 7.2 5土2.只 肠.肠士2.卯9 5.65土2.6 52.8.25批染料木素胶囊的溶出度测定结果依上法测定5批染料木素胶囊各6粒,记录各取样时间的累积溶出百分率,不同时间累积溶出百分率结果见表3,可见在 3 0而n时,5批染料木素胶囊溶出度均在9 5%以上。表35批染料木素胶班不同时间服积溶出率结果n=.牙土s)T日b3a tdl恤代nt肠口e s(n=6,牙士s)A d de d司映犯ludvea re to f5 9即u脚邵n贻妞加口脚川拐a tdl月 笼代址肠口.不同时间累积溶出率(司d己山卿】丽v e池a td迁e F耐丘口朋)/%肠tNo.15面n3 0口刀4 5nun印nun2X()10 5032 4.2 4士4.4 988.55士4.4 19 7.2 5土2.9 4%.肠士2.卯9 5.6 5土2.652X()10 50 82 3.0 3士3.2 4如.98士4.629 7.2 5土0.739 5.9 7士1.3 19 5.肠土0.8 72X()10 5142 3.67士2.598 7.8 9士3.2 09 7.16土1.12肠.7 7土1.059 5.2 3士1.以2加l肠172 4.51士4.6388.21士3.7 6%.59士1.8 69 5.肠土2.839 5.17士2.552X()1肠232 3.砚士4.0 78 9.6 8士4.5398.的土1.4 89 5.8 5土1.4 39 5.39土2.163讨论3.1从染料木素的结构特点及理化性质可知,染料木素为异黄酮类成分,具强疏水性,不溶于水、稀盐酸(0.1mo lL一)、十二烷基硫酸钠水溶液(十二烷基磺酸钠水溶液)、人工肠液(pH二6.8),微溶于甲醇和乙醇。所以选择上述溶液作本品的溶出介质不适宜。参考20(X)年版 中国药典二部部分品种项下的溶出介质及有关文献报道,一6,结合染料木素原药物分析杂志Ci hnJPha n r.Ana lZX(H,2 4(5)料的理化特性(因结构 中含有 酚经基而显弱酸性,溶于稀碱),选择稀氢氧化钠(0.0 1mo lL一)溶液作为染料木素胶囊的溶出介质。本品经方法学选择,确定为转篮法,lo ormin一,溶出时间为3 0mi n,测定波长为2 71nm,经线性、稳定性、回收率试验,确认方法简便可行。样品含量测定采用紫外分光光度法,可用于样品的常规分析。3.2采用本法对5批样品进行溶出度考察,3 0而n取样测定时溶出量均不低于标示量的9 5%,样品进行体外溶出的Wei bu l l参数几、几、几比较,5批之间无显著性差异,说明本品工艺稳定,有较好的一致性。3.3在溶出度测定时可以看出,3 0mi n后随着时间增加,溶出量略有下降趋势,这种现象在某些药物中也有相似情况,其可能原因为辅料梭甲基淀粉钠溶出量增大,对主药测定有一定影响所致。3.4本品的崩解时限较短,一般在5mi n左右,崩解后未必能充分溶出。考虑到用药的有效性和产品质量,进行溶出度检查是必要的。参考文献IA沮e二e u rt ZH,MW.Phy to eso t rge n sa ndwe s.emi d一.An n姗七J,19 97,29:9 52Me si sn a,M,P。峙V,e Stehel l)K IR,e t以.o y Sina k te即dea c ne ri rs k:A e r 城ewo fh te认曲ma nd i nda a t.刃山ra Cc n er,19 94,2 1:1 133Me s s i n aM.Mo demap pi lei a ton sO fa na neiei nb e 明:o y Sbe a nsa nd h tePe rv eni to na ndi tal t刀 e nto fe肠niedis e a s e.J刀山r,19 95,1 25:5 6754Ch P(中国药典).2戊旧.V o ln(二部):7 15SH EN Fa ng(申放).Dis cu si s Ono nh tediss o 1ui to na r tea nds切山i i l y to fh ih gv l ee lpa race“口1 01a b tle s t(高效对乙酞氨基酚片剂 的溶出度及稳定性探讨).C h in aJPh aI 7 n(中国药业杂志),19 98,7(1 1):4 26H U A NGHo ng一w e n(黄红雯).Dis e u ssiono n口etho d so fdeteY Z-i nn gh te击ss oluio tna e r to fe Iv画阳let曲les(t盐酸左旋咪哇片溶出度测定方法 的商讨).叨昭面了姆月比彻(J广东药学),2侧x,1 0(2):2 77z HENGYa n一b in(郑艳彬),Y班Jie(印杰),L UQia n一zh o u(吕迁洲).Com po fdi3的lui to ni nth re ek访d so f沙ela zid e切山les t(格列齐特3种片剂 的溶出度比较).h Ci nJ刀而,刀n止g,a认尺巴m(中国新药与临床杂志),20 03,2 2(1):2 5(本文于20 03年1 0 月9日修改回)高效毛细管电泳分离和测定注射用盐酸吉西他滨中有关物质金薇杨永健(上海市药品检验所上海2X()233)摘要目的:建立高效毛细管电泳法分离盐酸吉西他滨差向异构体以及胞啥 吮,测定注射用盐酸吉西他滨的杂质盐酸吉西他滨a异构体及胞啥吮含量。方法:采用熔融石英毛细管:总长印cm,检测端3 8c m,内径 5 o卿;以声3.5的0.0 5m o lL一磷酸盐缓冲液为运行缓冲液,运行电压为2 1kV,柱温:2 5,检测波长为27 5n m,真空进样5。结果:胞啥陡及盐酸吉西他滨a异构体和p异构体分离完全,线性范围分别为7.0一14 0此m L一(r二0.卯94),5.0一10 0此m L一(;二0.9 9 96),5,8一11 7哪m L一(r=0.99 96),。二5;精密度(R SD)分别为1.7%,1.9%,2.1%(。=5),最低检测浓度分别为0.5,1.0,1.2此m L一。结论:方法快速、简便且准确,可用于盐酸吉西他滨的杂质盐酸吉西他滨a异构体及胞啥吮含量的测定。关健词高效毛细管电泳盐酸吉西他滨胞啥吮杂质检查异构体紫外检测SeParatio na ndDee trn止n ai tono fRe】atedSubsa tnc esinGemcis tbin ef or坷e citon勿HPCEI JNWeia ndY A NGYo ng一jia n(5加昭加i方”t自u“f orD几睽c o瓜o rl声加昭加12X()233)A bstrac toh je ci v te:o Te sta b lisha nHC PEmeh to df orse Pa a r tiono fgemeita binea nditsePimer,阴df o rde tem ri-na tio no fr elatedsu bsta nee sin罗meia b tin ef orin je etio n.Method:Af us ede apil l娜O f6()emlo ng(38emo th tedete co t r)x50阿inter na ldia mee trw a sus ed.h Teele ct功phoe rsisbuf f erwa s0.仍molL一h Posh Pod。buf f er(ad-juse tdo tPH3.5袱h tPh osphoirea eid).h Tese Pa rationvoltagew a s2 1kV,eo lumntempea r t二25,deteetionw ave len纳275nm,va cin jeci o tn50.Re su ls t:Thehe na rr ange,(n=5)f o rdetem rini a to no fey to sin e,a一15 0-m ero f罗m cia b tinehyd概喻irdea ndp一is omero fge meia b tinehy山o rch iio rdew e e r7.0一叨此毗一(;=