1、湖南省肿瘤医院检验科作业指导书 文件编号:HNZLYY-JYK-ZY-LJ -001
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脑脊液常规检验操作程序
1． 目的
保证脑脊液常规检测结果准确、可靠、及时。
2． 适用范围
脑脊液常规检测，标本类型为脑脊液。
3． 职责
3..1脑脊液标本由临床医护人员采集 检验人员向临床提供脑脊液标本量、保存条件、注意事项、生物参考范围及临床意义等。
3.2脑脊液标本的运送 由临床卫生员运送。
3.3收集与处理 检验后脑脊液标本由检验卫生员统一送到医院垃圾处理站按相关程序进行处理。
4. 检
2、验程序
4.1脑脊液理学检验:
4.1.1颜色 正常脑脊液为无色液体。当有病变时可出现红色、黄色、绿色、乳白色、黑色等颜色。
4.1.2透明度 正常脑脊液清晰透明,当脑脊液中有形物增加时,透明度降低,透明度可按清晰透明,微浑、浑浊三级报告。 4.1.3凝固或薄膜 正常脑脊液没有凝块,化脓性脑膜炎时可出湖南省肿瘤医院检验科作业指导书 文件编号:HNZLYY-JYK-ZY-LJ -001
脑脊液常规检验标准操作程序 第2页 共5页现 ，脑膜炎时可出现薄膜,可用无凝块、胶冻样、有薄膜形成、有凝块等方式报告
3、
4.2脑脊液化学检验:
(一)潘氏(pandy)定性试验
4.2.1【原理】
蛋白质与石碳酸结合成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。
4.2.2【试剂】
5-7%石碳酸溶液。
4.2.3【方法】
取试剂2－3毫升置于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液1－2滴,衬以黑色背景下观察结果,出现白色浑浊为阳性。
4.2.4【结果判断】
透明无变化 (一)阴性
微呈白雾状 (±)极弱阳性
灰白色云雾状 (+)弱阳性
白色浑浊 (++)阳性
白色浓絮状沉淀 (+
4、)强阳性
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白色凝块 (++++)最强阳性
4.3【注意事项】
试剂和脑脊液应按一定比例进行试验,若脑脊液浑浊,应离心沉淀后取上清液试验。
4.4【参考值】
正常人多为阴性,偶有极弱阳性反应。
5、脑脊液显微镜检验:
5.1细胞总数计数
5.1.1直接计数法:如细胞数很少,可用此法,用滴管吸取少量充分混匀的脑脊液于血细胞计数池内,等待2~3分钟后,用低倍镜计数四角及
5、中央共五个大方格中的细胞数,将其总数乘以2×106,即为每升脑脊液中的细胞总数。
5.1.2稀释计数法:如脑脊液中的细胞数很多,可用此法。于小试管内加红细胞稀释液0.38毫升,再用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20微升加入小试管中,混匀后将其滴人血细胞计数池内,然后用低倍镜计数四角的四个大方格中的细胞总数并乘以50×106。而即为每升脑脊液 中的细胞总数。
5.2白细胞计数
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脑脊液常规检验标准操作程序 第4页 共5页5..1.1直接计数法:用吸管吸冰醋酸
6、后轻轻吹出,使管壁附着少许冰醋酸。用此滴管吸取混匀的脑脊液数滴,待其中红细胞完全溶解后充入血细胞记数池内,计数四角及中央共五个大方格中的白细胞数(包括间皮细胞)。总数乘以2×106即为每升脑脊液中的白细胞数。 待其中红细胞完全溶解后充入血细胞记数池内,计数
白细胞数(包括间皮细胞)。总数乘以2×106即为每升脑脊液中的白细胞数。 待其中红细胞完全溶解后充入血细胞记数池内,计数四角及中央共五个大方格中的白细胞数(包括间皮细胞)。总数乘以2×106即为每升脑脊液中的白细胞数。
5.1.2、稀释计数法:稀释、充液、计数方法同细胞总数计数的稀释计数法,但改用白细胞稀释液,四角大方格中的细胞总数乘
7、以50×106即为每升脑脊液中的白细胞数。
6.白细胞分类
6.1、直接分类法:于白细胞计数后,将低倍镜改为高倍镜进行分类。依据细胞形态和核的形态将白细胞分为单核细胞和多核细胞。一般应计数100个白细胞。
6.2、涂片染色分类法:将脑脊液离心沉淀后,取沉淀物涂片,进行瑞氏染色,然后用油镜分类,报告方式同血液白细胞分类计数。
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脑脊液常规检验标准操作程序 第5页 共5页7.注意事项
7.1、标本应立即进行检查,时间太久细胞易变性、自溶及凝固。
7.2、白细胞数在10×106/L以下时,无须作分类计数。
8.正常值
正常脑脊液中无红细胞或仅含少量因穿刺损伤而带入脑脊液的正常形态的红细胞。白细胞亦极少,成人为(O~8)×106/L,儿童为(O~15)×106/L,多为单核细胞。
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