基于网络药理学和分子对接技术探讨沙棘活性成分对非酒精性脂肪肝作用机制.pdf

护理研究 2023 年 8 月第 37 卷第 16 期（总第 732 期）基于网络药理学和分子对接技术探讨沙棘活性成分对非酒精性脂肪肝作用机制高健1，吴胜男1，王晓静2，纪景馨2，张然2，程景民1*1.山西医科大学管理学院，山西 030001；2.山西医科大学公共卫生学院Study on mechanism of active ingredient in seabuckthorn on nonalcoholic fatty liver based on network pharmacology and molecular dockingGAO Jian,WU Shengnan,WANG Xiaojing,JI Jingxin,ZHANG Ran,CHENG JingminSchool of Management,Shanxi Medical University,Shanxi 030001 ChinaCorresponding Author CHENG Jingmin,Email:Abstract Objective：To analyze and study the molecular mechanism of active ingredients of sea buckthorn on non-alcoholic fatty liver disease（NAFLD）through network pharmacology and molecular docking technology.Methods：The highthroughput sequencing data of NAFLD was retrieved from the GEO database，and the differential expression analysis of the R language edgeR package was used to obtain the intersection of the differential genes and the corresponding targets of key components of sea buckthorn retrieved from the TCMSP database to obtain potential targets of sea buckthorn to interfere with NAFLD.Gene set enrichment analysis was used to study potential targetrelated cellular functions and signaling pathways，and Cytoscape was used to construct a componenttargetpathway interaction network.Subsequently，protein interaction network analysis（PPI）and network topology analysis（Degree）were performed to determine the core intervention targets，and the virtual docking of core targets and core components was performed through AutoDock Vina and PyMOL open source tools to predict the relationship between ligands and receptors.molecular mechanism of action.Results：The componenttargetpathway network was constructed by 159 nodes and 387 pairs of interactions.Molecular docking results showed that 10 active substances，including quercetin，flavonoids，kaempferol，linolenic acid，isorhamnetin，myricetin，coumarin，ursolic acid，rutin and stigmasterol，interact with JUN，MMP9，FGF2，VCAM1，CDKN1A，ACE，SERPINE1，SPP1，NOS3 and CCNA2，these 10 core targets have high affinity.Functional enrichment and pathway enrichment analysis mainly obtained biological processes of fatty acid synthesis and metabolism.62 active ingredients such as quercetin in sea buckthorn were shown to interfere with the development of NAFLD by regulating 61 targets such as transcription factor JUN.Conclusion：A variety of active components in sea buckthorn may play a role in preventing or intervening in the development of NAFLD by affecting lipid accumulation，reducing inflammatory response and scavenging reactive oxygen species through multiple targets and multiple pathways.The organic acids such as ursolic acid rich in sea buckthorn have great potential to interfere with NAFLD.Keywords transcriptomics；seabuckthorn；nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD；network pharmacology；molecular docking摘要 目的:通过网络药理学以及分子对接技术对沙棘活性成分干预非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）的分子作用机制深入分析研究。方法:在 GEO 数据库检索非酒精性脂肪肝病的高通量测序数据，通过 R 语言 edgeR 包差异表达分析后，将差异基因与 TCMSP数据库检索到的沙棘关键成分对应靶点取交集，得到沙棘干预非酒精性脂肪肝病的潜在靶点。利用基因集富集分析，研究潜在靶点相关细胞功能和信号通路，并使用 Cytoscape构建成分靶点通路三者作用网络。随后进行蛋白质互作网络（PPI）和网络拓扑分析 Degree确定核心干预靶点，并通过 AutoDock Vina和 PyMOL开源工具进行核心靶点与核心成分的虚拟对接工作，预测配体与受体之间的分子作用机制。结果:成分靶点通路网络由 159个节点以及 387对互作关系构建而成。分子对接结果显示，槲皮素、黄酮、山柰酚、亚麻酸、异鼠李素、杨梅黄酮、香豆素、熊果酸、芦丁和豆甾醇共 10 种活性物质与 JUN、MMP9、FGF2、VCAM1、CDKN1A、ACE、SERPINE1、SPP1、NOS3和 CCNA2 10个核心靶点有较高亲和性。功能富集和通路富集分析主要得到脂肪酸合成与代谢的生物过程。沙棘中槲皮素等 62种活性成分显示通过调节转录因子 JUN 等 61个靶点影响干预非酒精性脂肪肝病的发展。结论:沙棘中多种活性成分可能通过多靶点、多通路影响脂质积累、减弱炎症反应和清除活性氧从而发挥预防或干预非酒精性脂肪肝病病情发展的作用。沙棘中富含的熊果酸等有机酸干预非酒精性脂肪肝病潜力巨大。关键词 转录组学；沙棘；非酒精性脂肪肝；网络药理学；分子对接doi:10.12102/j.issn.1009-6493.2023.16.001非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）包 括 脂 肪 变 性、脂 肪 肝 炎（non alcoholic steatohepatitis，NASH）、肝纤维化，最终导致肝硬化及肝细胞癌症的广泛性系列疾病1。据流行病学调查数据显示，全球成人非酒精性脂肪肝病的患病率高达23%25%，其中 20%非酒精性脂肪肝病病人受脂肪肝炎的影响2。现阶段，在“二次打击”学说不断发展的基础上，针对除脂肪变性、氧化应激以外的胰岛素抵抗、线粒体功能紊乱、脂质毒性等多重平行打击在致病机制方面表明，非酒精性脂肪肝病为多种危险因素的相互作用导致34。考虑到非酒精性脂肪肝病受基因遗传、表观遗传和环境暴露等诸多复杂因素的相互影响，除使用非针对性药物治疗或接受身体运动的建议 科研论著 基金项目 国家自然科学基金青年科学基金项目，编号：71804102；山西省高校教学改革创新项目，编号：J2021261作者简介 高健，硕士研究生在读通讯作者 程景民，Email:引用信息 高健,吴胜男,王晓静,等.基于网络药理学和分子对接技术探讨沙棘活性成分对非酒精性脂肪肝作用机制J.护理研究,2023,37(16):28532861.2853CHINESE NURSING RESEARCH August,2023 Vol.37 No.16以外5，现阶段提出的“营养遗传学”和“营养表型基因组学”，通过研究饮食暴露与基因组的相互作用，改善临床与健康营养实践5。同时，植物提取物的多种活性成分、多种药理作用在非酒精性脂肪肝病实验模型中展现潜在多靶向效应3。于是，膳食管理和植物营养干预非酒精性脂肪肝病应运而生。沙棘果、沙棘叶和沙棘籽包含多糖、多酚和氨基酸等活性物质种类丰富，药理作用明显68。沙棘叶和沙棘果的提取物抑制糖基化终产物的形成9，沙棘油富含的山柰酚可减弱细胞的氧化应激和脂质积累10，沙棘汁在抑制炎症和预 防 代 谢 性 综 合 征、神 经 退 行 性 疾 病 中 发 挥 重 要作用8。随着非酒精性脂肪肝病和沙棘相关研究的不断深入，单靶点单成分的研究模式已无法完全解释其治疗作用。本研究通过构建多成分多靶点多信号通路的关联网络探究沙棘对非酒精性脂肪肝病的综合干预方式，对非酒精性脂肪肝病的发病、进展以及沙棘活性成分干预机制有着重要意义，为后续进一步探索沙棘治疗非酒精性脂肪肝病相关作用机制提供理论依据。1 资料与方法 1.1沙棘成分的获取在TCMSP数据库（https:/ Uniprot数据库（https:/www.uniprot.org/）规范蛋白质名称后将其转化为基因名称（gene symbol）。考虑检索到的沙棘成分以及成分对应靶点数目较少，且沙棘作为食品可直接食用，故暂不考虑使用常用参数药物相似度（DL）、口服生物利用度（OB）等对其进行过滤筛除。1.2非酒精性脂肪肝差异表达基因的筛选在 GEO 数据库（https:/www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）中选择表达谱 GSE126848 高通量测序数据集做差异表达分析。将数据矩阵中“健康人群（healthy normal weight）”和“健康肥胖（obese）”作为对照组，“单纯性脂肪变性（NAFL）”和“非酒精性脂肪性肝炎”作为试验组。对照组与试验组的测序数据统一为基因名称（gene symbol）后，使 用 R（4.1.3）“limma”包 以 P0.05、|LogFC|1 为临界阈值筛选差异基因并绘制火山图。其中，数据集中体重正常和肥胖受试者显示正常的肝脏组织学。1.3沙棘影响非酒精性脂肪肝病的潜在靶点预测沙棘成分的对应靶点基因与非酒精性脂肪肝病差异 表 达 的 基 因 在 JVENN 在 线 网 站（http:/jvenn.toulouse.inra.fr/app/example.html）绘 制 韦 恩 图（Venn），其中交集基因即沙棘干预非酒精性脂肪肝病的潜在靶点。1.4构建蛋白质互作网络（PPI）将沙棘干预非酒精性脂肪肝病的潜在靶点导入STRING 网站（https:/cn.stringdb.org/）构建靶点蛋白之间的关系网络图（medium confidence：0.4）。将PPI网络关系图导入 Cytoscapev 3.9.0平台可视化并借助 Cytohubba工具计算 Degree度值。1.5 基 因 本 体（GO）功 能 富 集 与 基 因 组 百 科 全 书（KEGG）通路富集将潜在靶点的 gene symbol使用 org.Hs.eg.db R 包转化为 Entrez ID 后，clusterprofiler、enrichplot R 包对潜在靶点进行生物过程（biological process，BP）、细胞组分（cellular component，CC）和分子功能（molecular function，MF）做 GO 功 能 富 集 和 KEGG 通 路 富 集（FDR0.05）。筛选 BP、CC 和 MF 三者富集数量排序均居前 10 位的结果通过 ggpubr 包绘制 GO 功能富集的条形图。借助 ggplot 2包将 KEGG 信号通路的全部结果可视化绘制气泡图。1.6成分靶点通路网络的构建沙棘成分、靶点信息和信号通路的相互关系导入Cytoscape（v 3.9.0）平 台 构 建 成 分 基 因 通 路 分 析网络。1.7分子对接验证分析使用网络拓扑分析 Degree 算法筛选出前 10 个基因作为核心靶点，并利用 RCSB 数据库（https:/www.rcsb.org/）、AlphaFold数据库（https:/alphafold.ebi.ac.uk/）和 TCMSP 数据库（http:/ 10 个活性分子的三维结构信息。有效成分和经PyMOL 2.2.5 去除多余配体的靶点蛋白在 AutoDock Tools 1.5.7软件分别去除水分子、补全氢分子，选定受体、配体后输出为 PDBQT 文件。调整靶点蛋白 Grid Box 参数使其对接范围包含全部的蛋白质结构。在AutoDock Vina 软件中完成核心成分与靶点之间的对接，记录其亲和性并用 pheatmap R 包绘制对接结果热图进行分析。沙棘的 10 种活性成分与其亲和性最高的非酒精性脂肪肝病核心靶点在 PyMol 中进行分子对接的可视化。2 结果 2.1沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点的获取在 TCMSP 数据库检索到沙棘有效成分 223 种，剔除未检索到靶点的成分和删除重复选项后，得到138 种 活 性 成 分 与 574 个 靶 点 蛋 白 的 关 系 信 息。GSE126848测序数据包含健康群体（14例）、健康肥胖（12例）、单纯非酒精性脂肪变性（15例）和非酒精性脂肪肝炎（16 例）4 组信息。将对照组（健康群体和健康 2854护理研究 2023 年 8 月第 37 卷第 16 期（总第 732期）肥胖）26 例样本与试验组（脂肪变形和脂肪肝炎）31例样本的表达谱信息转化为 13 569 个基因矩阵信息后，以 P0.05、|LogFC|1 为过滤条件筛选非酒精性脂肪肝病的差异表达基因。非酒精性脂肪肝病差异表达基因共 1 188 个，其中上调表达 627 个，下调表达561 个，采用 limma R 包对数据矩阵进行差异分析，代表上调基因的红色圆点共 627 个，代表下调基因的蓝色圆点共 561 个，灰色部分代表的基因被认为差异表达不显著。详见图 1。574 个沙棘靶点与 1 188 个非酒精性脂肪肝病靶点的交集，共 61 个关联靶点。详见图 2。2.2蛋白质互作网络的构建61 个 影 响 非 酒 精 性 脂 肪 肝 病 的 潜 在 基 因 在STRING 网站检索后蛋白质互作网络关系图见图 3。将 网 络 关 系 导 入 Cytoscape 平 台，其 中 TCF7L1、PCDH12、PDXP、B3GAT1、MAPK8IP2、HS3ST3A1、NT5M、SLC16A6 和 CBS 这 9 个靶点基因由于独立于主要网络关系暂不纳入分析。按照网络拓扑分析计算 Degree 值排序，选取 Degree 值居前 10 位的基因（JUN、MMP9、FGF2、VCAM1、CDKN1A、ACE、SERPINE1、SPP1、NOS3、CCNA2）作为核心靶点做深入研究分析，详见图 4，图中颜色深浅反映网络拓扑分析 Degree关系强弱。2.3GO功能富集与 KEGG通路富集利用 clusterprofiler 包富集 61 个潜在靶点主要的细胞功能与信号通路并将其可视化，GO 功能富集主要富集到对异源刺激反应、活性氧反应、镉离子的反应、营养反应、调节血管形成、脉管系统发展相关生物过程，详见图 5；KEGG 信号通路主要富集到细胞周期、p53 信号通路、动脉粥样硬化、AGERAGE信号通路、细胞衰老、缺氧诱导因子1（HIF1）信号通路等信号通路。详细见图 6。图 3沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点蛋白质互作网络图（基于 STRING 网站）图 2沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点韦恩图图 4沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点蛋白质互作网络图（基于 Cytoscape平台）图 1沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点火山图 2855CHINESE NURSING RESEARCH August,2023 Vol.37 No.162.4成分靶点通路网络的构建沙棘中 62 种活性成分显示，通过调节转录因子JUN 等 61个靶点影响干预非酒精性脂肪肝病的发展。将基因与信号通路的关系导入 Cytoscape 平台进行可视化处理，62种沙棘成分、61个靶点基因、10条 GO 功能富集（生物过程）和 26条 KEGG 信号通路，共 159个图 6沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点 KEGG富集分析气泡图图 5沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点 GO富集分析柱状图 2856护理研究 2023 年 8 月第 37 卷第 16 期（总第 732期）节点和表示其相互关系的 387 条边共同构成成分靶点信号通路关系网络。详见图 7。2.5分子对接验证分析筛选到的核心基因与主要成分进行进一步分子学验证，以研究成分靶点之间具体的结合分子机制。核心 靶 点（JUN、MMP9、FGF2、VCAM1、CDKN1A、ACE、SERPINE1、SPP1、NOS3、CCNA2）与各核心成分槲皮素（quercetin）、黄酮（flavone）、山柰酚（kaempferol）、亚麻酸（linolenic acid）、异鼠李素（isorhamnetin）、杨梅黄酮（myricetin）、香豆素（coumarin）、熊果酸（ursolic acid）、芦丁（rhein）、豆甾醇（stigmasterol）一一进行分子对接，利用 pheatmap 包绘制对接亲和性热图，详见图 8。其中，结合能（Vina 评分）越低则表示靶点与活性成分对接后越稳定。在 Autodock Vina分子对接中，配体和受体之间对接结果若结合能5.0 kcal/mol，则被认为是对接的良好标准品1112。同时也有经验法则（rule of thumb）认为，结合能7.0 kcal/mol 为结合力强的体现。沙棘活性成分芦丁与核心靶点 NOS3亲和性结合能=8.8 kcal/mol 为 100 次对接结果中亲和性最高的组合。分子对接结果显示，槲皮素、黄酮、山柰酚、亚麻酸、异鼠李素、杨梅黄酮、香豆素、熊果酸、芦丁和豆甾醇共 10 种活性物质与 JUN、MMP9、FGF2、VCAM1、CDKN1A、ACE、SERPINE1、SPP1、NOS3 和 CCNA2 10 个核心靶点有较高亲和性。详见图 9。图 7沙棘干预非酒精性脂肪肝病的成分靶点通路网络关系图图 810个核心靶点与 10个核心成分之间的 Autodcok vina对接亲和性热图 2857CHINESE NURSING RESEARCH August,2023 Vol.37 No.163 讨论 在全球流行肥胖的背景下，非酒精性脂肪肝病患病率不断上升13。目前，“多重打击”解释非酒精性脂肪肝病发病过程中多种可能的平行作用，其中氧化应激被认为是肝损伤和疾病发展的主要因素14。脂类代谢紊乱导致肝脏脂质积累，影响线粒体、内质网和NADPH 氧化酶等活性氧的发生器，从而影响胰岛素图 9沙棘主要活性物质与亲和性最高的靶点的分子对接可视化图 2858护理研究 2023 年 8 月第 37 卷第 16 期（总第 732期）敏感性和脂类代谢关键酶的活性与表达15。尽管肥胖是非酒精性脂肪肝病公认的风险因素，但也有瘦弱个体的患病报道16。所以在本研究中，GSE126848 数据集中 14例正常健康样本与 12例健康肥胖（肝脏样本正常）样本一同纳入本研究的对照组，有效排除单纯肥胖对非酒精性脂肪肝病研究的影响。由于非酒精性脂肪肝病的多种危险因素的相互作用，来自草药或饮食的天然活性物质由于对应的众多靶点而成为非酒精性脂肪肝病潜在的治疗方法17。从构建的网络中发现，不同化合物对应的多个靶点、多个信号通路重合，预测对非酒精性脂肪肝病可发挥协同干预作用。槲皮素诱导超氧化物歧化酶（SOD）催化分解反应中供氢体谷胱氨肽的合成，从而发挥清除自由基和活性氧的作用18。除此之外，槲皮素还可以通过激活 FXR1/TGR5 信号通路改善脂质代谢19，或通过抑制脂肪酸的从头合成途径减少脂质积累20。山柰酚缓解细胞中脂质储存和内质网应激21，介导磷酸腺苷 酸 活 化 蛋 白 激 酶（AMPK）/西 罗 莫 司 靶 蛋 白（mTOR）的磷酸化诱导细胞自噬从而发挥对脂毒细胞的保护作用22。作为过氧化物酶增殖物激活受体（PPAR）天然配体，异鼠李素通过抑制受体信号传递改善胰岛素抵抗、抑制脂肪细胞的分化并减轻肝脏的脂肪变性以及纤维化程度2324。61 个沙棘干预非酒精性脂肪肝病潜在靶点构建蛋白质互作网络确定了其中 10 个核心基因参与疾病的 发 生、发 展。转 录 因 子 JUN（transcription factor JUN）在 61个潜在干预靶点的网络拓扑分析中 Degree度值最高。JUN 识别激活蛋白1（activator protein1，AP1）特定序列并与之结合成转录复合物，可增强其结合活性与转录活性2526。构成 AP1 的系列蛋白特别是 cJun 已被证明在肝脏生物学和疾病的许多方面起着至关重要的作用27。与对照组小鼠相比，饮食诱导的非酒精性脂肪肝病小鼠在组织阵列和免疫组化分析中 JUN 信使核糖核酸（mRNA）表达水平及磷酸化水平升高28。与正常肝组织相比，非酒精性脂肪肝病病人 mRNA 的表达水平显著增强，且 cJUN 的表达与炎性评分、脂肪变性分级显示显著相关性28。在与JUN靶点对应的多个沙棘活性成分中，杨梅黄酮与熊果酸通过抑制可磷酸化激活 cjun 的酶类（jun Nterminal kinase，JNK）表现抑制 JUN 作用2930。与其他核心基因相比，内皮细胞一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,endothelial NOS3）与沙棘多个活性成分展现高亲和性。内皮一氧化氮合酶（eNOS）介导血管张力并在心血管系统中提供抗炎信号，而缺乏 eNOS 的小鼠线粒体周转和自噬的相关标志物减少，更容易受到西方饮食诱导的肝脏炎症和纤维化的影响31。在筛选的沙棘活性成分中，芦丁可通过 NOS 介导的核转录因子B（NFB）信号通路抑制氧化应激和抗炎效应32，同时对卡非佐米（carfilzomib，CFZ）诱导的肾毒性表现出保护作用32，在肝脏相关研究中也可能有类似功效潜力。有 统 计 学 研 究 显 示，重 塑 金 属 蛋 白 酶 9（matrix metalloproteinase9，MMP9）在内脏脂肪组织中表达增加，且促炎糖蛋白 TNC 与 MMP9 的表达水平呈现明显正相关33。而在本研究中 MMP9 受沙棘中槲皮素的调控表达同样在相关研究中得到验证。槲皮素可降低 MMP9、MMP2和血管内皮生长因子A（VEGFA）的表达阻止癌细胞的侵袭和血管形成34。MMP9对非酒精性脂肪肝病的直接影响相对较少，仍处于研究更新状态，但是 MMP9在肥胖症中的表达异常或活性改变强调其在肥胖及相关肥胖并发症的病理生理的参与33。61个沙棘干预非酒精性脂肪肝病的靶点在 GO 功能富集中收集到多种生物学相关过程，其中活性氧（ROS）、活性氮（RNS）等促氧化剂与抗氧化剂之间的平衡维持着细胞正常生理状态下的增殖、分化、迁移和收缩35。正常生理状态下，基础水平的 ROS 参与氧化还原反应信号的传导36。细胞通过分解脂滴回收受损的内质网和线粒体，抑制氧化应激和有害 ROS 的生成37，维持肝脏功能代谢和能量需求，预防非酒精性脂肪肝病或非酒精性脂肪性肝炎3839。高脂饮食和脂质代谢失调导致肝游离脂肪酸和三酰甘油的积累40。线粒体 氧化水平降低和脂肪生成增加导致肝细胞中的脂质积累，生成过多的 ROS39。除线粒体外，内质网中细胞色素 P450 活性反应、微粒体代谢、CHOP 表达也是 ROS的来源41。ROS异常生成时，通过抑制线粒体呼吸链酶、诱导脂质过氧化、促进促纤维化细胞迁移，造成肝细胞的损伤和纤维化42。同时 ROS 不利于线粒体自噬对肝脏的保护。ROS 诱导线粒体膜电位增加不利于线粒体自噬的发生43，不利于凋亡降解维持线粒体功能结构39。可见，ROS 参与细胞多种反应过程，对维持肝细胞微环境非常重要。除此之外，在 KEGG 富集通路中也有丰富的生物信号通路体现。P53调节细胞应激、代谢和周期，已成为肝脏稳态和功能障碍的重要调节剂44。P53 参与脂质代谢相关基因的表达促进脂质分解，或抑制脂质合成蛋白质来调控脂质积累。但是也有相关报道称表示 2859CHINESE NURSING RESEARCH August,2023 Vol.37 No.16抑制 P53的转录活性可以降低肝脏脂肪变性相关的氧化应激45。其中，P53 与非酒精性脂肪肝病的双重关系可能与激活状态、细胞内分布和突变相关46。10个核心靶点与10个核心成分之间的Autodcok Vina对接亲和性热图显示，沙棘活性成分与非酒精性脂肪肝病核心靶点亲和性几乎全部结合能5.0 kcal/mol，且部分对接组合结果结合能7.0 kcal/mol 展示高亲和性。沙棘主要的活性物质与亲和性最高的靶点的分子对接可视化图显示，受体与配体间接触面积较大，活性分子基本被蛋白分子接触包绕。除去 NOS3与豆甾醇之间的结合为疏水作用力，其余核心靶点与活性成分展现高亲和性则以亲水氢键连接。通过分子对接亲和力 热 图 层 次 聚 类 分 析，NOS3、MMMP9、ACE、SERPINE1 和 CCNA2 与沙棘活性成分亲和力明显高于其余核心基因而被分为不同模块。其中 NOS3与众多沙棘核心成分亲和性最高，沙棘成分可能主要通过与 NOS3的相互作用发挥抗炎抗非酒精性脂肪肝病功效。与其他沙棘成分相比，熊果酸与多个核心基因也显示较高亲和性。除熊果酸以外，沙棘中其他种类及含量丰富的有机酸也可能在非酒精性脂肪肝病干预过程中发挥潜在作用。总而言之，本项目研究 GEO 公开数据库收集非酒精性脂肪肝病的特征基因，并筛选与之对应匹配的沙棘活性成分。研究结果表明沙棘可通过多靶点和多通路影响干预非酒精性脂肪肝病，为以后非酒精性脂肪肝病的相关病理或药理研究提供参考。参考文献：1 ESLAM M,VALENTI L,ROMEO S.Genetics and epigenetics of NAFLD and NASH:clinical impactJ.Journal of 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