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临床检验方法学评价基本概念和具体实施简介

方法学评价不仅是实验室认可的必须条件，更是实验室质量管理的基本要求。
• 2003年我国实验室国家认可委员会（CNAS)以将ISO15189《医学实验室-质量和能力的专用要求》作为我国实验室认可的标准。
• 《医疗机构临床实验室管理办法》第三十条:
医疗机构临床实验室应对方法学进行评价,包括准确度、精密度、特异性、线性范围、稳定性、抗干扰性、参考范围等。
• CLIA’88 第493.1213条:
实验室在报告病人结果前, 必须建立和确认每个方法下列的性能指标:正确度(原称准确度) 、精密度、分析灵敏度和特异性、病人结果的检测(可报告)范围、参考范围与其他适用的性能特性。
分析系统 试剂 定标品 分析仪
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检测系统
试剂 人员 操作程序 环境和配套设施 分析仪器 校准品

• 确认(验证):
用小批量的病人样本(混合样本),来验证本实验室现行的检测系统参数与厂家提供的参数相吻合或符合本实验室所制定的检测质量要求。
• 建立:
用批量的病人样本(或混合样本)、采用标准的实验方法、用实验室现行的检测系统来确定本实验室检测项目的参数和检测质量要求。

为何要对方法学进行评估
• 安装和运输过程使分析系统发生变化。
• 工作环境和条件不相同(水质、电压、温度、湿度、大气压等)。
• 试剂在运输和储存条件等状况发生变化。
• 仪器电子部件的使用老化和机械部件的磨损。
• 操作程序的制定。
• 员工的素质和培训情况的差异、检测对象(人群)的差异。
方法学评价的目的
• 在实验室开业之前或新检测项目和检测系统引入后，在正式开展之前，核实或验证厂家提供的技术参数。
• 建立自己的检测系统的方法学参数，并评价方法学参数是否符合本实验室（或国家规定的）的质量要求。
• 利用新检测系统的方法学参数，正确解读项目、报告结果及合理解释检测结果。
• 对现用的检测系统进行监控，已确保检测质量。
• 熟悉和掌握该仪器或检测系统的操作程序，为正式检测病人样本作好准备。
• 编写较全面的适合自己的SOP。

何时需要进行评价
• 新引入的检测系统（仪器、试剂）在正式使用之前。
• 实验室自己研制或开发新项目时。
• 现使用的方法（仪器、试剂）发生了变更后。
• 仪器进行了重大的维修和主要部件的更换后。
• 室间质评失败后。

方法学评价的基本内容
• 精密度（批内、天间）评价
• 正确的评价
• 灵敏度评价（功能灵敏度）
• 可测定范围验证（AMR,线性）
• 临床可报告范围验证（CRR)
• 携带污染确认
• 参考区间确认或建立
• 干扰因素评价

精密度评价
CLSI EP5-A2方案：
《定量检测方法的精密度性能评价》
方案特点：
1. 主要用于厂商或临床实验室对新研发的检测方法和系统或自建检测系统进行评价。
2. 采用2×2×20检测方法，80个数据，
3. 要经过离群值检验、精密度评价、与厂家指标比较等复杂的计算。

CLSI EP15-A方案：
《用户对精密度和正确度性能的核实指南》
方案特点：
1. 要根据厂商提供的批内和总精密度来决定样本检测的重复次数。
2. 需20份样本（包含整个线性范围）,一天或3～4天完成。
3. 要计算批内和总精密度并分别与厂家的数据进行比较。
4. 要_______经过离群值检验和统计学显著性检验。
5. 是对厂家提供的性能参数的核实。
简易的不精密度评价
一、可选用的样本
1.检测过的混合的病人样本。
2.质控物质。
3.定标品（非现在用的另一批号）。
4.厂家专门生产的用于精密度评价的物质。
二、样本要求
1.高低两个浓度，最好选择在医学决定水平点。
2.或浓度在参考区间的上限和下限附近。
3.或检测范围的中间点和功能灵敏度上限。
4.与病人样本同基质，含量稳定，不能有添加剂。

三、制定本科室的检验质量目标
1.按生物学变异导出的质量目标.
2.按室间质评计划中规定的质量目标： CLIA ”88、部室间质评标准
3.按已出版的推荐的质量目标
4.基于目前技术水平设定质量目标
四、检测
1.批内（within run）：一次检测完成。
2.天间（run to run）：一天检测一次，共20天，（在样本保存有困难的项目中，可采用上下午各检测一次，每次两个样本，共检测五天）。

五、统计计算和形成评估报告
分别计算批内和天间两浓度的SD、CV%。
六、判别标准
1. 批内不精密度≤1/4的总允许误差（TEa）
2. 天间不精密度≤1/3的总允许误差（TEa）
正确度性能评价
正确度定义:
由大量检测结果得到的平均值与接受参考值的一致程度。
何时需要评价：
1.新仪器、新方法（试剂）使用之前。
2.仪器、方法（试剂）、操作程序的更改后。
3.仪器进行重大的维护及主要部件的更换后。
4.室间质控结果失败时。
5.相同项目有多台仪器（方法）检测。
6.至少半年一次。

常用的评价方案
• 方法学比对
• 室间质评（PT）:CAP、部、省临检中心等
• 对已知靶值物质的检测（定值质控品、定标品、测试过的样本）
• 实验室之间的比对
• Chart review
• 双人比对
简易的正确评价法案
《用户对精密度和正确度性能的验证指南》
1.方法学比对
2.对已知靶值物质的检测计算偏倚包括如下物质（但不限于这些物质）
a.定值质控品
b.定标品（另一批号）
c.PT样本
d.测试过已知值的病人样本（结果需稳定）
e.厂家生产专门用于正确的确认（定标确认）的物质
f.参考物质

临床可报告范围（CRR）
• 临床可报告范围是指检测方法能定量报告的范围，允许稀释或浓缩和预处理，检测值可超出AMR。
CRR建立的基本要求
• CRR的建立是由实验室主任作出的医学判断，并依赖于分析技术。CRR通常是在方法学验证之始建立并且不需要再评估除非方法学改变。
CRR的建立应兼顾以下两点：
1. 方法学上能否做到
2. 是否有临床诊断意义

• 方法学评价是一个比较复杂和繁琐的工作，知识面要求高，需要认真
地去学习有关的基础知识。
• 目前：大部分EP文件只适用于新方法的研发，检验科要按照实际情况选择简单的评价方案进行验证厂家提供的参数就可以了。
• 首次评价应在检验项目正式开展之前完成，未完成的应尽快完善。
• 要通过评价熟悉和掌握检验方法和检测仪器，利用评价参数正确报告结果与合理解释检测结果。
• 科主任和相关组长要参与方案设计和评价数据的统计、员工必须参与评价。