加速溶剂提取法快速分析乌龙茶内含呈香组分_苏新国.pdf

441分析检验食品科学2006,Vol.27,No.10加速溶剂提取法快速分析乌龙茶内含呈香组分苏新国1,2，王宁生1，宓穗卿1，蒋跃明2，段 俊2(1.广州中医药大学临床药理研究所，广东 广州 5 1 0 4 0 5；2.中国科学院华南植物园，广东 广州 5 1 0 6 5 0)摘 要：加速溶剂提取法(A c c e l e r a t e d s o l v e n t e x t r a c t i o n,A S E)是近年来最先进的样品前处理技术之一，具有快速高效等特点。本研究应用A S E 技术对凤凰单枞乌龙茶(C a m e l l i a s i n e n s i s)的呈香组分进行富集，设置最优条件是使用4 0 m l乙酸乙酯为提取溶剂，提取压力9 M P a，提取温度1 2 0，可对1 0.0 0 g乌龙茶样品的香气成分有效提取，提取时间仅为5 m i n；结合气质联用仪分析鉴定。结果表明采用 A S E富集凤凰单枞乌龙茶香气组分，从桂花香型凤凰单枞乌龙茶中检测出 6 3种香气组分，其中较高的组分有芳樟醇、橙花叔醇、壬酸、癸酸、香叶醇、十六烷和 3,7-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇。A S E 法可对乌龙茶内含香气组分进行无损富集和快速检测，避免茶叶内含不稳定的香气组分被破坏，减少茶叶香气组分检测的误差和不稳定性。关键词：凤凰单枞乌龙茶；加速溶剂提取；气质联用；香气组分A p p l i c a t i o n o f A c c e l e r a t e d S o l v e n t E x t r a c t i o n o n t h e O o l o n g T e a(C a m e l l i a s i n e n s i s c v.F e n g h u a n g d a n c o n g)A r o m a A n a l y s i sS U X i n-g u o1,2，M I S u i-q i n g1，W A N G N i n g-s h e n g1，J I A N G Y u e-m i n g2D U A N J u n2(1.I n s t i t u t e o f C l i n i c a l P h a r m a c o l o g y,G u a n g z h o u U n i v e r s i t y o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M e d i c i n e,G u a n g z h o u 5 1 0 4 0 5,C h i n a；2.S o u t h C h i n a b o t a n i c g a r d e n,C h i n e s e A c a d e m y o f S c i e n c e s,G u a n g z h o u 5 1 0 6 5 0,C h i n a)A b s t r a c t：O o l o n g t e a (C a m e l l i a s i n e n s i s),n a t i v e t o C h i n a,i s a s e m i-f e r m e n t a t i o n w i t h a g o o d p l e a s a n t,f r a g r a n t a n d s w e a t t a s t e.T h e a r o m a c o m p o u n d s,c o l l e c t e d b y a c c e l e r a t e d s o l v e n t e x t r a c t i o n (A S E),c o m p a r e d t o d i s t i l l a t i o n e x t r a c t i o n (S D E),w e r ei n v e s t i g a t e d.T h e m a j o r r e s u l t s a r e a s f e l l o w s:U s i n g A S E,6 3 k i n d s o f a r o m a c o m p o u n d s o f F e n g h u a n g d a n c o n g O o l o n g t e a c v s.G u i h u a w e r e i d e n t i f i e d,w h e r e a s 5 5 a r o m a c o m p o u n d s b y S D E,r e s p e c t i v e l y.T h e m a j o r a r o m a c o m p o u n d s o f O o l o n g t e ac o l l e c t e d b y A S E w e r e l i n a l o o l,n e r o l i d o l,n o n a n o i c a c i d,d e c a n o i c a c i d,g e r a n i o l a n d 3,7-d i m e t h y l-1,5,7-o c t a t r i e n e-3-o l.A S Ee x h i b i t e d a d v a n t a g e s i n c o l l e c t i n g a c t u a l a r o m a c o m p o u n d s,m o d i f y i n g t h e a n a l y s i s o f t e a h e a t-i n s t a b l e a r o m a c o m p o u n d s a n dm a i n t a i n i n g a g o o d a n a l y t i c s t a b i l i t y.K e y w o r d s：O o l o n g t e a；a c c e l e r a t e d s o l v e n t e x t r a c t i o n (A S E)；G C-M S；A r o m a c o m p o u n d s中图分类号：T S 2 7 2.5.9 文献标识码：A 文章编号：1 0 0 2-6 6 3 0(2 0 0 6)1 0-0 4 4 1-0 4收稿日期：2 0 0 6-0 7-3 1基金项目：中国科学院重点项目凤凰单枞乌龙茶无公害生产及技术示范(2 0 0 2-2 0 0 4)作者简介：苏新国(1 9 7 7-)，男，副研究员，博士后，主要从事天然产物化学及其药理作用研究。分析茶叶香气组分的第一步是茶叶香气组分的提取，由于茶叶香气组分含量低微、组成复杂、易挥发、不稳定，在提取过程中易发生氧化、聚合、缩合、基团转移等反应，因此，茶叶香气需要采取特殊的分离和提取方法，其直接关系到茶叶香气组分的定性和定量结果 1。乌龙茶的香气组分很多，不同的香气组分，则表现出不同的香气类型，其含量的高低影响着乌龙茶的品质 2。关于这些香气组分分析，目前主要以水蒸汽蒸馏法(S D E)提取茶叶的香精油再进行相应地分析 3,4，由于 S D E法需要长时间水蒸气蒸馏过程，而制得香精油，香气组分处于高温高湿的环境，使得所制香精油中各个化学成分的含量和比例变化较大，因此不能真实地反映样品中香气组分的实际构成 4,5。因此样品制备及其前处理技术直接关系到乌龙茶香气组分的准确分析，虽然采用固相微萃取(S P M E)法可以准确地富集乌龙茶的感官香气，但是该技术对茶叶内含香气组分，特别是半挥发性组分的富集提取仍存在不足 2。A S E(A c c e l e r a t e d S o l v e n t E x t r a c t i o n,A S E)是近年来美 2006,Vol.27,No.10食品科学分析检验442国戴安(D i o n e x)公司近年推出的全新样品前处理技术，具有提取时间短，溶剂消耗少，提取效率高等特点，并且其操作过程可以自动化和模式多样化 6,7。目前 A S E技术广泛地应用于食品农药残留分析、环境污染物检测以及中药制剂含量测定等方面，由于A S E 的特点突出，可以大幅度提高萃取效率，它已经被美国国家环保局批准为 E P A 3 5 4 5 号标准方法 8 1 0。因此，本研究以乙酸乙酯为提取溶剂，采用 A S E法对凤凰单枞乌龙茶的内含香气组分进行有效提取，并结合气质联用仪进行检测；对比 A S E和 S D E两种不同的香气提取方法分析乌龙茶内含香气组分的差异，对于研究凤凰单枞乌龙茶内含香气组分的实际构成，同时也可为 A S E 法在食品有效成分快速制备和检测中的应用提供实验参考。1材料与方法1.1材料及取样方法实验所用凤凰单枞乌龙茶(C a m e l l i a s i n e n s i s)品种为桂花香型，成茶样品于2 0 0 4 年4 月8 日采自潮州市凤凰镇凤溪村(海拔 7 8 5 8 4 2 m，属于中高山优秀茶区)。乌龙茶制作按照传统凤凰单枞制法：采样后晒青2 h左右，接着晾青 4 h，每隔 2 h碰青 1 5 m i n，前后共碰青 5 次；1 8 0 2 0 0 杀青锅中杀青 1 0 m i n，接着机械揉捻2 0 m i n，然后 2 0 0 热风烘 1 5 m i n；再用1 0 0 热风复烘 2 h。成茶干样用隔气聚丙烯茶叶袋密封，贮藏于 4 冷库中待用。分别采用 A S E和 S D E法提取样品内含香气组分，并进行相应 G C-M S分析。1.2仪器与试剂A S E 2 0 0 溶剂加速提取仪 美国D i o n e x 公司；气质联用条件：采用岛津 Q P-2 0 1 0 型气质联用仪，分别采用J&W 公司 D B-1 7 m s 弹性石英毛细管柱，柱长3 0 m，内径 0.2 5 m m，涂膜厚度为0.2 5 m，分流比为3 0:1，载气为高纯氦；进样 1 l，进样口温度2 0 0，初始温度6 0，升温速率 2 5/m i n，终止温度 2 5 0。质谱条件：电子能量 1.1 K e v，离子源温度 2 0 0，扫描范围 4 0-7 0 0 m/z，扫描间隔0.5 s，扫描速率1 0 0 0 a m u/s，采用 N I S T 和W i l e y谱库进行串连检索。1.3A S E 法制备乌龙茶叶的内含香气组分称取打碎的乌龙茶1 0.0 g，分装于3 3 m l 不锈钢提取管中，管两端加装纤维滤片，以乙酸乙酯(HPLC，M e r c k)提取乌龙茶中的内含香气组分。由于压力的改变对提取效率的影响不大，高压的作用主要是用于维持溶剂在高温下始终处于液体状态，大多数情况下压力的范围是 7 1 4 M P a 1 1，9 M P a 是D i o n e x 公司对该仪器推荐的工作压力，故本实验研究直接将提取压力设定为9 M P a。其它预设条件：提取温度为 1 2 0，提取时间为 5 m i n，提取压力固定为 9 M P a，循环 1次，整个提取过程共耗用溶剂 4 0 m l。试验共设 4个重复，合并所有提取液，经过 1 0 g无水硫酸钠干燥过夜后，用 K D浓缩器浓缩至2 0 m l，经微孔滤膜(0.4 5 m)过滤，进样 G C-MS分析，结合标准谱库，鉴定其化学成分组成。1.4S D E法制备和检测乌龙茶叶的内含香气组分取凤凰单枞乌龙茶成茶干样5 0 g，剪碎后置于S D E装置的2 0 0 0 m l 圆底烧瓶中，加入1 0 0 0 m l 沸腾的重蒸水，采用套式恒温器加热，保持微沸；萃取瓶中加入1 0 0 m l纯化三氯甲烷，其中加入1 0 0 l 0.2 g/L 癸酸乙酯(内标物)，保持 5 0 水浴，提取 9 0 m i n。提取液经过 5 g无水硫酸钠干燥过夜后，用 K D浓缩器浓缩至 1.0 m l，所得内含香精油在4 低温下保存于玻璃毛细管中，供分析用。该部分香气组分的 G C-M S分析条件：气相色谱仪为岛津G C-1 7 A(3 0 m 0.2 5 m m J&W D B-1 7 m s 石英毛细管柱)，质谱仪为岛津Q P-5 0 0 0。实验条件设置为：4 0 2 5 0，2/m i n 升温速率，载气为H e，流速为1 m l/m i n，电子倍增管电压为 2 5 0 0 V，轰击能量为 7 0 e V，离子源温度为2 0 0，总离子流强度为 1 1 0 m A，电流方式为E I。S D E 法提取得到的香精油样直接进样1 l，同时启动仪器采集数据。1.5香气组分分析利用N I S T 及W I L E Y 两个谱库对得到的质谱图进行串连检索。以各香气组分的峰面积占总面积之比值表示组分相对含量。2结果与分析图1 ASE提取的凤凰单枞乌龙茶内含香气组分色谱图Fig.1 Chromatogram chart of aromas of extract ofFenghuangdancong Oolong tea cv.Guihua by ASE保留时间(m i n)1.5 01.2 51.0 00.7 50.5 00.2 50.0 05.01 0.01 5.02 0.02 5.03 0.03 5.04 0.04 5.05 0.05 5.06 0.082 01 91 62 22 31 22 93 23 53 94 74 85 05 15 35 45 65 76 26 3图1 是加速溶剂提取法(A S E)制备的桂花香型凤凰单枞乌龙茶内含香气组分的 G C-M S 总离子流色谱图(T I C)，从 T I C图中看出，采用气质联用法鉴定出 6 3种香气成分，6 5 m i n 后香气组分基本检测完毕。而水蒸气蒸馏法(S D E)制备的乌龙茶香精油的 G C-M S 检测中，共鉴定出5 5 种香气组分，整个检测过程耗时 5 0 m i n，具体见我们前期的实验报道 2。利用N I S T 及W I L E Y 两个谱库对得到的A S E和 S D E443分析检验食品科学2006,Vol.27,No.10制得乌龙茶香气组分的质谱图进行串连检索，并以各香气组分的峰面积占总面积之比值表示组分相对含量，结果如表1所示。采用A S E 法检测出的香气组分有 6 3种，其中含量较高的为己醇(3.1 8%)、十六烷(3.9 4%)、芳樟醇(7.9 2%)、苯甲醛(3.0 8%)、3,7-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇(3.9 6%)、藏花醛(2.7 8%)、苯甲醇(2.4 0%)、3-己烯酸己烯(3.2 3%)、香叶醇(3.6 3%)、苯酚(5.6 7%)、橙花叔醇(9.6 0%)、壬酸(3.9 0%)、茶螺烯酮(3.0 5%)、癸酸(4.0 6%)和9,1 2-十八碳二烯酸(3.1 0%)，这1 5 种香气组分占总量的 6 3.5 0%；而采用S D E 法提取的香精油中共有5 5 种香气组分，含量较高的有芳樟醇(5.8 9%)、6-辛基-2-酮(3.1 7%)、壬醇(1.9 4%)、-萜品醇(2.8 1%)、香叶醇(7.0 4%)、2,4-庚二烯醛(3.3 0%)、己酸-3-己烯酯(3.3 0%)、苯甲醇(5.0 3%)、博伏内酯(2.4 1%)、橙花叔醇(7.8 0%)、茉莉酮酸甲酯(2.2 0%)、茶螺烯酮(2.3 0%)、茉莉内酯(2.0 2%)、二氢海葵内酯(2.2 0%)、十六酸甲酯(3.4 4%)、植醇(2.2 0%)和9,1 2-十八碳二烯酸(4.5 0%)，这1 7 种香气组分占香精油总量的6 1.3 4%。通过 A S E和 S D E法检测的乌龙茶香气组分中，均有高含量的芳樟醇、橙花叔醇香叶醇、茶螺烯酮和9,1 2-十八碳二烯酸，这些香气组分构成了凤凰单枞乌龙茶香气的主体。两组香气组分中最高含量均为橙花叔醇，其次为芳樟醇，它们具有清淡爽快的铃兰香 1 2，与桂花的甜蜜清爽香气十分相似，为桂花香型乌龙茶的主体呈香物质 1 3，而其它几种香气组分应该在乌龙茶呈香过程中起到关键作用。采用A S E 检测的香气组分含有十六烷、十二烷、十二酸、壬醇、壬酸等简单碳氢化合物，这些化合物在 S P M E法检测到的感官香气中也有发现 2，但却在 S D E过程中丧失；另外 A S E检测的香气组分中存在2 种芳樟醇氧化物(I 和I I I)，但在S D E 中却存在4 种(I、I I、I I I 和I V)，这也从另外一个方面反应了 A S E和 S D E法在制备过程中，乌龙茶香气组分有 A S E 法制备乌龙茶香气组分 S D E 法制备乌龙茶香气组分成分名称相对含量(%)成分名称相对含量(%)1己醛0.3 51-戊烯-3-醇0.7 821-戊烯-3-醇0.1 63-己烯-1-醇1.1 033-己烯-1-醇0.0 5庚醛0.5 342-庚酮0.2 32-己烯醛0.6 15庚醛0.3 4苯甲醛0.3 162-己烯醛0.1 62-戊基呋喃0.4 372-戊基呋喃0.5 5-香叶烯0.4 38癸烷0.6 5-萜品烯0.5 39正戊醇0.2 02-戊烯-1-醇0.4 31 0-萜品烯0.2 52,5-二甲基吡嗪0.6 51 12-戊烯-1-醇0.2 5芳樟醇氧化物I1.4 01 22,5-二甲基吡嗪0.9 4芳樟醇氧化物I I1.3 11 3丁内酯0.1 5芳樟醇5.4 91 4十二烷0.8 4辛醇1.3 81 5己醇3.1 8苯甲酸甲酯1.2 31 63-己烯-1-醇1.0 56-辛烯-2-酮3.1 71 7苎烯0.9 63,7-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇0.7 81 8芳樟醇氧化物I0.4 33-己烯酸己烯1.6 71 91-辛烯-3-醇1.0 3壬醇1.9 42 0十六烷3.9 4-萜品醇2.8 12 1糠醛1.0 4柠檬醛1.2 12 2芳樟醇7.9 2芳樟醇氧化物I I I0.6 12 3苯甲醛3.0 8-法呢烯0.7 82 4芳樟醇氧化物 I I I0.7 9芳樟醇氧化物I V0.4 72 5辛醇0.3 0香叶醇6.0 42 6-环柠檬醛0.1 62,4-庚二烯醛3.3 02 7苯甲酸甲酯0.2 7己酸-3-己烯酯3.3 02 8十二酸1.1 7苯甲醇4.0 3表1 ASE 和SDE 法制备桂花香型凤凰单枞乌龙茶内含香气组分及其含量Table 1 Compounds and concentration of aromas of extract ofFenghuangdancong Oolong tea cv.Guihua by ASE and SDE A S E 法制备乌龙茶香气组分 S D E 法制备乌龙茶香气组分成分名称相对含量(%)成分名称相对含量(%)2 93,7-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-醇3.9 6-紫罗酮2.6 43 0藏花醛2.7 8癸酸乙酯1.4 03 1苯甲醇2.9 42-苯乙醇5.3 03 23-己烯酸己烯3.2 3苄基氰1.3 63 3壬醇1.9 3茉莉酮1.3 63 4-萜品醇0.7 5苯乙基丁酸1.3 53 5柠檬醛2.4 7乙酰吡咯0.5 33 6-法呢烯0.6 4雪松醇1.1 83 7橙花醇0.4 43-己烯基苯甲酸酯0.8 73 82,4-庚二烯醛1.1 3法呢醇1.6 33 9香叶醇36 3博伏内酯2.4 14 0苯乙醇0.6 4壬酸0.9 74 13,7,1 1-三甲基-1,6,1 0-十二烷烯-3-醇0.8 3橙花叔醇7.8 04 2苯乙醛0.7 2茉莉酮酸甲酯2.2 04 3苄基氰0.4 6茶螺烯酮2.3 04 4苯乙基丁酸0.9 2茉莉内酯2.0 24 5乙酰吡咯2.1 5癸酸0.8 94 6 5,6-环氧-紫罗酮2.4 7二氢海葵内酯2.2 04 7苯酚5.6 7吲哚0.6 54 8橙花叔醇9.6 0蒎烯0.4 24 9雪松醇0.4 74-甲基十五酸甲酯0.7 55 03-己烯基苯甲酸酯0.8 4十六酸甲酯3.4 45 1博伏内酯0.6 8亚油酸甲酯1.3 15 2异长叶烯1.1 8-亚麻酸甲酯0.7 15 3壬酸3.9 0植醇2.2 05 4茶螺烯酮3.0 59,1 2-十八碳二烯酸4.5 05 54-乙烯基愈疮木酚0.4 49-十八碳烯酸0.8 95 6茉莉内酯1.7 65 7癸酸4.0 65 8二氢海葵内酯0.5 95 9乙烯基苯酚0.3 06 0吲哚0.6 36 1植醇0.7 56 2 9,1 2-十八碳二烯酸3.1 06 3角鲨烯0.9 9(续表1)2006,Vol.27,No.10食品科学分析检验444着不同程度的缩合、基团转移等反应，A S E比 S D E法更为温和。3讨 论茶叶中香气组分比较复杂，选用不同的提取方法所检出的香气组分也不尽相同；因此，一般认为分析茶叶中所有的香气组分最能确切地了解茶叶本身的香气特征 1 4。目前对茶叶香气组分提取多采用 S D E法，但采用 S D E法提取需要高温、高湿的密闭条件，茶叶中香气组分在此密闭条件下提取，易发生散失、降解等反应，如一些不饱和脂肪酸氧化降解生成脂肪族醇、醛类物质，糖苷类化合物水解释放单体等 1 5。A S E 是利用升高温度和压力，增加物质溶解度和溶质扩散效率，提高提取的效率。温度的增高能够打断溶剂与基质之间的作用力，使被溶物能快速从基质中解析出来；并能降低溶剂的粘度，使之能更快速地被萃取 1 6；而升高压力能够使溶液的沸点增高，在较高的温度之下使溶剂保持液态，压力可以使溶剂进入基质微孔，与基质更全面地接触 1 7。目前 A S E 已在食品、农业、环境、药物、化工等方面得到了广泛的应用 8 1 0。本研究利用 A S E法提取凤凰单枞乌龙茶的内含香气组分，检测出 6 3种香气成分，并对照前期实验进一步支持了高含量的芳樟醇、橙花叔醇、香叶醇、茶螺烯酮和9,1 2-十八碳二烯酸构成了凤凰单枞乌龙茶香气主体的观点；而不同乌龙茶的香气特点可能是由于这些呈香组分不同的比例所决定 1 8。A S E 法可对乌龙茶内含香气组分进行无损富集和快速检测，避免茶叶内含不稳定的香气组分被破坏，减少茶叶香气组分检测的误差和不稳定性。结合加速溶剂萃取法(A S E)和固相微萃取法(S P M E)分别对乌龙茶的内含香气组分和感官香气进行快速检测，可为乌龙茶品质的量化和质量监控提供重要依据。参考文献：1 朱旗,施兆鹏,任春梅.绿茶香气不同提取方法的研究 J .茶叶科学,2 0 0 1,(1):3 8-4 3.2 苏新国,蒋跃明,段俊,等.固相微萃取法分析凤凰单枞乌龙茶香气组分 J .食品科学,2 0 0 5,2 6(1 1):2 1 3-2 1 6.3 M o s a n d l A.C a p i l l a r y g a s c h r o m a t o g r a p h y i n q u a l i t y a s s e s s m e n t o ff l a v o u r s a n d f r a g r a n c e s J .J o u r n a l o f C h r o m a t o g r a p h y A,1 9 9 2,6 2 4:2 6 7-2 9 2.4 M i t s u y a S,H i r o k o S,H i d e k i S.C o m p a r i s o n o f t h e o d o u r c o n c e n t r a t e sb y S D E a n d a d s o r p t i v e c o l u m n m e t h o d f r o m g r e e n t e a i n f u s i o n J .J o u r n a l o f A g r i c u l t u r a l a n d F o o d C h e m i s t r y,1 9 9 5 a,4 3:1 6 1 6-1 6 2 0.5 M i l l e r K G,P o d e C F,P a w l o w s k i T M P.C l a s s i f i c a t i o n o f t h e b o t a n i c a lo r i g i n o f c i n n a m o n b y S o l i d-p h a s e M i c r o e x t r a c t i o n a n d g a sc h r o m a t o g r a p h y J .J o u r n a l o f C h r o m a t o g r a p h y A,1 9 9 6,4 2:6 3 9-6 4 6.6 J e n s e n D,H o f l e r F.R a p i d p r e p a r a t i o n o f e n v i r o n m e n t a l s a m p l e s b y A S E J .P o l y c y c l i c A r o m a t i c C o m p o u n d s,1 9 9 6,(9):2 3 3-2 4 0.7 H u b e r t A,W e n z e l K D.H i g h e x t r a c t i o n e f f i c i e n c y f o r P O P s i n r e a lc o n t a m i n a t e d s o i l s a m p l e s u s i n g a c c e l e r a t e d s o l v e n t e x t r a c t i o n J .A n a-l y t i c a l C h e m i s t r y,2 0 0 0,7 2:1 2 9 4-1 3 0 0.8 M a r i o n W,W a l t e r V,B e r n a n d L.M i c r o w a v e-a s s i s t e d e x t r a c t i o n a n dA S E w i t h e t h y l a c e t a t e-c y c l o h e x a n e b e f o r e d e t e r m i n a t i o n o f o r g a n-c h l o-r i n e i n f i s h t i s s u e b y g a s c h r o m a t o g r a p h y w i t h e l e c t r o n c a p t u r e d e t e c t o r J .E n v i r o n m e n t a l A n a l y s i s,2 0 0 0,8 3(6):1 3 3 4-1 3 4 3.9 J o h n E.A S E o f p e s t i c i d e r e s i d u e i n f o o d p r o d u c t s J .G I T l a b o r a t o r yJ o u r n a l,2 0 0 0,4(1):1 7-1 9.1 0 B j o r k l u n d E,M u l l e r A,H o i s e C V.C o m p a r i s o n o f f a t r e t a i n e r s i na c c e l e r a t e d s o l v e n t e x t r a c t i o n f o r t h e s e l e c t i v e e x t r a c t i o n o f P C B f r o m f a tc o n t a i n i n g s a m p l e s J .A n a l y t i c a l C h e m i s t r y,2 0 0 1,7 3(1 6):4 0 5 0-4 0 5 3.1 1 P a l m a M,P i e i r o Z,B a r r o s o C.I n l i n e p r e s s u r i z e d f l u i d e x t r a c t i o ns o l i d p h a s e e x t r a c t i o n f o r d e t e r m i n i n g p h e n o l i c c o m p o u n d s i n g r a p e s J .J o u r n a l o f C h r o m a t o g r a p h y A,2 0 0 2,9 6:8 1.1 2 刘乾刚,林智,蔡建明.乌龙茶制造与品质形成的化学机理 J .福建农林大学学报,2 0 0 2,3 1(3):3 4 7-3 5 1.1 3 冯建跃,赵箐,黄巧巧,等.吸附丝质谱法用于桂花香气研究 J .浙江大学学报,2 0 0 1,2 8(6):6 4 2-6 4 5.1 4 H a b u T,F l a t h R A,M o n T R.V o l a t i l e c o m p o n e n t s o f R o o i b o s t e a(A s p a c a t h u s l i n e a r i s)J .J o u r n a l o f A g r i c u l t u r a l a n d F o o d C h e m i s t r y,1 9 8 5,3 3(2):2 4 9-2 5 4.1 5 M i t s u y a S,H i r o k o S,H i d e k i S.C o m p o u d s a m o n g d i f f e r e n t g r a d e o fg r e e n t e a a n d t h e i r r e l a t i o n t o o d o u r a t t r i b u t e s J .J o u r n a l o f A g r i c u l t u r a la n d F o o d C h e m i s t r y,1 9 9 5 b,4 3:1 6 2 1-1 6 2 5.1 6 M c K i e r n a n J W,C r e e d J T.A c o m p a r i s o n o f a u t o m a t e d a n d t r a d i t i o n a lm e t h o d s f o r t h e e x t r a c t i o n o f a r s e n i c a l s f r o m f i s h J J o u r n a l o f A n a l y t i c a lA t o m i c S p e c t r o m e t r y,1 9 9 9,1 4:6 0 7-6 1 3.1 7 C a m p b e l l S,L i Q X.N a+E D T A a s s i s t e d i n s i t u t e s d e r i v i t i z a t i o n p r e s s u r-i z e d f l u i d e x t r a c t i o n o f p o l a r h e r b i c i d e s i n s o i l J .A n a l y t i c a C h i m i c aA c t a,2 0 0 1,(9):2 8 3-2 8 9.1 8 戴素贤,谢赤军,陈栋,等.七种高香型乌龙茶香气成分的主成分分析 J .华南农业大学学报,1 9 9 9,2 0(1):1 1 3-1 1 7.中 国 科 学 引 文 数 据 库 核 心 库 收 录 期 刊