大便潜血假阴性.doc

粪便潜血试验是筛查消化道肿瘤的有效手段,过去一直使用化学法检测粪便潜血,其中邻甲苯胺法为1983年中华医学会全国临床检验方法学术讨论会推荐的方法,经多年来临床检验应用,认为易出现假阳性结果。近年来沿用胶体金法,但粪便中血红蛋白含量较高时会出现假阴性结果.
目的:比较单克隆胶体金法与化学法测定粪便和胃引流物隐血。方法:将38例临床确诊为上消化道出血患者的"柏油"样粪便和16份经镜检证实含红细胞的胃引流物标本分别用胶体金试纸、邻联甲苯胺和四甲基联苯胺尿隐血试纸测试其是否含有隐血。结果:测试38例"柏油"样粪便标本,胶体金试纸阳性率为60。5%,邻联甲苯胺和尿隐血试纸均为100%;测试16份含红细胞的胃引流物标本,胶体金试纸阳性率为68。8%,邻联甲苯胺为100%,尿隐血试为81。3%。结论:高浓度血红蛋白以及血红蛋白被酸、碱化的标本和痰液等含大分子蛋白标本使胶体金法测定隐血的灵敏度下降,不适宜的pH可使该法特异性降低,而化学法所受影响较小。

化学法与免疫胶体金法检测粪潜血的比较

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【关键词】 ,大便潜血；邻联甲苯胺法；免疫胶体金

　　［摘　要］ 目的：探讨粪潜血二种检测方法的优劣和应用。方法：用邻联甲苯胺和便隐血胶体金检测试纸分别检测200例粪标本进行对照实验并分析。结果：二者一致性符合率为90％。结论：化学法灵敏度、特异性较胶体金法低，受饮食影响因素大，胶体金法有假阴性，故建议二者结合判断。

　　［关键词］ 大便潜血；邻联甲苯胺法；免疫胶体金

　　the comparison between the chemical method and immunogold method in detecting sedoccult blood

　　wu zi an，hu jun，huang li ying，et al

　　(1.fangcun branch of guangdong province tcm，guangzhou, guangdong 510370,china;2.hospital of traditional chinese medicine，guangzhou，guangdong 510210，china)

　　abstract：objective to explore the comparability between the chemical method and immunogold method in detecting sed occult blood．methods to detect the sed occult blood of 200 specimens with both ortho tolidine method and immunogold method．then analyse the results．results the coincidence of the detecting results between the two methods is 90％．conclusion food and drink impact the results of chemical method very much．so chemical method is lesssensitive and specific than immunogold method．but immunogold method also has false positivereaction，therefore we suggest detecting sed occult blood with the both two methods.

　　key words：sed occult blood；ortho tolidine method；mmunogold method

　　粪便潜血试验(fecal occult biood test)是诊断和监测消化道出血性疾病的有效常规检查，也是发现消化道肿瘤的重要手段之一。目前最常用的方法有化学法（包括邻联甲苯胺法、潜血粉法、愈创木脂法)和免疫学方法(胶体金标记夹心免疫法)。传统化学法成本低，但假阳性多、灵敏度低，对操作人员有致癌性；新兴的免疫胶体金法成本略高，但因其特异性好而越来越广泛使用，本文仅以邻联甲苯胺法与免疫胶体金法相比较，探讨二者在临床使用上的价值。

　　1　材料与方法

　　1．1　试剂　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　便隐血胶体金检测试纸，北京万华普曼生物工程有限公司提供，批号20050724；3％h2o2自配，邻联甲苯胺由上海远航试剂厂生产，冰乙酸及无水乙醇由广州东红化工厂生 产，均为ar级。称取邻联甲苯胺1 g溶于冰乙酸及无水乙醇各50 ml中，棕色瓶保存(4 ℃保存8周~12周)。

　　1．2　标本　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　本院200份无重复住院患者新鲜大便，均为成年人，女89例，非月经期，男111例(均排除痔肛裂出血)。

　　1．3　方法　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　每份标本均做邻联甲苯胺法和便隐血胶体金试纸检测、邻联甲苯胺法按全国操作规程，便隐血胶体金试纸法按说明书操作。

　　2　结果

　　见表1。表1　两种方法粪潜血结果邻联甲苯胺法（略）

　　2．1　4例邻联甲苯胺法(阳性)胶体金法(阴性)中1例肺癌，大便墨绿色、性软；1例异位妊娠、2例copd，大便外观均为黄软。

　　2．2　16例邻联甲苯胺法(阴性)胶体金法(阳性)中1例黄色黏液便，cad患者；3例大便黄、烂，分别是cad、npc、copd患者，余12例外观均黄、软，其中呕吐查因1例、消化道出血4例、肺癌2例、肺部感染、copd、肝硬化、腹部肿物各1例，且16例胶体金法皆为弱阳性。

　　3　讨论

　　邻联甲苯胺法利用血红蛋白中的亚铁血红素具过氧化物酶活性，催化过氧化氢放出新生态氧，把受体邻联甲苯胺氧化成联甲偶氮苯而显蓝绿色。任何有类似氧化物酶活性的物质都可影响此实验，如动物的血红蛋白，另外维生素c、铁剂、绿色蔬菜均会造成假阴性［1］。邻联甲苯胺法灵敏性低于胶体金法［1］，故极少量的出血会造成邻联甲苯胺法(阴性)胶体金法(阳性)的结果。此时粪便外观通常无明显异常，如本文结果(2)外观均为黄色。但如果血红蛋白在消化道停留时间过长，或受细菌分解等因素而降解，其与胶体金试纸上包被的抗体的相应抗原受到破坏时就会出现假阴性，若此时出血量在邻联甲苯胺法检测限上就会出现邻联甲苯胺法阳性而胶体金法阴性的结果，邻联甲苯胺法假阳性也会导致此模式。另外当出血量大于胶体金法检测范围，随着血红蛋白含量增加，抗原抗体复合物反而减少，产生后带现象，免疫胶体金法出现假阴性，上述两种情况大便外观通常会有明显改变，只需将粪便溶液调配成一定浓度后检测，免疫胶体金法可获阳性结果。由于免疫胶体金法只特异地针对人血红蛋白抗原表位，基本排除饮食和药物干扰，灵敏度与特异性均优于传统化学法，迄今尚未有假阳性的案例报道［2］，故被who和世界胃肠镜检查协会推荐做粪便隐血试验的一种较为确认的方法［3］，且对操作者无损害，但其成本较化学法高。鉴于两种方法各有优缺点，笔者认为如果有条件的实验室应同时开展两种方法：二者皆为阳性判断为真阳性；化学法阳性而免疫胶体金法阴性者，若外观无改变者建议禁肉食、大量绿色蔬菜、某些已知有影响的药物2 d～3 d后复查，若外观有所改变者稀释重测免疫胶体金法；若化学法阴性而免疫胶体金法阳性者建议连续复查2次及做进一步检查。

　　参考文献：

　　［1］王建洲，陆希明．三种便潜血试验测定方法的比较［j］．哈尔滨医药,2005,25(2)：13 14．

　　［2］陈高远，周文良，王惟，等．单克隆抗体金标法与“ab液法”检测粪便隐血的比较［j］．贵州医药,2005,29(5)：466．

　　［3］young gp,st john dj,winawer sj,et al．choise of fecal occult blood tests for colorectal cancer csreening：recommendations based on performance characteristics in population studies：a who world health organization)and omed(world organization for digestive endoscopy)report［j］．am j gastroenterol,2002,97(10)：2499 2507．

　　1.广东省中医院芳村分院，广东 广州 510370；

　　2.广东省中医院，广东 广州 510120

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单克隆胶体金法与化学法测定隐血比较

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作者单位：广州医学院荔湾医院，广东 广州 510170

【摘要】 目的：比较单克隆胶体金法与化学法测定粪便和胃引流物隐血。方法：将38例临床确诊为上消化道出血患者的“柏油”样粪便和16份经镜检证实含红细胞的胃引流物标本分别用胶体金试纸、邻联甲苯胺和四甲基联苯胺尿隐血试纸测试其是否含有隐血。结果：测试38例“柏油”样粪便标本，胶体金试纸阳性率为60.5％，邻联甲苯胺和尿隐血试纸均为100％；测试16份含红细胞的胃引流物标本，胶体金试纸阳性率为68.8％，邻联甲苯胺为100％，尿隐血试为81.3％。结论：高浓度血红蛋白以及血红蛋白被酸、碱化的标本和痰液等含大分子蛋白标本使胶体金法测定隐血的灵敏度下降，不适宜的ph可使该法特异性降低，而化学法所受影响较小。

【关键词】 单克隆 胶体金 隐血试验

　　comparison of monoclonal colloidal gold method and chemical method in detecting occult blood
liu meiling,huo jian

　　(the affiliated liwan hospital of guangzhou medical college,guangzhou,guangdong 510170,china)

　　abstract：objective to compare the method determining the occult blood from stool and stomach strains by monoclonal colloidal gold method and chemical method. methods tarry stools from 38 cases definited upper gastrointestinal bleeding and 16 stomach strains confirmed including red blood cells by test under microscope respectively tested by colloidal gold indicator paper, orthotolidine method and tetramethyl benzidine indicator paper. results in 38 cases of tarry stools,the positive percentage is 60.5 by colloidal gold indicator paper,and the positive percentage is100 byorthotolidine method and tetramethyl benzidine indicator paper.in 16 cases of stomach strains the positive percentage is respectively 68.8,100 and 81.3 by above three methods. conclusion results show that thesensibility can be depressed by the method of colloidal gold method when the haematoglobin concentration is too high and haematoglobin is acidated or alkalified.not suitable ph degree can depressed the specifity by the colloidal gold method ,but chemical method is seldomly effected.

　　key words：monoclonal;colloidal gold;occult blood test

我院自2006年开始应用单克隆胶体金胶体金试纸测定隐血［1］，并取得了较满意的结果，同时发现在某些特殊标本胶体金法检测结果常与临床不符。为此，对胶体金法与邻联甲苯胺法及尿隐血纸进行比较，报告如下。

　　1 材料与方法

　　1.1 对象

　　38例临床确诊为上消化道出血患者的“柏油”样粪便；16份经镜检证实含红细胞的胃引流物标本。

　　1.2 方法

　　1.2.1 胶体金法

　　万华曼公司“速而准”隐血试纸条、邻联甲苯胺液及10a尿隐血试纸（四甲基联苯胺法），均文献操作［2］。

　　1.2.2 灵敏度测试

　　用蒸馏水将自制血红蛋白（hb）倍比稀释后以胶体金试纸条、邻联甲苯胺法及隐血试纸测试。

　　1.2.3 38例“柏油”样粪便中血红蛋白的检测分别用三种方法检测，胶体金法结果阴性的标本作1∶50、1∶100、1∶200、1∶400、1∶600稀释后以胶体金法再测。同时每份标本各取50 mg，溶于20 ml铁氰化血红蛋转化液中。离心取上清液于540 nm比色并做空白对照，查标准曲线得血红蛋白浓度。

　　1.2.4 胃引流物标本的检测

　　16份胃引流物标本分别以三种方法测定（取约0.2 ml标本加入1 ml蒸馏水中混匀）。

　　1.2.5 ph值对实验的影响

　　以5%醋酸、0.1 mol/氢氧化钠配制ph 0～14系列空白以及加入适量hb（100 mg/l）的溶液分别为三种方法测试。

　　1.2.6 经酸、碱化后的hb的测试

　　取适量hb（100 mg/l）经酸化（ph 12）20 min后，再调节ph至中性以三种方法纸测定。

　　2 结果

　　2.1 各法检测适宜hb浓度范围

　　胶体试纸在1.5 mg/l～700 mg/l之间，当hb≥700 mg/l时结果呈假阴性。隐血试纸≥8 mg/l。邻联甲苯法≥0.5 mg/l。

　　2.2 38例“柏油”样粪便、16份胃引流物标本用三种方法测试结果

　　见表1。其中胶体金法为阴性的15例“柏油”样便标本经1∶50～1∶600稀释后，检出阳性4例，胶体金法总阳性率为71.1%。同时以高铁氰化法检测hb浓度在10%～35%（g/l）之间，平均为25%。表1 不同方法检测结果（略）

　　2.3 胶体金试纸测定隐血适宜ph

　　范围约在3～10之间。ph≤3时呈假阳性，ph≥10呈假阴性甚至实验失败（对照区无呈色反应）。邻联甲苯胺法、隐血纸未受影响。

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