交联透明质酸衍生物的制备与应用进展.pdf

CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS 2006 年第 25 卷第 12 期 1410 化 工 进 展 交联透明质酸衍生物的制备与应用进展 杨 好熊文说应国清易 喻王 鸿 浙江工业大学药学院浙江 杭州 310014 摘 要透明质酸具有良好的生物相容性生物降解性但由于其力学性能较低须经交联修饰提高力学性能才能制成生物材料被广泛应用本文综述了近年来国内外有关使用交联剂制备透明质酸衍生物的研究介绍了常用交联剂和新型交联剂的应用情况和发展前景为研制开发新型透明质酸提供选择 关键词透明质酸衍生物交联剂 中图分类号TQ 464.1 文献标识码A 文章编号10006613200612141005 Development of preparation and application of cross-linked hyaluronan YANG HaoXIONG WenshuoYING GuoqingYI YuWANG Hong School of PharmacyZhejiang University of TechnolrgyHangzhou 310014ZhejiangChina AbstractHyaluronan(HA)has wonderful biocompatibility and biodegradabilitybut needs cross-linking modification to improve its mechanical properties for its use as a biomaterial.This review concentrates on the recent advances of cross-linking reagent for producing HA derivativesand introduces the application and development of common cross-linking reagent and new type cross-linking reagentso as to provide more advice for the development of HA reagent.Key wordshyaluronanderivativecross-linking reagent 透明质酸hyaluronanHA是一种从动物组织提取的天然阳离子多聚糖是由 D-葡萄糖醛酸和 N-乙酰氨基葡萄糖交替排列构成的长链高分子 具有良好的亲水性黏弹性润滑性1但在临床医学中发现天然HA易于被生物降解 硬度和力学强度不够大这限制了 HA 的应用2将天然 HA 进行交联可得更大交联网状结构的衍生物其化学和力学性能比 HA更稳定且具有生物相容性和生物降解性 获得新型医用生物材料如防术后粘连材料软组织填充材料新型药物缓释基质等3-7所以交联HA 衍生物的应用开发和生产是目前国内外生化药界比较热门的课题 HA 被修饰的常用部位有羧基羟基N-乙酰氨基和还原末端目前临床使用的 HA 衍生物多为对其羧酸和羟基修饰而成图 1近年来交联HA 制品在临床应用上取得了较大发展新型交联剂的使用更拓宽了其应用范围 1 用常见交联剂制备交联 HA 衍生物 1.1 修饰羧基的交联剂 以多功能团的环氧化合物(epoxide)作交联剂 OOHOOCOHOOOHNHCH3On化学修饰部位HO n 化学修饰部位 HOOC OH HONH CH3 OO O O O OH 图1 HA的化学结构及其主要化学修饰部位 可得到水溶性交联HA 调节多环氧化合物与HA的比例也能得到不溶于水的产物此类交联HA凝胶含水度高(95%)可作为植入性药物传递炎性(刺激物)-应答可降解基质 常被推荐作为玻璃体替代物或用于视网膜剥离手术聚乙二醇聚酯类双环氧交联剂在2555 与HA交联可得到力学强度好溶胀收稿日期 20060429修改稿日期 20060612 基金项目 浙江省科技厅重点科研项目No.2006C23005 第 一 作 者 简 介 杨 好女硕 士 研 究 生E mail 联系人 应国清教授研究方向为生物制药生化分离酶工程等电话 [phone]Email 万方数据第 12 期 杨好等交联透明质酸衍生物的制备与应用进展 1411 率可调的生物降解薄膜材料或多孔支架材料且材料具有优异的亲水性及细胞亲合性降解产物对细胞无毒性此方法为环保材料和组织工程支架材料的研制提供一种新的思路8交联HA与环氧化合物反应生成的海绵体也具有良好的力学强度和锁水性能若在此海绵体中注入胶原质制得组织再生材料可应用于外科器官移植手术促进纤维原细胞再生9由HA和碱性1,4-丁二醇二环氧醚制备的水凝胶具有多孔渗水的性质可被高碘酸盐激活再由包含细胞黏附区域Arg-Gly-Asp(RGD)的18-氨基酸缩氨酸修饰可提高HA水凝胶与细胞的黏附性 碳二亚胺(biscarbodimideEDC)在酸性pH4.75溶液中与HA的羧基反应先生成N-酰基脲化合物再与不同的碳二亚胺进一步加合形成稳定的交联衍生物能抵制透明质酸酶的降解10 11当HA与EDC在异丙醇或赖氨酸甲酯介质中能形成可生物吸收的海绵物可进一步延长在体内降解时间通常交联衍生物水溶性降低在组织停留时间延长还可黏附于组织上无需缝线甚至在血液存在时也能保持效果在500次模拟关节弯曲伸展循环运动测试中EDC-HA-白明胶修饰的肌腱没有损伤与未修饰肌腱相比具有更好的润滑性能可有效减少关节摩擦12HA与水溶性EDC10甘油和5紫杉醇交联可得柔软且具粘连性生物相容性的缓释膜可预防外科手术术后粘连13由HACM-纤维素和EDC反应制得的衍生物可以制成膜或是凝胶可以极其方便地使用在肿瘤生长点与其他化疗法联合治疗肿瘤或是应用于治疗慢性疾病如风湿性关节炎视网膜增生还可治疗子宫内膜异位动脉硬化内膜增生另还发现分离膜可抑制血管增殖14 用酰肼(hydrazide)作为交联剂 通过调节反应条件和试剂的比例可得更具机械硬度和脆性的凝胶具有抗酶解性和较好的生物相容性是一种具有开发潜力的可降解性植入材料己二酸二酰肼(ADH)可在pH值4.04.75的酸性缓冲液中与HA的羧基反应生成ADHHA中间产物产物的修饰率为0.15015其保留的一个酰肼基既可在pH值8.08.5的碱性缓冲液中与HA分子中的羧基继续反应发生分子内或分子间交联 也可以与药物反应将药物系挂到HA 分子上生成HA-药物网状大分子1617两个HA-ADH链分子可由特定连接剂连接起来形成冻干后表面形态不同的疏水凝胶利用原位聚合技术HA-ADH与大分子交联剂聚乙二醇-二醛(PEG-dialdehyde)在生理条件下的交联18溶剂蒸发后获得力学强度一定的HA水凝胶膜此类新型材料具有药物缓释作用可以促进伤口愈合 1.2 修饰羟基的交联剂 二乙烯基砜(divinyl sulfoneDVS)在室温下可与 HA 的羟基快速反应得到性质变化很大的 HA凝胶图 3产物在水中的膨胀率取决于凝胶交联度交联度可由 HA 相对分子质量HA 浓度反应介质 pH 值 HA/DVS 比率来控制 HA 初始浓度可为 0.2550与 DVS 反应成凝胶后用pH4 的水溶液清洗所得产物具有高度黏弹性可作注射剂器官移植配件及药物缓释系统19 未经修饰的 HA 凝胶表面光滑其带阴离子特性不适合联合用药 而 DVS 交联 HA 制备的水凝胶具有微孔结构在水和水溶液中平衡吸附容量明显高于普通 HA 可应用于预防术后粘连20DVS-HA作麻醉药物缓释基质也可延长麻醉药物持久作用时间21 Genzyme 公司将 HA 与 DVS 部分交联形成稳定中间体 在反应过程中要防止乙烯基与 HA 反应 得到的新型材料能保持HA 原有生物活性 可作药物载体和介质特别是将 0.5 g HA 与 5.0g DVS 交联经 120 高温灭菌 12 min 后相对分子质量减少低温下向此衍生物添加-干扰素混合 18 h 后用碱液透析 研究发现产物具有抵抗人胰腺致癌细胞的细胞毒性故此类凝胶应用于抗癌治疗中的药物制剂22 2 用新型交联剂制备交联 HA 衍生物 2.1 京尼平 随着研究手段不断进步近年来发现京尼平Genipin是一种较为突出的新型交联剂它由纯天然生物杜仲的活性成分京尼平甙水解而得也可人工合成23它是一种杂环化合物具有OHCOO 等多个活性官能基团(图 2)OCOOHOHHHCH2HO COOH H O OH H HO CH2 图 2 京尼平的化学结构 与常见交联剂相比 京尼平克服了常见交联剂在处理生物组织方面的缺点 不具细胞毒性 而且由其交联的生物组织在移植后不易钙化24 25京尼平最万方数据化 工 进 展 2006 年第 25 卷 1412 大优点就是低毒性经 MTT3-(4,5二甲基噻唑)2,5二苯基四唑溴化物试验测定京尼平的细胞毒性比戊二醛小 10 000 倍26经细胞集落形成试验测定 暴露于京尼平的细胞繁殖能力为暴露于其他交联剂的 5 000 倍而且京尼平的交联制品变性温度提高27 28稳定性增大29生物相容性优越30 31 研究发现26,29京尼平可自发地与氨基发生反应生成一个环烯醚萜氮化物随后经过脱水作用形成一个芳香族单体 该单体由于其自由基反应而形成环状的分子间和分子内交联结构 所以将脱乙酰化HA 与其作用可得环状交联 HA但发生反应时会生成一种多聚体深蓝色色素 对交联制品产生一定的影响所以在使用过程中要注意其用量的比例关系还有国际市场上日本和中国台湾的商品化京尼平价格较高如台湾 Challenge Bioproducts 公司售价约4 000 元/5g而目前中国大陆还没有公司生产京尼平产品这使其广泛应用和研究受到限制 2.2 活化的聚乙二醇 聚乙二醇(PEG)对HA来说是一种待研发的新交联剂与常见交联剂相比PEG 无抗原性毒性小具有水溶性和良好的两亲性不影响酶活易从体外排出还可以通过调控其相对分子质量及不同活化度的 PEG 形式使产物形成很大的溶解度范围可应用于临床医学32 为使 HA 能在较温和条件下以较高速率与 PEG 偶联一般用活化的 PEG 与 HA 乙酰化处理的氨基发生反应 PEG 有 4 种不同的活化形式33聚乙二醇 1,2环氧丙基醚聚乙二醇甲酸对硝基苯酚酯(PEG)聚乙二醇琥珀酸琥珀酰亚胺酯和聚乙二醇甲酸甘氨酸琥珀酰亚氨酯PEG 经活化后在其一端或多个末端形成一个或多个羧基 此羧基与经乙酰化 HA 的氨基反应 形成一个二元共轭物 HA 与 PEG 间的交联分酯键图 3和醚键连接图 4前者在体内会被逐渐水解 而后者相对更稳定 在传输药物时选酯键连接型可在体内酯键逐渐水解药物得以缓释在外科手术如用于填充软组织时选醚键连接型替代颚骨皮下脂肪除皱塑形 2HAHAHNOPEGOPEGOHNOHANOOOOOPEGOOONOO N N 图 3 活化 PEG 与 HA 醚键连接 NOOOOOPEGO2HAOOONOOoOOPEGOOOOHNHAHNHAN 图 4 活化 PEG 与 HA 酯键连接 将 HA 先转成脂肪族衍生物 再于 PEG 反应得到网状聚合物成胶反应后倒入溶剂可得 HA 水凝胶膜经干燥此膜可以在缓冲液中以 7 倍体积膨胀 且平衡时间少于 100 s 电镜检测发现此膜与水结合后具有多孔渗水微结构故此类材料具有良好的生物相容性和高黏弹性 因此可视需要被制成线膜和凝胶用于手术防粘连材料皮肤移植手术整形手术药物缓释剂等34 目前国内外以 PEG 为交联剂的研究多趋向于PEG 和酶蛋白或氨基酸之间的相互作用而对于天然多糖的交联反应国内外研究均处于初期故可借鉴已有 PEG 和酶蛋白偶联机制 试验 PEG 与 HA交联机制和最佳交联条件及研究产物理化特性 3 HA 衍生物的应用 因为天然 HA 力学性能低在体内存留时间较短限制了其疗效的发挥但通过化学修饰可以提高其化学和力学性能 近年来在预防粘连和软组织填充等方面要求HA 在体内应具有适宜的存留时间发现交联产物具有调节炎症血管生成和促进愈合功能还可作为选择性和保护性的细胞膜包被 研究还表明 HA衍生物明显优于传统的药物载体由于其特有的黏弹性当它有效包埋药物以后能防止药效受体内各因素的破坏实现长时间以相同浓度释放并控制血药浓度延长体内半衰期另外HA 衍生物具有良好的生物相容性低致敏性还可以与其他药物配伍治疗疾病35故常常替代传统 HA 应用于 眼科手术和关节疾病的黏弹性补充疗法预防术后粘连软组织工程及美容体系给药体系等目前处于临床实验和已批准上市的交联 HA 制剂见表 1 4 展 望 近年来 HA 交联衍生物的制备和应用备受关注稳定性佳生物相容性好体内存留时间长的HA 衍生物制剂在临床医学上正逐渐替代天然 HA今后将重点对制备 HA 衍生物的交联基团以及交联 万方数据第 12 期 杨好等交联透明质酸衍生物的制备与应用进展 1413 表 1 正在临床实验和已批准上市的交联 HA 制剂 公 司 制剂名称 剂 型 适用范围 注册情况 Genzyme Seprafilm,Sepra coat36 HA-CMC可吸收膜 预防术后粘连 在欧洲美国获准上市 Synvisc16 HA凝胶注射剂 骨关节炎眼科手术 临床研究 Hylafoem37 HA凝胶填充剂 软组织缺损 待批准上市 Biomatrix Restylane38 部分交联HA凝胶注射剂 整形外科皮内植入和整容注射 欧洲上市 Hylashield38 交联HA液 干眼症 临床研究 Life Core Biomedical Lubricoat38 铁离子交联HA凝胶 预防卵巢输卵管粘连 临床研究 Incert39 交联HA可吸收膜 术后粘连 待批准上市 Anika Research Orthovisc38 HA凝胶注射剂 眼科手术 待批准上市 Fidia ACP40 粉末或水凝胶 腹部与妇产外科创伤修复组织缺损修复细胞生长支架 欧洲上市 剂种类交联机制进行研究随着新型天然交联剂的不断开发研究HA 衍生物种类会更加丰富其性能会更加完善新型交联 HA 产品会上市进一步开拓 HA 的新用途 参 考 文 献 1 Allan S.Hoffman Hydrogels for biomedical applications J.Advanced Drug Delivery Reviews200243312.2 Xuejun XNetti P A.Preparation and characterization of a hydrogel from lowmolecular weight hyaluronic acid JJournal of Bioactive and Compatible Polymers200419514.3 Yoo Hyuk SangLee Eun AhYoon Jun Jinet al.Hyaluronic acid modified biodegradable scaffolds for cartilage tissue engineering JBiomaterials20052619251933.4 Kristyn S MastersDarshita N ShahLeslie A Leinwandet al.Crosslinked hyaluronan scaffolds as a biologically active carrier for valvular interstitial cellsJ Biomaterials 2005 26(15)25172525.5 Wang YingjunYang Chunrong Chen Xiaofeng et al.Development and characterization of novel biomimetic composite scaffolds based on bioglasscollagenhyaluronic acidphosphatidylserine for tissue engineering J.Applications Macromolecular Materials and Engineering2006291(3)254262.6 Shih Hsin Nung Fang Jen Feng Chen Jui Hsiang et al.Reduction in experimental peridural adhesion with the use of a crosslinked hyaluronate/collagen membraneJJournal of Biomedical Materials Research Part BApplied Biomaterials200471B(2)421428.7 Sei K HahnSandra JelacicRonald V Maieret al.Hoffman Antiinflammatory drug delivery from hyaluronic acid hydrogelsJ.Journal of Biomaterials SciencePolymer Edition200415(9)11111119.8 周长忍李立华.环氧基交联剂及其制备方法和在制备生物降解材料中的应用中国 1417253AP.2003514.9 KuroyanagiYoshimitsu.Substrate for tissue regeneration containing hyaluronate and other polymer spongesmaterial for transplantationand processes for producing theseWO2002045767 A1P2002.10 Bystricky SAlfoldi JMachova Eet al.Nonbiodegradable hyaluronan derivative prepared by reaction with a watersoluble carbodiimideJ.Chemical Papers200155(1)4952.11 Young Jenn Jong Cheng Kuang Ming Tsou Tai Li et al.Preparation of crosslinked hyaluronic acid film using 2 chloro 1 methylpyridinium iodide or watersoluble 1ethyl(33 dimethylaminopropyl)carbodiimideJJournal of Biomaterials SciencePolymer Edition200415(6)767780.12 Sun Yu LongYang ChaoAmadio Peter Cet al.Reducing friction by chemically modifying the surface of extrasynovial tendon graftsJ.Journal of Orthopaedic Research200422(5)984989.13 Jackson John KSkinner Kevin CBurgess Lauretteet al.Paclitaxelloaded crosslinked hyaluronic acid films for the preventation of postsurgical adhesionsJ.Pharmaceutical Research200219(4)411417.14 Moulton Steven.Angiogenesis inhibition with pharmaceutical containing reaction products of hyaluronic acid CMcellulose and carbodiimideWO2000054762 A2P.2000921.15 Pouyani TPrestwich G D.Functionalized derivatives of hyaluronic acid oligosaccharides drug carriers and novel to chemically modify hyaluronic acidleading to Biomaterials J.Bioconj.Chem.19945339347.16 凌佩学张天民.HAM.北京中国轻工业出版社2000102110.17 Glenn D PrestwichDale M MarecakJames F Mareceket al.Controlled chemical modification of hyaluronic acidsynthesisapplicationsand biodegradation of hydrazide derivativesJ.Journal of Controlled Release19985393103.18 Luo YKirker KPrestwich G.Crosslinked hyaluronic acid hydrogenl filmsnew biomaterialsfor drug delivery J.Controlled Release2000696975.19 Leshchiner Adelya K Konowicz Paul A.Divinyl sulfonecrosslinked hyaluronan polymer cohesive gelsUS2005142152A1P.2005.20 Madaghiele MConversano FMele Get al.Cellulose derivativehyaluronic acidbased microporous hydrogels crosslinked through divinyl sulfone(DVS)to modulate equilibrium sorption capacity and network stabilityJ.Biomacromolecules20045(1)9296.21 Gianolio Diego A Philbrook Michael Avila Luis Z et al.Synthesis and evaluation of hydrolyzable hyaluronantethered bupivacaine delivery systems J.Bioconjugate Chemistry200516(6)15121518.万方数据化 工 进 展 2006 年第 25 卷 1414 22 Edward GLarsen Nancy E.Preparation of hydrophilic biopolymerdrug conjugates as therapeutic agentsUS2004087488A1P.2004.23 Mi F LSung H WShyu S S.Drug release from chitosanalginate complex beads reinforced by a naturally occurring crosslinking agentJ.Carbohydrate Polymers2002486172.24 Nickerson M TFarnworth RWagar Eet al.Some physical and microstructural properties of genipincrosslinked gelatinmaltodextrin hydrogels J.International Journal of Biological Macromolecules200638(1)4044.25 Koo Hye JinLim Kyung HwaJung Hyun Jooet al.Anti inflammatory evaluation of gardenia extractgeniposide and genipinJ.Journal of Ethnopharmacology 2006 103(3)496500.26 Sung H W Huang R N Huang L Let al.In vitro evaluation of cyto toxicity of a naturally occurring crosslinking reagent for biological tissue fixation J.Biomater.Sci.Polym.Ed.199910(1)6378.27 Sung H WChang YChiu C Tet al.Mechanical properties of a porcine aortic valve fixed with a naturally occurring crosslinking agentJ.Biomaterials19992017591772.28 Chang YTsai C CLiang H Cet al.In vivo evaluation of cellular bovine pericardia fixed with a naturally occurring crosslinking agent(genipin)J.Biomaterial20022324472457.29 Sung H W Liang I L Chen C N et al.Stability of a biological tissue fixed with a naturally occurring crosslinking agent(genipin)J.J.Biomed.Mater.Res.200155538546.30 Mi F LTan Y CLiang H Fet al.In vivo biocompatibility and degradability of a novel injectablechitosanbased implantJ.Biomaterials200223181191.31 Huang L L HSung H WTsai C Cet al.Biocompatibility study of a biological tissue fixed with a naturally occurring crosslinking reagentJ.J.Biomed.Mater.Res.199842568576.32 陈景华徐政顾其胜等.聚乙二醇交联的透明质酸衍生物的细胞毒性J.中国生物制品学杂志200518(4)324326.33 印春华张敏.蛋白质和多肽类药物的聚乙二醇结合物一种新型给药系统J.中国药学杂志200136(5)292296.34 Luo YKirker K RPrestwich G D.Crosslinked hyaluronic acid hydrogel filmsnew biomaterials for drug deliveryJ.Journal of Controlled Release200069(1)169184.35 Hirakura Tai Nakamura Teruo Shimoboji Tsuyoshi.Hyaluronic acid modification product and drug carrier therefromWO2005023906 A1P.2005.36 Burns J WBurgess LSkinner Ket al.A hyaluronate based gel for the prevention of postsurgical adhesionsEvaluation in two animal species J.Fertil.Steril199666814821.37 Hallen LJohansson CLaurent C.Crosslinked hyaluronan(hylan b gel)a new injectable remedy for t reatment of vocal fold insufficiencyan animal studyJ.Acta Otolarygol(Stockh)1999119107111.38 Laurent T C.The ChemistryBiology and Medical App Lications of Hyaluronan and its DerivativesM.LondonPortland Press Ltd199833374365.39 Kuo J WSwann D APrestwich G D.Chemical modification of hyaluronic acid by carbodiimidesJ.Bioconjugate Chem.19912232241.40 Davide RenierPierangelo BellatoDavide Belliniet al.Pharmacokinetic behaviour of ACP gelan autocrosslinked hyaluronan derivative after intraperitoneal administrationJ.Biomaterials 20052653685374.编辑 史来娣 上接第 1409 页 33 Zako MUragaki H Kodate K.On intelligent structures using optical fiber J.J.Soc.Mater.Sci.Jpn.199544493497.34 Zako M Takano N.Intelligent material systems using epoxy particles to repair microcracks and delamination damage in GFRP J.J.Intel.Mater.Syst.Struct.199910836841.35 Zako MFujii K.Repair of damage under loading by intelligent composite material system J.Trans.Mater.Res.Soc.Jpn.200126175178.36 Kessler M RWhite S R.Self-activated healing of delamination damage in woven compositesJ.Composites Part A200132683699.37 Jung D Hegeman A Sottos N R et al.Self-healing composites using embedded microspheres J.Composites and Functionally Graded Materials199780265275.38 田薇王新厚潘强等.自修复聚合物材料用微胶囊J.化工学报200556(6)11381140.39 Brown E N White S R Sottos N R.Retardation and repair of fatigue cracks in a microcapsule toughened epoxy composite-Part I Manual infiltrationJ.Compos.Sci.Technol.20056524662473.40 Brown E N White S R Sottos N R.Retardation and repair of fatigue cracks in a microcapsule toughened epoxy composite-Part IIIn situ self-healing J.Compos.Sci.Technol.20056524742480.41 吕郑治祥丁厚福等.Al2O3基结构陶瓷材料裂纹自愈合研究进展J.兵器材料科学与工程20032645559.42 张妃二姚立宇.光纤智能混凝土结构自修复的研究J.功能材料与器件学报20039(1)9194.44 朱玉田荻原一郎毛利泰裕.形状记忆合金智能复合材料自修复中传感与控制方法研究J.机械工程学报 2005 41(3)221225.(编辑 奚志刚)万方数据交联透明质酸衍生物的制备与应用进展交联透明质酸衍生物的制备与应用进展作者：杨好，熊文说，应国清，易喻，王鸿，YANG Hao，XIONG Wenshuo，YING Guoqing，YI Yu，WANGHong作者单位：浙江工业大学药学院,浙江,杭州,310014刊名：化工进展英文刊名：CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS年，卷(期)：2006,25(12)被引用次数：4次 参考文献(40条)参考文献(40条)1.Kuroyanagi Yoshimitsu Substrate for tissue regeneration containing hyaluronate and other polymer sponges,material fortransplantation,and processes for producing these 20022.印春华;张敏 蛋白质和多肽类药物的聚乙二醇结合物-一种新型给药系统期刊论文-中国药学杂志 2001(05)3.陈景华;徐政;顾其胜 聚乙二醇交联的透明质酸衍生物的细胞毒性期刊论文-中国生物制品学杂志 2005(04)4.Huang L L H;Sung H W;Tsai C C Biocompatibility study of a biological tissue fixed with a naturally occurringcrosslinking reagent外文期刊 19985.Madaghiele M;Conversano F;Mele G Cellulose derivative-hyaluronic acid-based microporous hydrogels crosslinked throughdivinyl sulfone(DVS)to modulate equilibrium sorption capacity and network stability外文期刊 2004(01)6.Xuejun X;Netti P A Preparation and characterization of a hydrogel from low-molecular weight hyaluronic acid外文期刊20047.Leshchiner Adelya KKonowicz Paul A Divinyl sulfone-crosslinked hyaluronan polymer cohesive gels 20058.周长忍;李立华 环氧基交联剂及其制备方法和在制备生物降解材料中的应用 20039.Sei K Hahn;Sandra Jelacic;Ronald V Maier Hoffman Anti-inflammatory drug delivery from hyaluronic acid hydrogels2004(09)10.Shih Hsin Nung;Fang Jen Feng;Chen Jui Hsiang Reductio