胆结石患者结石氨基酸谱分析.pdf

内蒙古医学院硕士学位论文胆结石患者结石氨基酸谱分析姓名：岳斯图申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：胡江;王亮20080501C o n AC C K英文缩略语表C o n c a n a v a l i nAC h o l e c y s t o k i 血ns IS e m mf e r r i d n刀豆素胆囊收缩素血清铁U D P G Ak f tV e n t r i c u l a rE n d S y s t o l i cv o l u 啪阴离子多肽片段中文摘要目的分析内蒙古西部地区胆结石患者的结石氨基酸谱，并探讨氨基酸与胆结石成因的关系，并且对各类胆结石进行氨基酸成分测定对照研究，以助于寻找更好的溶石药物。也可分析出不同时期胆结石中的氨基酸含量有无变化。方法根据红外光谱特点以及结石取石年份的不同选出9 0 份胆石进行氨基酸成分测定，其中包括胆固醇结石、胆色素结石、混合型结石。通过统计学分析，比较同年内各型结石中氨基酸的含量以及比较三年内同类型结石中氨基酸的含量。结果胆固醇结石、胆色素结石、混合型结石其氨基酸量比例为2 8 9：5 6 7：1，胆固醇结石、胆色素结石、混合型结石其氨基酸酸性组分大于碱性组分，其中甘氨酸含量最高，同一类结石在三年内的氨基酸含量做统计学处理比较，P O 0 5，无明显差异。因实验的关系未测得半胱氨酸，而测得半胱氨酸的二硫化合物胱氨酸。结论(1)胆石中普遍存在着1 7 种蛋白质氨基酸。(2)无论何种胆石，其成分均为脂肪族氨基酸 酸性氨基酸 碱性氨基酸 芳香族氨基酸 含硫氨基酸o(3)在8 种脂肪族氨基酸中，甘氨酸含量最高，占1 7 种氨基酸总量的1 5 5 6。(4)氨基酸含量依次为：胆色素结石 混合型结石 胆固醇结石。(5)混合型结石中胆红素含量越高，氨基酸含量也越高。胆色素结石和胆固醇结石各氨基酸百分含量基本相似。关键词胆固醇结石胆色素结石混合型结石氨基酸凼塞直匿堂睦亟婴塞生堂丝迨塞f 塑!玺2别引，所以随即选取我院2 0 0 4 年1 月至2 0 0 6 年1 2 月三年内外科手术取出的胆石1 0 0 0余份进行大体肉眼分出胆固醇结石、胆色素结石和混合型结石三型，按每年每型选出3 0份对其进行红外光谱分析确定成分m】，从中再按每年每型随机选出1 0 份，共9 0 份结石标本o1 2 主要试剂：6 咖抄L 盐酸、优级纯浓盐酸、苯酚、0 0 0 2 5 咖L L 混合氨基酸标准液、p H 2 2 柠檬酸钠缓冲液、茚三铜溶液、纯度9 9 9 9 高纯氮气、冷冻剂、l(B r 试剂1 1】。1 3 主要仪器和设备：(1)日立8 3 5 5 0 型氨基酸自动分析仪(2)真空泵(3)恒温干燥箱(4)水解管(5)真空干燥器(6)B r u k e rD 8X 型射线衍射仪(7)N e x 岫6 7 0 型傅立叶变换红外光谱仪(8)玛瑙研钵1 4 实验方法：(1)标本处理：经肉眼分型后的2 7 0 例胆结石标本进行玛瑙研钵研碎并经干燥处理成胆石粉末o(2)称取胆石粉末少许，进行红外光谱定性分析及X 射线衍射分析1 1】。从结果中再按每年每型随机选出1 0 份，共9 0 份结石标本。(3)上机测定结石氨基酸谱：称样：准确称取2 9，为减少误差可适当增大称样量，测定前再稀释。将称好的试样放于水解管中o水解：在水解管内加6 啪L L 盐酸1 0 m L 一1 5 I n L，加入新蒸馏水的苯酚3 4 滴，再将水解管放入冷冻剂中，冷冻3 I I l i n，再接到真空泵的抽气管上，抽真空(接近0 P a)，然后充入高纯氮气；在抽真空充氮气，重复三次后，在充气状态下封口或拧紧螺丝盖将以封口的水解凼塞直匿堂睦亟婴塞生堂丝迨塞f 塑!玺2别引，所以随即选取我院2 0 0 4 年1 月至2 0 0 6 年1 2 月三年内外科手术取出的胆石1 0 0 0余份进行大体肉眼分出胆固醇结石、胆色素结石和混合型结石三型，按每年每型选出3 0份对其进行红外光谱分析确定成分m】，从中再按每年每型随机选出1 0 份，共9 0 份结石标本o1 2 主要试剂：6 咖抄L 盐酸、优级纯浓盐酸、苯酚、0 0 0 2 5 咖L L 混合氨基酸标准液、p H 2 2 柠檬酸钠缓冲液、茚三铜溶液、纯度9 9 9 9 高纯氮气、冷冻剂、l(B r 试剂1 1】。1 3 主要仪器和设备：(1)日立8 3 5 5 0 型氨基酸自动分析仪(2)真空泵(3)恒温干燥箱(4)水解管(5)真空干燥器(6)B r u k e rD 8X 型射线衍射仪(7)N e x 岫6 7 0 型傅立叶变换红外光谱仪(8)玛瑙研钵1 4 实验方法：(1)标本处理：经肉眼分型后的2 7 0 例胆结石标本进行玛瑙研钵研碎并经干燥处理成胆石粉末o(2)称取胆石粉末少许，进行红外光谱定性分析及X 射线衍射分析1 1】。从结果中再按每年每型随机选出1 0 份，共9 0 份结石标本。(3)上机测定结石氨基酸谱：称样：准确称取2 9，为减少误差可适当增大称样量，测定前再稀释。将称好的试样放于水解管中o水解：在水解管内加6 啪L L 盐酸1 0 m L 一1 5 I n L，加入新蒸馏水的苯酚3 4 滴，再将水解管放入冷冻剂中，冷冻3 I I l i n，再接到真空泵的抽气管上，抽真空(接近0 P a)，然后充入高纯氮气；在抽真空充氮气，重复三次后，在充气状态下封口或拧紧螺丝盖将以封口的水解凼鐾直匿堂睦亟婴塞生堂焦迨塞i 垫圣生)管放在1 1 0 1 的恒温干燥箱内，水解2 2 小时，取出冷却。打开水解管，将水解液过滤后，用去离子水多次冲洗水解管，将水解液全部转移到5 0 m L，容量瓶内用去离子水定容。吸取滤液1 m L 于5 x l l L 容量瓶内，用真空干燥器在4 0 一5 0 干燥，残留物用1r I l L 一2 n 也水溶解，再干燥，反复进行两次，最后蒸干，用1 r n Lp H 2 2 的缓冲液水解，供仪器测定用o测定：准确吸取0 2 0 0 m L 混合氨基酸标准，用氨基酸自动分析仪以外标法稀释液浓度为5 0 0 m n o 协0 止，作为上机测定氨基酸标准，用氨基酸自动分析仪以外标法测定试样测定液的氨基酸含量。【1 2】结果计算：按下式计算：X=c 1 5 0 F V w m 1 0 9 1 0 0X 试样按计算的含量，单位为克每百克(g 1 0 0 9)；C 试样测定液中氨基酸含量，单位为纳摩尔每5 0 微升(r m l o l，5 0 斗L)；卜试样稀释倍数；V 水解后试样定容体积，单位为毫升(n d)；M 氨基酸分子量；m 试样质量，单位为克(g)；l 5 0 折算成每毫升试样测定的氨基酸含量，单位为微摩尔每升(弘m o L L)；1 0 9 将试样含量由纳克(n g)折算成克(g)的系数。统计学处理：本实验根据红外光谱特点将标本分为胆固醇结石组、胆色素结石组、混合型结石组共9 0 份标本，不同年份的同类结石之间氨基酸总量的分析采用均数标准差表示，检测结果采用t 检验进行分析。不同类结石之间各氨基酸成分之间的比较也采用均数标准差表示，检测结果采用t 检验进行分析。所有数据统计分析采用S P s S l l 0 软件，资料类型为计量资料，相关性采用脚n 相关分析，P 0 0 5 有显著统计学意义，P O 0 5，无明显差异，表明结石在储存过程中，氨基酸没有明显的丢失，其三年内的氨基酸总量无明显差异o4 结论：(1)胆石中普遍存在着2 0 种蛋白质氨基酸，本次实验测得1 7 种o(2)无论何种胆结石，其成分均为脂肪族氨基酸 酸性氨基酸 碱性氨基酸 芳香族氨基酸 含硫氨基酸o?(3)在8 种脂肪族氨基酸中，甘氨酸含量最高，占1 7 种氨基酸总量的1 5 5 6。(4)在三种胆结石中氨基酸含量依次为：胆色素结石 混合型结石 胆固醇结石，混合型结石中胆红素含量越高，氨基酸含量也越高。(5)胆固醇结石与胆色素结石所含各类氨基酸的百分比含量基本相似。(6)胆结石中的氨基酸在储存时不会有明显的丢失。综上所述，胆结石难溶组分是胆结石形成的核心和关键，也是溶石治疗的难点。因此分离提取胆结石中的蛋白质，弄清其组成和结构，对其氨基酸谱的检测研究是今后深入研究的方向。本组实验可以提供一些胆结石中蛋白质氨基酸谱的数据，为寻求更好的溶石治疗提供理论支持。参考文献：1 赵国臣，周春祥胆结石成石机制研究概况，广西中医学院学报，2 0 0 r 7，1 0(2)：7 6 7 8 2 陈海菊，马保金，蔡端胆结石成因的基因研究，肝胆胰外科杂志，2 0 0 3，1 5(1)：6 8 6 9 3 曹建江，李学颖胆囊结石成因的研究进展华西医学2 0 0 7，2 2(2)：4 5 0 4 5 l 4 吴在德，吴肇汉外科学人民卫生出版社，2 0 0 5，5 6 7 5 6 8 5 陈雨强，张延龄，蔡端等成核效应蛋白在泡凝聚融合过程中作用的初步研究 J 中华外科杂志。1 9 9 7，3 5(3)：1 8 l 1 8 5 6 黄家驷，吴阶平外科学 M 北京：人民卫生出版社，1 9 7 9 8 3 0 8 5 0 7 李哲夫胆固醇胆石成因的研究进展中国普通外科杂志2 0 C r 7，1 6(2)：1 7 0 一1 7 2 8 刘刚，邢达，王海珉，吴杰胆结石中蛋白质的傅里叶变换红外光谱和表面增强拉曼光谱研究，光学学报，2 0 0 2，4，4：“l 一4 4 6 9 囝美兴，武彩霞，许秀华胆结石中各组分的光谱和化学分析，福建医药杂志，2 0 0 0，2 2，4：1 0 7 一1 0 8 1 0 珊压e nh u a，L UJ 幽，c o m p 面n gC o 陀鼬m n d 蹦删c o q 瑚i 妇o f 蛐c t a l 铂u 合杂志，1 9 9 6，6，2：1 0 一1 4 2 8 戴显伟，何魁修，张剑秋，胆管胆色素结石及其难溶的祖分氨基酸分析，中华医学杂志，1 9 8 7 2 5(6)：3 3 3 2 9 周孝思我国胆色素类结石成因的研究近况 J 普外临床，1 9 9 4，9(4)：1 9 3 3 0 夏亮芳，胆色素结石与胆固醇结石氨基酸祖分特点，中华外科杂志，1 9 8 8，(8)：4 8 5 4 8 7直鐾直匿堂医亟堑塞生堂鱼迨塞(兰塑璺生2下产生的粘蛋白是一种有效的促成核因子，现已发现胆汁中有十余种促成核因子，胆汁成核时间的降低是这些因子综合作用的结果，成核效应蛋白大多为糖蛋白，糖链起着调节活性的作用，其中能够缩短胆固醇成核时间的蛋白称为促成核蛋白，反之则称为抑成核蛋白【4】o 刀豆球蛋白A(C o n A)结合蛋白因包含了目前已知的绝大多数促成核蛋白，为系统研究促成核活性蛋白提供了可能，C o-认结合蛋白在加快泡聚集与融合时，也使泡胆固醇增加、磷脂减少，使泡胆固矽磷脂比值升高，胆固醇析出，证实了作为成核效应蛋白C o n A 结合蛋白的差异是决定胆汁胆固醇成核与否的主要原因。胆结石形成过程中糖蛋白起着重要作用，糖蛋白是一类以蛋白为主、糖为辅基的结合蛋白质，分为粘蛋白和非粘性糖蛋白uJ。1 粘蛋白：粘蛋白主要由上皮细胞产生，是一类高分子量蛋白质，糖基占其总量的7 0 一7 4，肽链骨架约占1 5 一2 0 o 糖蛋白特有的形成胶样物的特性主要是由糖基决定的。不同胆结石患者胆汁中粘蛋白糖基的组成不同，一般来说主要由半乳糖、岩澡糖、N 一乙酰葡萄糖胺组成，但糖基的含量多样性在成石胆汁和正常胆汁中并无明显差异哺Jo 不同凝集素能特异性地与不同糖基结合如刀豆素(C o-认)和豌豆素(P s A)可以结合a D 一甘露糖、a D 一葡萄糖；荆豆素(U E A)可结合L 一岩藻糖、西非单豆素(B S L)可结合仅一D一半乳糖等。许多研究证明致石胆囊胆汁中的粘蛋白浓度远高于正常胆囊胆汁，而且胆囊粘膜在感染条件下产生的粘蛋白是一种有效的促成核因子。胆结石中的粘蛋白主要由胆囊粘膜上皮细胞产生。H a l e 1 等发现氨自由基可刺激胆囊粘膜上皮细胞产生和释放大量的粘蛋白。后来S i p【8 1 等发现感染的胆囊壁和胆囊胆汁中的氨自由基水平显著增高，同时发现胆结石患者多伴有粘膜的慢性炎症病变，感染细菌，特别是不含过氧化氢酶的细菌，都可产生氧自由基的细菌，粒细胞在吞噬细胞时可产生氧自由基，因而认为促使胆囊粘膜上皮细胞产生粘蛋白的主要因素是感染。磷脂酶A 2 一A 在胆囊结石胆囊粘膜的感染中起炎症介质作用，磷脂酶A 2 一霎姜d 厶耀越器矍蠡嚣野蓁僖糍篙；猷菰孽塑童娶需型辇霉宝j 蓁鞭型勤墼妄零拓挥羹一雾羹诵滴懈礤浦涅薹捡蠹写蝤蓬编泪薹型骺薛雾缀醚绌墅茎i 薹重型嚼塑藿殛墼耄着调节活性翼稚角；耋蓁奏器戮鳎豁墼蘸蓁雾翟剧删挺墓i 两咦雾成核雾雾臣芝则除篓羹器醚蓁曼鬻闭青爵霭蠹蠹蕈吟崭ix凼鐾直匡堂睦亟堑塞生堂焦迨塞(兰塑墨生22 3 载脂蛋白胆道载脂蛋白具有类似血浆脂蛋白的转运、溶解胆固醇和磷脂的作用。实验证明胆囊胆汁中的载脂蛋白A 1 可以抑制胆固醇过饱和胆汁中胆固醇结晶的形成u 4 o 随后在胆囊胆固醇结石中也发现载脂蛋白A 1 的存在o2 4 免疫球蛋白正常人和动物胆汁中均含有免疫球蛋白，主要为I g A、I g G 和I g M。人胆囊胆汁中主要以I g A 为主，其次为I g G 和I g M，而在肝胆汁中则以I g G 含量最高，这主要是因为胆囊粘膜可以分泌S I g A 进入胆汁，同时选择性吸收I g G。P 锄e l a 等应用蛋白印迹技术发现，所有胆结石中均含有分子量为2 8 k D 和2 2 k D 免疫球蛋白F a b 片段存在，其中2 8 k D 的F a b 片段能更显著的缩短成核时间，而普通商用的F a b 片段却没有这种作用，推测胆结石中的F a b 片段是以抗原一抗体复合物的形式存在，并非单纯的F a b 片段。胆固醇结石中免疫球蛋白片段的出现，动摇了细菌不参与胆固醇结石的传统观念，随后S 讲d s i I l s“圩1 通过D N A 扩增和对1 6 s 核糖体R N A 系列分析在大多数胆固醇结石中也发现有细菌存在。人们很早就认识到，单纯胆固醇和胆色素钙盐的沉积并不能形成胆结石。关于胆结石的形成，我们认为是先由粘多糖形成网状结构，然后胆固醇结晶和胆色素钙盐沉积在其中，最后形成结石。值得注意的是最近1 l o m p s o n 等6 的研究表明，成石胆汁中的纤维蛋白溶解抑制含量明显高于正常胆汁，提示我们纤溶系统可能参与了胆结石的形成。胆结石成分研究结果表明，胆结石之所以难溶，正是因为胆结石中有相当部分未测知的难溶物质存在，糖蛋白与难溶物质有着密切关系。胆结石中糖蛋白组成和作用的最终阐明，将为胆结石的预防和溶石治疗提供重要依据。对胆红素结石成因所进行的研究，尤其是腺体内成核过程的研究，可能会对早期预防和治疗此病提供一条新思路。二，胆结石氨基酸谱分析：已知蛋白质在结石的形成过程中起重要的作用。一些蛋白质如粘糖蛋白、钙结合蛋白、免疫球蛋白对胆结石的形成可能起促成核和网架的作用，但是，胆结石中蛋白质的形貌结构及蛋白质分子的二级结构目前还不甚清楚，有必要对胆石的组成和结构进行深入研究。蛋白质构成的基本单位是氨基酸。目前知道在蛋白质分子中存在的、受遗传密码支配的氨基酸有2 0 种，即甘、丙、缬、亮、异亮、蛋、脯、苯丙、色、酪、丝、苏、半胱、谷、天门冬、组、赖、精氨酸和天冬氨酸及谷氨酰胺1 7】。为了寻求更好的溶石方法，陈瑛噶3 等对2 7 例直鐾查匿堂睦亟堑塞生堂焦迨塞f 塑!生2胆结石分三组，分别为胆固醇结石1 0 例，胆色素结石1 0 例，混合型结石7 例经处理上机检测氨基酸，检测结果得知但结石中普遍存在着生蛋白质氨基酸，其氨基酸含量依次为胆色素结石)混合型结石)胆固醇结石，其成分均为脂肪族氨基酸)酸性氨基酸)碱性氨基酸)芳香族氨基酸)含硫氨基酸。混合型结石中，胆红素含量越高，氨基酸含量也越高。胆色素结石中酸性氨基酸组份相对碱性氨基酸组份为高。而胆色素结石与胆固醇结石各种氨基酸百分含量基本相似。戴显伟等u 引对胆管胆色素结石及其难溶残渣中1 7 种氨基酸的含量进行对比分析，结果表明，难溶残渣中氨基酸的种类与胆结石相同，残渣中氨基酸的含量明显高于胆结石；其中丙、苏、亮、异、谷、酪、蛋、苯、脯、赖1 0 中氨基酸的含量明显高于胆结石，有显著差异；残渣中氨基酸的参与良玉残渣的百分含量具有密切的正相关关系。因此，认为大分子有机物在胆色素结石的形成中起重要作用。胆色素结石中的氨基酸平均约有4 4 以易溶状态存在易于提取；约有5 6 以难溶状态存在，构成了胆色素结石的难溶组分。胆色素结石中各种氨基酸的百分构成，以甘氨酸和N H 3 的含量明显高于其残渣是其特点。残渣中各种氨基酸的百分构成特点是，谷氨酸和丙氨酸明显高于胆结石，而甘氨酸和N H，的含量明显低于胆结石。结合残渣中C a 元素的残余量也与残渣的百分含量有非常密切的正相关关系汹】，因此推测，胆色素结石生成的始发阶段和成石过程中，难溶性氨基酸所组成的难溶性大分子物质(蛋白质)，与胆汁中的难溶性钙盐和胆红素等菊和成大分子高聚物 2 l】构成难溶性颗粒，成为胆色素结石的雏形；在胆汁淤积的条件下，大量难溶性颗粒没能被及时排出，逐渐聚集形成胆石。胆结石难溶组分是胆结石形成的核心和关键，也是溶石治疗的难点。因此分离提取胆结石中的蛋白质，弄清其组成和结构，对其氨基酸谱的检测研究是今后深入研究的方向。参考文献：1 唐乾利胆石症中医治疗近况及展望 J 广西中医药，2 0 0 l，2 4(6)：9 2 N GK l l i，)【US h 锄一如，uR 0 嘴一c h n g(王夔，许善锦，李荣昌)M e d i c a lC h e i 8 何F o 衄拯d 一c l I e m i c a I R u l e n t l l e0 c c u 珀D dD e v e l o p m e n t0 fD i 嘣b 鹤(医化学基础疾病发律)(B)e i j i n g：P e I【i n gU 血v 绷姆P r e 鸥北京：北京大学出版社)，2 0 0 1 2 1 5 3 T o m p k i n 3RK，K m RAR，z i】锄舢E，e t a l C m c a l a r I db i o c h e m i c a l 喇d e n o f 血陀够e dg a：u s t o 啦f o I 眦妇a f I 盱伽p l e t eM 阳 J S 嘴r y 1 9 7 2，7 l：1 9 6 4 周孝思我国胆色素类结石成因的研究近况 J 普外临床。1 9 9 4，9(4)：1 9 3 5 M a l【f r P a t h o g e n e 8 i 80 fc a l c i 皿b i mb i m t e 萨l l s|【0 n：撇E 础，一g I u c：u r o 血t l a，衄d a g l l-直鏊直匿堂瞳亟堑塞生堂焦迨銮(塑!生2l a t i b yh，啦I o m，P o 呐眦由t e 蛐d 姆t 蚯 J】A 衄咖葛，1 9 6 6，l“：9 0 一1 0 0 6 S h r v b 一如u r o n i da 眦t i v i t yi n b 如o f g a 岫p a t i e 吣一b o t h w i t h 衄dw i t h 伽td u o d e n a ld i v e 毗山 J s c 妞d J 脚m 哪l，1 9 8 9，2 4(2)：2 0 5 2 1 2 7 K 加口e yH o D e v e l o I m 明t a n d o 州血丛d o fa 酏n z y l 鹏l i n l【e di m 强I 加r I n 眦8 a y 锄p l I 咖gT 岫砌玳衄伽I o c l o m 舢b 础f o ra b I u te q u 觚t i t 洳o fh 呦nB，g l u c u 删d 蹴 J B i o t e c h l o 一圈阻n d A p p l i e dB i h e m i s 町，1 9 9 2，1 6，l 1 0 8 陈道纯，陈锡谋，林谷珍，等，胆汁内源性B G a 能真实活力的观察 J 福建医学院学报，1 9 9 5，2 9(2)：1 9 8 9 M 硼删i s H n 吨i n 缸n 咖j u 刚b i l i 川b i ni n b i l e J G 鸥咖一钯m 1 0 罢洲，1 9 7 9，1 4(4)：3 1 2 3 1 5 1 0 陈瑛，王莲莲，肖玉霞，倪景华，朱燕各类胆石氨基酸成分研究分析，临床消化病杂志，1 9 s r 7，9，l：l 一5 1 1 刘刚，邢达，王海珉，吴杰，胆结石中蛋白质的傅里叶变换红外光谱和表面增强拉曼光谱研究，光学学报，2 0 0 2，4，4：4 4 l 一4 4 6 1 2 周孝思，我国胆色素类结石成因的研究近况，普外临床，1 9 9 4，9，4：1 9 3 2 0 2 1 3 囝美兴，武彩霞，许秀华，胆结石中各组分的光谱和化学分析，福建医药杂志，2 0 0 0，2 2，4：1 0 7 1 0 8 1 4 胆结石组成和形成机理的研究进展，孙颖，杨展澜，申国荣，周勇等，中国科学，2 0 0 l，1 0，3 l。5：3 8 5 3 9 3 1 5 陈瑛，王蘧，王莲莲等，胆固醇结石与胆色素结石氨基酸成分检测对照研究，深圳中西医结合杂志，1 9 9 6，6，2：1 0 1 4，、1 6 M a r g&r e t aS t a d【，H a 璐J 诧m v a l l 姐dJ 姐J o h 鹏n，I 的k 出o na n dc h 哪c t e r i z a d 0 fh y d r o p h o b i cp o b 供p 耐i nh u m a 玎b d e，E u r J B i o c h e m 2 6 6，2 0 9 2 1 4(1 9 9 9)1 7 D 嘶e lF O 尬，M a I i eV S t P i e 髓，A 池A b d u l m 嘲i l l，肌dh I r i nM“AY e 哪A 1 1 P b 础i 1 1 9C 鹕e n e t)，p e i I lM 础啦，A 1 1 P d e p e n d e n tB d eA c i d n 删，I H EJ O U R N A L0 FB I o L o G I C A LC H E M I s：限Y，V 0 1 2 7 2，N o 2 4，I s s I I eo f J 皿c1 3，p p 1 5 3 5 8 一1 5 3 6 5，1 9 9 7 1 8 夏亮芳，胆色素结石与胆固醇结石氨基酸祖分特点，中华外科杂志，1 9 8 8，(8)：4 8 5 4 8 7 1 9 戴显伟，何魁修，张剑秋，胆管胆色素结石及其难溶的祖分氨基酸分析，中华医学杂志，1 9 8 7 2 5(6)：3 3 3 2 0 石富，张剑秋，陈长春等，色素性结石的氨基酸分析，中华外科杂志1 9 8 9，2 6(6)：1 3 3 2 1 梁之彦，张惠珠，陈诗书等，生理化学，上海科学技术出版社1 9 8 5，2(6)；3 1 2直鏊直匡堂医亟班塞生堂丝迨塞(!Q 鲣生26、缺铁因素：胆结石中约7 5 是胆固醇结石，该病的发病率女性较男性高2 3 倍，在女性生育和5 0 岁以上的年龄段，这个比例甚至更高，这个现象提示，可能与雌激素和孕激素水平的升高，对胆道的运动及胆汁的形成有关系n】，陆敏等1 2 1 对8 1 例胆结石病员的血清铁(S I)水平进行了对比，并讨论了男女间的差异。结果表明对照组S I 浓度显著高于胆囊结石组。这确实表明胆石症患者处于相对缺铁状态，虽然绝大多数尚未达到贫血的标准。本研究提示，缺铁可能导致胆囊结石的发生，尤其是女性胆囊结石发病的一个机制。因此，适当调整铁的摄人量，可能成为防治胆囊结石的一项措施o7、脂代谢紊乱：脂代谢紊乱与胆结石胆囊结石的形成与脂质运输、代谢、分泌异常有密切的关系，血浆H D L 参与机体胆固醇逆转运，将机体内过多的胆固醇转运至肝脏代谢m】。袁作彪等在对高胆固醇血症与豚鼠胆囊色素性结石动物实验中发现，高血清胆固醇明显增高时肝细胞有较严重的脂肪变性及淤胆表现，但胆汁中总胆固醇变化不明显，可能是：总胆汁酸合成降低，血清胆固醇升高会抑制内源性胆固醇的合成，使有效用于胆汁酸的原料减少，而且肝细胞的脂肪变性，可直接影响到7 以羟化酶等的活性，其正常合成胆汁酸的功能受到影响，两方面的共同作用，使其降低钙离子浓度与活度的效应不能充分发挥，致”胆红素钙”向着沉淀的方向进行；肝细胞器的损伤，约2 5 的胆石症患者的尿苷二磷酸葡萄糖苷酰转移酶(U D P G A)活性降低，远远高于正常人比例(3)，从而导致胆红素脂化不全，胆汁中的M G B 比例上升，最终形成结石j 结果显示，高胆固醇血症可促进胆色素结石的形成，提示胆固醇与胆结石的形成之间很可能存在某种关系，从而确定最终形成胆固醇或胆色素结石u 引。按照目前的研究成果来看，胆结石的形成机制异常复杂，涉及到上述多种因素的相互影响，到目前为止，对胆结石的具体形成机制尚无定论。对胆汁热力学、胆道动力学因素而言，目前已具有比较确切的认识；但对其他几个因素还需进一步研究探讨，今后的研究重心将是对上述相关部分的综合作用作个合理的解释，特别是成核活性蛋白体系与其他方面的相关作用；或是对还未知的领域作进一步阐述。所以，还需完善前人的工作，将胆囊结石的形成机制进一步阐发，为进一步的科研、临床提供更好的依据。参考文献：1】吴在德，吴肇汉外科学人民卫生出版社，2 0 0 5，5 6 7 5 6 8致谢三年的研究生学习即将结束，在此毕业之际，首先感谢我尊敬的导师胡江老师、王亮老师。在我三年的学习、实验及临床实践中，导师的指导与帮助极大地丰富了我的理论知识，开阔了我的专业视野，提高了我的科研及工作能力，为我将来成为一名优秀的外科医生打下了坚实的基础。两位导师严谨、缜密的科研作风，精益求精的工作作风以及对事业的执著追求是我终生学习的榜样!谨在此向两位导师表示我最衷心的感谢!感谢包头市中心医院普外科的李明章、金衍波、粱鲁、宋晓彪、张存贵老师及所有普外科的各位老师在我临床实践过程中给予的指导和帮助!感谢包头市中心医院手术室刘婷老师、内蒙古农业科学学院的高天云老师、以及内蒙古工业大学的阿山老师及全体工作人员在我课题实验过程中给予的诸多指导和帮助!感谢我的父母多年来对我的帮助，理解和关怀!胆结石患者结石氨基酸谱分析胆结石患者结石氨基酸谱分析作者：岳斯图学位授予单位：内蒙古医学院 本文读者也读过(10条)本文读者也读过(10条)1.王丹 外阴阴道假丝酵母菌病致病菌株及药物敏感性的研究学位论文20082.张茂 比较VEGF及KDR在大肠腺瘤和腺癌中的表达及其预后学位论文20083.庄耘 胆结石病人胆汁中幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白的检测及意义学位论文20074.杜洁 FGF-2、VEGF、ER、PR在子宫肌瘤组织中的表达学位论文20085.郭丽 TGF、HGF及bFGF在妊娠期高血压疾病中的表达及意义学位论文20086.常义 BPH致BOO患者逼尿肌NGF表达及超微结构改变学位论文20087.刘来兴 大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化为神经样细胞的实验研究学位论文20088.王伟 红外线计算机导航下全膝关节置换的应用研究学位论文20089.刘芳 雌激素受体基因多态性与稽留流产病因学分析学位论文200810.王菲 GnRH、GnRH-R在卵巢子宫内膜异位症与子宫腺肌病中的表达及意义学位论文2008 本文链接：http:/