结缔组织病相关自身抗体临床应用新进展.pdf

结缔组织病相关自身抗体临床应用新进展结缔组织病相关自身抗体临床应用新进展谭立明谭立明南昌大学第二附属医院南昌大学第二附属医院12014年年5月月17日日5时时11分分检验义工群：36630 940 5结缔组织病结缔组织病的概念的概念结缔组织病结缔组织病，以疏松结缔组织粘液样水肿及，以疏松结缔组织粘液样水肿及纤维蛋白样变性为病理基础的一组疾病。最早认纤维蛋白样变性为病理基础的一组疾病。最早认为主要是胶原纤维发生纤维蛋白样变性所致，故为主要是胶原纤维发生纤维蛋白样变性所致，故称为弥漫性胶原病或胶原血管病，以后认为主要称为弥漫性胶原病或胶原血管病，以后认为主要病变不仅限于胶原纤维，而改称为病变不仅限于胶原纤维，而改称为结缔组织病结缔组织病。检验义工群：36630 940 5骨科骨科呼吸呼吸血液血液肾内肾内心内心内结缔组织病结缔组织病免疫学免疫学皮肤皮肤内分泌内分泌结缔组织病结缔组织病与其它学科的关系与其它学科的关系检验义工群：36630 940 5结缔组织病结缔组织病的分类的分类(1)(1)（ACR,1993）分分 类类疾疾 病病弥漫性风湿病弥漫性风湿病SLE、RA、PSS、SS、PM、DM、MCTD、系统性血管炎系统性血管炎、弥漫性筋膜炎等弥漫性筋膜炎等伴脊柱炎的关节炎伴脊柱炎的关节炎AS、RS、PSA等等骨关节炎骨关节炎原发性原发性、继发性继发性感染相关的风湿病感染相关的风湿病病毒性关节炎病毒性关节炎、反应性关节炎反应性关节炎代谢及代谢及内分泌相关内分泌相关风湿病风湿病痛风痛风、假痛风假痛风、淀粉样变淀粉样变、Whipples 病病检验义工群：36630 940 5结缔组织病结缔组织病的分类的分类(2)(2)（ACR,1983）分分 类类疾疾 病病肿瘤性肿瘤性滑膜肉瘤滑膜肉瘤、滑膜瘤滑膜瘤、转移瘤转移瘤神经血管性神经血管性雷诺病雷诺病、红斑肢痛症红斑肢痛症、交感神经营养交感神经营养不良不良骨及软骨性疾病骨及软骨性疾病骨质疏松骨质疏松、骨软化骨软化、致密性骨炎致密性骨炎、缺缺血性骨坏死血性骨坏死关节外疾病关节外疾病滑囊炎滑囊炎、筋膜炎筋膜炎、附着点炎附着点炎、肌腱肌腱炎炎、纤维织炎纤维织炎其它有关节表现的其它有关节表现的疾病疾病复发性风湿病复发性风湿病、绒毛结节性滑膜炎绒毛结节性滑膜炎检验义工群：36630 940 5结缔组织病结缔组织病的病因的病因感染感染病毒病毒、细菌细菌、衣原体等衣原体等环境环境潮湿潮湿、寒冷寒冷、紫外线等紫外线等内分泌内分泌雌孕激素失调雌孕激素失调免疫紊乱免疫紊乱T T、B B细胞亚类异常细胞亚类异常遗传遗传HLAHLA-DRbDRb1 1、HLAHLA-DRbDRb2 2、DRDR3 3、HLAHLA-DRDR4 4、TCRTCR-VbVb 3 3、1414、1717检验义工群：36630 940 5结缔组织病结缔组织病的特征性表现的特征性表现1、皮疹皮疹2、粘膜溃疡粘膜溃疡3、皮下结节皮下结节4、腊肠指腊肠指5、皮肤硬化皮肤硬化6、多浆膜炎多浆膜炎7、关节炎关节炎/痛痛8、晨僵晨僵检验义工群：36630 940 5结缔组织病结缔组织病的共同特点的共同特点1.反复发作反复发作2.全身症状：全身症状：发热、皮疹、关节肿痛发热、皮疹、关节肿痛/炎、淋炎、淋巴结肿大等巴结肿大等3.多系统损害：多系统损害：免疫、心、肺、肾、消化、免疫、心、肺、肾、消化、血液、骨关节等血液、骨关节等4.血清学检查：血清学检查：多种自身抗体，如多种自身抗体，如ANA等等检验义工群：36630 940 52014年年5月月17日日5时时11分分9常见结缔组织病常见结缔组织病系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮类风湿性关节炎类风湿性关节炎系统性硬皮症系统性硬皮症混合性结缔组织病混合性结缔组织病干燥综合征干燥综合征多发性肌炎多发性肌炎/皮肌炎皮肌炎系统性血管炎系统性血管炎强直性脊柱炎强直性脊柱炎自身免疫性肝病自身免疫性肝病其它：抗磷脂综合征等其它：抗磷脂综合征等检验义工群：36630 940 5系统性红斑狼疮的自身抗体系统性红斑狼疮的自身抗体抗抗体体敏感性敏感性(%)特异性特异性(%)抗核抗体抗核抗体(ANA)dsDNA抗体抗体抗抗Sm抗体抗体（SmD1)膜膜DNA抗体抗体核小体抗体核小体抗体U1RNP抗体抗体SS-A 抗体抗体SS-B 抗体抗体抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体类风湿因子类风湿因子PCNA抗体抗体组蛋白抗体组蛋白抗体核蛋白抗体核蛋白抗体抗抗C1q抗体抗体抗端粒抗体抗端粒抗体997025788550253515204025530-805868718095999492879470407530955050748710检验义工群：36630 940 5类风湿关节炎的自身抗体类风湿关节炎的自身抗体抗体敏感性(%)特异性(%)类风湿因子R A 3 3/3 6 抗体S a 抗体抗角蛋白抗体抗核周因子抗C C P 抗体抗C B 1 0 抗体抗B i P 抗体50-7025-45373338-6270-8072708693.678-9787-9270-909670-889211检验义工群：36630 940 5进行性系统性硬化症进行性系统性硬化症的自身抗体的自身抗体靶抗原靶抗原阳性率阳性率(%)(%)着丝点着丝点8080-9595SclScl-70702525-7575ssDNAssDNA3030-6060原纤维蛋白原纤维蛋白5 5-1010RNA RNA 多聚酶多聚酶4 4PMPM-Scl(Scl(重叠综合征重叠综合征)3 3NORNOR-90(90(核仁形成区核仁形成区)少见少见Ku(Ku(与多肌炎的重叠综合征与多肌炎的重叠综合征)1)1-7 7检验义工群：36630 940 52014年年5月月17日日5时时11分分13抗抗体体阳性率阳性率(%)(%)A N AA N A抗抗S S AS S A 抗体抗体抗抗S S BS S B 抗体抗体抗抗aa-胞衬蛋白抗体胞衬蛋白抗体抗抗M 3M 3 受体抗体受体抗体类风湿因子类风湿因子A N C AA N C A抗抗M 2M 2 抗体抗体A C AA C A抗抗R N PR N P 抗体抗体6 06 0-8 08 05 05 0-7 07 03 03 0-6 06 06 56 5-8 78 79 29 26 06 0-8 08 01 01 0-2 52 51 31 32277干燥综合征的自身抗体干燥综合征的自身抗体检验义工群：36630 940 5混合性结缔组织病（混合性结缔组织病（M C T DM C T D）A N AA N A 阳性阳性E N AE N A 抗抗R N PR N P 高滴度阳性高滴度阳性检验义工群：36630 940 5多肌炎和皮肌炎抗体谱多肌炎和皮肌炎抗体谱靶抗原靶抗原阳性率阳性率(%)(%)ssDNAssDNA4040-5050JoJo-1 12525-3535PMPM-Scl(Scl(重叠综合征重叠综合征)8 8MiMi-2 25 5Ku(Ku(与硬皮病的重叠综合征与硬皮病的重叠综合征)1)1-7 7PLPL-7 7、PLPL-1212、OJOJ、EJEJ、KJ 2KJ 2-3 3检验义工群：36630 940 5血管炎的自身抗体血管炎的自身抗体cc-A N C AA N C A 和和P RP R33-A N C AA N C A对韦格纳肉芽肿有高度特异性（对韦格纳肉芽肿有高度特异性（9 5%9 5%），敏感性），敏感性8 0%8 0%与病情活动性相关与病情活动性相关常作为判断药物疗效和病情复发的指标常作为判断药物疗效和病情复发的指标pp-A N C AA N C A 和和M P OM P O-A N C AA N C A不如不如cc-A N C AA N C A 具有诊断特异性具有诊断特异性阳性者血管炎程度较高，其滴度也与病情活动相关阳性者血管炎程度较高，其滴度也与病情活动相关主要与主要与显微镜下多血管炎显微镜下多血管炎坏死性新月体肾小球肾炎坏死性新月体肾小球肾炎变应性肉芽肿性血管炎变应性肉芽肿性血管炎相关相关检验义工群：36630 940 517其他特异性其他特异性ANCA（乳铁蛋白）（乳铁蛋白）LFLF-ANCA:ANCA:可见于可见于SLESLE、IBDIBD、RARA、DILDIL、PBCPBC、PSCPSC、AIHAIH等，但阳性率低且与病情活动无关。等，但阳性率低且与病情活动无关。（弹性蛋白酶）（弹性蛋白酶）HELHEL-ANCA:ANCA:可见于可见于SLESLE、药物性血管炎（如肼苯哒嗪引、药物性血管炎（如肼苯哒嗪引起狼疮样综合征）、起狼疮样综合征）、PBCPBC、PSCPSC等。等。（组织蛋白酶（组织蛋白酶G G）CGCG-ANCA:ANCA:可见于可见于SLESLE、IBDIBD、PBCPBC、PSCPSC等。等。检验义工群：36630 940 518溶菌酶（溶菌酶（LYSLYS）-ANCA:ANCA:可见于可见于IBDIBD、PBCPBC、AIHAIH等，它与临床明确的等，它与临床明确的血管炎无明显相关性，与多器官受累有关，尤其血管炎无明显相关性，与多器官受累有关，尤其是肾、肺损害是肾、肺损害防御素防御素-ANCA:ANCA:可出现在一种热带寄生虫病可出现在一种热带寄生虫病慢性过度反应慢性过度反应性盘尾丝虫病病人血清中，其抗体阳性率达性盘尾丝虫病病人血清中，其抗体阳性率达100%100并与病情活动有关，适宜的抗寄生虫治疗可使，并与病情活动有关，适宜的抗寄生虫治疗可使该抗体滴度降低或阴转该抗体滴度降低或阴转其他特异性其他特异性ANCA检验义工群：36630 940 519其他特异性其他特异性ANCA人溶酶体相关膜蛋白人溶酶体相关膜蛋白2 2-ANCA:ANCA:与与坏死性新月体肾小球肾炎（坏死性新月体肾小球肾炎（NCGNNCGN）相关联相关联，活动期阳性率大于，活动期阳性率大于90%90%，且常与，且常与PR3PR3-ANCAANCA和和MPOMPO-ANCAANCA同时出现同时出现以上以上ANCAANCA在在IIFIIF检测中，可检测中，可呈现呈现p p-ANCAANCA或或aANCA aANCA -葡萄糖醛酸酶、葡萄糖醛酸酶、-烯醇酶烯醇酶-ANCA:ANCA:临床意义尚未阐明临床意义尚未阐明检验义工群：36630 940 520c-ANCA相关疾病相关疾病韦格纳氏肉芽肿韦格纳氏肉芽肿8080-90%90%显微镜下多血管炎显微镜下多血管炎1010-15%15%变应性肉芽肿性脉管炎变应性肉芽肿性脉管炎1010-20%20%多动脉炎结节多动脉炎结节5 5-9%9%检验义工群：36630 940 521p-ANCA靶抗原髓过氧化物酶髓过氧化物酶显微镜下多血管炎显微镜下多血管炎多血管炎结节多血管炎结节变应性肉芽肿性脉管炎变应性肉芽肿性脉管炎过敏性过敏性紫癜紫癜类风湿性关节炎类风湿性关节炎韦格纳氏肉芽肿韦格纳氏肉芽肿系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮检验义工群：36630 940 522p-ANCA靶抗原靶抗原乳铁蛋白乳铁蛋白系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮类风湿性关节炎类风湿性关节炎FeltyFelty氏综合症氏综合症弹性蛋白酶弹性蛋白酶系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮韦格纳氏肉芽肿韦格纳氏肉芽肿检验义工群：36630 940 523p-ANCA靶抗原靶抗原组织蛋白酶组织蛋白酶G G慢性炎症性肝和肠病慢性炎症性肝和肠病BPIBPI韦格纳氏肉芽肿韦格纳氏肉芽肿微血管炎微血管炎溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎CrohnCrohn氏病氏病自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎烯醇化酶烯醇化酶脉管炎脉管炎葡萄糖醛酸酶葡萄糖醛酸酶溶菌酶溶菌酶检验义工群：36630 940 524p-ANCA相关疾病相关疾病原发性脉管炎原发性脉管炎显微镜下多血管炎显微镜下多血管炎4242-70%70%变应性肉芽肿性脉管炎变应性肉芽肿性脉管炎1818-60%60%多结节性动脉炎多结节性动脉炎5 5-15%15%过敏性紫癜过敏性紫癜KawasakiKawasaki动脉炎（川崎病动脉炎（川崎病）多发性大动脉炎综合症多发性大动脉炎综合症检验义工群：36630 940 525p-ANCA相关疾病相关疾病系统性风湿病系统性风湿病系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮25%25%类风湿性关节炎类风湿性关节炎20%20%干燥综合症干燥综合症25%25%菲尔蒂综合症菲尔蒂综合症50%50%检验义工群：36630 940 526p-ANCA相关疾病相关疾病慢性炎症性肠病慢性炎症性肠病溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎76%Crohn氏病氏病7%检验义工群：36630 940 5炎症性肠病（炎症性肠病（IBDIBD）诊断诊断:内镜组织病理学及内镜组织病理学及X X线影象学检查线影象学检查 IBDIBD自身抗体谱：自身抗体谱：抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCApANCA）抗肠杯状细胞抗体（抗肠杯状细胞抗体（GCAGCA）抗酿酒酵母抗体（抗酿酒酵母抗体（ASCAASCA）抗胰腺腺泡抗体（抗胰腺腺泡抗体（PAAPAA）检验义工群：36630 940 528p-ANCA相关疾病相关疾病自身免疫性肝病自身免疫性肝病自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎I I型型65%65%原发性硬化性胆管炎原发性硬化性胆管炎87%87%原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化13%13%检验义工群：36630 940 5自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎(AIH)原发性胆汁性肝硬化原发性胆汁性肝硬化(PBC)原发性硬化性胆管炎原发性硬化性胆管炎(PSC)重叠综合症重叠综合症自身免疫性肝病分类自身免疫性肝病分类检验义工群：36630 940 5自身免疫性肝病自身免疫性肝病抗核抗体（抗核抗体（ANA）抗肝细胞膜抗体抗肝细胞膜抗体(抗抗LMA)抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）抗肝肾微粒体抗体（抗抗肝肾微粒体抗体（抗LKM抗体）抗体）抗肝抗肝-胰抗体胰抗体(抗抗LPLP抗体抗体)抗可溶性肝细胞抗体（抗抗可溶性肝细胞抗体（抗SLA）抗线粒体抗体（抗线粒体抗体（AMA）检验义工群：36630 940 5自身免疫性肝炎（AIH）ANA抗平滑肌抗体（SMA）抗肝肾微粒体抗体原发性胆汁性肝硬化（PBC）抗线粒体抗体（AMA）M2原发性硬化性胆管炎ANCA阳性自身免疫性肝病自身免疫性肝病检验义工群：36630 940 5AIH临床分类及特异性自身抗体临床分类及特异性自身抗体类型类型相关抗体相关抗体靶抗原靶抗原I型型抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）抗核抗体（抗核抗体（ANA）抗肝可溶性抗肝可溶性/肝胰抗原抗体（肝胰抗原抗体（SLA/LP)F-肌动蛋白肌动蛋白细胞核抗原细胞核抗原UGA-丝氨酰丝氨酰tRNA蛋白蛋白复合物复合物II型型抗肝肾微粒体抗肝肾微粒体1型抗体（型抗体（LKM-1）抗肝细胞溶质抗原抗肝细胞溶质抗原1型抗体（型抗体（LC-1)细胞色素细胞色素P450 IID6亚胺甲基转移酶和环化亚胺甲基转移酶和环化脱氨酶脱氨酶检验义工群：36630 940 5 方法:IIFT（大鼠肾/胃）阳性率:40-90%靶抗原:多种常见 F-actin 高滴度ASMA和 ANA强烈提示AIH 部分病毒性肝炎也可能出现ASMA大鼠肾大鼠胃抗平滑肌抗体（抗平滑肌抗体（ASMA）检验义工群：36630 940 5大鼠胃：大鼠胃：ASMA最佳最佳IFA检测基质检测基质检验义工群：36630 940 5 方法:IFA,ELISA,LIA 阳性率:2-4%靶抗原:细胞色素 p450 IID6 偶见丙型肝炎？提示预后差和病情更严重？LKM-1(大鼠肾)LKM-1(大鼠肝)抗肝肾微粒体抗肝肾微粒体1型抗体（型抗体（LKM-1）检验义工群：36630 940 5 方法方法:IIFT,ELISA,LIA 阳性率阳性率:1-2%靶抗原靶抗原:FTCD(亚胺甲基转移酶环化脱氨酶亚胺甲基转移酶环化脱氨酶)良好的疾病特异良好的疾病特异 与疾病活动性相关？与疾病活动性相关？LC-1(大鼠肝)抗肝细胞溶质抗原抗肝细胞溶质抗原1型抗体（型抗体（LC-1）检验义工群：36630 940 5PBC相关自身抗体相关自身抗体荧光表现荧光表现相关抗体相关抗体对应靶抗原对应靶抗原胞浆颗粒型胞浆颗粒型抗线粒体抗体（抗线粒体抗体（2型常见）型常见）（AMA-2）丙酮酸脱氢酶复合物丙酮酸脱氢酶复合物核点型核点型抗抗sp100抗体抗体抗抗PML抗体抗体sp100早幼粒细胞白血病抗原早幼粒细胞白血病抗原核膜型核膜型抗抗gp210抗体抗体抗抗Lamin蛋白及受体抗体蛋白及受体抗体核孔复合体糖蛋白核孔复合体糖蛋白Lamin蛋白及其受体蛋白及其受体检验义工群：36630 940 5抗原抗原:丙酮酸脱氢酶丙酮酸脱氢酶(OADC)多酶复合物的成分多酶复合物的成分:-丙酮酸脱氢酶丙酮酸脱氢酶(PDC)-2-酮戊二酸脱氢酶酮戊二酸脱氢酶(OGDC)-支链支链 2-丙酮酸脱氢酶丙酮酸脱氢酶(BCOADC)主要的靶抗原为丙酮酸脱氢酶主要的靶抗原为丙酮酸脱氢酶对对PBC诊断具有良好的敏感度和特异性诊断具有良好的敏感度和特异性抗线粒体抗线粒体2型抗体（型抗体（AMA-M2）AMA(HEp-2)检验义工群：36630 940 52、分裂期细胞浓缩染色体聚集区域未见点状样荧光的有序排列判读要点1、间期细胞核浆中出现10-15个数目不等的点状样荧光疾病：自身免疫性肝病疾病：自身免疫性肝病PBC核点型在核点型在HEp-2细胞中的荧光表现细胞中的荧光表现检验义工群：36630 940 52、分裂期细胞荧光阴性判读要点1、间期细胞核浆中出现均匀但着色较浅的荧光表现，核周边荧光略有增强疾病：自身免疫性肝病PBC核膜型在核膜型在HEp-2细胞中的荧光表现细胞中的荧光表现检验义工群：36630 940 5与与PSC相关自身抗体及其发生率相关自身抗体及其发生率相关抗体相关抗体发生率发生率抗中性粒细胞胞浆抗体（抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）68%抗核抗体抗核抗体30%抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体17%抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体27%类风湿因子类风湿因子15%抗酿酒酵母抗体抗酿酒酵母抗体44%并无明显的特征性抗体并无明显的特征性抗体检验义工群：36630 940 5抗磷脂抗体综合征（抗磷脂抗体综合征（A P SA P S）是一种非炎症性自身免疫病，临床上以动是一种非炎症性自身免疫病，临床上以动/静脉血栓形成、静脉血栓形成、习惯性流产和血小板减少等症状为表现，血清中存在抗习惯性流产和血小板减少等症状为表现，血清中存在抗磷脂抗体磷脂抗体血清学检查血清学检查抗心磷脂抗体（抗心磷脂抗体（A C A A C A ）I g GI g G、I g MI g M、I g AI g A（E L I S AE L I S A）抗抗22糖蛋白糖蛋白11 抗体（抗体（抗抗22-G P 1)G P 1)狼疮抗凝物（狼疮抗凝物（L AL A）凝血酶原时间（凝血酶原时间（P TP T）激活的部分凝血活酶时间（激活的部分凝血活酶时间（A P T TA P T T）白陶土凝集时间（白陶土凝集时间（K C TK C T）蛇毒试验（蛇毒试验（R V V TR V V T）检验义工群：36630 940 52酶联免疫吸酶联免疫吸附法附法（ELISA）1间接免疫荧间接免疫荧光法（光法（IFA Indirect Indirect FluorescenFluorescent Assayt Assay）3免疫印迹法免疫印迹法（IB）WesternblotLIA4其它：免疫其它：免疫沉淀法（沉淀法（IDAIDA）、放射性）、放射性免疫分析（免疫分析（RIARIA）等）等自身抗体常用的实验室检测方法自身抗体常用的实验室检测方法检验义工群：36630 940 5全自动自身抗体分析仪全自动自身抗体分析仪自动化检测自动化检测检测定量化检测定量化单个项目随时检测单个项目随时检测多个项目同时检测多个项目同时检测45-90分钟报告结果分钟报告结果质控血清质控血清精确温度调控系统精确温度调控系统全自动蛋白印迹仪全自动蛋白印迹仪检验义工群：36630 940 5LIA：靶抗原确认实验：靶抗原确认实验 几乎涵盖所有自身免疫性疾病相关抗体 每膜条对应一份样本 一次实验完成多个指标检测 结果稳定可靠 可肉眼判读，也借助软件实现数字化判读检验义工群：36630 940 52014年年5月月17日日5时时11分分4646检验义工群检验义工群:366309405检验义工群：36630 940 52014年年5月月17日日5时时11分分4747检验义工群：36630 940 5