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基础分子生物学实验基础分子生物学实验主讲：赵主讲：赵主讲：赵主讲：赵 云云云云 王茂林王茂林王茂林王茂林 助教：周云涛（博士生）李华鹏（博士生）高勇（硕士生）助教：周云涛（博士生）李华鹏（博士生）高勇（硕士生）助教：周云涛（博士生）李华鹏（博士生）高勇（硕士生）助教：周云涛（博士生）李华鹏（博士生）高勇（硕士生）实验技术人员：杨卫实验技术人员：杨卫实验技术人员：杨卫实验技术人员：杨卫序号序号实验项目实验项目内容简介内容简介每组每组人数人数实验实验时数时数备注备注1基因基因组组DNA的制的制备备细细菌菌、动物、植物、动物、植物总总DNA的提取；的提取；琼琼脂脂糖凝胶糖凝胶电电泳泳312必修必修2质质粒粒DNA的制的制备备细细菌菌质质粒粒DNA的提取；限制性内切的提取；限制性内切酶酶酶酶切；切；琼琼脂糖凝胶脂糖凝胶电电泳，溴乙泳，溴乙锭锭染色，紫染色，紫外灯下外灯下检测检测，拍照，拍照36必修必修3DNA的重的重组组质质粒粒载载体与外源体与外源DNA片段的片段的连连接；大接；大肠肠杆菌感受杆菌感受态细态细胞的制胞的制备备；重；重组组DNA分子分子导导入原核入原核细细胞；重胞；重组组子的子的鉴鉴定定316必修必修4细细菌基因菌基因组组文文库库的构建的构建基因基因组组文文库库的构建；功能性的构建；功能性筛选筛选阳性克阳性克隆隆38必修必修5植物植物细细胞胞mRNA的提取的提取总总RNA的提取；的提取；mRNA的分离、的分离、纯纯化与化与鉴鉴定定38选选修修6PCR基因基因扩扩增增特定基因片段的特定基因片段的扩扩增；增；电电泳泳检查检查36必修必修7分子分子杂杂交交植物基因组植物基因组DNA的的酶切、酶切、电电泳，泳，转转膜与膜与固定；探固定；探针针的制的制备备，预杂预杂交，交，杂杂交，放交，放射自射自显显影影324选选修修实验项目的选择主要内容u微生物、动物基因组微生物、动物基因组DNA的小量制备（项目的小量制备（项目1）u植物基因的克隆（包含项目植物基因的克隆（包含项目1、2、3、4、6）植物基因组植物基因组DNA的提取的提取TOC33基因片段的PCR扩增主要内容 DNA的琼脂糖凝胶上回收与纯化的琼脂糖凝胶上回收与纯化DNA片段的体外重组与转化片段的体外重组与转化克隆的筛选与鉴定克隆的筛选与鉴定u分子杂交实验（选修）分子杂交实验（选修）SouthernblotNorthernblotWesternblot注意事项注意事项安全：安全：-要求：认真，要求：认真，勤动，遵守实验室规章制度勤动，遵守实验室规章制度 实验室礼节：实验室礼节：-实验报告的撰写：实验报告的撰写：-安全第一！首先，人身安全！首先，人身安全！其次，设备安全！其次，设备安全！最后，环境安全最后，环境安全生物安全！生物安全！Biosafety OverviewWhat You Need to Know When Working With Biological Material-Lab Etiquette1.谦虚有礼2.记住别人的帮助3.有事预约时间4.不随便移动实验室设备、资料，用后还原5.未经许可，不用他人东西6.公用试剂，用完前即准备新的Lab Etiquette7.发现设备破损或有安全隐患，及时处理或报告8.坦承错误9.不乱放自己东西，立即清理实验遗留10.自己做自己的事11.不在实验室作与实验无关的事12.不与实验室以外的人讨论实验室的研究结果-室验报告撰写好的实验报告就是一篇论文！好的实验报告就是一篇论文！背景实验材料实验方法结果分析讨论参考文献主要参考文献林宏辉 赵云 王茂林 陈放。现代生物学基础实验指导。四川大学出版社，成都，2002.8颜子颖，王海林译，精编分子生物学实验指南，科学出版社，北京，1998。魏群主编，分子生物学实验指南，高等教育出版社，北京，1999。