高中生物必修一实验八__叶绿体中色素的提取和分离.doc

实验八 叶绿体中色素的提取和分离
教学目的
1． 初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
2． 探索叶绿体中有几种色素。
实验原理
1． 叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。
2． 色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。
实验程序
（1）称取5g绿色叶片并剪碎
提取色素 研钵→研磨→漏斗过滤→
（2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮 收集到试管内并塞紧管口
（1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时到达滤液细线）
制滤纸条
（2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线
（1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线
滤液划线
（2）干燥后重复划2-3次
（1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准）
纸上层析 （2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中
（3）用培养皿盖盖上烧杯
观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）

最宽：叶绿素a；
最窄：叶绿素b；
相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；
相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。
实验关键
1． 选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
2． 画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进行，重复2-3次。
3． 层析时不要让滤液细线触及层析液。
注意事项
1． 因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。
2． 在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。
3． 分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

【同类题库】
．下列哪一种液体不能作为叶绿体中色素提取液？（C）
A．丙酮溶液 B．酒精溶液 C．水溶液 D．汽油
．在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素是（D）
A．叶绿素a B．叶绿素b C．叶黄素 D．胡萝卜素
．将菠菜叶表皮细胞和人的口腔上皮细胞制成装片，从盖玻片一侧滴入30%的蔗糖溶液，另一侧用吸水纸重复吸收几次，分别放在显微镜下观察，其结果是（D）
A．前者发质壁分离，后者也发生质壁分离 B．前者发生质壁分离，后者破裂
C．前者发质壁分离，后者质壁分离复原 D．前者发生质壁分离，后者皱缩
．如果没有丙酮和菠菜叶，要保证分离后色素带清晰，可以用来替代的最佳实验材料是（A）
A．酒精和麦苗 B．酒精和大白菜 C．蒸馏水和大白菜 D．蒸馏水和麦苗
．用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离实验”，下列不能用作提取剂的是（A）
A．水 B．丙酮 C．酒精 D．CCl4
．为了提取绿色植物叶绿体中的色素，在研磨绿叶时加入少许碳酸钙，其作用是（B）
A．调节PH，加速色素溶解 B．调节PH，防止叶绿素被破坏
C．使绿叶研磨充分 D．有利于四种色素的分开
．在研磨绿叶时，下列哪种物质不需要加入（B）
A．丙酮 B．层析液 C．碳酸钙 D．二氧化硅
．（多选）某学生在做“叶绿体色素的提取和分离实验”时，收集到的滤液呈淡绿色，其原因可能是（AC）
A．叶片较老较黄 B．加入的二氧化硅多了些
C．研磨不充分 D．漏斗基部塞的脱脂棉多了些
．做色素提取和分离实验的正确装置是图中（D）

．在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是（C）
A．滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果
B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散
C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显
D．滤纸条上几种色素会混合起来
．某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈颜色为（D）

A．橙黄色
B．黄色
C．蓝绿色
D．黄绿色

．叶绿体中色素经层析后，出现在滤纸上扩散最宽的色素带是（A），最窄的色素带是（C），最整齐的色素带是（C）
A．叶绿素a B．叶绿素b C．胡萝卜素 D．叶黄素
．叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分离开的原因是（C）
A．色素提取液中的不同色素已分层 B．阳光的照射使不同的色素彼此分开
C．滤纸对各种色素的吸附力不同 D．丙酮酸使色素溶解并彼此分离的扩散速度不同
．在叶绿体色素的提取和分离实验中：
（1）研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入CaCO3的原理是 。
（2）定性滤纸进行干燥处理的目的是 。
（3）对滤纸剪去两角的目的是 。
（4）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免 以取得较好的分离效果。
（5）层析装置加盖的目的是 。
（6）滤纸条上色素带最宽的颜色是 ，相邻色素带间距离最近的是 与 。
[（1）中和细胞中的有机酸（2）使层析液在滤纸条上均匀扩散（3）使层析液同时到达滤液细线（4）色素带部分重叠（5）避免层析液挥发影响效果并引起中毒（6）蓝绿色；叶绿素a；叶绿素b]
．某同学在做“叶绿体中色素的提取和分离”实验时，操作情况如下所述，结果实验失败，请指出其错误所在：
（1）将5克新鲜菠菜剪碎后，放入研钵中，加入酒精、石英砂后，迅速研磨。
（2）用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔细线小心均匀地划出一道滤液细线，并连续迅速地重复划2-3次。
（3）把划好细线的的滤纸条插入层析液中，并不断振荡，以加快层析液在滤纸条上的扩散。
[（1）未加碳酸钙，叶绿素可能会被破坏（2）划滤液细线时，不能连续迅速地重复划2-3次，要待干后才能划第二次，同样划第三次（3）层析时不能振荡烧杯，这样会使滤液细线上的色素部分溶解到层析液中，使色素带不清晰]
．分别在A、B、C三个研钵中加入2克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。
处理
A
B
C
SiO2（少量）
＋
＋
＋
CaCO3（少量）
－
＋
＋
95％乙醇（10毫升）
＋
－
＋
蒸馏水（10毫升）
－
＋
－
注：“＋”表示加；“－”表示不加
试回答：（1）A处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。
（2）B处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。
（3）C处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。
[（1）黄绿色（或褐色）；部分叶绿素受到破坏（2）几乎无色；叶绿素不溶于水（3）深绿色；大量叶绿素溶于乙醇中]