DB2302∕T 053-2023 马铃薯脱毒组培苗假植技术规程(齐齐哈尔市).pdf

ICS 65.020.20 CCS B01 DB2302 齐齐哈尔市地方标准 DB 2302/T 0532023 马铃薯脱毒组培苗假植技术规程 2023-11-01 发布 2023-12-01 实施 齐齐哈尔市市场监督管理局 发布 DB2302/0532023 I 目 次 前言.III 引言.IV 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 3.1 马铃薯组培苗.1 3.2 脱毒马铃薯组培苗.1 3.3 假植.1 4 材料选择.1 5 苗床准备.2 5.1 苗床分类.2 5.2 苗床制备.2 6 培养基质制备.2 6.1 基质选择.2 6.2 基质水肥管理.2 6.3 杀菌与消毒.2 7 温室设施设置.2 8 组培苗移栽.2 8.1 脱毒组培苗假植时间.2 8.2 脱毒苗炼苗.2 8.3 清理组培苗根部培养基.3 8.4 生根剂处理.3 8.5 脱毒苗移栽.3 8.6 苗源扦插.3 9 温室管理.4 9.1 温湿度管理.4 9.2 营养管理.4 10 移栽与扦插注意事项.5 10.1 移栽工具.5 10.2 移栽操作.5 10.3 品种管理.5 10.4 定植后组培苗管理.5 11 档案管理.5 DB2302/0532023 II 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由黑龙江省农业科学院克山分院提出。本文件由齐齐哈尔市农业农村局归口。本文件起草单位：黑龙江省农业科学院克山分院。本文件主要起草人：杨梦平、宋继玲、娄树宝、刘喜才、刘春生、翟玲侠、邢金月、孙旭红、张勇、王磊、李志新、王立春。DB2302/0532023 III 引 言 由于马铃薯是无性繁殖作物，经过多年留种种植后，体内病毒逐代传递并积累，使马铃薯植株矮化，茎秆细弱，叶片失绿、卷曲或皱缩，薯块变小或畸形而减产，对生产造成严重的危害。马铃薯茎尖脱毒技术的出现，有效地防止了病毒感染和品种退化，提高了良种繁育的速度和产量。马铃薯脱毒组培苗假植技术作为马铃薯脱毒种薯繁育的重要环节之一，在生产上推广应用具有重要的现实意义。黑龙江省农业科学院克山分院从40多年的脱毒组培苗温室假植工作中不断总结经验，改进技术，建立了一套便捷、快速、安全、存活率高、长势良好的组培苗假植技术体系，总结出一套马铃薯脱毒组培苗假植技术规程。DB2302/0532023 1 马铃薯脱毒组培苗假植技术规程 1 范围 本文件规定了马铃薯脱毒组培苗假植过程中的术语与定义、材料选择、苗床准备、培养基质制备、温室园艺措施设置、组培苗移栽、温室管理及移栽扦插注意事项等技术要求。本文件适用于齐齐哈尔地域内马铃薯脱毒组培苗的假植与管理。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T29378 马铃薯脱毒种薯生产技术规程 NY/T1606 马铃薯种薯生产技术操作规程 NY/T 1962 马铃薯纺锤块茎类病毒检测 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 马铃薯组培苗 根据马铃薯植物细胞具有全能性的理论，利用外植体，在无菌和适宜的人工条件下，培育的完整植株。3.2 脱毒马铃薯组培苗 经检测确认不携带马铃薯 X 病毒(PVX)、马铃薯 Y 病毒(PVY)、马铃薯 S 病毒(PVS)、马铃薯卷叶病毒(PLRV)、马铃薯 A 病毒（PVA）、马铃薯 M 病毒（PVM）和马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTVd）的组培苗。3.3 假植 是脱毒组培苗在网棚定植前的一种临时保护性措施。脱毒组培苗从组培器皿中取出后不立即定植，DB2302/0532023 2 暂时将其种植于温室内，提高组培苗移栽到网棚后对生长条件的适应性与成活率的过程。4 材料选择 选择类病毒与病毒病检测全阴性组培苗，肉眼观察试管内植株与根系健康、无污染，植株为 5cm以上，叶片 5 片7 片最佳。5 苗床准备 5.1 苗床分类 苗床分为三类：第一类在畦面铺4cm左右厚的小石子与土壤隔绝，小石子做畦，上面铺纱网和黑膜；第二类是用钢丝和铝合金做成的低架苗床，架起来离地5cm10cm；第三类使用钢丝和铝合金做成的高架苗床，以水泥墩子为基座，以角铁为支柱的床架，离地60cm80cm。5.2 苗床制备 三种类型的苗床均先铺纱网，再铺黑地膜，黑地膜规格0.2mm，在铺培养基质之前于黑地膜上前后左右每隔40cm扎小孔，小孔不宜过大（不能透过小孔看到网纱），便于根系通气，不存水。也可以采用黑地布铺于苗床，透气性更佳，但成本略贵。每季收货完毕，黑地膜需重新更换，纱网经消毒后可重复利用。苗床挡板高度10cm12cm。6 培养基质制备 6.1 基质选择 移栽脱毒苗的苗床基质关键是疏松通气，适宜的保水性，而且不易滋生杂菌。一般选用粗粒状蛭石、细沙、蚯蚓粪、椰糠等，其中最常用的是蛭石，椰糠需提前浸泡，或将蛭石和珍珠岩按11配比作为培养基质。6.2 基质水肥管理 将基质平铺于苗床中约7cm左右，撒底肥，每平方米基质施40g50g氮磷钾复合肥（1：2：1），也可以将肥溶于水后喷施，或喷施MS营养液（见表1），每平方米基质喷施1000ml营养液，再平铺3cm厚基质。于栽苗前1d2d喷施清水，使基质充分吸水，手握成团指缝见水但不滴水为宜。6.3 杀菌与消毒 使用代森锰锌 750800 倍液，或多菌灵 1000 倍液，或百菌清 600800 倍液中的任意一种，对温室和苗床进行全面消毒。7 温室设施设置 温室所处位置需远离茄科作物。智能温室中，内部可设置可移动高架苗床，自动供水肥、喷药和排水系统，统一电动遮阳网，可电动覆盖御寒小棉被。有供暖提温系统，满足假植苗及微型薯的生长需求。温室需有风机、水帘或坡型内带纱网的通风窗，当温度过高时可及时排风降温。DB2302/0532023 3 8 组培苗移栽 8.1 脱毒组培苗假植时间 马铃薯脱毒组培苗5月中上旬于温室假植为宜。8.2 脱毒苗炼苗 若培养器皿中组培苗株数较多，苗较弱，需将容器内的组培苗移置到温室炼苗，通过光培炼苗，尽可能使试管苗适应外界生存的环境，以提高移栽成活率。脱毒马铃薯组培苗移栽前，首先打开组培瓶口（或拔掉试管塞），逐渐降低湿度，增强自然光光照。炼苗5d7d后移栽至苗床。组培器皿洗净送回组培室再次利用。若组培苗植株健壮，株高8cm10cm，叶片舒展，叶面积较大，叶片数810片，根系发育正常，根系长9cm10cm，则无需炼苗，可直接移栽。8.3 清理组培苗根部培养基 需人工将组培苗根部培养基清理干净：一种是用清水洗除组培苗根部的培养基，然后移栽；另一种是人工用手清理干净组培苗根部培养基，不过水直接移栽。第二种方法移栽的组培苗成活率和生长势一般高于第一种方法移栽的组培苗。8.4 生根剂处理 8.4.1 直接移栽 若脱毒组培苗移栽时间较早，距离定植时间充裕，且组培苗植株健壮，则无需进行生根处理，直接移栽的组培苗也可以正常生长发育。8.4.2 生根处理 若组培苗植株弱，或移栽时间晚，组培苗移栽前可采用1010-6浓度的ABT生根粉（1gABT生根粉溶解于500mL 75%乙醇中，加500mL水，定容至1000mL，即为100010-6母液，取10mL母液加入至1000mL水中则得到1010-6浓度的ABT生根粉）浸根15min20min，诱导不定根的生成，促进侧根增多，处理过的苗生根会比未处理的苗生根略快。8.5 脱毒苗移栽 8.5.1 取苗 移栽前浸湿或浇湿苗床基质，移栽时一定要避开中午的强光，或采取遮阳网遮荫措施，降低光强。在装载清理过根部的组培苗的容器内放入湿润的无纺布，将组培苗整齐地摆放在无纺布上，同时也要在容器上盖上湿润的无纺布或薄布，送往温室移栽，当天取出的苗，当天移栽完成，以保证高成活率和正常的生长发育。8.5.2 移栽 移栽时采用开浅沟栽苗，按行距 4cm5cm，株距 3cm 左右开深 1cm2cm 的浅沟，将组培苗栽入；或使用筷子、木棍等在苗床基质上每间隔 3cm 左右钻出深 2cm3cm 的圆孔，用镊子轻轻夹住组培苗根部将其栽入圆孔中。两种方法均大苗宜深，小苗宜浅，栽后轻轻挤压苗基部，并用喷（洒）壶适时适量喷（洒）水，使苗根部与基质接触，但不可出现积水现象。8.6 苗源扦插 DB2302/0532023 4 8.6.1 苗源标准 从苗源植株上剪二叶一心的生长点，作为扦插苗。8.6.2 扦插条件 扦插苗移栽具备以下条件：苗床湿润；苗床晚间温度不能低于 10；植株生长点抱紧向上；母苗苗龄较小。8.6.3 扦插方法 剪取扦插苗需呈 Y 字形，浸泡 1010-6浓度的 ABT 生根粉后，控水移栽。9 温室管理 9.1 温湿度管理 9.1.1 移栽初期温湿度管理 组培苗移栽后，根据温室内温度和光照强度适当遮荫，控制光温条件。刚移栽的马铃薯脱毒试管苗不能经受强光照射和干旱缺水，栽后每天早晨要补水增湿，需浇透而不存水，切忌出现上表层湿、培养基质中部和底部干的情况，遮阳网要做到早晚揭、中午盖，室内温度白天控制在 2530，夜间不能低于 15，湿度 90%左右。9.1.2 移栽中后期温湿度管理 移栽 7d10d 缓苗结束后，揭去遮阳网，延长光照时间，增加光照强度，加大通风排湿。温度白天控制在 1821，夜间不低于 12，湿度 50%左右。9.2 营养管理 植株根系正常生长后，进入苗期生长，可每隔 5 d7d 喷施一次营养液，营养液可选用半量 MS 营养液（见表 1）逐步过渡到全量营养液，也可选用 K5 营养液（见表 2）。喷洒次数依据苗情来定，每次喷洒营养液后都要喷洒清水。水温过低时，需提前在贮水池中存放 2 d3d 后使用。营养液需提前 1 d2d 配制，先配制母液，然后稀释，pH 值为 5.86.0。若苗出现徒长现象，可喷施多效唑或矮壮素进行控制。DB2302/0532023 5 表 1 MS 培养液配方 母液序号 成份 使用浓度(mg/L)1 硝酸铵 NH4NO3 1650 硝酸钾 KNO3 1900 磷酸二氢钾 KH2PO4 170 硫酸镁 MgSO4.7H2O 370 氯化钙 CaCl2.2H2O 440 2 硫酸亚铁 FeSO4.7H2O 27.8 乙二胺四乙酸二钠 CHNNaO 37.3 3 碘化钾 KI 0.83 钼酸钠 Na2MoO4.2H2O 0.25 硫酸铜 CuSO4.5H2O 0.025 硫酸锰 MnSO4.H2O 22.3 硫酸锌 ZnSO4.7H2O 8.6 氯化钴 CoCl2.6H2O 0.025 硼酸 H3BO3 6.2 4 盐酸硫胺素 VB1 0.4 5 盐酸吡哆辛 VB6 0.5 6 甘氨酸 CHNO 2 7 菸酸 NC5H4COOH 0.5 8 肌醇 C6H12O6 10 表 2 K5 营养液配方 母液序号 成份 使用浓度(mg/L)1 硝酸钾 KNO3 1000 磷酸二氢钾 KH2PO4 300 2 硫酸镁 MgSO4.7H2O 500 硝酸铵 NH4NO3 167 3 硝酸钙 Ca(NO3)100 4 硫酸锰 MnSO4.H2O 22.3 硫酸锌 ZnSO4.7H2O 8.6 硼酸 H3BO3 6.2 钼酸钠 Na2MoO4.2H2O 0.25 硫酸铜 CuSO4.5H2O 0.025 5 硫酸亚铁 FeSO47H2O 28 乙二胺四乙酸二钠 CHNNaO 37 10 移栽与扦插注意事项 10.1 移栽工具 DB2302/0532023 6 移栽时使用的镊子和剪刀需定期清理与消毒，尤其更换移栽品种时，需将放苗的容器、保湿布等工具统一清洗消毒。10.2 移栽操作 注意使用镊子时的姿势和力度，切忌将组培苗折断、损坏，应用镊子轻轻夹住根部位置栽于土中，根系需紧贴培养基质，不能暴露在空气中。10.3 品种管理 若温室内假植多个品种时，需做好标注，将品种名用防水笔写在插地牌上插入苗床中，此外还需做好温室品种分布图，以防后期管理中不慎造成插地牌丢失或混乱，不同品种间需保持一定距离。10.4 定植后组培苗管理 马铃薯假植苗一般于6月份定植于网棚中，未移出定植的假植苗需继续进行温室温湿度及水肥管理与病虫害防控，直至收获结束。11 档案管理 建立马铃薯脱毒组培苗假植技术档案，内容包括组培苗品种、假植时间、假植数量、操作人员、成活率、营养管理时间、品种布置图、定植日期等，档案至少保存2年以上。_