食品微生物检验常用仪器设备学习PPT教案.pptx

2024/11/8 周五1一、常用仪器及其使用显微镜冰箱超净工作台、杀菌锅离心机水浴锅、培养箱烘箱或干燥箱匀质器各种玻璃器材2024/11/8 周五2（一）显微镜2024/11/8 周五3普通显微镜的保养1、观察完后，移去观察的载玻片标本。2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭23次，最后再用擦镜纸将擦镜液二甲苯擦去。3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。2024/11/8 周五4数字显微镜2024/11/8 周五52024/11/8 周五61.智能隔水恒温培养箱2.隔水培养箱3.电热培养箱4生化培养箱（二）、培养箱1.智能隔水恒温培养箱2.隔水培养箱3.电热培养箱4.生化培养箱2024/11/8 周五7卧式恒温振荡培养箱电热恒温培养箱1、普通恒温培养箱2024/11/8 周五8智能培养箱微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能，镜面不锈钢内胆，外门内层用一层门，观察箱内情况时不影响箱内温度。9000系列隔水式加热方式，具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。2024/11/8 周五9隔水式培养箱隔水式培养箱数字控温，不锈钢内胆，俗称水夹套培养箱。温度均匀，断电后仍能保持较长时间恒温。2024/11/8 周五10电热恒温培养箱2024/11/8 周五11幻灯片放映2、生化培养箱2024/11/8 周五123、二氧化碳培养箱2024/11/8 周五13培养箱的配置和使用配置：22（）、30（）、37（）培养箱各一个使用注意事项：(1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。(2)内放一杯水，以保持湿度。(3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。(4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。(5)不得当烘箱使用。2024/11/8 周五142024/11/8 周五154、水浴锅（1）37和42水浴锅24小时工作；（2）其余水浴锅用后关掉电源；（3）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。配置：37、42、56各一个2024/11/8 周五162024/11/8 周五17匀浆机（三）匀质器2024/11/8 周五18高速匀浆机无菌均质器无菌均质器该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交叉污染。2024/11/8 周五19（四）、超净工作台三大类型：侧流式、直流式和外流式2024/11/8 周五20垂直流超净工作台2024/11/8 周五21水平单向流洁净工作台2024/11/8 周五22超净台的使用和注意事项1 1、使用前先打开紫外灯照射，紫外、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射照射时间40604060分分钟；2 2、使用中，有机玻璃罩受到、使用中，有机玻璃罩受到污染，染，严禁用酒精棉球擦拭，禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭；3 3、请保持超保持超净台整台整洁，不要堆，不要堆积杂物；物；4 4、使用完、使用完毕，勿忘关，勿忘关闭煤气开关或酒精灯；煤气开关或酒精灯；5 5、请做好使用做好使用记录。6 6、如遇故障，除、如遇故障，除记录在册外，在册外，还应及及时与有关人与有关人员联系，系，尽早排除故障。7 7、学期开始做无菌、学期开始做无菌试验一次，以保一次，以保证净化台正常使用。平化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。2024/11/8 周五23（五）、离心机离心机的类型：普通离心机 高速离心机 超速离心机2024/11/8 周五24类型普通离心机高速离心机超速离心机最 大 转 速(r/min)600025000可达75000以上最大RCF（g）600089000可达510000以上分离形式固液沉淀固液沉淀分离密度梯度区带分离或差速沉降分离转子角式和外摆式转子角式、外摆式转子等角式、外摆式、区带转子等仪器结构性能和特点速率不能严格控制，多数室温下操作有消除空气和转子间摩擦热的制冷装置，速率和温度控制较准确、严格。备有消除转子与空气摩擦热的真空和冷却系统，有更为精确的温度和速度控制、监测系统、有保证转子正常运转的传动和制动装置等。应用收集易沉降的大颗粒（如RBC、酵母细胞等）收集微生物、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小细胞器（如核糖体）、蛋白质等大分子。主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等甚至能分开分子大小相近的同位素标记物15N-DNA和未标记的DNA。2024/11/8 周五25台式高速冷冻离心机2024/11/8 周五262024/11/8 周五272024/11/8 周五28差速沉降（沉淀）法：密度梯度离心法：2024/11/8 周五29转子许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。1水平转子：盛样品的离心管放在吊桶内，以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。2角式转子：许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短，沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。3垂直管转子：用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。转子：（a）水平转子；（b）固定转角转子；（c）垂直离心管转子2024/11/8 周五30（六）、灭菌器干热灭菌器湿热灭菌器2024/11/8 周五311、电烘箱（干燥箱）用途：用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。玻璃器皿等物的灭菌，温度160165，灭菌2小时。2024/11/8 周五322024/11/8 周五33玻璃器材的干热灭菌方法(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。(2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160165保持2小时即可。(5)待自然降温冷却后(60以下)才能开门取出玻璃器皿。2024/11/8 周五342、高压灭菌锅用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。种类：手提式、立式、卧式杀菌锅2024/11/8 周五35不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）全自动高压灭菌器2024/11/8 周五362024/11/8 周五37大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法1.放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位；2.放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针拨至“关”；3.选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电源；4.当温度达到100左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止；5.当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。2024/11/8 周五38使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项A：为避免烫伤，只有当温度降低到70以下时放可小心的打开消毒锅门。B：为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70时就可慢慢把门打开。C：根据消毒物品选择排气方式：（1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。（2）.如只有废品等可选择快排。2024/11/8 周五39手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。（2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。（3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。（4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。2024/11/8 周五40（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除。（6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。（7）、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。2024/11/8 周五41思考题干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何?电热烘箱和高压锅如何操作?各有哪些使用注意事项?2024/11/8 周五423、滤菌器2024/11/8 周五43MF75快速抽滤器方便过滤1000ml容量的培养液、缓冲液等，可直接保存和分装。可高温灭菌。Nalgene可反复用抽滤装置2024/11/8 周五44（七）、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取完后及时将有用物品放回原处；2、关冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好;3、冰柜内的不要样品应及时清理。2024/11/8 周五452024/11/8 周五46菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪2024/11/8 周五471、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化，或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化，快速测定样品中细菌含量数目。2、适用于各种食品，制药，石化工厂的微生物品质管理，取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。快速自动菌数导电测定仪2024/11/8 周五48细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作，避免人工操作的误差，数据精确，省时省力。是您作细胞研究的好助手，是研究细胞的更高层次的选择细胞/颗粒分析计数仪空气微生物检测仪 2024/11/8 周五49适合CGMP药厂,食品加工厂,医院手术防,无尘无菌室室Class100100000之等级微粒子落塵计数器 2024/11/8 周五50二、常用玻璃仪器及用具2024/11/8 周五511、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml（一）量器类2024/11/8 周五522、容量瓶50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml2024/11/8 周五533、量筒容量（ml）10、25、50、100、25053、500、1000、20002024/11/8 周五54固定体积移液器数字型可调移液器P型4、微量取样器2024/11/8 周五55（二）、其他常用玻璃器皿2024/11/8 周五563.5cm,7cm，9cm，15cm1、培养皿2024/11/8 周五572、试管2024/11/8 周五582024/11/8 周五59各种试管的使用13mmX100mm：生化反应及凝集反应15mmX150mm：斜面培养18mmX180mm：检样稀释2024/11/8 周五60型号150ml，200ml，250ml，500ml，1L，2L，3L3、三角瓶2024/11/8 周五61烧杯容量（ml）：30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、30002024/11/8 周五62三、玻璃器皿的清洗和灭菌(一一)、新、新购的玻璃器皿的玻璃器皿 1 1、先用、先用热肥皂水刷洗，流水冲肥皂水刷洗，流水冲净。2 2、再浸泡于的、再浸泡于的盐酸中数小酸中数小时，最后用流水冲净。2024/11/8 周五63(二二)、用、用过的玻璃器皿的玻璃器皿2024/11/8 周五641、含油脂器材的清洗（1）、单独高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；（3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100烘箱中烤0.5h;（4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。2024/11/8 周五652、含菌试管的清洗高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。2024/11/8 周五663、含菌平皿的灭菌（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；（3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。2024/11/8 周五674、含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液内浸泡30min以上杀菌；（2）、用肥皂水洗涤一次；（3）、最后用清水冲洗干净即可。2024/11/8 周五685、载玻片及盖玻片的清洗（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5%的来苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；（2）盖片用软布擦干即可；（3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。2024/11/8 周五69（三）、玻璃器材的灭菌（1）清洗后烘干；（2）加塞包扎；（3）灭菌:干热灭菌:160165烘箱中烤2h湿热灭菌:12120min2024/11/8 周五70思考题1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题?2、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题?3、如何正确使用超净台?4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌?5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法？6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?