结核病实验室生物安全与菌株运输.ppt

结核病实验室生物安全结核病实验室生物安全及菌株运输及菌株运输内 容一、结核病实验室生物安全一、结核病实验室生物安全二、结核菌株或样本运输二、结核菌株或样本运输三、风险评估三、风险评估一、结核病实验室生物安全一、结核病实验室生物安全结核杆菌的生物学性状结核杆菌的生物学性状1 1 1 1、结核杆菌为细长、结核杆菌为细长、结核杆菌为细长、结核杆菌为细长略带弯曲略带弯曲略带弯曲略带弯曲的杆菌，约的杆菌，约的杆菌，约的杆菌，约1-41-41-41-40.3-0.60.3-0.60.3-0.60.3-0.6 m m m m，常聚集成团，牛型比人型略粗短；常聚集成团，牛型比人型略粗短；常聚集成团，牛型比人型略粗短；常聚集成团，牛型比人型略粗短；2 2 2 2、分枝杆菌属的细菌、分枝杆菌属的细菌、分枝杆菌属的细菌、分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质细胞壁脂质细胞壁脂质细胞壁脂质含量较高，约占干重的含量较高，约占干重的含量较高，约占干重的含量较高，约占干重的 60%60%60%60%，特别是其中的大量分枝菌酸可影响染料的穿入；，特别是其中的大量分枝菌酸可影响染料的穿入；，特别是其中的大量分枝菌酸可影响染料的穿入；，特别是其中的大量分枝菌酸可影响染料的穿入；3 3 3 3、一般用、一般用、一般用、一般用萋萋萋萋-尼（尼（尼（尼（Ziehl NeelsenZiehl NeelsenZiehl NeelsenZiehl Neelsen）抗酸性染色法，以抗酸性染色法，以抗酸性染色法，以抗酸性染色法，以5%5%5%5%石石石石炭酸复红炭酸复红炭酸复红炭酸复红加温染色后可以染上，但着色后不易被盐酸酒加温染色后可以染上，但着色后不易被盐酸酒加温染色后可以染上，但着色后不易被盐酸酒加温染色后可以染上，但着色后不易被盐酸酒精脱色；精脱色；精脱色；精脱色；结核杆菌的生物学性状结核杆菌的生物学性状4 4 4 4、若再加用、若再加用、若再加用、若再加用美蓝美蓝美蓝美蓝复染，则分枝杆菌呈复染，则分枝杆菌呈复染，则分枝杆菌呈复染，则分枝杆菌呈红色红色红色红色，而其它细菌及，而其它细菌及，而其它细菌及，而其它细菌及 背景中的物质为背景中的物质为背景中的物质为背景中的物质为蓝色蓝色蓝色蓝色；5 5 5 5、专性需氧，最适温度为、专性需氧，最适温度为、专性需氧，最适温度为、专性需氧，最适温度为37373737，低于，低于，低于，低于30303030或高于或高于或高于或高于42424242均不均不均不均不 生长；营养要求较高，生长缓慢，初次分离需要营养丰生长；营养要求较高，生长缓慢，初次分离需要营养丰生长；营养要求较高，生长缓慢，初次分离需要营养丰生长；营养要求较高，生长缓慢，初次分离需要营养丰 富的培养基。常用的有富的培养基。常用的有富的培养基。常用的有富的培养基。常用的有Lowenstein-JensenLowenstein-JensenLowenstein-JensenLowenstein-Jensen培养基培养基培养基培养基，内，内，内，内 含蛋黄、甘油、无机盐和孔雀绿等。含蛋黄、甘油、无机盐和孔雀绿等。含蛋黄、甘油、无机盐和孔雀绿等。含蛋黄、甘油、无机盐和孔雀绿等。6 6 6 6、细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质吸收，故、细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质吸收，故、细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质吸收，故、细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质吸收，故生长缓生长缓生长缓生长缓 慢慢慢慢，在一般培养基中每分裂一代需要，在一般培养基中每分裂一代需要，在一般培养基中每分裂一代需要，在一般培养基中每分裂一代需要10101010多个小时，在人多个小时，在人多个小时，在人多个小时，在人 体内需体内需体内需体内需24-3624-3624-3624-36小时小时小时小时；结核杆菌的生物学性状结核杆菌的生物学性状7 7 7 7、一般、一般、一般、一般10-3010-3010-3010-30天天天天可见菌落生长，菌落呈颗粒、结节或花菜可见菌落生长，菌落呈颗粒、结节或花菜可见菌落生长，菌落呈颗粒、结节或花菜可见菌落生长，菌落呈颗粒、结节或花菜 状，乳白色或米黄色，不透明；状，乳白色或米黄色，不透明；状，乳白色或米黄色，不透明；状，乳白色或米黄色，不透明；8 8 8 8、结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可防止菌体水分的丢、结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可防止菌体水分的丢、结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可防止菌体水分的丢、结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可防止菌体水分的丢 失，故对失，故对失，故对失，故对干燥的抵抗力特别强干燥的抵抗力特别强干燥的抵抗力特别强干燥的抵抗力特别强，沾附在尘埃上保持传染，沾附在尘埃上保持传染，沾附在尘埃上保持传染，沾附在尘埃上保持传染 性性性性8-108-108-108-10天，在干燥痰内可存活天，在干燥痰内可存活天，在干燥痰内可存活天，在干燥痰内可存活6-86-86-86-8个月个月个月个月；9 9 9 9、结核杆菌对、结核杆菌对、结核杆菌对、结核杆菌对湿热敏感湿热敏感湿热敏感湿热敏感，在液体中，在液体中，在液体中，在液体中加热加热加热加热62-6362-6362-6362-63后后后后15151515分钟分钟分钟分钟 或或或或煮沸煮沸煮沸煮沸即被杀死；即被杀死；即被杀死；即被杀死；结核杆菌的生物学性状结核杆菌的生物学性状10101010、结核杆菌对、结核杆菌对、结核杆菌对、结核杆菌对紫外线敏感紫外线敏感紫外线敏感紫外线敏感，直接日光照射，直接日光照射，直接日光照射，直接日光照射数小时数小时数小时数小时可被杀可被杀可被杀可被杀 死，可用于结核患者衣服、书籍等的消毒；死，可用于结核患者衣服、书籍等的消毒；死，可用于结核患者衣服、书籍等的消毒；死，可用于结核患者衣服、书籍等的消毒；11111111、结核杆菌的抵抗力与环境中、结核杆菌的抵抗力与环境中、结核杆菌的抵抗力与环境中、结核杆菌的抵抗力与环境中有机物有机物有机物有机物的存在有密切关系，的存在有密切关系，的存在有密切关系，的存在有密切关系，如如如如痰液痰液痰液痰液可增强结核杆菌的抵抗力，因大多数消毒剂可使可增强结核杆菌的抵抗力，因大多数消毒剂可使可增强结核杆菌的抵抗力，因大多数消毒剂可使可增强结核杆菌的抵抗力，因大多数消毒剂可使痰中的痰中的痰中的痰中的蛋白质凝固蛋白质凝固蛋白质凝固蛋白质凝固，包在细菌周围，使细菌不易被杀死；，包在细菌周围，使细菌不易被杀死；，包在细菌周围，使细菌不易被杀死；，包在细菌周围，使细菌不易被杀死；12121212、5%5%5%5%的石炭酸的石炭酸的石炭酸的石炭酸在无痰时在无痰时在无痰时在无痰时30303030分钟分钟分钟分钟可杀死结核杆菌，有痰时可杀死结核杆菌，有痰时可杀死结核杆菌，有痰时可杀死结核杆菌，有痰时需要需要需要需要24242424小时小时小时小时；5%5%5%5%的来苏儿的来苏儿的来苏儿的来苏儿无痰时无痰时无痰时无痰时5 5 5 5分钟分钟分钟分钟杀死结核杆菌，杀死结核杆菌，杀死结核杆菌，杀死结核杆菌，有痰时需要有痰时需要有痰时需要有痰时需要1-21-21-21-2小时小时小时小时；结核杆菌的生物学性状结核杆菌的生物学性状13131313、结核杆菌对酸（、结核杆菌对酸（、结核杆菌对酸（、结核杆菌对酸（3%HCL3%HCL3%HCL3%HCL）或碱（）或碱（）或碱（）或碱（4%NaOH4%NaOH4%NaOH4%NaOH）有抵抗力，）有抵抗力，）有抵抗力，）有抵抗力，15151515分钟分钟分钟分钟不受影响，可在分离培养时用于处理有杂菌污染的不受影响，可在分离培养时用于处理有杂菌污染的不受影响，可在分离培养时用于处理有杂菌污染的不受影响，可在分离培养时用于处理有杂菌污染的标本和消化标本中的粘稠物质；标本和消化标本中的粘稠物质；标本和消化标本中的粘稠物质；标本和消化标本中的粘稠物质；14141414、结核杆菌对、结核杆菌对、结核杆菌对、结核杆菌对1 1 1 1：75000750007500075000结晶紫结晶紫结晶紫结晶紫或或或或1 1 1 1：13000130001300013000孔雀绿孔雀绿孔雀绿孔雀绿有抵抗有抵抗有抵抗有抵抗力，加在培养基中可抑制杂菌生长；力，加在培养基中可抑制杂菌生长；力，加在培养基中可抑制杂菌生长；力，加在培养基中可抑制杂菌生长；15151515、结核杆菌对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙、结核杆菌对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙、结核杆菌对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙、结核杆菌对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡拉霉素、对氨水杨酸等胺丁醇、卡拉霉素、对氨水杨酸等胺丁醇、卡拉霉素、对氨水杨酸等胺丁醇、卡拉霉素、对氨水杨酸等敏感敏感敏感敏感，但长期用药容，但长期用药容，但长期用药容，但长期用药容易出现易出现易出现易出现耐药性耐药性耐药性耐药性，而吡嗪酰胺的，而吡嗪酰胺的，而吡嗪酰胺的，而吡嗪酰胺的耐药性耐药性耐药性耐药性5%5%5%5%。实验室安全操作实验室安全操作原则原则1 1 1 1、实验室应按等级要求、实验室应按等级要求、实验室应按等级要求、实验室应按等级要求完善实验设施完善实验设施完善实验设施完善实验设施，如生物安全柜的抽，如生物安全柜的抽，如生物安全柜的抽，如生物安全柜的抽 风排风功能、紫外灯消毒、生物安全柜内的除菌滤膜定风排风功能、紫外灯消毒、生物安全柜内的除菌滤膜定风排风功能、紫外灯消毒、生物安全柜内的除菌滤膜定风排风功能、紫外灯消毒、生物安全柜内的除菌滤膜定 期更换等；期更换等；期更换等；期更换等；2 2 2 2、普通实验室应、普通实验室应、普通实验室应、普通实验室应注意气流方向注意气流方向注意气流方向注意气流方向，实验过程中尽量避免强气，实验过程中尽量避免强气，实验过程中尽量避免强气，实验过程中尽量避免强气 流变化而产生气溶胶（如：人员走动等流变化而产生气溶胶（如：人员走动等流变化而产生气溶胶（如：人员走动等流变化而产生气溶胶（如：人员走动等 ）；）；）；）；3 3 3 3、易产生气溶胶或出现溅出的操作、易产生气溶胶或出现溅出的操作、易产生气溶胶或出现溅出的操作、易产生气溶胶或出现溅出的操作,如涂片、离心或其它操如涂片、离心或其它操如涂片、离心或其它操如涂片、离心或其它操 作，应在作，应在作，应在作，应在BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2实验室实验室实验室实验室的的的的级生物安全柜级生物安全柜级生物安全柜级生物安全柜中进行，并使用中进行，并使用中进行，并使用中进行，并使用个体防护个体防护个体防护个体防护设备；设备；设备；设备；4 4 4 4、尽可能、尽可能、尽可能、尽可能减少使用注射器针头减少使用注射器针头减少使用注射器针头减少使用注射器针头，实验中使用注射器时，用过，实验中使用注射器时，用过，实验中使用注射器时，用过，实验中使用注射器时，用过 的针头的针头的针头的针头切勿切勿切勿切勿再再再再重新入套重新入套重新入套重新入套或拔开注射器与针头，应直接放入或拔开注射器与针头，应直接放入或拔开注射器与针头，应直接放入或拔开注射器与针头，应直接放入 锐气收集器锐气收集器锐气收集器锐气收集器，以免划破皮肤造成接种感染；，以免划破皮肤造成接种感染；，以免划破皮肤造成接种感染；，以免划破皮肤造成接种感染；5 5 5 5、试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被、试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被、试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被、试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被 污染的实验器械或物品，能够高压的必须进行污染的实验器械或物品，能够高压的必须进行污染的实验器械或物品，能够高压的必须进行污染的实验器械或物品，能够高压的必须进行高压消毒高压消毒高压消毒高压消毒；6 6 6 6、实验中发生、实验中发生、实验中发生、实验中发生意外污染意外污染意外污染意外污染情况，应情况，应情况，应情况，应立即报告立即报告立即报告立即报告。实验室安全操作实验室安全操作原则原则实验室安全操作实验室安全操作-意外事故处理意外事故处理1 1 1 1、实验过程中，如标本或含标本的前消化处理液被打翻，、实验过程中，如标本或含标本的前消化处理液被打翻，、实验过程中，如标本或含标本的前消化处理液被打翻，、实验过程中，如标本或含标本的前消化处理液被打翻，污染操作台或地面，应以吸满污染操作台或地面，应以吸满污染操作台或地面，应以吸满污染操作台或地面，应以吸满75757575乙醇乙醇乙醇乙醇溶液的卫生纸覆溶液的卫生纸覆溶液的卫生纸覆溶液的卫生纸覆 盖污染区，盖污染区，盖污染区，盖污染区，15151515分钟分钟分钟分钟后卫生纸方可移去；后卫生纸方可移去；后卫生纸方可移去；后卫生纸方可移去；2 2 2 2、实验过程中，如污染物溅落到身体表面，或有割伤、刺、实验过程中，如污染物溅落到身体表面，或有割伤、刺、实验过程中，如污染物溅落到身体表面，或有割伤、刺、实验过程中，如污染物溅落到身体表面，或有割伤、刺 伤、烧伤、烫伤等情况发生，应伤、烧伤、烫伤等情况发生，应伤、烧伤、烫伤等情况发生，应伤、烧伤、烫伤等情况发生，应立即停止立即停止立即停止立即停止实验并进行紧实验并进行紧实验并进行紧实验并进行紧 急处理；更换被污染的工作服，皮肤表面用急处理；更换被污染的工作服，皮肤表面用急处理；更换被污染的工作服，皮肤表面用急处理；更换被污染的工作服，皮肤表面用消毒液消毒液消毒液消毒液清清清清 洗，伤口以洗，伤口以洗，伤口以洗，伤口以碘酒碘酒碘酒碘酒及及及及酒精酒精酒精酒精消毒，眼睛用消毒，眼睛用消毒，眼睛用消毒，眼睛用无菌生理盐水无菌生理盐水无菌生理盐水无菌生理盐水冲洗；冲洗；冲洗；冲洗；3 3 3 3、被污染的器械等立即浸泡于、被污染的器械等立即浸泡于、被污染的器械等立即浸泡于、被污染的器械等立即浸泡于含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂或或或或75757575乙醇乙醇乙醇乙醇等溶等溶等溶等溶 液中，实验完成后再进行液中，实验完成后再进行液中，实验完成后再进行液中，实验完成后再进行高压消毒高压消毒高压消毒高压消毒处理；处理；处理；处理；4 4 4 4、如果发生气溶胶污染或大面积污染，应、如果发生气溶胶污染或大面积污染，应、如果发生气溶胶污染或大面积污染，应、如果发生气溶胶污染或大面积污染，应立即停止立即停止立即停止立即停止实验并实验并实验并实验并 关闭关闭关闭关闭实验室，对实验区域和实验室进行实验室，对实验区域和实验室进行实验室，对实验区域和实验室进行实验室，对实验区域和实验室进行紫外灯照射紫外灯照射紫外灯照射紫外灯照射消毒消毒消毒消毒2 2 2 2 小时以上小时以上小时以上小时以上；对污染区域进行；对污染区域进行；对污染区域进行；对污染区域进行空气熏蒸空气熏蒸空气熏蒸空气熏蒸消毒。消毒。消毒。消毒。实验室安全操作实验室安全操作-绝对禁止绝对禁止的处理方法的处理方法1 1 1 1、有可能造成污染面积扩大，如使用、有可能造成污染面积扩大，如使用、有可能造成污染面积扩大，如使用、有可能造成污染面积扩大，如使用75757575乙醇乙醇乙醇乙醇或或或或甲酚皂液甲酚皂液甲酚皂液甲酚皂液 擦洗擦洗擦洗擦洗被污染的区域；被污染的区域；被污染的区域；被污染的区域；2 2 2 2、直接用火焰直接用火焰直接用火焰直接用火焰对未经任何处理的污染地面、操作台、器械对未经任何处理的污染地面、操作台、器械对未经任何处理的污染地面、操作台、器械对未经任何处理的污染地面、操作台、器械 进行进行进行进行烧灼烧灼烧灼烧灼处理；处理；处理；处理；3 3 3 3、使用、使用、使用、使用消毒效果未经证实消毒效果未经证实消毒效果未经证实消毒效果未经证实的消毒剂进行消毒；的消毒剂进行消毒；的消毒剂进行消毒；的消毒剂进行消毒；4 4 4 4、使用、使用、使用、使用低浓度的消毒剂低浓度的消毒剂低浓度的消毒剂低浓度的消毒剂和和和和紫外灯紫外灯紫外灯紫外灯进行进行进行进行短时间、长距离短时间、长距离短时间、长距离短时间、长距离照射照射照射照射 消毒。消毒。消毒。消毒。实验室消毒与灭菌实验室消毒与灭菌1 1 1 1、物理消毒：、物理消毒：、物理消毒：、物理消毒：紫外线、高压灭菌紫外线、高压灭菌紫外线、高压灭菌紫外线、高压灭菌2 2 2 2、化学消毒：、化学消毒：、化学消毒：、化学消毒：乙醇、过氧乙酸、苯酚、含氯消毒剂乙醇、过氧乙酸、苯酚、含氯消毒剂乙醇、过氧乙酸、苯酚、含氯消毒剂乙醇、过氧乙酸、苯酚、含氯消毒剂3 3 3 3、注意事项、注意事项、注意事项、注意事项物理消毒紫外线1 1 1 1、紫外线对结核杆菌有一定的杀灭作用，用辐射、紫外线对结核杆菌有一定的杀灭作用，用辐射、紫外线对结核杆菌有一定的杀灭作用，用辐射、紫外线对结核杆菌有一定的杀灭作用，用辐射 强度在强度在强度在强度在 100w/cm 100w/cm 100w/cm 100w/cm2 2 2 2以上的以上的以上的以上的30W30W30W30W紫外线灯、相对湿度紫外线灯、相对湿度紫外线灯、相对湿度紫外线灯、相对湿度50%50%50%50%70%70%70%70%的的的的 条件下，照射条件下，照射条件下，照射条件下，照射40min40min40min40min以上，对空气中结核杆菌的杀灭效以上，对空气中结核杆菌的杀灭效以上，对空气中结核杆菌的杀灭效以上，对空气中结核杆菌的杀灭效 果可达果可达果可达果可达99.9%99.9%99.9%99.9%以上；以上；以上；以上；2 2 2 2、在液层厚度、在液层厚度、在液层厚度、在液层厚度3mm3mm3mm3mm含菌含菌含菌含菌107107107107108cfu/ml108cfu/ml108cfu/ml108cfu/ml的结核杆菌的菌悬的结核杆菌的菌悬的结核杆菌的菌悬的结核杆菌的菌悬 液，用液，用液，用液，用10W10W10W10W紫外线灯在距离紫外线灯在距离紫外线灯在距离紫外线灯在距离0.5m0.5m0.5m0.5m处持续照射处持续照射处持续照射处持续照射3 3 3 3分钟分钟分钟分钟，在，在，在，在 距离距离距离距离1m1m1m1m处持续照射处持续照射处持续照射处持续照射10101010分钟分钟分钟分钟后，菌悬液经培养无活菌生后，菌悬液经培养无活菌生后，菌悬液经培养无活菌生后，菌悬液经培养无活菌生 长；长；长；长；3 3 3 3、紫外线穿透力弱，、紫外线穿透力弱，、紫外线穿透力弱，、紫外线穿透力弱，通常用于空气和物体表面消毒通常用于空气和物体表面消毒通常用于空气和物体表面消毒通常用于空气和物体表面消毒，对空，对空，对空，对空 气中细菌的杀灭更具优势，适合随时性空气消毒。气中细菌的杀灭更具优势，适合随时性空气消毒。气中细菌的杀灭更具优势，适合随时性空气消毒。气中细菌的杀灭更具优势，适合随时性空气消毒。物理消毒物理消毒高压灭菌高压灭菌 1 1 1 1、高压灭菌是对实验材料灭菌的、高压灭菌是对实验材料灭菌的、高压灭菌是对实验材料灭菌的、高压灭菌是对实验材料灭菌的最有效最有效最有效最有效和和和和最可靠最可靠最可靠最可靠 的方法；的方法；的方法；的方法；2 2 2 2、通通通通常常常常下下下下列列列列组组组组合合合合可可可可以以以以确确确确保保保保正正正正确确确确装装装装载载载载的的的的高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌器器器器 的灭菌效果：的灭菌效果：的灭菌效果：的灭菌效果：121121121121、15min/15min/15min/15min/115 115 115 115、25min25min25min25min 推荐推荐推荐推荐121121121121、30min30min30min30min。化学消毒化学消毒乙醇乙醇1 1 1 1、结核杆菌（纯培养物）直接接触、结核杆菌（纯培养物）直接接触、结核杆菌（纯培养物）直接接触、结核杆菌（纯培养物）直接接触70%-75%70%-75%70%-75%70%-75%乙醇乙醇乙醇乙醇5-305-305-305-30 分钟分钟分钟分钟可被杀死，可用于可被杀死，可用于可被杀死，可用于可被杀死，可用于皮肤皮肤皮肤皮肤消毒；消毒；消毒；消毒；2 2 2 2、但由于乙醇能、但由于乙醇能、但由于乙醇能、但由于乙醇能凝固蛋白凝固蛋白凝固蛋白凝固蛋白，使痰表面形成一层把菌，使痰表面形成一层把菌，使痰表面形成一层把菌，使痰表面形成一层把菌 体包裹起来的膜，短时间内不能杀死细菌，通常体包裹起来的膜，短时间内不能杀死细菌，通常体包裹起来的膜，短时间内不能杀死细菌，通常体包裹起来的膜，短时间内不能杀死细菌，通常 乙醇乙醇乙醇乙醇不用于痰标本不用于痰标本不用于痰标本不用于痰标本的消毒。的消毒。的消毒。的消毒。化学消毒化学消毒过氧乙酸过氧乙酸1 1 1 1、过氧乙酸气溶胶渗透性强、过氧乙酸气溶胶渗透性强、过氧乙酸气溶胶渗透性强、过氧乙酸气溶胶渗透性强、易蒸发易蒸发易蒸发易蒸发，作用快，作用快，作用快，作用快 速，分解后不留有毒物质，适合于速，分解后不留有毒物质，适合于速，分解后不留有毒物质，适合于速，分解后不留有毒物质，适合于空气消毒空气消毒空气消毒空气消毒；2 2 2 2、用、用、用、用5g/L5g/L5g/L5g/L过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸水溶液经气溶胶喷雾器喷雾消水溶液经气溶胶喷雾器喷雾消水溶液经气溶胶喷雾器喷雾消水溶液经气溶胶喷雾器喷雾消 毒，喷雾量为毒，喷雾量为毒，喷雾量为毒，喷雾量为2020202010ml/m10ml/m10ml/m10ml/m3 3 3 3，密闭，密闭，密闭，密闭60min60min60min60min以上。以上。以上。以上。化学消毒化学消毒苯酚苯酚1 1 1 1、主要通过、主要通过、主要通过、主要通过破坏菌细胞膜破坏菌细胞膜破坏菌细胞膜破坏菌细胞膜而致细胞质内容物漏而致细胞质内容物漏而致细胞质内容物漏而致细胞质内容物漏 出，使菌体蛋白质变性、凝固，抑制菌体脱氢出，使菌体蛋白质变性、凝固，抑制菌体脱氢出，使菌体蛋白质变性、凝固，抑制菌体脱氢出，使菌体蛋白质变性、凝固，抑制菌体脱氢 酶和氧化酶等酶系统杀死结核杆菌；酶和氧化酶等酶系统杀死结核杆菌；酶和氧化酶等酶系统杀死结核杆菌；酶和氧化酶等酶系统杀死结核杆菌；2 2 2 2、2%2%2%2%苯酚苯酚苯酚苯酚5 5 5 5分钟分钟分钟分钟、5%5%5%5%苯酚苯酚苯酚苯酚1 1 1 1分钟分钟分钟分钟能杀死结核杆菌培能杀死结核杆菌培能杀死结核杆菌培能杀死结核杆菌培 养物；养物；养物；养物；3 3 3 3、5%5%5%5%苯酚苯酚苯酚苯酚与痰液等量混合，与痰液等量混合，与痰液等量混合，与痰液等量混合，24242424小时小时小时小时才能杀死结核才能杀死结核才能杀死结核才能杀死结核 杆菌。杆菌。杆菌。杆菌。化学消毒化学消毒含氯消毒剂含氯消毒剂 含氯消毒剂能使菌体的酶失活，还能与蛋白质含氯消毒剂能使菌体的酶失活，还能与蛋白质含氯消毒剂能使菌体的酶失活，还能与蛋白质含氯消毒剂能使菌体的酶失活，还能与蛋白质的氨基结合，使菌体蛋白氯化，代谢功能障碍，细的氨基结合，使菌体蛋白氯化，代谢功能障碍，细的氨基结合，使菌体蛋白氯化，代谢功能障碍，细的氨基结合，使菌体蛋白氯化，代谢功能障碍，细菌死亡。但对在菌死亡。但对在菌死亡。但对在菌死亡。但对在蛋白质混合液蛋白质混合液蛋白质混合液蛋白质混合液中的结核杆菌中的结核杆菌中的结核杆菌中的结核杆菌几乎无几乎无几乎无几乎无消毒效果消毒效果消毒效果消毒效果。化学消毒化学消毒其它其它1 1 1 1、结核杆菌较一般细菌对酸、碱抵抗力更强，可、结核杆菌较一般细菌对酸、碱抵抗力更强，可、结核杆菌较一般细菌对酸、碱抵抗力更强，可、结核杆菌较一般细菌对酸、碱抵抗力更强，可 在临床或动物标本中加入在临床或动物标本中加入在临床或动物标本中加入在临床或动物标本中加入4%NaOH4%NaOH4%NaOH4%NaOH，3%HCL3%HCL3%HCL3%HCL和和和和6%H6%H6%H6%H2 2 2 2SOSOSOSO4 4 4 4，消化蛋白质及杀灭杂菌，以分离出结，消化蛋白质及杀灭杂菌，以分离出结，消化蛋白质及杀灭杂菌，以分离出结，消化蛋白质及杀灭杂菌，以分离出结核杆菌；核杆菌；核杆菌；核杆菌；2 2 2 2、结核杆菌对染料，如、结核杆菌对染料，如、结核杆菌对染料，如、结核杆菌对染料，如113000113000113000113000孔雀绿孔雀绿孔雀绿孔雀绿和和和和175000175000175000175000结晶紫结晶紫结晶紫结晶紫有抵抗力，通常在培养基内有抵抗力，通常在培养基内有抵抗力，通常在培养基内有抵抗力，通常在培养基内 加入一定量的孔雀绿或结晶紫抑制其他杂菌加入一定量的孔雀绿或结晶紫抑制其他杂菌加入一定量的孔雀绿或结晶紫抑制其他杂菌加入一定量的孔雀绿或结晶紫抑制其他杂菌 生长。生长。生长。生长。注意事项注意事项1 1 1 1、实验室含有生物危险物的临床标本及被污染的一次性用、实验室含有生物危险物的临床标本及被污染的一次性用、实验室含有生物危险物的临床标本及被污染的一次性用、实验室含有生物危险物的临床标本及被污染的一次性用 品，实验完成后，应经品，实验完成后，应经品，实验完成后，应经品，实验完成后，应经高压高压高压高压消毒后方可消毒后方可消毒后方可消毒后方可丢弃丢弃丢弃丢弃或焚烧；或焚烧；或焚烧；或焚烧；2 2 2 2、可重复使用的试验用品及器械，、可重复使用的试验用品及器械，、可重复使用的试验用品及器械，、可重复使用的试验用品及器械，高压高压高压高压灭菌后再灭菌后再灭菌后再灭菌后再清洗清洗清洗清洗使用；使用；使用；使用；3 3 3 3、试验用的、试验用的、试验用的、试验用的试管、吸管、注射器试管、吸管、注射器试管、吸管、注射器试管、吸管、注射器，须装在，须装在，须装在，须装在加盖加盖加盖加盖的容器内，经的容器内，经的容器内，经的容器内，经 高压高压高压高压消毒后拿出实验室；消毒后拿出实验室；消毒后拿出实验室；消毒后拿出实验室；4 4 4 4、培养物或实验室垃圾，在丢弃前必须经过、培养物或实验室垃圾，在丢弃前必须经过、培养物或实验室垃圾，在丢弃前必须经过、培养物或实验室垃圾，在丢弃前必须经过高压高压高压高压灭菌处理；灭菌处理；灭菌处理；灭菌处理；5 5 5 5、实验室内未经消毒的污水，、实验室内未经消毒的污水，、实验室内未经消毒的污水，、实验室内未经消毒的污水，禁止禁止禁止禁止直接排入公共排水系统，直接排入公共排水系统，直接排入公共排水系统，直接排入公共排水系统，更不允许混入居民生活垃圾。更不允许混入居民生活垃圾。更不允许混入居民生活垃圾。更不允许混入居民生活垃圾。生物安全柜的使用生物安全柜的使用1 1 1 1、正确安装，确保安全柜与外部排风系统压力平衡，、正确安装，确保安全柜与外部排风系统压力平衡，、正确安装，确保安全柜与外部排风系统压力平衡，、正确安装，确保安全柜与外部排风系统压力平衡，保证安全柜处于保证安全柜处于保证安全柜处于保证安全柜处于正常工作状态，正常工作状态，正常工作状态，正常工作状态，定期维护和检测，定期维护和检测，定期维护和检测，定期维护和检测，确保安全性；确保安全性；确保安全性；确保安全性；2 2 2 2、在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设、在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设、在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设、在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设备，充分备，充分备，充分备，充分做好准备做好准备做好准备做好准备工作；工作；工作；工作；3 3 3 3、尽量、尽量、尽量、尽量减少房间内人员走动减少房间内人员走动减少房间内人员走动减少房间内人员走动，保证正常气流；，保证正常气流；，保证正常气流；，保证正常气流；4 4 4 4、准备好、准备好、准备好、准备好消毒剂消毒剂消毒剂消毒剂和处理遗洒事件的物品；和处理遗洒事件的物品；和处理遗洒事件的物品；和处理遗洒事件的物品；5 5 5 5、前窗开至、前窗开至、前窗开至、前窗开至适当高度适当高度适当高度适当高度，打开安全柜的灯和风机；，打开安全柜的灯和风机；，打开安全柜的灯和风机；，打开安全柜的灯和风机；生物安全柜的使用生物安全柜的使用6 6 6 6、将、将、将、将本次实验本次实验本次实验本次实验所需物品放入生物安全柜内，并按照所需物品放入生物安全柜内，并按照所需物品放入生物安全柜内，并按照所需物品放入生物安全柜内，并按照清洁物和污染物分别排列；清洁物和污染物分别排列；清洁物和污染物分别排列；清洁物和污染物分别排列；7 7 7 7、避免避免避免避免物品挡住隔栅；物品挡住隔栅；物品挡住隔栅；物品挡住隔栅；8 8 8 8、将手、将手、将手、将手缓慢缓慢缓慢缓慢放入生物安全柜，并等待放入生物安全柜，并等待放入生物安全柜，并等待放入生物安全柜，并等待2-3min2-3min2-3min2-3min，操作，操作，操作，操作 时应在隔栅内侧靠近隔栅处操作；时应在隔栅内侧靠近隔栅处操作；时应在隔栅内侧靠近隔栅处操作；时应在隔栅内侧靠近隔栅处操作；9 9 9 9、避免避免避免避免使用干扰安全柜内层流的实验手段（如离心使用干扰安全柜内层流的实验手段（如离心使用干扰安全柜内层流的实验手段（如离心使用干扰安全柜内层流的实验手段（如离心 和使用明火等）；和使用明火等）；和使用明火等）；和使用明火等）；生物安全柜的使用生物安全柜的使用10101010、与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前、与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前、与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前、与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前 必须经必须经必须经必须经表面去污处理表面去污处理表面去污处理表面去污处理；11111111、所有的托盘或容器从安全柜中、所有的托盘或容器从安全柜中、所有的托盘或容器从安全柜中、所有的托盘或容器从安全柜中取出前必须盖上取出前必须盖上取出前必须盖上取出前必须盖上；12121212、用、用、用、用75%75%75%75%酒精酒精酒精酒精清洁安全柜所有内壁，清洁时安全柜清洁安全柜所有内壁，清洁时安全柜清洁安全柜所有内壁，清洁时安全柜清洁安全柜所有内壁，清洁时安全柜 风机必须处于风机风机必须处于风机风机必须处于风机风机必须处于风机工作状态工作状态工作状态工作状态；13131313、工作结束后，安全柜继续开机、工作结束后，安全柜继续开机、工作结束后，安全柜继续开机、工作结束后，安全柜继续开机3-5min3-5min3-5min3-5min；14141414、关闭、关闭、关闭、关闭前窗、灯、风机前窗、灯、风机前窗、灯、风机前窗、灯、风机，打开，打开，打开，打开紫外灯紫外灯紫外灯紫外灯。THANK YOUSUCCESS2024/11/8 2024/11/8 周五周五2525可编辑可编辑干净的物品干净的物品干净的物品干净的物品理想的工作台摆放原则（清洁理想的工作台摆放原则（清洁-污染区）污染区）在工作台面上的实验操作应该按照从在工作台面上的实验操作应该按照从在工作台面上的实验操作应该按照从在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区清洁区清洁区清洁区到到到到污染区污染区污染区污染区的方向进行的方向进行的方向进行的方向进行 被污染的区域被污染的区域被污染的区域被污染的区域垃圾袋垃圾袋垃圾袋垃圾袋废弃物托盘废弃物托盘废弃物托盘废弃物托盘生物安全柜的使用生物安全柜的使用二、菌株运输二、菌株运输法律依据法律依据1 1 1 1、病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院令第、病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院令第、病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院令第、病原微生物实验室生物安全管理条例（国务院令第424424424424号号号号 2004.11.12 2004.11.12 2004.11.12 2004.11.12）2 2 2 2、可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输、可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输、可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输、可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输 管理规定（卫生部令第管理规定（卫生部令第管理规定（卫生部令第管理规定（卫生部令第45 45 45 45 号号号号 2005.12.282005.12.282005.12.282005.12.28）3 3 3 3、人间传染的病原微生物名录（卫生部、人间传染的病原微生物名录（卫生部、人间传染的病原微生物名录（卫生部、人间传染的病原微生物名录（卫生部 2006.1.112006.1.112006.1.112006.1.11）4 4 4 4、中国民用航空危险品运输管理规定（、中国民用航空危险品运输管理规定（、中国民用航空危险品运输管理规定（、中国民用航空危险品运输管理规定（CCAR276CCAR276CCAR276CCAR276）5 5 5 5、危险物品航空安全运输技术细则（国际民航组织）、危险物品航空安全运输技术细则（国际民航组织）、危险物品航空安全运输技术细则（国际民航组织）、危险物品航空安全运输技术细则（国际民航组织）相关定义相关定义1 1 1 1、病原微生物病原微生物病原微生物病原微生物:是指能够使人或者动物致病的微生物。是指能够使人或者动物致病的微生物。是指能够使人或者动物致病的微生物。是指能够使人或者动物致病的微生物。2 2 2 2、实验活动实验活动实验活动实验活动:是指实验室从事与病原微生物菌（毒）是指实验室从事与病原微生物菌（毒）是指实验室从事与病原微生物菌（毒）是指实验室从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。3 3 3 3、可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或 样本样本样本样本：是指在：是指在：是指在：是指在人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录中中中中 规定的第一类、第二类病原微生物菌（毒）种或规定的第一类、第二类病原微生物菌（毒）种或规定的第一类、第二类病原微生物菌（毒）种或规定的第一类、第二类病原微生物菌（毒）种或 样本。样本。样本。样本。病原菌病原菌病原菌病原菌名称名称名称名称危害程危害程危害程危害程度分类度分类度分类度分类实验活动所需生物安全实验室级别实验活动所需生物安全实验室级别实验活动所需生物安全实验室级别实验活动所需生物安全实验室级别运输包装运输包装运输包装运输包装分类分类分类分类大量活大量活大量活大量活菌操作菌操作菌操作菌操作动物感动物感动物感动物感染实验染实验染实验染实验样本样本样本样本检测检测检测检测非感染性材非感染性材非感染性材非感染性材料的实验料的实验料的实验料的实验A/BA/BA/BA/BUN UN UN UN 编号编号编号编号结核分结核分结核分结核分枝杆菌枝杆菌枝杆菌枝杆菌第二类第二类第二类第二类BSL-3BSL-3BSL-3BSL-3ABSL-3ABSL-3ABSL-3ABSL-3BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2BSL-1BSL-1BSL-1BSL-1A A A AUN UN UN UN 2814281428142814牛型分牛型分牛型分牛型分枝杆菌枝杆菌枝杆菌枝杆菌第二类第二类第二类第二类BSL-3BSL-3BSL-3BSL-3ABSL-3ABSL-3ABSL-3ABSL-3BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2BSL-1BSL-1BSL-1BSL-1A A A AUN UN UN UN 2814281428142814结核杆菌分类结核杆菌分类人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录人间传染的病原微生物名录 第二类：是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在第二类：是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在第二类：是指能够引起人