1、牛冷冻精液和配种技术的应用牛冷冻精液和配种技术的应用讲述内容l第一章第一章 概述概述l第二章第二章 牛的生殖器官牛的生殖器官l第三章第三章 母牛的发情母牛的发情l第四章第四章 输精、受精与妊娠早期鉴定输精、受精与妊娠早期鉴定第一章 概述l 一一 牛冷冻精液技术在畜牧业生产中的意义牛冷冻精液技术在畜牧业生产中的意义l 二二 牛冷冻精液的发展概述牛冷冻精液的发展概述一 牛冷冻精液技术在畜牧业生产中的意义l什么是冷冻精液什么是冷冻精液?l冷冻精液的优点:冷冻精液的优点:l1、扩大配种数量l2、优秀种公牛的有效利用l3、减少种公牛的饲养l4、防止疾病l5、提高受胎l6、消灭不孕l7、远距离运输l8、长
2、期保存二 牛冷冻精液的发展概述l(1)家畜冷冻精液的发展家畜冷冻精液的发展 l(2)牛冷冻精液的应用牛冷冻精液的应用 第二章第二章 牛的生殖器官牛的生殖器官l一一 公牛的生殖器官及精子的生成与保存公牛的生殖器官及精子的生成与保存l二二 母牛的生殖器官及功能母牛的生殖器官及功能 一一、公牛的生殖器官及精子的生成与保存、公牛的生殖器官及精子的生成与保存公牛的生殖器官包括睾丸、阴囊、附睾、输精管、副性腺、尿生殖道、公牛的生殖器官包括睾丸、阴囊、附睾、输精管、副性腺、尿生殖道、阴茎和包皮。阴茎和包皮。精子的生成与保存精子的生成与保存l1.2.1 性成熟性成熟l公牛初次释放有受精能力的精子,并表现出完整
3、性行为能公牛初次释放有受精能力的精子,并表现出完整性行为能力的年龄,是公牛的初情期。力的年龄,是公牛的初情期。l一般引进品种的猪、绵羊和山羊为一般引进品种的猪、绵羊和山羊为7月龄;牛为月龄;牛为12月龄;月龄;马马1518月龄;兔为月龄;兔为34月龄。国内地方品种相对提早。月龄。国内地方品种相对提早。l性成熟是继初情期之后,青年公牛的身体和生殖器官进一性成熟是继初情期之后,青年公牛的身体和生殖器官进一步发育,生殖机能达到完善、具备正常生育能力的年龄。步发育,生殖机能达到完善、具备正常生育能力的年龄。l各种公畜达到性成熟和体成熟的时间各种公畜达到性成熟和体成熟的时间精子的生成与保存精子的生成与保
4、存l1.2.2精子的生成精子的生成l 公牛自初情期开始,直至生殖机能衰退,在整个生殖年龄,睾丸的精公牛自初情期开始,直至生殖机能衰退,在整个生殖年龄,睾丸的精细管上皮总是在进行着生精细胞的分裂和演变,使精子不断产生和释放。细管上皮总是在进行着生精细胞的分裂和演变,使精子不断产生和释放。与此同时,生精细胞也以其独特的方式得到不断的补充和更新。母牛则与此同时,生精细胞也以其独特的方式得到不断的补充和更新。母牛则早在胚胎期就形成并储备了全部终生需要的原始卵泡,这是公、母牛配早在胚胎期就形成并储备了全部终生需要的原始卵泡,这是公、母牛配子发生方面的重要区别之一。子发生方面的重要区别之一。l1.2.3精
5、子的保存精子的保存l精子的保存分常温和低温两种。精子的保存分常温和低温两种。l低温保存又分低温(低温保存又分低温(05)和超低温()和超低温(-79-196)两种。超低温)两种。超低温即指冷冻精液,是把种公牛的精液通过人工授精的方法采集后,经品质即指冷冻精液,是把种公牛的精液通过人工授精的方法采集后,经品质检查,加适量稀释保护液,分装在不同类型的特殊包装后,进行冷冻保检查,加适量稀释保护液,分装在不同类型的特殊包装后,进行冷冻保存。存。l冷冻精液的形式分颗粒和细管两种,颗粒已逐步淘汰,普遍使用细管方冷冻精液的形式分颗粒和细管两种,颗粒已逐步淘汰,普遍使用细管方法。细管的剂量分法。细管的剂量分0
6、.25和和0.5毫升两种,普遍使用的是毫升两种,普遍使用的是0.25毫升(法国)。毫升(法国)。二、母牛的生殖器官二、母牛的生殖器官l母牛的生殖器官包括卵巢、输卵管、子宫、阴道和外生殖器等组成。l 2.1卵巢卵巢l2.1.1形态和位置形态和位置l未孕母牛的卵巢在没有较大的卵泡和黄体时,形态和位置如下:l牛卵巢的形态为扁椭圆形,附着在卵巢系膜上,有血管和神经从卵巢门出入。中等大小的母牛,卵巢平均长为34厘米、宽1.52厘米,厚23厘米。l母牛的卵巢一般位于子宫角尖端外侧。初胎和胎次少的母牛卵巢位于耻骨前缘之后,多胎母牛因子宫下垂,卵巢亦前移至耻骨前缘的前下方。l2.1.2 卵巢的组织结构卵巢的组
7、织结构l牛的卵巢组织分为皮质部和髓质部,两者的基质都是结缔组织。l皮质内含有卵泡,卵泡的前身和续产物(红体、黄体和白体)。由于卵巢外表无浆膜覆盖,卵泡可在卵巢的任何部位排卵。l卵巢的组织结构含原卵细胞、卵泡(上皮)细胞、卵母细胞、次级卵泡,生长卵泡,卵丘、卵细胞,间质细胞以及上述续产物。l2.1.3 卵巢的功能卵巢的功能l(1)卵巢的发育和排卵卵巢的发育和排卵l卵巢皮质部分布着许多原始卵泡。原始卵泡是由一个卵母细胞和周围一单层卵泡细胞构成。它经过次级卵泡、生长卵泡和成熟卵泡发育阶段,最终排出卵子,排卵后,在原卵泡处形成黄体。l(2)分泌雌激素和孕酮)分泌雌激素和孕酮l卵泡膜的血管性内膜分泌雌激
8、素,一定量的雌激素是导致母牛发情的直接因素。l排卵后形成的黄体,黄体能分泌孕酮,它是维持妊娠所必需的激素。2.2 输卵管输卵管l2.2.1 输卵管的形态和位置输卵管的形态和位置l输卵管是卵子进入子宫的必经通道,包裹在输卵管系膜内,细长而弯曲,长12-30cm,前1/3较粗,称为壶腹,是卵子受精的部位。其后部分较细,称为峡部。靠近卵巢的部位扩大呈漏斗状,叫漏斗,是接纳卵子的部位。l2.2.2 输卵管的功能输卵管的功能l(1)承受并运送卵子l卵子输卵管伞部漏斗部壶腹部受精壶峡部子宫角l()()精子获能,受精及卵裂的场所l()()分泌机能l发情时分泌含营养的粘液,是卵子,精子及早期胚胎的营养液。2.
9、3子宫子宫l2.3.1子宫的形态和位置子宫的形态和位置l子宫分子宫颈、子宫体和子宫角三个部分。牛子宫角基部之间有一纵隔,将两角分开,称对分子宫。l()()子宫角,子宫体l牛的子宫角长30-40cm,角的基部粗1.5-3cm;子宫体2-4cm。初胎牛的较小。子宫体粘膜有突出表面的半圆形子宫阜70-120个,没有宫腺,基部含丰富的血管,怀孕时子宫阜即发育成母体胎盘。l()()子宫颈l牛的子宫颈长5-10cm,粗3-4cm,壁厚而硬,不发情时管壁封闭,发情时也只是稍微开放。子宫颈阴道部粗大,突入阴道2-3cm,粘膜有放射状皱襞,经产牛有时呈菜花状。l2.3.2子宫的功能子宫的功能l()()发情时,输
10、送精液至输卵管;分娩时,排出胎儿。主要是借肌纤维收缩的力量。l()为胎儿提供营养,是胎儿发育的场所。l()()对卵巢的机能影响。l()()子宫颈是子宫的门户。l()()子宫颈是精子的“选择性贮库之一”。2.4阴道阴道l阴道是牛的交配器官,又是胎儿娩出的通道,长22-28cm.具交配;精子贮存,保护生殖道不受外生物侵害;排出胎儿及子宫、输卵管分泌物等多项功能。第三章第三章母牛的发情母牛的发情l一、性成熟一、性成熟l二、卵子的发生二、卵子的发生l三、卵泡的发育和排卵三、卵泡的发育和排卵l四、黄体的形成与退化四、黄体的形成与退化l五、发情和发情周期五、发情和发情周期 l六、牛的发情周期特点与发情鉴定
11、六、牛的发情周期特点与发情鉴定一、性成熟一、性成熟l3.1.1初情期初情期l母牛初次发情和排卵的时期称为初情期。l3.1.2性成熟期性成熟期l性成熟是指母牛初情期以后的一段时期,此时生殖器官发育成熟,具备了正常的繁殖能力,被称为性成熟期。此期体成熟尚未完成,需推后配种。一、性成熟一、性成熟l3.1.3适配年限适配年限l根据具体发育情况而定,一般要求奶牛18个月,380公斤体重,也有14-16个月配种,要特别注意营养。l3.1.4体成熟体成熟l母年出生后达到成年体重的年龄称为体成熟期。l3.1.5繁殖能力停止期繁殖能力停止期l母牛达到一定年龄,繁殖能力消失时期称为繁殖能力停止期。各种母畜的生理发
12、育期二、卵子的发生二、卵子的发生l3.2.1 卵子的发生卵子的发生l母牛在胎儿阶段,卵巢皮质内的卵原细胞经有丝分裂发育成为初级卵母细胞。l初期后,初级卵母细胞发生第一次减数分裂(成熟分裂),生长发育成为次级卵母细胞。l在受精过程中,次级卵母细胞完成第二次分裂,并成熟为卵子(第二极体)。l卵子的发生过程包括原细胞增殖,卵母细胞生长(初级次级),卵母细胞成熟三个过程。l3.2.2 卵子卵子l卵子的结构包括放射冠、透明带、卵黄膜、卵黄。三、卵泡的发育和排卵三、卵泡的发育和排卵l3.3.1 卵泡的发育及其形态特点卵泡的发育及其形态特点l卵泡发育是指卵泡由原始卵泡发育成为初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡和成
13、熟卵泡的生理过程。l()原始卵泡:位于卵巢皮质部,少数发育成熟。没有卵泡膜和卵泡腔。l()初级卵泡:由原始卵泡发育而成,未发育卵泡膜和卵泡腔。l()次级卵泡:初级卵泡进一步发育而成,位于皮质部较深层,卵黄膜与卵泡细胞之间形成透明带,但尚未形成卵泡腔。l()三级卵泡:形成卵泡腔,但不规则。l()成熟卵泡:是三级卵泡进一步发育至最大体积,卵泡壁变薄,卵泡腔内充满液体。l牛的成熟卵泡直经可达10-14mm.3.3.2 排卵排卵l成熟的卵泡破裂即发生排卵。排卵数,牛一般每次只排一个卵子,个别也有排两个的。l牛属自发性排卵,即自发排卵和自动生成黄体。四、黄体的形成与退化四、黄体的形成与退化l成熟的卵泡破
14、裂排卵后,由于卵泡液被排空,血管破裂,血液在卵泡腔成熟的卵泡破裂排卵后,由于卵泡液被排空,血管破裂,血液在卵泡腔内凝块,呈红色,称为红体。此后由于吸收类脂质而使颗粒细胞变黄称内凝块,呈红色,称为红体。此后由于吸收类脂质而使颗粒细胞变黄称为黄体。为黄体。l牛一般在发情周期的第牛一般在发情周期的第7天(按天为一个周期、发情日为天),天(按天为一个周期、发情日为天),黄体内的血管生长及黄体细胞分化完成,第天达到最大体积。黄体内的血管生长及黄体细胞分化完成,第天达到最大体积。l母牛如未配种或配种未孕,此后黄体就逐渐退化,此时的黄体称为假黄母牛如未配种或配种未孕,此后黄体就逐渐退化,此时的黄体称为假黄体
15、或性周期黄体。体或性周期黄体。l如配种妊娠,则黄体一直维护到母牛临近分娩前,此时的黄体称为妊娠如配种妊娠,则黄体一直维护到母牛临近分娩前,此时的黄体称为妊娠黄体或真黄体。黄体或真黄体。l在整个妊娠期中,黄体体积变小,颗粒细胞被纤维细胞代替,形成一个在整个妊娠期中,黄体体积变小,颗粒细胞被纤维细胞代替,形成一个瘢痂,称为白体。一般存在到下一个周期。瘢痂,称为白体。一般存在到下一个周期。五、发情和发情周期五、发情和发情周期l3.5.1发情发情l母牛达到一定的年龄时,由卵巢上的卵泡发育所引起的,受下丘脑垂体卵巢轴系控制的一种生殖生理现象叫做发情。l3.5.2 发情周期发情周期l母牛自第一次发情后,如
16、果未配或未孕,则每间隔一定时间便开始下一次发情,如此周而复始直到性机能停止活动的年龄为止。这种周期性的活动,称为发期周期。l各种家畜的发情周期和发期持续期l3.5.3 影响发情周期的因素影响发情周期的因素l遗传因素、环境因素(包括光照、气温和湿度)和饲养管理水平。家畜种类发情周期(天)发情持续期(小时)牛21(18-24)18-19(13-27)水牛21(16-25)25-60牦牛6-2548以上马21(18-25)2-7天驴21-285-7(2-9)天绵羊16-17(14-19)29-36(24-48)山羊20(18-22)48(30-60)猪21(18-23)48-72(15-96)牛的发
17、情周期特点牛的发情周期特点 l3.6.1 母牛发情周期的特点母牛发情周期的特点l了解和掌握牛发情周期的特点对于进行发情鉴定以确定并掌握最适配种时间,提高受情率和配种受胎率,达到提高繁殖率有着十分重要的意义。l1、发情周期和发情期、发情周期和发情期l母牛的发情周期平均为天,但青年牛比成年牛短。l母牛的发情期因季节略有差异,一般夏季较短;春、秋较冬季短;营养好比营养差的短。l牛的排卵发生在发情停止后10-15小时,牛的发情行为表现比较明显。l、卵巢的变化特点、卵巢的变化特点l牛右侧卵巢的排卵机率较左侧大。发情周期第10天左右黄体最大,直径2.02.5cm。成熟的黄体为球形或椭圆形,突出于卵巢表面。
18、发情鉴定发情鉴定l3.6.2 发情鉴定发情鉴定l()外部观察法:常用,主要看母牛的外部表现和精神状态加以判断。如:精神兴奋不安,食欲减退,外阴肿胀,湿润有粘液分泌排出及粘液的数量,颜色和粘稠度,排尿频繁,爬跨或被爬跨程度。l试情法:应用试情公牛对母牛进行试情。l阴道检查法:用开张器进行观察,其阴道粘膜的颜色、湿润度、子宫颈的颜色,肿胀度及开口大小和粘液数量、颜色、粘稠度等。l直肠检查法:将手伸入母牛直肠内,隔着直肠壁触摸卵巢上的卵泡发育程度,以确定配种时间的方法。需要技术熟练,触诊卵泡进要手轻,切勿用力挤压。l还有电测法、激素测法、鉴定器法,超声波仪等等。发情鉴定发情鉴定l()牛的发情鉴定l通
19、常采用外部观察法和直肠检查法综合判断。l母牛发情的外部表现l发情初期有公牛或母牛跟随、欲爬,但不接受;兴奋不安、哞叫、阴道和子宫呈轻微充血肿胀,流透明粘液,量少;食欲下降,产减少,排尿增多。l发情盛期接受爬跨或爬跨其它母牛,粘液增多,牵缕性强;子宫颈呈鲜红色,明显肿胀发亮,开口较大,尾根部或荐部表皮通常磨破,后躯常粘有污泥或粪便。l发情后期接受爬跨减少,粘液变稠变厚,牵缕性变弱。l母牛发情时的卵泡发育规律l一般不用直肠检查法,但现在普遍采用深部输精(至子宫角)或对一些营养不良或排卵没有规律的母牛要进行直肠检查,判断卵泡发育情况。l在卵泡生长发育期,卵巢增大,卵泡直径0.5-1.5cm,呈球状,
20、逐渐有波动感。随着卵泡增大,发情逐渐明显,卵泡达到最大时,发情逐渐减弱。卵泡成熟后,卵泡不再增大,但泡壁变薄,有一触即破之感。随着卵泡破裂排卵,卵泡液流失,形成一个小的凹陷,排卵后6-8小时,红体与黄体随即生成,凹陷消失。l夜间排卵较白昼多,右侧卵巢排卵较左侧多。第四章输精、受精第四章输精、受精l正确的输精方法和准确的输精时间是保证和提高受胎率的关健措施。l受精是指精子和卵子结合,产生合子的过程。受精部位是在母牛输卵管壶腹部。一、输精一、输精l4.1.1 准备准备l(1)母牛的准备l把经过发情鉴定后的母牛,拉入输精架或牛床上予适当保定。l将尾巴拉向一侧,清洗阴部及会阴部,再用消毒液(0.3%高
21、锰酸钾或0.5%新吉尔灭)进行消毒,然后用灭菌生理盐水冲洗,灭菌布擦干。l(2)输精器材的准备l现在普遍用卡苏式输精器,金属部分用75%酒精棉球擦试消毒,待酒精完全挥发后使用。l输精器外套一定是每头牛一次一支,外套包装拆封后要注意污染。l(3)精液的准备l取出冷冻精液一支,用38-40温水解冻15-20秒。解冻容器要专用,解冻温度要准确。解冻后的冷冻精液,用专用剪截去封口端,将棉栓封口端向后,正确装入输精枪。l(4)输精人员的准备l需穿工作服,指甲剪短磨光,手洗净擦干,用75%酒精消毒。需带一次性长臂手套涂抹灭菌润滑剂。l4.1.2 输精要求输精要求l适宜的输精时间通常是根据母牛发情鉴定的结果
22、来确定,要充分考虑其排卵时间和精子获能时间,精子在母牛生殖道内维持受精能力时间,卵子维持受精能力时间,精液类型等因素,以利于精子和卵子的结合。l各种家畜的输精要求l牛的发情周期是平均21天(18-24天),发情时间较短,6-18小时,排卵一般在发情结束后的10-15小时发生。l实践证明,母牛在早上接受爬跨,可当日下午输精,下午或傍晚接受爬跨,可在第二天早晨输精。第二次输精间隔8-10小时。l输精部位一般直肠把握法要求做到子宫深部或子宫体,技术熟练者可做到子宫角(排卵侧)。4.1.3 输精方法输精方法l(1)阴道开张器输精法l目前基本停止使用l(2)直肠把握子宫颈输精法l优点是输精部位深,操作简
23、单,不易感染,防止精液逆流。同时,可检查卵巢,子宫疾病。l要点:消毒彻底;把握要准确,两手配合达当;不能用力过猛,随牛移动。二、受精二、受精l受精是指精子和卵子结合,产生合子的过程。受精部位是在母牛输卵管壶腹部。4.2.1 精子的运行精子的运行l(1)精子在子宫颈的运行l牛子宫颈粘膜具有许多纵行皱壁构成的横行沟槽(皱褶)。输精后,一部分精子借自身运动和粘液向前流动进入子宫;另一部分则随粘液进入腺窝,暂时贮存,形成精子贮库。库内的精子会相随子宫颈收缩活动被拥入子宫或下一个腺窝,而死精子则被纤毛上皮的逆蠕动推向阴道排出,或被白细胞吞噬消除。l精子通过子宫颈第一次筛选,即第一关口保证了运动和受精能力
24、的精子进入子宫,防止过多精子入宫。l(2)精子在子宫内的运行l进入子宫的精子大部分进入子宫内膜腺(即隐窝中),形成精子在子宫内的贮库。精子在此贮库中不断被释放,通过子宫进入输卵管,在宫管连接部是第二关口。l精子在子宫内膜腺内白细胞反应加强,死精子和活力差的精子被吞噬,形成又一次筛选。4.2.1 精子的运行精子的运行l(3)精子在输卵管内的运行l精子在壶峡部受到峡部括约肌的有力收缩被暂时阻挡,造成精子到达受精部位的第三关口。各种动物进入壶腹部的精子一般不超过1000个。最后到达卵子周围的精子只有100个。与卵子结合的精子只有1个。l(4)精子在母牛生殖道内运行的速度l牛在交配后,15分钟左右即可
25、在输卵管壶腹部发现精子。与母牛生理状态,粘液的性状及胎次有关。l(5)精子在母牛生殖器内的存活时间和维持受精能力的时间l存活时间15-56小时l维持受精能力时间 28小时4.2.2 卵子的运行卵子的运行l(1)卵子的接纳l由输卵管伞部接纳被排出的卵子,随纤毛摆动进入输卵管。l(2)向壶腹部的运行l靠输卵管肌肉活动和管壁纤毛摆动运行。由于管腔宽大,很快进入壶腹下端。l(3)卵子的滞留l多数家畜的受精卵在此滞留较长时间,可达2天左右。l(4)通过宫管连接部l随着输卵管逆蠕动的减弱和正向蠕动加强以及肌肉的放松,受精卵运行至宫管连接部短暂滞留,当该部的括约肌放松时,受精卵随分泌液迅速进入子宫。l(5)
26、卵子保持受精能力和时间l牛一般为18-20小时,而且只能在壶腹部有受精能力。未受精的卵子随输卵管进入子宫退化,最后破裂崩解,被白细胞吞噬。4.2.3 受精过程受精过程l(1)精子穿越放射冠l(2)精子穿越透明带l(3)精子进入卵黄膜l(4)原核形成l(5)配子配合结束语结束语l以上为牛冷冻精液配种技术的全部过程和技术环节以上为牛冷冻精液配种技术的全部过程和技术环节的关键点,因时间紧,对理论和原理部分讲述的较的关键点,因时间紧,对理论和原理部分讲述的较少,主要是实际操作部分,希望各学员在实际工作少,主要是实际操作部分,希望各学员在实际工作中,多查找资料,认真学习,不断创新,提高业务中,多查找资料,认真学习,不断创新,提高业务水平,我鄂尔多斯市现代化畜牧业的发展做出贡献。水平,我鄂尔多斯市现代化畜牧业的发展做出贡献。谢谢大家!谢谢大家!
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