1、基本概念基本概念*1.物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 2.化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法3.影响消毒灭菌效果原因影响消毒灭菌效果原因消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第1页3.3.清洁清洁(cleaning)cleaning)基本概念基本概念1.1.消毒消毒(disinfection)disinfection)2.2.灭菌灭菌(sterilization)sterilization)4.4.防腐防腐(antisepsis)antisepsis)5.5.无菌无菌(asepsis)asepsis)6.6.无菌操作无菌操作消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第2页(3)(3)惯用化学法惯用化学法,
2、用以消毒药品称用以消毒药品称为为消毒剂消毒剂(disinfectant)disinfectant)。1.1.消毒消毒(disinfection)disinfection)(1)(1)杀死物体上病原微生物方法杀死物体上病原微生物方法(2)(2)并不一定能杀死含芽胞细菌或并不一定能杀死含芽胞细菌或非病原微生物。非病原微生物。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第3页2.2.灭菌灭菌(sterilization)sterilization)杀灭物体上全部微杀灭物体上全部微生物方法。生物方法。比消毒要求高,比消毒要求高,包含杀灭细菌包含杀灭细菌芽胞芽胞在在内全部内全部病原微生物病原微生物和和非病原微
3、生物非病原微生物。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第4页 3.3.清洁清洁(cleaning)(cleaning):经过除去尘埃和一切污秽经过除去尘埃和一切污秽以降低微生物数量过程。以降低微生物数量过程。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第5页 4.4.防腐防腐(antisepsis)antisepsis):预防或抑制体外细菌生长繁预防或抑制体外细菌生长繁殖方法。细菌普通不死亡。殖方法。细菌普通不死亡。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第6页5.5.无菌无菌(asepsis)asepsis)不存在活菌不存在活菌消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第7页 6.6.无菌操作:无菌操
4、作:预防微生物进入人体或其它物品操作方法。预防微生物进入人体或其它物品操作方法。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第8页热力灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法辐射杀菌法滤过除菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第9页 (一)干热灭菌法(一)干热灭菌法 1.1.焚烧焚烧:废弃物、尸体:废弃物、尸体 2.2.烧灼烧灼:接种环、试管口:接种环、试管口 3.3.干烤干烤:玻璃:玻璃,160,160170170,2 2 h.h.4.4.红外线红外线:医疗器械:医疗器械消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第10页(二)湿热灭菌法原理(二)湿热灭菌法原理 使细菌
5、在含水量高情况下使细菌在含水量高情况下轻易变性凝固,而且蒸汽穿透轻易变性凝固,而且蒸汽穿透力强。力强。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第11页湿热灭菌特点湿热灭菌特点湿热中菌体蛋白轻易变性湿热中菌体蛋白轻易变性湿热穿透力强湿热穿透力强湿热蒸汽有潜能存在湿热蒸汽有潜能存在 在在100下,下,1克水由气态转变克水由气态转变 为液态可释放为液态可释放529cal热量热量消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第12页惯用湿热灭菌法惯用湿热灭菌法1.1.巴氏消毒法:巴氏消毒法:61.61.1 162.862.8,3030minmin或或71.771.7,15-30s,15-30s主要用于牛乳消毒主
6、要用于牛乳消毒 消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第13页 2.2.煮沸法煮沸法:煮沸煮沸100100,5-105-10minmin,杀灭细菌繁殖杀灭细菌繁殖 体,细菌芽胞经体,细菌芽胞经1-21-2h h被杀死。被杀死。惯用于食具、刀剪等。惯用于食具、刀剪等。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第14页3.3.流动蒸汽消毒法:流动蒸汽消毒法:一个大气压下一个大气压下100 100 水蒸汽消毒。水蒸汽消毒。细菌繁殖体细菌繁殖体15-3015-30min.min.可被杀死,但芽可被杀死,但芽胞不一定被全部杀灭胞不一定被全部杀灭4.4.间歇蒸汽消毒法:间歇蒸汽消毒法:利用重复屡次流动蒸汽间歇
7、加热消利用重复屡次流动蒸汽间歇加热消毒,毒,100 100,15-3015-30min.min.37 37过夜后过夜后,再蒸再蒸,如此重复如此重复3 3次次.消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第15页 5.5.高压蒸汽灭菌法:高压蒸汽灭菌法:103.4103.4kPa(1.05kg/cm2)kPa(1.05kg/cm2)121.3 121.3,15-2015-20min.min.消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第16页消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第17页消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第18页1.1.紫外线紫外线 (UVUV)波长波长2 240-300nm40-300
8、nm紫外线含有杀菌作紫外线含有杀菌作用。其主要作用于用。其主要作用于DNADNA,使一条使一条DNADNA链链上相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成二上相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体,造成细菌变异和死亡。聚体,造成细菌变异和死亡。含有可逆性。含有可逆性。穿透力弱,故仅用于空气和物体穿透力弱,故仅用于空气和物体表面消毒。表面消毒。对人体有害。对人体有害。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第19页UV-lamp消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第20页2.2.电离辐射电离辐射:高速电子、高速电子、X X射线、射线、射线,用于医用塑料,食物射线,用于医用塑料,食物3.3.微波微波:波长波长1 1
9、mmmm1m1m,适合用适合用于非金属用具等于非金属用具等消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第21页Seitz滤器(石棉)滤器(石棉)烧结玻璃滤器烧结玻璃滤器薄膜滤器(薄膜滤器(NC膜)膜)消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第22页消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第23页 生物洁净技术是包括多学科一门边生物洁净技术是包括多学科一门边缘学科,它利用空调技术、物理过缘学科,它利用空调技术、物理过滤、气流组织、压差控制等很多技滤、气流组织、压差控制等很多技术伎俩,控制污染颗粒来控制微生术伎俩,控制污染颗粒来控制微生物污染,从而对控制环境对象建立物污染,从而对控制环境对象建立一个完善保障
10、体系。一个完善保障体系。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第24页 层流室层流室消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第25页干燥法干燥法:细菌在空气干燥条件细菌在空气干燥条件时会死亡。时会死亡。低温法:低温法:低温可使细菌新陈低温可使细菌新陈代谢减慢,惯用作保留细菌代谢减慢,惯用作保留细菌菌种。菌种。冷冻真空干燥法:冷冻真空干燥法:是当前保是当前保留菌种最好方法。留菌种最好方法。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第26页低温与干燥在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分用途:用途:保留菌种冷冻真空干燥法:冷冻真空干燥法:消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第27页1.1.化
11、学消毒剂杀菌机制化学消毒剂杀菌机制(1)(1)促进菌体蛋白质变性或凝固促进菌体蛋白质变性或凝固(2)(2)干扰细菌酶系统或代谢干扰细菌酶系统或代谢(3)(3)损伤菌细胞膜损伤菌细胞膜2.2.消毒剂主要种类和应用消毒剂主要种类和应用消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第28页类别类别机机 制制用用 途途酚类酚类蛋白变性,细胞蛋白变性,细胞膜损伤膜损伤石炭酸石炭酸醇类醇类蛋白变性蛋白变性乙醇乙醇重金属盐重金属盐氧化氧化,蛋白酶变性蛋白酶变性红汞红汞,硫柳汞硫柳汞氧化剂氧化剂 氧化氧化、蛋白沉淀蛋白沉淀高锰酸钾高锰酸钾,过过氧乙酸氧乙酸,碘酒碘酒表面活表面活性性 剂剂蛋白变性蛋白变性、细胞膜损伤细
12、胞膜损伤新洁而灭新洁而灭染染 料料干扰氧化干扰氧化、抑抑制繁殖制繁殖龙胆紫龙胆紫消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第29页类别类别机机 制制用用 途途氯氯氧化氧化/蛋白蛋白沉淀沉淀饮水消毒饮水消毒新洁新洁尔灭尔灭蛋白凝固沉蛋白凝固沉淀淀,膜损伤膜损伤皮肤黏膜皮肤黏膜,手手,器器械浸泡械浸泡甲醛甲醛/戊戊二醛二醛蛋白蛋白,核酸核酸烷基化烷基化浸泡组织浸泡组织,物品表物品表面和面和,空气消毒空气消毒消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第30页种类种类浓度浓度(%)(%)用途用途石炭酸石炭酸3 35 5地面地面、器具表面器具表面、皮肤消毒皮肤消毒乙醇乙醇70-7570-75皮肤皮肤、体温计消毒
13、体温计消毒高锰酸甲高锰酸甲0.10.1皮肤皮肤、尿道尿道、蔬菜蔬菜、水果消毒水果消毒红汞红汞2 2皮肤皮肤、粘膜粘膜、小创伤消毒小创伤消毒硫柳汞硫柳汞0.10.1皮肤消毒皮肤消毒、手术部位消毒手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸 0.2-0.30.2-0.3 塑料塑料、玻璃器材消毒玻璃器材消毒碘酒碘酒2-2.52-2.5皮肤消毒皮肤消毒新洁而灭新洁而灭3 35 5手术洗手手术洗手、浸泡手术器械浸泡手术器械龙胆紫龙胆紫2 24 4浅表创伤消毒浅表创伤消毒消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第31页影响消毒剂作用原因影响消毒剂作用原因消毒剂消毒剂种种类类浓浓度度时时间间细细 菌菌菌龄菌龄/种类种类 环环
14、 境境酸碱酸碱度度有机有机物物温度温度消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第32页 一、病原微生物分类一、病原微生物分类 第第一一类类是是指指能能够够引引发发人人类类或或者者动动物物非非常常严严重重疾疾病病微微生生物物,以以及及我我国国还还未未发发觉觉或或者已经宣告毁灭微生物。者已经宣告毁灭微生物。第第二二类类是是指指能能够够引引发发人人类类或或者者动动物物严严重重疾疾病病,比比较较轻轻易易直直接接或或者者间间接接在在人人与与人人、动物与人、动物与动物间传输微生物。动物与人、动物与动物间传输微生物。第五节 病原微生物试验室安全消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第33页 一、病原微生物分类
15、一、病原微生物分类第第三三类类是是指指能能够够引引发发人人或或动动物物疾疾病病,但但普普通通情情况况下下对对人人、动动物物或或环环境境不不组组成成严严重重危危害害,传传输输风风险险有有限限,试试验验室室感感染染后后极极少少引引发发严严重重疾疾病病,而而且且具具备备有有效效治治疗疗和和预预防防办办法微生物。法微生物。第第四四类类是是指指在在通通常常情情况况下下不不会会引引发发人人或或动动物疾病微生物。如小鼠白血病病毒等。物疾病微生物。如小鼠白血病病毒等。第第一一类类、第第二二类类统统称称为为高高致致病病性性病病原原微微生生物物。消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第34页一级生物安全试验室消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第35页二级生物安全试验室消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第36页三级生物安全试验室消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第37页四级生物安全试验室消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第38页1 1、掌握概念、掌握概念:灭菌灭菌(sterilization),消毒消毒(disinfection)2 2、掌握紫外线灭菌机制、掌握紫外线灭菌机制,应用应用,特点?特点?3 3、了解湿热灭菌方法及应用、了解湿热灭菌方法及应用,滤过除菌滤过除菌应用。应用。4 4、了解化学消毒灭菌、了解化学消毒灭菌本节关键点消毒灭菌和病原微生物实验室安全专家讲座第39页
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