体外诊断试剂分析性能评估指导原则.pptx

L/O/G/O体外诊疗试剂分析性能评定指导标准体外诊断试剂分析性能评估指导原则第1页1.检测限2.线性范围3.可汇报范围4.准确度（回收试验）5.准确度（方法学比对）6.精密度7.干扰试验8.稳定性9.参考值（参考区间）体外诊断试剂分析性能评估指导原则第2页检测限检测限检测限评定基本标准检测限评定基本标准 试验人员应熟悉检测方法与仪器操作；采取适当校准品、质控品并保持仪器处于正常状态；用于试验试剂应为同一批号，且在使用期内。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第3页检测限检测限检测限评定和数据处理方法检测限评定和数据处理方法试验材料和基本要求试验材料和基本要求空白样本制备：空白样本应不含被测物，但其基质应与待测定常规样本相同。如空白样本难以得到，可采取5%牛血清或人血清白蛋白溶液。或依据测定项目选取对应基质样本，但应注意将基质效应减至最小。试验方法试验方法在一次运行中将空白样本重复测定20次。数据处理数据处理数据统计：将测定结果统计于表格中。假如检测系统对于低于零结果汇报为零，应统计初始响应值，如吸光度值等。数据统计：计算20次结果均值与标准差SD。结果汇报：结果汇报：以空白均值加两倍标准差汇报方法检测限。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第4页线性范围线性范围线性范围评定基本标准线性范围评定基本标准试验操作人员应熟悉方法原理与操作，能对样本进行正确处理，确保仪器工作状态正常，采取适当校准品对仪器进行校准。仪器各项性能指标（如精密度）应与标称值相符，不存在显著携带污染等。应使用同批号试剂及校准品。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第5页线性范围线性范围基本要求基本要求样本基质应与临床试验样本相同，但不可采取含有对测定方法含有明确干扰作用物质样本，如溶血、脂血、黄疸或含有一些特定药品样本。进行血清学标志物检测时，理想样本为分析物浓度靠近预期测定上限混合人血清。建立一个定量测定方法线性范围时，需在预期测定范围内选择7-11个浓度水平。如将预期测定范围加宽至130%，在此范围内选择更多浓度水平，然后依据试验结果逐步降低数据点直至表现出线性关系，可发觉最宽线性范围。当对标称线性参数进行验证时，需在已知线性范围内选择5-7个浓度水平。不论是建立或验证线性范围，所选取浓度水平应可覆盖整个预期测定范围并包含与临床相关主要评价浓度，如最小测定浓度或线性范围最低限、不一样医学决定水平、最大测定浓度或线性范围高限等。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第6页线性范围线性范围制备方法制备方法不一样浓度水平样本可经过将高浓度样本与低浓度样本进行倍比稀释得到，注意在进行液体吸收时应选择精密度与准确性好移液装置。制备时应将样本完全混合并防止蒸发或其它使样本变质情况。每份样本浓度与体积单位应统一。假如高/低浓度血清值未知，可将每种血清编码，用编码代表每个血清相对浓度。对于等浓度间隔样本，可用连续整数如1、2、3、4、5）代表连续样本。进行数据处理时可用样本号代替X值。样本特殊处理：在无法得到适用人血清时，需对样本进行一些特殊处理以满足试验要求。这些处理过程包含稀释、加入添加物或透析、热处理等，不论进行何种处理均应以保持基质恒定为基本标准。在评价汇报中应对所使用稀释液、添加物、溶剂等材料起源加以注明。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第7页线性范围线性范围试验过程试验过程建立线性范围：需测定9-11个浓度水平，每个浓度水平重复测定3-4次验证标称线性参数：需测定4-6个浓度水平，每个浓度水平重复测定3-4次。全部样本应在一次运行中或几次间隔很短运行中随机测定，最好在一天之内完成。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第8页线性范围线性范围结果汇报结果汇报线性范围汇报详细格式不要求，但最少应包含以下几方面：进行线性评价试验室或生产厂家名称。被评价方法或试剂名称，批号。测定项目。线性范围（如为二阶线性应包含临床允许误差）。如可能应标出测定项目标医学决定水平及在此水平处临床允许误差。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第9页可汇报范围可汇报范围可汇报范围评定基本标准可汇报范围评定基本标准1.试验人员应熟悉测定方法与仪器操作。2.采取适当校准品、质控品并保持仪器处于正常状态。3.用于评价试验试剂应为同一批号，并在使用期内。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第10页可汇报范围可汇报范围样本要求样本要求最好选择与测定样本含有相同基质样本。制备方法制备方法低值样本：将待测样本（含被分析物）用混合人血清（含被分析物浓度水平较低）或5%牛血清白蛋白生理盐水溶液进行稀释，产生靠近于方法线性范围低限浓度水平样本，普通为5个浓度水平，浓度水平间隔应小于线性范围低限10%。高值样本：选取含被测物高值样本，必要时可添加被分析物纯品，并计算出理论值。使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理盐水溶液或测定方法要求稀释液对高值待测样本进行稀释，使其靠近于线性范围上1/3区域内，并统计稀释倍数。最少选取三个高浓度样本，稀释倍数应为方法性能标明最大稀释倍数、并适当增加或减小稀释百分比。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第11页可汇报范围可汇报范围试验过程试验过程在一次运行中将低值样本重复测定10次，高值稀释样本重复测定3次。数据处理数据处理数据统计：可依据附表进行数据统计。数据统计：分别计算AVE、SD、CV值。对于可汇报范围高限还应计算乘以稀释倍数后还原浓度和相对偏差。结果汇报结果汇报可汇报范围低限：以方法性能标示CV值为可接收界值，由数据中选取CV值等于或小于可接收界值最低浓度水平做为可汇报范围低限。可汇报范围高限：选取还原浓度与理论浓度偏差（%）等于或小于方法标示CV值时最大稀释倍数为方法推荐最大稀释倍数，方法线性范围上限与最大稀释倍数乘积为该方法可汇报范围高限。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第12页准确度准确度回收试验回收试验回收试验评定基本标准回收试验评定基本标准1.试验人员应熟悉测定方法与仪器操作。2.采取适当校准品、质控品并保持仪器处于正常状态。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第13页准确度准确度回收试验回收试验试验样本基本要求和制备方法试验样本基本要求和制备方法1 选择适当浓度常规检测样本，分为体积相同3-4份。2 在其中2-3份样本中加入不一样量待测物标准，制成2-3个不一样加入浓度回收样本，计算加入待测物浓度。3 在另一份样本中加入一样量无被测物溶剂，制成基础样本。试验过程试验过程用待评价方法对回收样本和基础样本进行测定，通常对样本进行2-3次重复分析，取其均值进行计算。数据处理及结果汇报数据处理及结果汇报1 计算回收率：回收率1=2可接收判断：百分比系统误差小于CLIA 88允许总误差1/2 体外诊断试剂分析性能评估指导原则第14页准确度准确度回收试验回收试验注意事项：注意事项：1 加入体积：加入标准液体积普通在样本体积10%以内；并且确保在加样过程中取样准确度。2 加入待测物浓度：在确保总浓度在方法分析测量范围内，尽量使加入标准液后样本中被测物浓度到达医学决定水平。3 标准物浓度：因为标准物溶液加入体积不到10%，为确保得到不一样浓度回收样本，标准物浓度应该足够高。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第15页准确度准确度方法学比对方法学比对方法学比正确基本标准方法学比正确基本标准1.熟悉待评价系统。2.编写仪器标准操作规程，其中包含校准程序和室内质控程序。3.比对方法选择：对于比较、对方法，采取符合生产厂家要求试验室现行方法，或采取公认参考方法。比对方法应含有以下条件：（1）含有比试验样品方法更加好精密度。（2）没有已知干扰物。（3）同试验样品方法含有相同单位。比较方法应该选择正确性经过验证方法,依据实际条件,选择次序以下：参考方法、原装系统、配套系统、经过验证非配套系统。4.待评价方法处理：进行方法学对比试验前，应该对系统进行初步评价（可参考NCCLS EP-10），而且对待评价方法进行精密度评价（参考相关标准）,只有在以上评价完成而且到达相关标准后，才可进行对比试验。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第16页准确度准确度方法学比对方法学比对试验样本基本要求试验样本基本要求1 按照试验对样品要求搜集处理病人样品，样本贮存时间及条件由被测组分稳定性而定，尽可能防止使用贮存样品。2 样品应来自于许多病人，而且此病人疾病对于被测组成影响应该是知道，不要使用含有干扰此方法组分或条件(如溶血)样品。3 在含有临床意义范围内即医学决定水平范围内，评价试验样品方法，通常基本从低于参考范围低限到高于参考范围高限。分析浓度尽可能在汇报浓度范围内均匀分布。商品质控物或者校准物可能存在基质效应，应防止使用。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第17页准确度准确度方法学比对方法学比对试验过程试验过程1 天天选择8个临床病人样本，按1到8次序编号。用两种方法同时进行试验，按照1，2，3，4，5，6，7，8，8，7，6，5，4，3，2，1样本次序进行测定。2 以上试验最少重复5天，即最少分析40个不一样临床病人样本。天天试验必须进行校准和室内质控。只有在室内质控合格情况下，当日试验室数据才有效。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第18页精密度精密度1.批内精密度批内精密度是众各种类精密度中最基本一个，它是在严格相同条件下，所得到最正确精密度。2.批间精密度批间精密度指在同一试验室，由同一（组）操作员在同一仪器上，使用同一方法和同种、同一批号试剂，在一段时间内(普通为一个月或20个工作日)对同一测试样品（惯用质控品）测量结果精密度。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第19页Text in here精密度精密度精密度评定基本标准精密度评定基本标准1.操作者必须熟悉方法和/或仪器工作原理，了解并掌握仪器操作步骤和各项注意事项，能在评定阶段维持仪器可靠和稳定。2.用于评定试验样品普通常采取临床试验室搜集稳定和冷冻贮存血清(浆)库；当实验室搜集样品不稳定或不易得到时，也可考虑使用稳定、以蛋白质为基质商品物质，如校准品或质控品。3.评定精密度时，应最少评定二个浓度水平样本精密度。当二个浓度精密度有显著差异时，提议增加为三个浓度。所选样本浓度应在测量范围内有医学意义，即最少有一个浓度在医学决定水平(medical decision levels)左右。不要为了得到较小精密度，都选取较高值样品，甚至超出测量范围。也不应选取靠近最低检出限样品，此时所得精密度往往偏大。相当多检验项目低值常无实际临床意义，但有少数检验项目，其低值也有临床价值，此时就需要评定有判断价值低值精密度，适用时，可进行功效灵敏度评定。如没有医学决定水平，可在参考区间上限左右选一个浓度。另外，再依据检验项目标性质在线性区间内选择另一个值。如与厂商或文件报导精密度进行比较，所选浓度应与被比较精密度浓度相靠近。不然，有可能得出不恰当结论。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第20页精密度精密度只评定批内不精密度只评定批内不精密度1 试剂和校准品：应使用同一个类、同一批号试剂和校准物,如可能,只进行一次校准。使用不一样批号试剂和屡次校准都会增加检验结果变异程度。2 评定方法：在以上条件满足情况下，在一批内对样本进行重复测定，最少进行20次重复测定。3 质量控制：检验时应同时最少测一个质控品。当质控品结果超出要求失控限，不论试验结果是否满意都应弃去不用，重新进行试验以取得20个试验数据。要保留全部质控数据和失控处理统计。4 数据搜集：在进行数据分析前，检验数据中有没有因为偶然差错引发离群值(outliers)，可用下述离群值标准；从已搜集20数据计算出总均值和标准差，任何结果和总均值差值超出4个标准差时，可认为是离群值。为了能搜集到最少20个有效数据。除补充因为质控失控而增加测试外，还应再增加因为离群值不用于精密度计算所需增加检验次数。在进行这种批内精密度评定试验时，一次只能有一个离群值，当离群值超出1个时，应怀疑是否为方法不稳定或操作者不熟悉所致。此时，应不用此次试验数据。检验问题和解决问题后重新开始新评定试验。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第21页Text in here精密度精密度同时评价批内和批间不精密度同时评价批内和批间不精密度评定方法：评定方法：天天做2个批次测试，每批测试时，对同一样品作双份测量，共做20天。评定结束时共有40对，即80个测试结果。从40批次测量中双份结果差值求出批内精密度。从全部80个数据计算出批间精密度。在实施此项评定工作时，必须由同一个或一组操作者在同一台仪器上进行，应该使用相同校准品、相同种类和批号试剂。所用时间不得少于20个工作日，这么所测到精密度能更加好地反应出该临床试验室定量测量方法在一段时间内理想或最适稳定性。在每一批次测量中，必须同时测量质控品，以确保结果是可靠，数据能够采取。注：也能够一日进行一个批次测量，一个批次中对同一样品重复测量4次，共测20个工作日，由80个数据求出批内和批间精密度；假如取得稳定样品有困难，也可改为测5日，每日2个批次，每个批次测一个样本8次。仍有80个数据。从10个批次中每一样品8次差异算出批内精密度。从全部80个结果计算出批间精密度。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第22页同时评价批内和批间不精密度同时评价批内和批间不精密度数据搜集数据搜集要搜集到足够有效数据(最少为80个数据)。除补充因为质控失控而增加测试外，应在进行数据分析前，检验数据中有没有因为偶然差错引发离群值(outlier)，可用下述剔除值标准；从实施段已搜集40对均值数据计算出总均值和标准差，出现以下任何一个情况都可认为是离群值：（1）任何一对均值和总均值差超出4倍标准差（2）任何一对中二个结果绝对差值超出4倍标准差离群值不用于精密度计算。在剔除后应再增加检验次数，以确保最少有40批次，80个数据进行计算。注：任何一次试验剔除值不能超出总测量数2.5%。当超出时，应怀疑是否为方法不稳定或操作者不熟悉所致。此时应不用此次试验数据，重新开始新试验。精密度精密度体外诊断试剂分析性能评估指导原则第23页精密度精密度精密度汇报形式精密度汇报形式精密度结果受众多原因影响，在汇报测量精密度时，应同时说明以下各点：批内标准差及其95%置信区间；批内变异系数;批间标准差及其95%置信区间;批间变异系数;试验进行工作日数;检验批次数;每个批次重复检验数和总检验数;试剂种类和批号;校准品种类、批号和校准次数;如适用，使用仪器种类和型号。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第24页干扰试验干扰试验干扰试验评定基本标准干扰试验评定基本标准（一）干扰物质起源：干扰物质可能来自内源或外源物质。可疑干扰物质起源通常有：1.常见异常标本，比如溶血、黄疸及脂血；2.普通处方药及非处方药；3.患者群体中异常生化代谢物；4.患者群体中常见治疗药品；5.干扰测量程序药品（包含代谢物）；6.已报道干扰相同测量程序物质；7.标本处理过程中添加物，比如抗凝剂、防腐剂；8.采集及处理过程中接触标本物质，比如血清分离设备、导管、标本搜集容器及塞子；9.影响一些试验膳食物质，比如咖啡因，-胡萝卜素，罂粟籽。（二）在实施评价试验前，必须决定临床可接收标准。（三）在实施评价试验前，操作者必须熟悉仪器设备及测量程序并对精密度及准确度进行评价，在进行试验设计时要防止遗留效应影响分析结果，确保分析系统保持稳定。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第25页干扰试验干扰试验干扰试验评定及数据处理方法干扰试验评定及数据处理方法干扰物质对试验结果影响，普通是经过测定对照或基础样本池中待测物浓度计算得出。在一些情况下，对照样本池中可能含有一定量内源性干扰物质，如胆红素、血红蛋白、蛋白质和脂类。在一些测量程序中，采取标本前处理、样本空白、血清基质校正物和因子校正等伎俩以降低这些干扰物质在平均浓度下影响，只有当患者样本中干扰物质浓度高于或低于平均水平时，因为干扰物质引发误差才会显现出来。基于此，有两种评定干扰物质基本方法，每一个方法都有它优点及内在不足，当两种方法同时使用时，可提供相互补充信息。一个方法是将可疑干扰物质加入样本以评价干扰效果，另一个方法是测量个别有代表性病人标本，相对于高特异性可比较测量程序评价被分析测量程序产生偏倚。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第26页干扰试验干扰试验试验材料和基本要求试验材料和基本要求（1）基础样本池：从一些未服用药品健康个体取得新鲜标本，以此反应标本基质。若不能取得新鲜标本，可使用冷冻或冻干标本代替，但应确保试验材料充分靠近新鲜临床标本。使用适当纯度分析物将样本池中分析物浓度调整到医学决定水平，但要防止引入其它干扰物质。（2）储存溶液：准备一个适当纯度或者最靠近循环形式可疑干扰物质。选择一个试验物质能充分被溶解溶剂，比如试剂纯水、稀释HCl或NaOH、甲醇或乙醇、丙酮、二甲亚砜（DMSO）及其它有机溶剂。制备最少20倍干扰物试验浓度储存溶液。（3）每个标本所需要重复测量次数：双侧检验试验重复次数为：，单侧检验用Z1-代替Z1-/2。其中，Z1-/2是双侧检验可信度为100(1-)%时标准正态分布相对应百分位数；Z1-是单侧检验可信度为100(1-)%时标准正态分布相对应百分位数；Z1-是把握度为100(1-)%时标准正态分布相对应百分位数；dmax是检测分析物浓度时最大允许干扰（interference）；s是测量程序重复性标准差。因为试验次数必须为整数，所以将计算结果四舍五入为整数。（4）干扰物试验浓度：干扰物质浓度应到达病理标本最高浓度值。（5）分析物试验浓度：分析物试验浓度应选择两个浓度水平。在大多数情况下，可选择医学决定水平、参考范围上、下限或病理浓度。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第27页干扰试验干扰试验试验过程试验过程（1）选择适当分析物浓度；（2）建立一个临床上显著性差异（dmax）标准；（3）决定每个样本重复次数；（4）制备一个基础样本池；（5）制备一个储存溶液；（6）制备试验样本，将储存溶液加至容量瓶体积1/20，再用基础样本加至刻度，混匀；（7）制备对照样本，将溶剂加至另一容量瓶体积1/20，再用基础样本加至刻度，混匀；（8）在同一批测定中，交替分析试验（T）及对照样品（C），比如C1T1C2T2C3T3.CnTn；（9）统计分析结果。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第28页稳定性稳定性稳定性评定基本标准稳定性评定基本标准1.试验操作人员能熟练应用操作系统。能定时（包含：每日、每七天、每个月、每季度）对所用仪器进行维护保养，按仪器说明书所要求定时更换易损零配件，每年请国家计量院对仪器滤光片进行校验，使仪器处于正常工作状态，确保仪器有很好测定精密度及降低样本、试剂携带污染等。2.要采取与评价试剂配套校准品，校准品使用（储存、复溶）应严格按照产品说明，校准步骤与间隔应按照本室标准操作程序进行。3.要做好室内质控，质控物应有可靠起源，稳定性应在一年以上，应尽可能采取人血清基质，可选取定值或非定值质控品，质控物使用（储存、复溶）应严格按照产品说明，质控物定值与靶值确实定应按照本室标准操作程序进行。4.进行稳定性评价时应注意试剂使用期及批号，不可采取过期试剂或不一样批号试剂，最好用同批混合试剂，这么可防止瓶间差。试剂应存放在说明书要求条件下。工作液配制应严格按照产品说明进行，试剂瓶上要标注打开日期及开瓶后失效日期并签上名或缩写，要注意配制好工作液是否需要避光保留。5.试验室应对用来保留试剂冰箱有温度监控统计，假如发觉冰箱温度可能存在问题，应该及时调整冰箱温度，以符合试剂保留要求，假如不能调整，应该及时转移冰箱内试剂。还应做好试验室内温度统计，对试验用水进行电阻率测定（不能低于1兆欧姆.厘米）。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第29页稳定性稳定性试验项目：试验项目：1.1 测定新配制试剂工作液和稳定时末试剂工作液两组平均值之间一致性。1.2 测定稳定时末试剂工作液空白吸光度值。1.3 测定稳定时末试剂工作液空白值试验样本：试验样本：2.1 两组平均值之间一致性试验样本要求（1）临床样本（人血清）：可防止基质效应对结果影响，力争新鲜，但不可选取含有对测定方法含有明确干扰作用物质样本，如溶血、脂血、黄疸或含有一些特定药品样本。最理想浓度为医学决定水平（普通有两个水平）。（2）质控品：选择易得到、有可靠起源，稳定性好定值或非定值质控物、此质控物最少要有两个浓度水平。2.2试剂空白吸光度值、试剂空白值试验样本要求生理盐水（开瓶时间在三个月内）应该透明清澈如出现沉淀或者混浊应及时更换。试验方法试验方法每个浓度水平样本重复测定最少6次，计算平均值。新配制及稳定时末工作液应在同次运行中测定，可将仪器带来不精密度减到最小。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第30页Description of the contentsDescription of the contentsDescription of the contents参考值（参考区间）参考值（参考区间）定义定义 1.参考个体：依据设计标准筛选出进行试验个体（确定一个人健康情况通常是非常主要）2.参考人群：由参考个体组成群体。（参考人群数量通常是未知，所以它是一个假定实体。参考人群也能够由一个人组成，比如为本身或其它人做参考。主题特异性参考个体在本指导文件中不包含在内。）3.参考样品组：选出适当数量个体以代表参考人群。4.参考值：经过对一定数量参考个体测量和观查，所取得检测结果。（对参考个体试验结果，参考值源于参考样品组）5.参考值分布：一组参考值分布。6.参考样本组参考值分布：经过测定，并用适当统计方法进行处理。7.参考人群参考值分布：评定参考样本组参考值分布，并用统计方法进行处理。8.参考限：源自参考值分布，用于描述部分参考值位置（小于或等于、大于或等于、下限/上限。9.参考区间：参考值低限和高限之间。如：GLU：3.66.1 mmol/L。有时只有参考值高限（X）有意义，其参考区间为：0X)。10.观察值：病人样本试验室检验结果，与参考值、参考值分布、参考限、参考区间作比较。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第31页参考值（参考区间）参考值（参考区间）选择参考个体选择参考个体1.1 概要概要健康是一个缺乏统一定义概念，所以，确定排除非健康标准是选择参考个体第一步。每一项研究都有不一样健康标准。一个准参考个体健康状态需经过一系列检验才能确定，这些检验包含病历检验或现实状况态生理指标临床试验检验。用于参考值研究标准应含有详细描述和证实，试验操作者依据此标准来判定参考样品组健康状态，调查问卷可用于评价每个参考个体健康状态。1.2 排除和分组排除和分组排除标准详细要求了准参考个体非健康状态，用于排除非健康参考样本。表-1列出了基本排除标准，此表并没有囊括全部排除标准，每个项目应依据实际情况细化排除标准。分组标准详细要求了组别特征。最惯用分组标准是年纪和性别。表-2还列出了其它分组标准。各个项目可依据实际情况进行调整。排除和分组最正确方法是调查问卷方式。调查问卷常只需要回答“是”或“否”即可确定，也可与体检同时进行。1.3 选择参考个体：选择参考个体：健康参考值参考个体不要求是健康年青人，他们应与疾病人群相同。许多情况下，年纪相关参考区间更适合用于临床诊疗。但有些情况下，与年纪相关试验室指标改变可能不代表健康情况改变，如老年人总胆固醇或生长激素水平改变。除非尤其需要（婴儿、老年人），参考个体通常不应是临床病人。1.4 抽样调查问卷：抽样调查问卷：为了保护参考个体权益，应确保问卷信息和检测结果保密性。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第32页参考值（参考区间）参考值（参考区间）项目准备：项目准备：对全部分析前条件，包含项目准备、样品搜集和处理、分析方法、仪器，应进行严格限定，限定条件应可同时应用于参考个体和患者人群。普通情况下，分析前应考虑两个原因，即生物学原因和方法学原因。生物学原因包含代谢和血液动力学，方法学原因包含样品搜集和处置等。样本种类、搜集、处置和贮存样本种类、搜集、处置和贮存试验室应有样品搜集、处置和贮存标准操作手册。选择适宜采血管，采血管不能引入外源性干扰。确定样本是否可在厌氧条件下贮存。不应使用溶血、脂血、黄疸血清或血浆样本。血样血样假如选择样本为血样，应确定需要是动脉血、静脉血还是毛细血管血。样本需要抗凝时，应选择抗凝剂，应明确样本采集方法。其它体液样本其它体液样本其它体液样本包含尿液、脑脊液、胸膜积液、腹腔积液、心包积液、关节内滑液、羊水和唾液等。应注意体液搜集时间段。温度温度应明确样本搜集和贮存温度。通常情况下，样本在采集后，应尽快进行处置和检测，尽可能降低放置时间。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第33页参考值（参考区间）参考值（参考区间）分析方法特征分析方法特征试验室应对所用检测方法进行细致描述和要求，应建立不精密度、不准确性、最小检测限、线性、回收率、干扰特征评价准则。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第34页参考值（参考区间）参考值（参考区间）考值（参考区间）评定方法和结果汇报考值（参考区间）评定方法和结果汇报1.新分析物质或分析方法新分析物质或分析方法1.1 方法描述方法描述此方法适合用于新分析物、新分析方法及以前分析物参考值建立。健康人群某分析物质参考值产生和参考区间预计，应依据一个详细限定条件方法进行，这些条件限定包含以下几点。（1）依据医学科技文件，建立适宜生物变异和分析干扰项目列表。（2）建立选择、排除及分组标准，设计适宜调查问卷，以揭示潜在参考个体标准。（3）参加参考区间试验参考个体应签署书面同意协议，并完成调查问卷。（4）按照问卷结果及其它适宜健康分析结果，对潜在参考个体进行分类。（5）依据排除标准或体检结果，从参考样品组排除不符合要求参考个体。（6）依据所需要参考限，决定适宜参考个体数目。（7）用被分析物检测常规方法，对被选择参考个体进行采样。（8）按照常规方法对样本进行搜集和处理。（9）按照被评价方法分析样品，搜集数据。整个过程与常规操作保持一致。（10）检测数据，设计图表，以评价数据分布。（11）识别可能数据错误。（12）选择预计方法、预计参考限和参考区间，对参考区间进行分析。（13）对以上步骤进行证实。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第35页参考值（参考区间）参考值（参考区间）1.2 结果分析结果分析 参考区间包含两个值，即参考上限和参考下限。对于大多数分析物，以2.5%为低限，以97.5%为高限，通常确定范围在2.5%97.5%测定值为参考值。有时，只有参考上限具临床意义。对于单侧指标，能够确定第5百分位数或第95百分位数为参考值。1.2.1 所需最少参考个体数：所需最少参考个体数：120个观察值能够满足90%置信限，153个观察值能够满足95%置信限，198个观察值能够满足99%置信限。作为通行标准，推荐一个分析项目最少需要120个参考个体数。假如试验分组，每一组最少需要120个参考个体数。假如这120个参考值中，有不符合健康条件值，将其排除后，应补测符合标准值，最终总体参考值不少于120个。1.2.2 离群值处理：离群值处理：设定比值D/R，其中D=最大值-次大值，或D=最小值-次小值，R为全部观察值极差。假如D1/3R，则极值应被删除。当两三个离群值处于数据分布一侧时，D1/3R规律经常不能识别出极值是否是含有显著水平异常值。这种情况下，1/3规律应将最小极值认定为离群值。1.2.3 参考值分组：参考值分组：对不一样性别、不一样年纪之间参考区间差异应进行验证，每一组最少应选择120个参考个体。普通情况下，假如两组数据含有显著性差异，则参考区间应分别汇报。两组之间平均值差异应用z检验进行验证。第一步，每组先检测60个个体。每一组平均值显著性差异应用标准正态检验。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第36页参考值（参考区间）参考值（参考区间）已经有分析物质或分析方法已经有分析物质或分析方法1 方法描述方法描述此方法适合用于将已知有效参考值（参考区间）从供给试验室转移到接收试验室。在适宜情况下，假如检测主体、方法学、取样方法均含有兼容性，参考值（参考区间）转移是可行。测量系统之间可比性能够经过对应方法进行验证。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第37页参考值（参考区间）参考值（参考区间）已经有分析物质或分析方法已经有分析物质或分析方法2 参考值（参考区间）转移参考值（参考区间）转移参考值（参考区间）转移是一个复杂过程，为了使参考值含有可接收性，需要满足一定条件。可接收转移条件应视详细情况而定：2.1 使用相同分析系统（方法和仪器）：使用相同分析系统（方法和仪器）：（1）在相同试验室里；（2）从一个试验室到另一个试验室；检测主体来自相同地域或相同人口统计学总体；检测主体来自不一样地域或不一样人口统计学总体；2.2 使用不一样分析系统（不一样方法和不一样仪器）：使用不一样分析系统（不一样方法和不一样仪器）：（1）在相同试验室里；（2）从一个试验室到另一个试验室；检测主体来自相同地域或相同人口统计学总体；检测主体来自不一样地域或不一样人口统计学总体；假如首次参考值（参考区间）测定已经完成，则不一样参考值（参考区间）转移应着重注意两个事项：即分析系统结果可比性和样本总体可比性。整个分析前过程及分析过程，均应与首次参考值（参考区间）确立过程保持一致。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第38页参考值（参考区间）参考值（参考区间）已经有分析物质或分析方法已经有分析物质或分析方法3 参考值（参考区间）确认：参考值（参考区间）确认：有三种方法可用于参考值（参考区间）转移可接收性评价。3.1 参考值（参考区间）转移可接收性能够经过对首次适宜参考值研究相关要素检验来进行评定，包含参考总体地域和人口统计学同质性，分析前和分析程序，分析操作参考值（参考区间）描述和调整，预计参考值（参考区间）方法等。假如初始参考值（参考区间）研究资料详细，接收试验室上述条件均与初始参考值（参考区间）研究相同，参考值（参考区间）能够直接进行转移，不需要进行确认试验。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第39页参考值（参考区间）参考值（参考区间）已经有分析物质或分析方法已经有分析物质或分析方法3.2 假如用户或接收试验室希望对厂家或其它试验室所汇报参考值（参考区间）进行确认试验，应对较少数量参考个体（n=20）进行参考值（参考区间）试验，并将结果与首次研究结果进行比较。在此研究中，整个过程应与首次研究保持一致。这20个参考个体应含有接收试验室健康人群代表性，并满足排除和分组标准。假如接收试验室检验主体人口统计学与首次研究检验主体不含有同质性，即存在显著差异时，参考值（参考区间）不可进行转移。假如20个检验主体中有2个以下值落在首次研究95%参考限之外，则首次参考值（参考区间）可被转移。假如3个以上检验主体值落在95%参考限之外，则用户应重新检验分析程序，检验两个参考总体人群是否含有同质性，是否需要按照规模性试验指南建立适合自己试验室参考值（参考区间）。此方法介绍接收试验室按照厂家或权威试验室提供方法，检测20个参考个体，假如只有两个以下参考个体值落在首次参考限以外，则应接收厂家或权威试验室提供参考值（参考区间）。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第40页参考值（参考区间）参考值（参考区间）已经有分析物质或分析方法已经有分析物质或分析方法3.3 用户或接收试验室希望对厂家或其它试验室所汇报参考值（参考区间）转移进行确认试验，也能够对60个参考个体进行参考值（参考区间）试验，将测定结果与所提供首次参考值（参考区间）进行比较。在此研究中，整个过程应与首次研究保持一致。假如接收试验室检验主体人口统计学与首次研究检验主体不含有同质性，即存在显著差异时，参考值（参考区间）不可进行转移。参考个体选择，参考值（参考区间）取得应与首次参考值（参考区间）研究相一致，数据经检验和离群值排除之后，将小样本参考值（参考区间）数据与首次大样本参考值（参考区间数据进行显著性检验，假如检验结果不存在显著性差异，则接收所提供首次参考值（参考区间）。假如存在显著性差异，应深入取样，深入比较，或者进行全规模参考值（参考区间）研究。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第41页参考值（参考区间）参考值（参考区间）已经有分析物质或分析方法已经有分析物质或分析方法4 参考值（参考区间）汇报参考值（参考区间）汇报：试剂生产企业假如提供参考值（参考区间）研究，则应提供试验室设备、数据处理系统、参考值（参考区间）覆盖范围，参考人群选择等详细参考值（参考区间）起源条件。体外诊疗试剂生产企业在产品标识上应提供参考值（参考区间），并说明参考值（参考区间）所引用文件。在此文件中，应详细列出参考样本数量，选择标准，分析前和分析变量控制，统计学处理方法等。生产企业应识别分组原因，为每一个含有显著性差异组别提供参考值（参考区间），而且说明是否对组之间差异进行了检验，如性别、年纪、饥饿/非饥饿、一天中取样时间、妊娠、体位等。生产企业使用参考人群应含有与其市场类似分布。为了易于参考值转移，生产企业应提供详细研究过程及结果。体外诊断试剂分析性能评估指导原则第42页L/O/G/OThank You!体外诊断试剂分析性能评估指导原则第43页