白茶提取物对纳米sio2诱导的大鼠纤维化抑制作用及机制.pdf

单位代码：I03J5学 号：21616206分类号：S5刀.1密级：无硕士学 位论文中文论文题目:英文论文题目:白茶提取物对纳米SiO2诱导的大鼠纤维化抑制作用及机制The Inhibition and Mechanism ofWhite Tea Extract on Fibrosis in Rats Induced by Silicon Dioxide NanoDarticles申请人姓名：_朴秀美_指导教师：屠幼英教授专业名称：_茶学_研窕方向：茶叶生物化学与综合利用所在学院：农业与生物技术学院论文提交日期 二零一九年三月hina Acaderrirnal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大学 或其他教育机构的学位或 证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文 中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期：*6年力月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解 浙江大学 有权保留并向国家有关部门或机 构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江大学 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影 印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/致 谢浙大硕士两年半的时间，像做梦一样一眨眼就过去了。本科毕业之后，在韩 国工作的八年间，我经常说的就是“很想回到学生的时光，能再回到学校学习是 我最大的愿望了。”终于我的梦想在浙大实现了。两年半的留学生活，每天都像 做梦一样，愉快的过着每一天，兴奋，开心。因为本科毕业后，离开学习环境近10年，且之前从未有过理科方面的学习，硕士期间的学习让我的生活并不是那么美好。每天面临的语言障碍和学习困难，无数次让我想要放弃，幸运的是身边老师和同学的支持和帮助让我坚持了下来。首先非常感谢屠幼英教授，在浙江大学求学期间对我的关心和指导，在艰苦 的理科学习留学生活上给予了我很大的帮助，而且不区别对待中国学生和留学生,一直相信和鼓励着像我这样没有基础的人，给我像普通学生一样做实验的机会，同时相信我能完成实验。本论文从选题到实验设计、试验的进行及最后的数据分 析和论文撰写，屠幼英老师都倾注了大量的精力和心血。感谢课题组的何普明老师、吴媛媛老师、李博老师和金恩惠老师在实验方面 给予的帮助和指导，当我面临困难时，他们都积极的帮我解决问题，日常生活中 也给予我很大的关心和关爱。还有非常感谢我身边的同学们。感谢王耀民、刘晓博、吴学进、仝团团、任 苧、许兰、陈志达、李金、顾莹婕、郭娜、陈莲芙、吴小清、黎攀，胡金祥等的 支持和帮助，尤其是在学习和生活上给予我最大帮助的田学凤。在他们的陪伴和 帮助下，我学到了很多东西，从学习方面，如语言、学习、实验，到生活方面，如游戏、网语、明星等。和同学们的日常相处，让我可以融入到真正的中国文化 中。虽然我的中文水平还不是太好，但大家都能愿意和耐心的听我说话，当沟通 出现问题时，也能耐心的听我重述或是不嫌麻烦的给我解释到我能理解的程度。他们也是我的老师。感谢来中国之前就一直给予我关心和支持的王小宁老师和金坚阿姨，我不会 忘记他们常常担心我学习疲惫，经常叫我去和他们一起吃饭，担心中国传统节日 时我一个人在中国生活会很孤单，他们都会陪在我身边，很高兴我在中国有了中(C2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/国爸爸妈妈了。在这里祝福两位长辈身体安康，万事如意！感谢我的父母和身边给予我支持和鼓励的所有亲人、朋友们。最后，衷心感谢参与本次论文评阅、答辩以及对本论文提出宝贵意见的所有 老师和同学们！朴秀美2019年2月于浙江大学紫金港(C)1994-2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http:/浙江大学硕士学位论文摘要摘要1997年，国际癌症研究所（IARC）已将SiO2列为一级致癌物。研究表明，SiO2吸入人体后可以迅速转移到全身的不同器官，会引起肺、肝组织产生较多 的炎症细胞因子及氧化应激，导致奸维化。已有研究报道，白茶具有抗炎、降血 脂、抗衰老、降血糖等保健功效。本论文研究了白茶提取物对纳米SiCh所致大 鼠肺与肝纤维化的抑制作用及机制。主要研究结果如下：1.实验采用白毫银针、白牡丹两种白茶为原料，经过提取、浓缩和冷冻干燥，得到两种白茶提取物。生化成分检测发现，白毫银针提取物的茶多酚、咖啡碱和 氨基酸含量高于白牡丹提取物，白牡丹提取物的可溶性糖、黄丽和蛋白质含量高 于白毫银针提取物。2.病理学和形态学观察发现，白茶提取物对纳米SiCh所致纤维化大鼠的肺、肝 具有一定的修复作用。通过对纤维化大鼠肺和肝指数、肉眼观察、HE染色、半 定量评价分析，白茶提取物可减轻肺、肝组织质量，而直接影响到肺、肝指数的 下降（P0.05）,并且肺、肝纤维化病理形态有明显的改善作用。通过两周白茶 提取物的灌胃，大鼠纤维化减少效果可以直接通过纤维化程度的半定量评分结果 得到验证（P0.05）o3.白茶提取物对纳米SiCh致大鼠的肺、肝氧化应激具有保护作用。研究发现，纳米SiO2染毒之后，大鼠血清、肺和肝组织中NO及MDA含量增加，并机体主 要两个抗氧化酶SOD及GSH-Px的含量下降，而经过两周灌胃白茶提取物之后，纤维化大鼠机体抗氧化能力提高。白茶提取物显著（P0.05）有效降低纤维化大鼠血清中NO及MDA含量，其中白毫银针的效果最佳，白牡丹升高SOD水平最显著（P0.05）；白茶提取 物使纤维化大鼠肺组织中NO水平显著降低（P0.05）；而对纤维化大 鼠肝组织效果更好，白茶提取物能有效明显降低NO及MDA含量，升高SOD、GSHPx水平，每项指标的变化都有统计学意义（P0.05）,其中白毫银针的效 果最佳；白茶提取物对纤维化大鼠肺和肝组织中IL-6浓度明显降低，均有统计 学意义（P0.05）,其中白牡丹具有较好的效果。12019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文摘要综上所述，白茶提取物可明显减轻纳米SiO2所致大鼠的肺和肝纤维化的程 度，清除自由基，改善肺和肝纤维化病理现象，此结果可能是通过抗氧化和抗炎 机制来实现的。本研究为白茶提取物预防和治疗SiO2引起的肺和肝纤维化提供 了新的途径。关键词：白茶；纳米二氧化硅；氧化应激；肝纤维化；肺纤维化；大鼠(C)1994-2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http:/浙江大学硕士学位论文AbstractAbstractInternational Agency fbr Research on Cancer(IARC in 1997)has classified that SiOs is a group!carcinogen.Studies have shown that after S1O2 inhalation,the silica particles are rapidly translocated to different organs in the body such as lung and liver tissues where they promote accumulation of inflammatory cytokines that induces fibrosis.Studies have reported that white tea has a wide range of effects that are beneficial to health as it inhibits inflammation,modifying blood lipid and hypoglycemia,anti-ageing properties and so on.In this study,we investigated the inhibitory effect and mechanism of white tea on pulmonary and hepatic fibrosis induced by silica dioxide nanoparticIes(nano-SiO2)in rats.The main results are as follows:1.In this experiment,silver needle and white peony were used as research materials.Tea extracts were obtained by extraction,concentration and freeze-drying.Biochemical analysis showed that polyphenol,caffeine and amino acids were higher in the silver needle tea extract than white peony extract.Whereas soluble sugar,flavonoids and protein were higher in white peony than silver needle tea extract.2.Pathological and morphological observation showed that white tea extract had a certain repairing effect on fibrous lung and liver tissues of rats that was induced by nano-SiO2.Through the observation of lung and liver index,visual observation,HE staining and semi-quantitative evaluation of fibrotic rats,white tea extract can reduce the quality of lung and liver tissue,directly affecting the decline of lung and liver index(P0.05),and the pathological morphology of lung and liver fibrosis had obvious controled and reduced.After two weeks of intragastric administration of white tea extract,the reduction of fibrosis in rats could be directly reflected in the semi-quantitative score of fibrosis degree(P0.05).3.White tea extract had a protective effect on nano-SiOi induced oxidative stress in rat lung and liver tissues.The contents of NO and MDA in blood serum,lung andIII(C)1994-2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved.http:/浙江大学硕士学位论文Abstractliver tissues increased after nano-SiO2 exposure whereas the activity of two main antioxidant enzymes SOD and GSH-Px decreased respectively.After 2 weeks of oral administration of white tea extract,the antioxidant activity of blood serum,in lung and liver tissues of fibrotic rats increased obviously.White tea extract significantly decreased the content of NO and MDA in blood serum of fibrotic rats(P0.05),silver needle showed the best effect.White peony significantly increased the level of SOD(P0.05)faster to compare with other treatments,and also significantly decreased NO levels in fibrous rat lung tissues(P0.05).Especially,white tea extract effectively reduced the content of NO and MDA in liver tissue of fibrotic rats and increased the activity of SOD and GSH-Px.The changes of each index had statistical significance(P0.05),among which silver needle had the best effect.White tea extract significantly decreased the concentration of IL-6 in lung and liver tissues of fibrotic rats(P0.05),white peony had the best effect.In conclusion,white tea extract can significantly reduce the degree of hepatic and pulmonary fibrosis induced by nano-SiOz,also its abilities of scavenging free radicals and improving the pathological phenomenon of hepatic and pulmonary fibrosis through anti-oxidation and anti-inflammatory properties were proved.In this study,white tea extract provides a new possibility fbr the prevention and treatment of fibrosis.Key words：white tea,silicon dioxide nanoparticles,oxidative stress,hepatic fibrosis,pulmonary fibrosis,ratsIVhina Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文图表索引图表索引表2.1两种白茶提取物的生化成分.12表2.2两种白茶提取物的儿茶素含量.13表3.1大鼠肝纤维化半定量计分.20表3.2白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠肺指数的影响.22表3.3白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠肝指数的影响.24表3.4大鼠各处理组肺纤维化的Ashcroft评分.26表3.5大鼠各处理组肝纤维化的半定量评分指数.28表4.1白茶提取物对纤维化大鼠血清抗氧化能力的影响.34表4.2白茶提取物对纤维化大鼠肺组织抗氧化能力的影响.35表4.3白茶提取物对纤维化大鼠肝组织抗氧化能力的影响.36表4.4白茶提取物对纤维化大鼠肺和肝组织IL-6浓度的影响.37图3.1大鼠各处理组肺组织形态学变化.21图3.2大鼠各处理组肝组织形态学变化.23图3.3大鼠各处理组肺组织HE染色.25图3.4大鼠各处理组肝组织HE染色.27hina Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文缩略词表缩略词表缩写全名中文名纳米SiO2Nano-silicon dioxide纳米二氧化硅SiO2Silicon dioxide二氧化硅NONitric oxide一氧化氮GSH-PxGlutathione peroxidase谷胱甘肽过氧化物酶SODSuperoxide dismutase超氧化物歧化酶MDAMalondialdehyde丙二醛IL-6Interleukin-6白介素GAGallic acid没食子酸C(-)-Catechin儿茶素EC(-)-Epicatechin表儿茶素GC(-)-Gallocatechin没食子儿茶素EGC(-)-Epigallocatechin表没食子儿茶素CG(-)-Catechin gallate儿茶素没食子酸酯ECG(-)-Epicatechin gallate表儿茶素没食子酸酯GCG(-)-Gallocatechin gallate没食子儿茶素没食子酸酯EGCG(-)-Epigallocatechin gallate表没食子儿茶素没食子酸酯VI2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文目录目录摘要.IAbstract.II1II图表索引.V缩略词表.VI目录.VII第一章绪论.1.纳米SiOz的概述.11.1.1 纳米SiOz定义.11.1.2 纳米SiOz的危害性.I1.2.纳米SiOz的体内外氧化应激作用.21.2.1 纳米SiOz对肺纤维化的影响.21.2.2 纳米SiCh对肝纤维化的影响.31.3 天然药物治疗肺和肝纤维化的功效及机理.41.3.1 天然药物治疗肺纤维化的功效及机理.41.3.2 天然药物治疗肝纤维化的功效及机理.51.4 白茶的功效与对疾病的防治作用.51.4.1 白茶的功效.51.4.2 白茶对各种疾病的防治作用.61.5 茶及其提取物对肺和肝疾病的防治作用.71.6 研究内容与技术路线.81.6.1 研究内容.81.6.2 技术路线.8第二章白茶提取物制备和理化成分分析.92.1 材料与仪器.92.1.1 实验材料.92.1.2 主要仪器.92.1.3 主要试剂.92.2 实验方法.10VII2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文 目录2.2.1 白茶提取物的制备.102.2.2 试剂配制.102.2.3 白茶提取物理化成分的测定.102.3 结果与分析.112.3.1 两种白茶提取物的主要理化成分含量.112.4 讨论.142.5 小结.15第三章白茶提取物对纤维化大鼠的形态学及病理学的影响.163.1 材料与仪器.163.1.1 实验动物.163.1.2 主要仪器.173.1.3 主要试剂.173.2 实验方法.173.2.1 白茶提取物的制备.173.2.2 纳米SiCh悬浮液的制备.173.2.3 建立纳米SiCh致大鼠肺、肝纤维化模型.173.2.4 分组及给药.183.2.5 大鼠形态学与病理学观察.183.2.6 统计学分析.203.3 结果与分析.2033.1 白茶提取物对纳米SiO2诱导的大鼠肺、肝形态学以及指数的变化.2033.2 白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠肺、肝病理学的影响.243.4 讨论.283.5 小结.30第四章白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠氧化应激保护作用.314.1 材料与仪器.314.1.1 实验动物.314.1.2 主要仪器.324.1.3 主要试剂.324.2 实验方法.32VIII2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文目录4.2.1 纳米SiCh悬浮液的制备.324.2.2 建立纳米SiCh致大鼠肺、肝纤维化模型.324.2.3 分组及给药.324.2.4 血清以及肺、肝组织的生理指标测定.324.2.5 肺组织及肝组织的炎症因子测定.334.2.6 统计学分析.334.3 结果与分析.334.3.1 白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠血清氧化应激的影响.334.3.2 白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠肺组织氧化应激的影响.344.3.3 白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠肝组织氧化应激的影响.354.3.4 白茶提取物对纳米SiCh诱导的大鼠炎症指标的影响.374.4 讨论.374.5 小结.39第五章总结与展望.405.1 总结.405.2 展望.41参考文献.42IX(C)1994-2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文第一章绪论第一章绪论二氧化硅(SiO2)是指由硅、氧、以及微量的铝、铁、镁等构成，其粉尘颗 粒极细，比表面积达到100m2/g以上，可以悬浮在空气中。大量的研究证明，SiO2 能导致矽肺，并且在1996年10月，国际癌症研究机构(International Agency fbr Research on Cancer,IARC)宣布将SiCh升级为第一类人类致癌物质。在对世界 肺癌发病率最高地区之一的云南宣威地区调查研究发现，此地区的女性肺癌发病 率是中国其他地方的20倍，与当地出产和使用的烟煤相关。此外如采矿、翻砂、喷砂、制陶瓷、制耐火材料等场所均为高SiCh环境。如何预防和治疗SiO2导致 的矽肺和肺癌成为国内外职业病防治的重要问题。L1.纳米SiO2的概述1.1.1 纳米SiOz定义纳米SiO2是指超细纳米级的SiO2,粒径在1100nm间的物质颗粒11具 有分散性好、化学纯度高、不溶于水、低热导性、高磁阻性等独特的性质，可 提高抗紫外线的光学性能、材料的抗老化、强度、耐久性，因此目前作为世界上 大规模工业化生产产量最高的纳米粉体材料之一。纳米SiCh的主要用途在于建 筑、航空航天、医药、电子封装材料、树脂复合材料、塑料、涂料、化妆品、橡 胶、陶瓷、玻璃钢制品等。1.1.2 纳米SiOz的危害性纳米SiO2由于其体积极细且具有独特的理化性质，对人体产生不可预知的 毒性。但是纳米Si02在日常生活中广泛存在，以及大规模生产和纳米产业的日 益发展，人群接触到纳米材料的几率越来越高，以致无法避免纳米SiCh通过各 种不同途径进入人体，因此对纳米SiO2的安全性也己引起人们的关注。微米级SiO2引起的矽肺病占在中国全部职业病的90%,造成很严重的经济 损失，纳米SiCh与微米级SiO2化学组成相同，而且纳米SiOz潜在更大危害。不 仅煤烟中检测出纳米级SiO2颗粒物，还有宣威地区女性肺癌癌组织中发现SiCh12019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文第一章绪论晶体存在久张晓雪15以生产纳米SiO2企业的作业工人为研究对象，进行分析纳 米SiO2对职业接触人群有危害作用，结果发现，职业接触人群在肺功能、血常 规、尿常规以及心血管系统方面都有出现异常。Yoshida等研究发现，通过大鼠 的鼻腔进入直径100nm以下的纳米SiO2可分布至肝脏及大脑。证明接触纳米 SiO2能导致人体危害。还有对于纳米SiOz的毒性，赵光强比较研究微米SiO2 与纳米SiCh对人支气管上皮细胞的破坏性，研究结果显示，微米SiCh没有进入 细胞里，而纳米SiO2可以进入细胞，并赋存细胞质中。另外研究表明网，纳米 SiO2的粒径越小，颗粒表面能和比表面积越大，纳米SiO2的反应活性越大。高 艳荣倒等进行动物实验表明，纳米SiCh导致的氧化损伤比微米级导致的更严重，并其颗粒的大小对导致的损伤程度有显著影响。通过以上的研究表明纳米SiO2 比微米SiCh具有更强毒性和更严重损伤。1.2.纳米SiCh的体内外氧化应激作用1.2.1 纳米SiCh对肺纤维化的影响矽肺的机制是包括SiO2粉尘进入气道，沉积的极细颗粒不能被清除，进入 肺泡，肺泡巨噬细胞不断吞噬和释放矽尘，由于巨噬细胞不能溶解矽尘，从而造 成巨噬细胞损伤并释放大量的致炎因子，释放的矽尘颗粒再次被肺泡巨噬细胞吞 噬，随着此过程反复的进行，不断地释放炎症因子和引起纤维化因子，随后导致 矽肺纤维化和肺癌。目前国内外已研究报道纳米SiO2具有肺毒性，张迎建眄通过一次性滴注方 式感染大鼠纳米SiO2,按照不同时间点观察大鼠肺组织损伤的病理动态变化，结果表明，随着染尘时间延长，早期以炎症为主的病理，后期则呈现以肺间质纤 维化为主。主要引起机体肺部炎症反应W-皿,其损伤程度比微米级SiO2严重13。ParkU6等人的研究发现，纳米siO2可以在体内外诱导氧化应激和炎症反应。经 过纳米SiO2作用后的细胞可引起活性氧(ROS)产生、谷胱甘肽(GSH)水平 降低。同时也引起巨噬细胞释放一氧化氮(NO)水平增加。至今，纳米SiCh导致肺毒性作用的机制还没完全明了，但是，通过以上的 研究表明可知，纳米SiCh与微米级SiCh毒性机理相近，进入机体造成致肺部损2(C2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文第一章绪论伤，肺巨噬细胞清除能力下降，破坏氧化与抗氧化水平的平衡，增生炎症因子和 肺纤维化因子，因而导致肺纤维化。1.2.2 纳米SiCh对肝纤维化的影响肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理基础，是由各种致病因素，包括病毒性、自身免疫性、药物性、酒精性等在内的多种病因导致肝脏炎症、修复反应而发生 肝纤维化。肝纤维化受多种复杂因素影响，其形成是多种因素相互交织的结果，而非一种因素所致。任何肝脏损伤在肝脏修复愈合的过程中都有肝纤维化的过程,如果损伤因素长期不能去除，纤维化的过程长期持续就会发展成肝硬化、肝癌。目前国内外对纳米SiO2造成肝纤维化的研究较少，从以下研究报道可以推测纳 米SiO2与肝损伤的相关性。Wang口7等研究发现，小鼠经口服一次性大剂量的二氧化钛（TiOz）纳米颗 粒注入之后，肝中TiCh含量增高，肝细胞体积变大，细胞核消失，中央静脉周 围的细胞受到损伤，淋巴细胞的浸润。GOberdbrster*网研究发现，肝脏是纳米 SiCh的主要靶器官，通过血液或淋巴液循环可到达肝脏，进而造成肝细胞的损 伤。另外研究表明【，吸收SiCh的小鼠肝脏中SOD以及丙二醛（MDA）表达 水平与正常小鼠比较有显著差异，纳米SiCh与微米SiCh相比可引起更加显著的 毒性效应。此实验证明肝脏可能是纳米颗粒在体内沉积和影响的主要靶器官，通 过氧化-抗氧化系统的失衡，引起肝脏组织的氧化损伤。钟建斌知采用人张氏肝 细胞（Chang liver cells）进行检测，发现纳米SiO?造成细胞严重损伤，细胞核发 生固缩和空泡化现象，此现象与时间和剂量有关。陆逊研究纳米SiCh对人肝 癌细胞HepG2的细胞毒性发现，纳米SiCh的粒径越细，对肝癌细胞活性的抑 制作用越强，并且其结果与浓度和暴露时间密切有关。陆敏口等研究纳米SiCh 对大鼠肝的影响结果显示，纳米SiCh可引起干细胞的明显水肿，大鼠肝组织中 可见淋巴细胞浸润，形成肉芽肿，肝细胞出现水样变形。丫/3】等人的研究结果 表明，纳米Si（h可引起人正常肝细胞L02氧化应激和细胞凋亡，具有与剂量和 时间依赖性。通过以上的研究内容可推测，纳米SiCh可以刺激肝细胞，产生增多的炎症(C2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文第一章结论细胞因子，引起细胞的凋亡，并导致肝内结缔组织异常增生，进一步可造成肝纤 维化，恶化为肝硬化、肝癌。13天然药物治疔肺和肝纤维化的功效及机理天然药物具有疗效稳定，毒副作用小，作用温和持久等优势深受患者欢迎。随着科学的进步，人们自我保健意识增强，对天然药物的认识深化，并且对天然 药物需求增加。目前已报道治疗肺、肝的天然药物主要通过清除自由基、抗氧化、抗炎、提高免疫调节的方法。13.1 天然药物治疗肺纤维化的功效及机理对于天然药物治疗肺病方面的研究，江振友等研究结果显示姜黄素可以降 低肺肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、转化生长因子RI（TGF-仇），这些细胞因子是引 起肺纤维化的主要原因，给予姜黄素干预后，可以不同程度地降低肺组织匀浆及 血清中TGF-pi、TNF-a的含量（P0.05）,同时纤维化程度减轻。LiPA等发现 黄酮类化合物黄苓昔可以减轻Si（）2导致大鼠的肺部炎症和纤维化。郭小燕阿等 研究了丹参对兔矽肺机体的氧化以及抗氧化系统的影响，研究表明，丹参可以降 低兔肺血清中MDA的含量以及提高SOD的活力，还能明显减轻SiO2导致的氧 化与抗氧化失衡状态，从而延缓肺纤维化的发展。高艳荣12刀等研究结果显示，黑 木耳粉可有效减少大鼠矽肺模型肺组织内胶原蛋白的含量，对肺纤维化有一定的 抑制作用，黑木耳粉干预的大鼠组与SiCh染尘组相比，不仅降低了 HYP以及 MDA水平，还能提高SOD的活力，减少脂质过氧化损伤，提高肺脏的抗氧化损 伤能力，因而发挥抗肺部纤维化作用。刘楠囤等利用大鼠感染SiOz模型研究橱 皮素对SiO2诱导肺纤维化的影响，结果表明，榔皮素预处理组的大鼠显著降低 了肺组织中羟脯氨酸（HYP）的表达量，提高了过氧化氢酶（CAT）以及谷胱甘 肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，从而能看到榔皮素对SiOz所致的肺组织纤维 化有一定的预防效果。樊林花【29等探讨五味子乙素（Sch-B）对矽肺大鼠肺组织 NO含量和诱导性一氧化氮合成酶（iNOS）动态变化的影响。五味子是一种中药，Sch-B是五味子中含量最高的联苯环辛烯类木脂素，该研究表明，五味子处理组 与染尘组相比，大鼠肺组织损伤以及纤维化程度都明显的减轻，并且降低了肺组42019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文第一章绪论织的HYP与MDA的含量，同时提高了 GSH含量。而且五味子降低了矽肺早期 炎症反应过程的NO含量以及诱导性一氧化氮合成酶iNOS mRNA表达水平，因 而能减轻矽肺大鼠肺组织的纤维化水平。1.3.2天然药物治疗肝纤维化的功效及机理迄今为止，很多文献已证明天然药物具有不同的功效，对于治疗肝病方面，白背叶已被认证具有抗肝损伤网、抗肝炎卬42病毒作用。另外研究表明网，白背 叶还具有抗肝纤维化作用，建立肝纤维化大鼠模型，观察白背叶根对肝纤维化大 鼠血清和肝组织中氧化指标，结果发现，白背叶根有效降低MDA以及NO表 达水平，证明白背叶具有较好的抗氧化作用，因而有一定的阻止肝纤维化的效果。黄丹丹因研究证明垂盆草醇提物对人肝癌细胞（HepG2）增殖具有抑制作用，随 着药物作用时间的增加，其抑制作用也增强。刘洪峰闾等通过酒精性脂肪肝大鼠 研究表明，豹皮棒总黄酮可以减轻脂质过氧化，明显降低血清中TNF-a水平以 及肝组织中TNF-a、mRNA水平。此外，研究证明银杏叶有效减轻肝组织的炎 症及肝纤维化程度”3%李风华网研究虫草菌丝对二甲基亚硝胺感染大鼠肝纤维 化的作用，发现虫草菌丝可显著降低二甲基亚硝胺感染大鼠肝组织的MDA含量 及GST活性，而明显提高SOD、GSH-Px活性，降低肝组织TNF-a,TGF-01、a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）表达水平。说明虫草菌丝具有较好抗组织氧化损伤，保护肝细胞，减少肝脏胶原形成，抑制肝纤维化的作用。年国侠网研究发现，水 芹总酚酸能减轻对a-素异硫氟酸酯中毒大鼠肝细胞损伤程度，通过水芹总酚酸 处理之后，模型组大鼠肝脏中MDA及SOD表达水平有显著改变。1.4 白茶的功效与对疾病的防治作用141白茶的功效白茶，属轻酵茶，性寒凉，味清淡，是民间常用的降火凉药，具有消暑生津，退热降火、清凉解毒的功效K。由于白茶制法独特，只经适度的自然氧化，因此 保留了更多的营养成分和保健品质。近年来的研究表明，白茶具有较好的抗氧化、抗癌和抗突变、抗糖尿病、肝损伤保护、抑菌叫等多种生物学功效。杨伟丽教(C2019 China Academic Journal Electronic Publishing House.All rights reserved,http:/浙江大学硕士学位论文第一章绪论授【4刀等以同地点、同品种、同嫩度的鲜叶，同时加工成六大茶类，进行其生化成 份分析发现白茶中的黄酮类、氨基酸、可溶性糖、咖啡碱的含量均高于其他茶类。吕海鹏网研究表明，白茶茶汤的抗氧化活性主要与儿茶素类化合物总量、总黄酮 含量以及有机酸总量具有较大的相关性，以上的研究结果说明白茶具有较好的抗 氧化能力。王丽网研究也证明该结果，采用同样的品种鲜叶分别加工成白茶、乌 龙茶、红茶三种茶类，测定其含有的抗箪化能力，研究结果显示，白茶清除DPPH 自由基和羟基自由基能力明显高于其他两种茶类。金亮网以19个茶样为对象，比较其含有的抗氧化活性，白毫银针具有超过绿茶平均值的清除DPPH自由基的 活性，并且总酚含量也高于绿茶的平均值。钱波成等研究证明，白茶对氧化应激 损伤的人结肠腺癌Caco-2细胞保护作用。1.4.2白茶对各种疾病的防治作用现代病大多与人体缺乏抗氧化物质有关，而人体可以通过外源性补充其具有 抗氧化作用的物质来预防与治疗疾病。茶叶是重要的天然酚类抗氧化剂的来源卬】,其中白茶的抗氧化效果较佳。L6 pez【5 2等研究白茶提取物对过氧化氢诱导PC12 细胞毒性的神经保护作用，实验表明，白茶提取物可降低细胞内氧化应激和提高 清除自由基的能力，因此，白茶提取物可有效对抗H2O2诱导毒性保护PC12细 胞。NunesR】等认为每日饮用白茶可以改善糖尿病前期Wistar大鼠的大脑皮质 代谢和氧化促进剂，恢复蛋白质氧