艾滋病实验室检查专家讲座.pptx

1艾滋病艾滋病 (AIDS)艾滋病实验室检查第1页2实实 验验 室室 检检 查查艾滋病实验室检查第2页3免疫学检测免疫学检测AIDSAIDS患者患者正常正常(10(109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定艾滋病实验室检查第3页4血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体初筛试验抗体初筛试验ELISA（酶联免疫（酶联免疫试验）试验）艾滋病实验室检查第4页5血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体确实证试验抗体确实证试验Western blot（免疫印迹（免疫印迹试验）试验）艾滋病实验室检查第5页6血清学检测（）血清学检测（）HIV抗原检测抗原检测ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）艾滋病实验室检查第6页7分子生物学检测分子生物学检测（1）HIV RNA检测检测RT-PCR（逆转录（逆转录-聚合酶链反应）聚合酶链反应）PCRPCR：高温变性：高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍数扩增个循环，成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）和一个荧光淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血浆中病毒查血浆中病毒RNARNA艾滋病实验室检查第7页8分子生物学检测（分子生物学检测（2 2）淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理：原理：RNARNA片段经电泳分片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，再用探针杂纤维素滤膜，再用探针杂交交艾滋病实验室检查第8页9分子生物学检测（分子生物学检测（3）HIV变异株检测变异株检测Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一某一固定点开始，随机在某一特定碱基处终止，产生特定碱基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不一样长度一系列核苷酸，四组不一样长度一系列核苷酸，经过在尿素变性经过在尿素变性PAGEPAGE胶上电泳，胶上电泳，取得取得DNADNA序列序列艾滋病实验室检查第9页10病毒检测病毒检测l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂，主要用于科研操作复杂，主要用于科研艾滋病实验室检查第10页11诊诊 断断艾滋病实验室检查第11页12诊疗标准诊疗标准l流流行行病病学学史史：有有静静脉脉注注射射毒毒品品史史；多多个个性性伴伴和和不不洁洁性性生生活活史史；输输入入未未经经HIV抗抗体体检检测测血血液液和和血血制制品品史史；HIV抗抗体体阳阳性性所所生儿女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。生儿女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。l临床表现：临床表现：高高危危对对象象出出现现上上感感样样及及单单核核细细胞胞增增多多症症样样表表现现，颈颈、腋腋及及枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。感染。无症状期、艾滋病期临床表现。无症状期、艾滋病期临床表现。l试试验验室室检检验验：HIV抗抗体体阳阳性性，并并经经确确证证试试验验确确认认。CD4+T淋淋巴巴细细胞胞数数显显著著降降低低。HIV RNA和和P24抗抗原原检检测测有有利于早期诊疗新生儿利于早期诊疗新生儿HIV感染。感染。艾滋病实验室检查第12页13诊疗标准诊疗标准l急性期急性期 流行病学史、临床表现、流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性 仅试验室检验仅试验室检验HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性l无症状期无症状期 流行病学史、流行病学史、HIV抗体阳性抗体阳性 仅试验室检验仅试验室检验HIV抗体阳性抗体阳性 艾滋病实验室检查第13页14诊疗标准诊疗标准l艾滋病期艾滋病期 流流行行病病学学史史，HIV抗抗体体阳阳性性，临临床床表表现现有有以以下下一项或以上一项或以上：1.1.1.1.短短短短期期期期（6 6 6 6个个个个月月月月内内内内）体体体体重重重重下下下下降降降降10101010以以以以上上上上；2.2.2.2.咳咳咳咳嗽嗽嗽嗽或或或或腹腹腹腹泻泻泻泻超超超超出出出出4 4 4 4周周周周；3.3.3.3.连连连连续续续续或或或或间间间间歇歇歇歇发发发发烧烧烧烧超超超超出出出出4 4 4 4周周周周；4.4.4.4.全全全全身身身身淋淋淋淋巴巴巴巴结结结结肿肿肿肿大大大大；5.5.5.5.重重重重复复复复带带带带状状状状疱疱疱疱疹疹疹疹或或或或慢慢慢慢性性性性播播播播散散散散性性性性HSVHSVHSVHSV感感感感染染染染；6.6.6.6.口口口口咽咽咽咽念念念念珠珠珠珠菌菌菌菌病病病病；7.7.7.7.全全全全身身身身搔搔搔搔痒痒痒痒性性性性皮皮皮皮炎炎炎炎；8.8.8.8.重重重重复复复复发发发发生生生生败败败败血血血血症症症症；9.9.9.9.深深深深部部部部真真真真菌菌菌菌感感感感染染染染，马马马马尔尔尔尔尼尼尼尼非非非非青青青青霉霉霉霉菌菌菌菌；10.10.10.10.肺肺肺肺孢孢孢孢子子子子虫虫虫虫肺肺肺肺炎炎炎炎；11.11.11.11.活活活活动动动动性性性性巨巨巨巨细细细细胞胞胞胞病病病病毒毒毒毒感感感感染染染染；12.12.12.12.弓弓弓弓形形形形虫虫虫虫脑脑脑脑病病病病。13.13.13.13.重重复复发发生生、难难治治性性肺肺部部感感染染或或进进展展快快速速活活动动性性结结核核病病；14.14.中中枢枢神神经经系系统统受受损损、占占位位性性病病变变或或中中、青青年年痴呆症；痴呆症；15.15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。卡波西肉瘤或淋巴瘤。艾滋病实验室检查第14页15诊疗标准诊疗标准 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状艾滋病实验室检查第15页16判别诊疗判别诊疗l原发性原发性CD4+淋巴细胞降低症淋巴细胞降低症 无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。l继发性继发性CD4+淋巴细胞降低淋巴细胞降低 肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。艾滋病实验室检查第16页17预预 后后艾滋病实验室检查第17页18影响预后原因影响预后原因l感染感染HIV型别及亚型：型别及亚型：HIV-1较较HIV-2临床进展快临床进展快l并发机会性感染：并发机会性感染：同同时时合合并并卡卡波波济济肉肉瘤瘤及及肺肺孢孢菌菌肺肺炎炎者者病病死死率率最最高高；合合并丙型肝炎者预后差并丙型肝炎者预后差l抗逆转录病毒治疗：抗逆转录病毒治疗：治疗改变了艾滋病进程治疗改变了艾滋病进程 艾滋病实验室检查第18页19HIV感染未治疗者结局感染未治疗者结局l经典经典(70%80%)：5 51010年进展为艾滋病年进展为艾滋病l快速进展型快速进展型(10%15%)：2 23 3年年l长长久久无无进进展展型型(500/mm500/mm3 3，病毒载量，病毒载量10103 3拷贝拷贝/mll长长久久存存活活型型(极极少少)：进进展展到到艾艾滋滋病病期期后后能能稳稳定定较较长长一段时间一段时间 艾滋病实验室检查第19页